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左金丸通过抑制ERK、p38和AKT信号通路抑制肿瘤血管生成和结肠癌生长

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海南医学院学报 2024年

作者：袁杰孟娇闫化茹常彬孙明瑜梁婷玉王子元上海中医药大学附属曙光医院放射科上海中医药大学附属曙光医院病理科上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学肝病研究所肝肾疾病病证教育部重点实验室

目的：研究左金丸通过抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路对肿瘤血管生成的影响。方法：使用不同浓度的左金丸处理含有或不含VEGF的HUVEC和Lovo细胞，利用CCK-8法评估左金丸对HUVEC和Lovo细胞增殖的影响；利用流式细胞术分析左金丸对HUVE... 详细信息

目的：研究左金丸通过抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路对肿瘤血管生成的影响。方法：使用不同浓度的左金丸处理含有或不含VEGF的HUVEC和Lovo细胞，利用CCK-8法评估左金丸对HUVEC和Lovo细胞增殖的影响；利用流式细胞术分析左金丸对HUVEC细胞凋亡的影响；采用划痕实验、Transwell实验、管腔形成实验检测左金丸对HUVEC细胞迁移、侵袭和管腔形成的影响；建立人结肠癌Lovo细胞裸鼠皮下移植瘤模型，随机分为5组：对照组（0.9%氯化钠溶液组），左金丸低、中、高剂量组（1 027.5 mg/kg，2 055 mg/kg，4 110 mg/kg）和化疗药5-Fu组（50 mg/kg），每隔一日给药一次。给药第21天处死裸鼠，比较各组肿瘤体积和重量。利用免疫组化法检测各组瘤体中CD34表达（微血管密度）。采用Western blot法检测左金丸对VEGFR2及其下游信号通路的调控作用。结果：左金丸能显著抑制HUVEC细胞和Lovo细胞的增殖，尤其对VEGF诱导的HUVEC细胞增殖的抑制效果更为明显（P＜0.05，P＜0.01）。左金丸能促进VEGF诱导的HUVEC细胞凋亡、抑制其迁移、侵袭和管腔形成能力（P＜0.05，P＜0.01）。在裸鼠移植瘤模型中，左金丸剂量依赖性地抑制了移植瘤的体积和重量（P＜0.05，P＜0.01），并使瘤体微血管密度显著减低（P＜0.05，P＜0.01）。此外，左金丸还通过抑制VEGF诱导的HUVEC细胞中ERK1/2、p38MAPK和AKT的磷酸化水平发挥作用，表现出剂量依赖性和时间依赖性，但未对VEGFR2磷酸化水平表达产生影响。结论：左金丸能有效抑制肿瘤血管生成，其机制可能与其抑制ERK1/2、p38MAPK和AKT信号通路有关。

关键词：左金丸肿瘤血管生成结肠癌 ERK1/2 AKT p38MAPK

麻黄连翘赤小豆汤及其效应成分抑制IgA肾病大鼠替代途径补体激活的研究

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中国中药杂志 2024年

作者：宋婷盛广宇阮伟张亚亨杨雪军上海中医药大学附属曙光医院上海中医药大学中医肾病研究所上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海市中医临床重点实验室

探究麻黄连翘赤小豆汤（Mahuang Lianqiao Chixiaodou Decoction， MHLQ）及其主要效应成分治疗IgA肾病（immunoglobin A nephropathy， IgAN）的可能作用机制。采用牛血清白蛋白（bovine serum albumin， BSA）灌胃、皮下注射四氯化碳(... 详细信息

