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载重组人釉原蛋白水凝胶缓释系统对人牙周膜成纤维细胞生物学特性的影响

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上海交通大学学报（医学版） 2019年第3期39卷 244-252页

作者：宁航夏一如董家辰束蓉上海交通大学医学院附属第九人民医院.口腔医学院牙周病科国家口腔疾病临床研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的·探讨载重组人釉原蛋白(recombinant human amelogenin,rhAm)水凝胶缓释系统对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts, HPDLFs)增殖、迁移、黏附及成骨、成牙骨质分化能力的影响。方法·组织块法获取原代HPDL... 详细信息

目的·探讨载重组人釉原蛋白(recombinant human amelogenin,rhAm)水凝胶缓释系统对人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts, HPDLFs)增殖、迁移、黏附及成骨、成牙骨质分化能力的影响。方法·组织块法获取原代HPDLFs,传代培养后将第3～5代细胞分为对照组、蛋白组(20μg/mL rhAm)、载蛋白水凝胶组(含20μg/mL rhAm的PCLA-PEG-PCLA水凝胶)。以CCK-8法检测细胞增殖与生长曲线的变化,采用划痕实验及Transwell小室实验检测细胞迁移的效果,以细胞计数法及扫描电子显微镜(电镜)观察并检测细胞黏附的效果,采用实时荧光定量PCR技术测定ALP、Runx2、CEMP1和CAP mRNA的表达,观察成骨能力的改变。结果·载rhAm水凝胶缓释系统对HPDLFs的生长曲线没有显著影响,对其增殖有促进作用,第3日时差异有统计学意义(P实验和Transwell小室实验中,蛋白组迁移最快,其次为载蛋白水凝胶组。载蛋白水凝胶对HPDLFs的黏附有促进作用,4 h时差异有统计学意义(P所上调。结论·载rhAm水凝胶缓释系统可显著促进HPDLFs的增殖和黏附,对其迁移无显著影响,对其成骨及成牙骨质能力均有显著促进作用。

关键词：牙周组织再生釉原蛋白水凝胶增殖黏附迁移成骨分化

USP47通过促进抗凋亡蛋白表达介导头颈鳞癌细胞顺铂耐药

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第4期41卷 434-441页

作者：童桐秦星谢非蒋英英石剑波张建军上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔颌面头颈-肿瘤科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的·探讨去泛素化酶47(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 47,USP47)对头颈鳞癌细胞顺铂耐药的影响及潜在机制。方法·通过梯度增加顺铂浓度,构建头颈鳞癌顺铂耐药细胞株;通过实时定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测耐药株中USP47的... 详细信息

目的·探讨去泛素化酶47(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase 47,USP47)对头颈鳞癌细胞顺铂耐药的影响及潜在机制。方法·通过梯度增加顺铂浓度,构建头颈鳞癌顺铂耐药细胞株;通过实时定量PCR和蛋白免疫印迹实验检测耐药株中USP47的表达情况;利用慢病毒载体构建USP47基因过表达或敲除的稳转细胞株,MTT法检测USP47表达升高或降低对头颈鳞癌细胞顺铂耐药性的影响;并检测USP47对癌细胞增殖、克隆形成和凋亡等生物学行为的影响;通过免疫印迹实验检测USP47对抗凋亡蛋白X-连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP)和重组人B细胞淋巴瘤因子2 xL(recombinant human B-cell leukemia/lymphoma 2 xL,Bcl-xL)的表达及泛素化水平的影响。结果·USP47在头颈鳞癌顺铂耐药细胞株中显著高表达;过表达USP47后,顺铂对头颈鳞癌细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)明显升高,而敲除USP47可以降低头颈鳞癌顺铂耐药细胞株的IC50;过表达USP47的头颈鳞癌细胞,其增殖和克隆形成能力均被抑制,而抗凋亡能力明显增强。USP47基因过表达显著提高了抗凋亡蛋白XIAP和Bcl-xL的表达量。泛素化测定证实了USP47通过降低XIAP和Bcl-xL蛋白的泛素化水平从而导致其表达量升高,而敲低XIAP和Bcl-xL基因表达水平可以阻断USP47基因过表达诱导的顺铂耐药性。结论·USP47通过降低XIAP和Bcl-xL蛋白的泛素化修饰水平,提高两者的蛋白表达水平,从而介导头颈鳞癌细胞顺铂耐药;抑制USP47的表达对降低头颈鳞癌细胞顺铂耐药具有潜在应用价值。