探究麻黄连翘赤小豆汤（Mahuang Lianqiao Chixiaodou Decoction， MHLQ）及其主要效应成分治疗IgA肾病（immunoglobin A nephropathy， IgAN）的可能作用机制。采用牛血清白蛋白（bovine serum albumin， BSA）灌胃、皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride， CCl4)、尾静脉注射脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）等综合措施建立IgAN大鼠模型。成模后，将IgAN大鼠随机分为模型组，MHLQ低、中、高剂量组，PHI组，PSE组及LP组，并以Wistar大鼠为对照。MHLQ低、中、高剂量组分别给予MHLQ颗粒剂1.773、3.545、7.090 g·kg-1灌胃，PHI组给予连翘苷（phillyrin， PHI）0.020 g·kg-1灌胃，PSE组给予盐酸伪麻黄碱（pseudoephedrine， PSE）0.020 g·kg-1灌胃，LP组给予氯沙坦钾（losartan potassium， LP）9.003 mg·kg-1灌胃，对照组和模型组每日灌胃等体积生理盐水，各组均连续干预4周。给药结束后收集各组大鼠尿液、血清、肝组织和肾组织。检测24h尿蛋白定量（24 hUTP）和肾功能；病理染色观察肾组织病理改变；免疫荧光（immunofluorescence， IF）检测肾脏IgA和补体C3/C3b/C3c表达；电镜观察肾组织超微结构；酶联免疫吸附测试（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）检测血清和肾组织补体C3、可溶性端补体复合物（sC5b-9）蛋白表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝、肾补体C3/C3b/C3c、C5/C5a、C5b-9及B因子（complement factor B， CFB）蛋白表达；免疫组化（immunohistochemistry， IHC）进一步检测肾组织补体C3/C3b/C3c蛋白表达。结果显示，与对照组比较，模型组大鼠尿素氮（blood urea nitrogen， BUN）、血肌酐（serum creatinine， SCr）含量升高，肾小球代偿性扩张，球内系膜细胞增殖，系膜基质扩张，肾小球可见IgA免疫复合物或电子致密物沉积；血清补体C3含量增加；肾组织CFB，补体C3/C3b/C3c， C5/C5a， C5b-9蛋白表达升高；肝组织中补体C3/C3b/C3c和C5b-9蛋白表达升高。而经过MHLQ及其效应成分干预后，上述指标皆逆转。综上所述，MHLQ及其效应成分干预IgAN大鼠疗效肯定，能够改善肾功能，减轻肾脏免疫复合物沉积和病理损伤，其机制可能与抑制IgAN大鼠替代途径（alternative pathway， AP）补体激活有关。

关键词：麻黄连翘赤小豆汤 IgA肾病补体激活炎症反应 C3

自拟清肺定喘贴联合宣白承气汤治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征的效果及对肺功能、炎症因子的影响

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辽宁中医杂志 2024年

作者：倪嘉纳罗华陈旋上海中医药大学附属曙光医院制剂室上海中医药大学附属曙光医院呼吸科

目的探讨自拟清肺定喘贴联合宣白承气汤治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征（ACOS）的效果及对肺功能、炎症因子的影响。方法选择2021年10月至2023年3月我院收治的116例ACOS患者纳入研究，通过随机数表法分为观察组、对照组，各58... 详细信息

目的探讨自拟清肺定喘贴联合宣白承气汤治疗哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征（ACOS）的效果及对肺功能、炎症因子的影响。方法选择2021年10月至2023年3月我院收治的116例ACOS患者纳入研究，通过随机数表法分为观察组、对照组，各58例。对照组使用噻托溴铵、布地奈德福莫特罗治疗，观察组在对照组基础上，联合自拟清肺定喘贴、宣白承气汤治疗，两组均持续治疗8周。比较两组治疗后临床疗效，治疗前后哮喘症状评分（ACT）、慢性阻塞性肺疾病症状评分（CAT）、第1秒用力呼气量（FEV1）、FEV1/用力肺活量（FEV1/FVC）、呼气峰值流速（PEFR）及血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）水平的变化及不良反应。结果观察组临床疗效总有效率为91.38%，高于对照组的75.86%，有统计学意义（P＜0.05）；观察组ACT评分为（20.61±1.95）分，明显高于对照组的（18.30±1.43）分，CAT评分为（15.02±2.31）分，明显低于对照组的（18.41±2.62）分，有统计学意义（P＜0.05）；且观察组FEV1、FEV1/FVC、PEFR分别为（2.20±0.27）L、（61.21±5.28）%、（3.88±0.36）L/s，均高于对照组的（1.93±0.21）L、（57.33±5.26）%、（3.67±0.41）L/s，有统计学意义（P＜0.05）；观察组血清TNF-α、IL-6、CRP分别为（31.70±5.42）ng/L、（22.05±3.29）ng/L、（9.75±1.60）mg/L，均低于对照组的（43.33±6.05）ng/L、（31.17±3.58）ng/L、（12.83±2.11）mg/L，有统计学意义（P＜0.05）；两组不良反应总发生率分别为10.34%、8.62%，无统计学意义（P＞0.05）。结论自拟清肺定喘贴联合宣白承气汤治疗ACOS患者疗效明显，能有效改善肺功能、降低炎症因子的表达，值得临床推广。