关键词：去泛素化酶47 顺铂耐药头颈鳞癌 X-连锁凋亡抑制蛋白重组人B细胞淋巴瘤因子2 xL

恶性肿瘤细胞来源的外泌体调控自然杀伤细胞活性的相关机制

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第5期41卷 659-664页

作者：鲁婷玮张建军陈万涛上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔颌面-头颈肿瘤科国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

外泌体是一种细胞分泌的胞外小囊泡,在细胞之间发挥着传递信息的作用,通过物质的转运来调节各种细胞的生理和病理功能。有研究表明,外泌体直接或通过中间细胞作用于恶性肿瘤细胞,进而在恶性肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。近年来,... 详细信息

外泌体是一种细胞分泌的胞外小囊泡,在细胞之间发挥着传递信息的作用,通过物质的转运来调节各种细胞的生理和病理功能。有研究表明,外泌体直接或通过中间细胞作用于恶性肿瘤细胞,进而在恶性肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用。近年来,自然杀伤(natural killer,NK)细胞与肿瘤细胞源性外泌体(tumor-derived exosomes,TDEXs)的相互作用和调控机制成为研究热点。在肿瘤微环境中,TDEXs可以作用于NK细胞,改变NK细胞与其他免疫细胞和免疫因子的相互作用,最终导致NK细胞对恶性肿瘤细胞的免疫防御减弱和免疫耐受产生。该文综述了不同恶性肿瘤组织中TDEXs对NK细胞活性的影响和可能的机制。

关键词：恶性肿瘤肿瘤细胞源性外泌体自然杀伤细胞活性

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牙颌面骨畸形机制研究的现状与发展

上海交通大学学报（医学版） 2024年第6期44卷 663-675页

作者：江凌勇上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科正颌正畸中心上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

牙颌面骨畸形发病率高、病因复杂、症状严重、诊疗困难,缺乏早期干预策略,其主要原因在于相关机制研究较少、不够深入。这类疾病主要表现为骨性畸形、牙列不齐等骨与牙的形态结构、位置关系及口颌功能异常,其中颌面骨与牙-牙周复合体是... 详细信息

牙颌面骨畸形发病率高、病因复杂、症状严重、诊疗困难,缺乏早期干预策略,其主要原因在于相关机制研究较少、不够深入。这类疾病主要表现为骨性畸形、牙列不齐等骨与牙的形态结构、位置关系及口颌功能异常,其中颌面骨与牙-牙周复合体是两大核心结构,分别决定了颜面美观与咬合功能。颌面骨畸形精准防治需从病因角度研究发育与致病机制,而牙列不齐等牙-牙周复合体畸形矫治则需从临床正畸应力角度研究稳态与应激改建机制,两方面机制研究均可为牙颌面骨畸形防治策略发展提供重要理论基础。既往相关研究常以突变基因与差异因子表达谱的描述为主。近年来,Cre-LoxP等条件性基因编辑技术的发展,使研究者得以在体内直观地评价单一细胞谱系中致病基因的功能,助力牙颌面骨畸形研究从表型层面向分子机制层面推进。该文梳理了国内外学者近年的研究以及笔者所在课题组的研究成果,提出牙颌面骨畸形机制研究“一体两翼”模式,即牙颌面骨畸形为“一体”,颌面骨发育与畸形致病机制为“一翼”,牙-牙周复合体稳态与应激改建机制为“另一翼”;该模式的提出旨在系统性研究疾病的发生发展,探索临床干预新思路。近年的相关研究运用前沿技术从“两翼”出发探究“一体”的机制:一方面,牙颌面骨的胚胎发育来源复杂,组成型条件性模式动物成为研究关键细胞中关键因子功能的重要新策略;另一方面,牙-牙周复合体的成体改建最为频繁,诱导型条件性模式动物为模型时程精准控制提供了技术支持。随着单细胞测序与谱系示踪技术的开发,组织特异性干细胞因其原位、特化的特征渐受青睐,越来越多的研究者开始关注其特征功能,这一发展趋势十分契合“一体两翼”的研究模式,有望加快牙颌面骨畸形的理论基础建设与应用转化。该文就牙颌面骨畸形机制“一体两翼”的研究模式进行述评。