关键词：哮喘-慢性阻塞性肺疾病重叠综合征中医肺功能炎症因子不良反应

β-岚香酮酸对肝细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制

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基因组学与应用生物学 2024年第5期43卷 907-924页

作者：邹晨乔凤杰方淼高亚婷马言璐高月求张鑫上海中医药大学附属曙光医院细胞免疫实验室上海市中医临床重点实验室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院肝病科上海201203

本研究旨在探讨β-岚香酮酸(β-elemonic acid,β-EA)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。利用CCK8法检测β-EA对人HCC细胞Huh7和PLC/PRF/5活力的影响;利用Annexin V-FTTC/7AAD染色检测细胞凋亡变化;利用流式细胞周期检测β-岚香酮酸对HCC细胞周期的影响;利用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl2、BAX、cleaved-caspase 3和细胞周期相关蛋白CDK1、Cyclin B1的表达。结合网络药理学预测β-EA抑制HCC细胞增殖的分子机制,检测PI3K/AKT信号通路蛋白的表达。通过构建H22皮下移植瘤模型,体内证实了β-EA对HCC的生长抑制作用。结果表明,β-EA能够显著抑制Huh7和PLC/PRF/5细胞活力,诱导HCC细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞,上调促凋亡蛋白cleaved-caspase 3、BAX,下调抗凋亡蛋白Bcl2、细胞周期蛋白Cyclin B1、细胞周期依赖性激酶CDK1、p-PI3K、p-AKT的表达。皮下移植瘤模型证实β-EA能够有效降低瘤重、瘤体积和Ki67的表达。本研究结果表明β-EA能够通过PI3K/AKT信号通路诱导HCC细胞凋亡和G2/M期细胞阻滞。

关键词：肝细胞癌 β-岚香酮酸细胞增殖细胞凋亡细胞周期阻滞

全反式维甲酸对肝纤维化氧化应激损伤自然杀伤细胞的保护作用

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中国免疫学杂志 2024年第7期40卷 1359-1363页

作者：平大冰齐婧姝孙鑫黄恺彭渊刘成海上海中医药大学附属曙光医院上海201203

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对肝纤维化氧化应激损伤NK细胞功能的保护作用。方法:采用CCl_(4)制备肝纤维化小鼠模型,通过生化及病理检测评价小鼠肝脏受损及纤维化程度,观察小鼠肝组织NK细胞变化及氧化应激损伤;体外采用H_(2)O_(2)诱导... 详细信息

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对肝纤维化氧化应激损伤NK细胞功能的保护作用。方法:采用CCl_(4)制备肝纤维化小鼠模型,通过生化及病理检测评价小鼠肝脏受损及纤维化程度,观察小鼠肝组织NK细胞变化及氧化应激损伤;体外采用H_(2)O_(2)诱导的NK92细胞株氧化应激损伤模型评价ATRA对NK92细胞的保护作用。结果:ATRA可以改善CCl_(4)模型小鼠肝功能,抑制肝脏炎症及纤维化,增加肝脏SOD活性和GSH含量,促进肝内NK细胞比例和数量;体外实验证实ATRA可以保护H_(2)O_(2)诱导的NK细胞氧化损伤及凋亡。结论:ATRA可以改善CCl_(4)引起的肝损伤及纤维化,可能与其保护NK细胞氧化应激损伤有关。

关键词：全反式维甲酸肝纤维化氧化应激自然杀伤细胞

基于中西医病证特点的腹泻型肠易激综合征动物模型的临床吻合度分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 218-227页

作者：蒋风茹何友成吴月潘可怡周淳宇蔡舒雨袁建业上海中医药大学附属龙华医院上海200032

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是临床常见的功能性肠病之一,其发病机制复杂且未被完全阐明,现代医学缺乏稳定且行之有效的治疗方式。建立符合中西医病证特点的IBS-D动物模型有助于进一步揭示其发病机制并完善治疗方案。临床吻合度是一种以... 详细信息

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是临床常见的功能性肠病之一,其发病机制复杂且未被完全阐明,现代医学缺乏稳定且行之有效的治疗方式。建立符合中西医病证特点的IBS-D动物模型有助于进一步揭示其发病机制并完善治疗方案。临床吻合度是一种以疾病中西医最新诊断标准为依据,评价动物模型对中西医病证模拟效果的指标。该文通过对IBS-D动物模型相关文献进行分析归纳,发现IBS-D模型所用动物多以大鼠为主,所用方法多为单因素诱导、双因素诱导和多因素联合诱导,所表现的疾病特征主要是与内脏痛觉过敏或(和)胃肠动力异常相关的症状和(或)体征。其中,单因素诱导IBS-D大鼠模型多具备很高的西医临床吻合度,而中医临床吻合度不足;双因素诱导和多因素诱导的IBS-D模型西医临床吻合度多数较高,但也存在吻合度水平参差不齐的情况。此外,IBS-D中医证候模型构建以肝郁脾虚证为主,而脾肾阳虚、脾胃湿热、脾虚湿盛,寒热错杂证候模型略显不足。因此,今后仍需进一步完善已有的或研发新的IBS-D动物模型,为本病的中西医病证机制探索和治疗手段研发提供更适用的工具。

关键词：腹泻型肠易激综合征动物模型中西医病证特点临床吻合度

中医体质与社区人群糖代谢异常进展相关性的病例对照研究

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中医杂志 2024年第9期65卷 928-933页

作者：黄慧赵慧敏许嘉慧陈清光陆灏上海中医药大学附属曙光医院上海市201203

目的以社区人群为研究对象,探讨中医体质对糖代谢异常进展的影响。方法纳入2019—2021年参加社区糖尿病筛查并具有基线及第二年随访两次完整的体检资料的社区居民393例。依据其口服葡萄糖耐量试验结果,分为糖代谢异常进展组和非进展组... 详细信息

目的以社区人群为研究对象,探讨中医体质对糖代谢异常进展的影响。方法纳入2019—2021年参加社区糖尿病筛查并具有基线及第二年随访两次完整的体检资料的社区居民393例。依据其口服葡萄糖耐量试验结果,分为糖代谢异常进展组和非进展组,以倾向性评分匹配功能进行1∶2匹配。采集两组基线时糖尿病相关影响因素,对两组人群进行中医体质判定,比较两组人群的影响因素及中医体质差异,应用Logistic回归方法分析糖代谢异常进展的危险因素。结果最终纳入进展组131例,非进展组262例。进展组高脂血症病史、血糖升高史、痰湿质、血瘀质占比均高于非进展组(P中医体质中阴虚质、血瘀质与糖代谢异常进展存在相关性,可能是糖代谢异常进展的危险因素。