关键词：牙颌面骨畸形牙颌面骨发育骨稳态基因编辑组织特异性干细胞

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口腔种植临床评价核心指标国际共识解读

中华口腔医学杂志 2023年第12期58卷 1227-1234页

作者：史俊宇刘蓓蕾伍昕宇赖红昌上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔种植科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所上海200011

临床评价指标的选择与测量是临床研究的关键问题。由上海交通大学医学院附属第九人民医院牵头,联合多所国际口腔知名高校,历时两年制订了《口腔种植临床评价核心指标的国际共识》,于2023年5月联合发布于Journal of Clinical Periodontol... 详细信息

临床评价指标的选择与测量是临床研究的关键问题。由上海交通大学医学院附属第九人民医院牵头,联合多所国际口腔知名高校,历时两年制订了《口腔种植临床评价核心指标的国际共识》,于2023年5月联合发布于Journal of Clinical Periodontology和Clinical Oral Implants Research。该共识确定了口腔种植试验、骨增量试验和软组织增量试验必须报告的系列临床评价指标,旨在全面、规范、标准化地评价口腔种植治疗的风险与收益。本文详述该共识的制订流程及关键内容,以帮助国内学者理解并使用此临床评价核心指标,提高我国口腔种植临床研究质量。

关键词：牙种植临床试验临床评价核心指标专家共识

牵张刺激下牙周膜细胞外泌体miR-181d-5p在调控成骨细胞分化中的作用

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医用生物力学 2023年第5期38卷 910-916页

作者：张轶凡瞿方王莹莹吴雅琴宋迎爽曹希萌沈荧怡胥春上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔修复科、上海交通大学口腔医学院、国家口腔医学中心、国家口腔疾病临床医学研究中心、上海市口腔医学重点实验室、上海市口腔医学研究所上海200011

目的探索牵张加载下牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)外泌体对成骨细胞分化的影响,以及牵张加载下PDLCs外泌体在力相关牙周组织改建中的调控作用。方法对体外培养人PDLCs施加20%牵张应变后,提取上清中的外泌体与成骨细胞... 详细信息

目的探索牵张加载下牙周膜细胞(periodontal ligament cells,PDLCs)外泌体对成骨细胞分化的影响,以及牵张加载下PDLCs外泌体在力相关牙周组织改建中的调控作用。方法对体外培养人PDLCs施加20%牵张应变后,提取上清中的外泌体与成骨细胞共培养,检测成骨细胞分化情况,并探索外泌体中发挥调控作用的miRNA。结果牵张加载下PDLCs分泌的外泌体可上调成骨细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、转录因子Osterix(Osx)、I型胶原蛋白(type I collagen,COL-1)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)和骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP 2)等成骨相关因子表达,促进细胞成骨向分化。牵张加载下PDLCs外泌体差异表达miRNA中,miRNA-181d-5p表达量上调达107倍,将其转染成骨细胞后,成骨细胞中ALP、Osx、Col-1、Runx2、Ocn和BMP2等成骨相关因子表达亦增加。结论本研究初步揭示了牵张加载下PDLCs外泌体miR-181d-5p在调控成骨细胞分化中的作用,对于明确力相关牙周组织改建中的信号通路具有重要科学意义。

关键词：牙周膜细胞牵张外泌体 miR-181d-5p 成骨分化

浅谈青少年Ⅱ类错[牙合]的诊疗要点和风险防范

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中华口腔医学杂志 2024年第9期59卷 879-885页

作者：房兵上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔正畸科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

Ⅱ类错[牙合]是导致青少年外貌不佳、咬合功能紊乱的原因之一,可影响青少年身心发育。青少年Ⅱ类错[牙合]成因复杂,青春期是生长改良的重要治疗窗口期,因此治疗时机和方法的正确选择是青少年Ⅱ类错[牙合]矫治成功的关键。同时,精准的风... 详细信息