关键词：糖代谢异常中医体质危险因素病例对照研究

基于以“味”统方、苦辛平逆法的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭合并糖尿病的临床疗效

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 98-106页

作者：张蒙王新东上海中医药大学附属曙光医院上海201203 南京中医药大学附属中西医结合医院南京210028

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准... 详细信息

目的:观察以“味”统方、苦辛平逆法指导下的葶鹿益心饮治疗射血分数保留型心力衰竭(HFp EF)合并糖尿病(证属气阴两虚、水瘀内停)患者的临床疗效及安全性。方法:选取南京中医药大学附属中西医结合医院2022年5月至2023年3月符合纳入标准的HFp EF合并2型糖尿病气阴两虚,水瘀内停证患者108例,随机分为对照组、观察组(每组各54例)。两组均遵循指南推荐予以慢性心力衰竭及糖尿病西医常规基础治疗,观察组在此基础上予葶鹿益心饮加载治疗,治疗疗程为12周。观察患者治疗前后纽约心脏协会(NYHA)心功能分级、左室舒张末径(LVEDD)、左房内径(LAD)、左心室舒张早期二尖瓣血流最大速度(E)/舒张早期二尖瓣环峰值速度(e')比值(E/e')、N末端B型脑钠肽前体(NT-pro BNP)、糖化血红蛋白(Hb A1c)、运动耐量评价指标6 min步行试验距离、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表、中医证候积分及其他安全性指标。结果:最终完成试验观察病例104例,其中对照组52例,观察组52例;对照组治疗后心功能分级改善显效及有效患者35例,总有效率为67.3%;观察组治疗后心功能分级改善显效及有效患者47例,总有效率为90.4%,观察组患者总有效率明显优于对照组(χ^(2)=2.754,P中医证候改善程度明显优于对照组(P中医证候积分。

关键词：射血分数保留型心力衰竭 2型糖尿病气阴两虚、水瘀内停葶鹿益心饮临床疗效

巴芪柔肝方促进Th22细胞活化及IL-22分泌抗肝纤维化机制

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中国中西医结合杂志 2024年第8期44卷 944-951页

作者：厉姣龙郭丽坤周振华上海中医药大学曙光临床医学院上海201203 上海中医药大学附属曙光医院肝病科上海201203

目的研究巴芪柔肝方抗肝纤维化的作用机制。方法 60只8周龄的BALB/c小鼠随机分为对照组(Control)、模型组(ConA)和巴芪柔肝方组(RGF)。模型组和RGF组制备刀豆蛋白A(ConA)诱导肝纤维化动物模型,RGF组随后灌服巴芪柔肝方(8.5 g/kg)至实... 详细信息

目的研究巴芪柔肝方抗肝纤维化的作用机制。方法 60只8周龄的BALB/c小鼠随机分为对照组(Control)、模型组(ConA)和巴芪柔肝方组(RGF)。模型组和RGF组制备刀豆蛋白A(ConA)诱导肝纤维化动物模型,RGF组随后灌服巴芪柔肝方(8.5 g/kg)至实验结束。体外分离健康人外周血CD4+T细胞和树突状细胞(DCs),诱导后分别与人肝星状细胞系(LX2细胞)共培养。检测相关基因和蛋白的表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠血清谷氨酸丙酮酸转氨酶(ALT)、转化生长因子-β(TGF-β)、透明质酸(HA)、白介素-22(IL-22)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-23(IL-23)水平均升高(P<0.01,P<0.05),白蛋白(ALB)水平降低(P<0.01)。与模型组比较,RGF组ALT、TGF-β、HA降低(P<0.01),IL-22、IL-6、TNF-α、IL-23均升高(P<0.01)。病理结果显示巴芪柔肝方对ConA诱导的肝纤维化有保护作用。与空白血清组比较,巴芪柔肝方含药血清组(0.5、1、10μg/mL) DCs分泌的IL-6、TNF-α、IL-23 mRNA水平升高(P<0.01)。在共培养体系中,与空白血清组比较,巴芪柔肝方含药血清组IL-22 mRNA和蛋白的表达水平升高(P<0.01),LX2中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原α1(Col1 α1)的mRNA和蛋白水平降低(P<0.01)。对衰老相关炎症基因的RT-PCR分析显示,巴芪柔肝方含药血清组可以上调基质金属蛋白酶9(MMP9)、IL-6、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP2)、p53和p21 mRNA的表达水平(P<0.01),同时下调基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP1) mRNA的表达水平(P<0.01)。结论巴芪柔肝方通过促进DCs分泌IL-6/TNF-α/IL-23,激活Th22细胞,增加其IL-22的分泌,从而抑制肝星状细胞(HSCs)的活化,促进活化的HSCs衰老。

关键词：巴芪柔肝方树突状细胞 Th22细胞肝星状细胞肝纤维化中药复方