Ⅱ类错[牙合]是导致青少年外貌不佳、咬合功能紊乱的原因之一,可影响青少年身心发育。青少年Ⅱ类错[牙合]成因复杂,青春期是生长改良的重要治疗窗口期,因此治疗时机和方法的正确选择是青少年Ⅱ类错[牙合]矫治成功的关键。同时,精准的风险防控也有利于治疗效果的提高。本文从Ⅱ类错[牙合]的危害、诊断、治疗、风险控制等方面,浅谈与青少年Ⅱ类错[牙合]诊疗相关的重要因素。

关键词：错[牙合],安氏Ⅱ类青少年危险处理正畸学,预防正畸学,阻断早期矫治

机器视觉图像处理技术及其在口腔种植外科中的应用

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中华口腔医学杂志 2024年第6期59卷 640-645页

作者：富晓娇史俊宇赖红昌上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔种植科上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

机器视觉图像处理技术在医学领域广.泛应用,在口腔种植领域主要应用于动态导航和种植机器人。机器视觉可辅助临床医师精准地植入种植体,提高种植修复的可预期性。口腔种植动态导航和机器人系统所应用的机器视觉图像处理技术,其核心原理... 详细信息

机器视觉图像处理技术在医学领域广.泛应用,在口腔种植领域主要应用于动态导航和种植机器人。机器视觉可辅助临床医师精准地植入种植体,提高种植修复的可预期性。口腔种植动态导航和机器人系统所应用的机器视觉图像处理技术,其核心原理主要包括空间定位和空间配准,不同系统在技术原理上存在差异性,操作流程和使用要点也各具特色。因此,本文从机器视觉图像处理技术的空间定位和空间配准原理出发,探讨其在口腔种植动态导航和机器人领域的应用现状,以期为临床应用机器视觉辅助种植技术提供有益参考。

关键词：牙种植机器视觉动态导航种植机器人

口腔白斑癌变DNA损伤修复相关基因的芯片检测及表达验证

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上海交通大学学报（医学版） 2021年第3期41卷 302-307页

作者：刘伟朱敏闻吴岚上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔颌面头颈肿瘤科国家口腔疾病临床研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011 上海市徐汇区牙病防治所口腔外科上海200032 上海交通大学医学院附属第九人民医院·口腔医学院口腔黏膜科国家口腔疾病临床研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所上海200011

目的·研究口腔白斑(oral leukoplakia,OL)患者病损发生发展中的DNA损伤修复基因表达谱,并验证关键基因共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia-telangiectasia mutated,ATM)和组蛋白2A变异体家族成员X(histone variant H2A family member X,H2AX)的mRNA和蛋白表达。方法·利用Affymetrix HTA 2.0芯片对口腔正常黏膜(n=3)、低危白斑(n=4)、高危白斑(n=4)、早期鳞状细胞癌(鳞癌,n=6)进行转录组学的高通量检测,利用基因本体数据库(Gene Ontology,GO)富集分析筛选出生物学功能为DNA损伤修复的相关基因[差异倍数(fold change,FC)对数的绝对值(|log_(2)FC|)≥2.0且P人正常口腔黏膜角化细胞(HOK)、白斑细胞系(Leuk1)和鳞癌细胞系(HN13)中的关键基因ATM和H2AX进行mRNA和蛋白表达验证。结果·DNA损伤修复基因在白斑发生发展中存在异常表达,从正常黏膜发展到低危白斑有7个|log_(2)FC|≥2.0的基因,从低危白斑发展到高危白斑有7个|log_(2)FC|≥2.0的基因,从高危白斑发展到鳞癌有52个|log_(2)FC|≥2.0的基因。qPCR对关键基因验证结果显示,ATM和H2AX基因在HOK细胞、Leuk1细胞和HN13细胞中的表达量均呈阶梯式升高(P<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,磷酸化H2AX(γ-H2AX)蛋白在HOK细胞、Leuk1细胞和HN13细胞中亦逐步上调(P<0.05)。ATM蛋白在Leuk1细胞中的表达比在HOK细胞中表达明显增强(P<0.05),但在HN13细胞中的表达明显降低(P<0.05)。结论·DNA损伤修复基因ATM和H2AX参与OL的发生发展。

关键词：口腔白斑鳞状细胞癌 DNA损伤修复共济失调毛细血管扩张症突变基因组蛋白2A变异体家族成员X