麻黄连翘赤小豆汤及其效应成分抑制IgA肾病大鼠替代途径补体激活的研究

作     者：宋婷 盛广宇 阮伟 张亚亨 杨雪军 

作者机构：上海中医药大学附属曙光医院 上海中医药大学中医肾病研究所 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室 上海市中医临床重点实验室 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(82274492) 上海市科委基金资助项目(22Y31920200) 

主　　题：麻黄连翘赤小豆汤 IgA肾病 补体激活 炎症反应 C3 

摘      要：探究麻黄连翘赤小豆汤（Mahuang Lianqiao Chixiaodou Decoction， MHLQ）及其主要效应成分治疗IgA肾病（immunoglobin A nephropathy， IgAN）的可能作用机制。采用牛血清白蛋白（bovine serum albumin， BSA）灌胃、皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride， CCl4)、尾静脉注射脂多糖（lipopolysaccharide， LPS）等综合措施建立IgAN大鼠模型。成模后，将IgAN大鼠随机分为模型组，MHLQ低、中、高剂量组，PHI组，PSE组及LP组，并以Wistar大鼠为对照。MHLQ低、中、高剂量组分别给予MHLQ颗粒剂1.773、3.545、7.090 g·kg-1灌胃，PHI组给予连翘苷（phillyrin， PHI）0.020 g·kg-1灌胃，PSE组给予盐酸伪麻黄碱（pseudoephedrine， PSE）0.020 g·kg-1灌胃，LP组给予氯沙坦钾（losartan potassium， LP）9.003 mg·kg-1灌胃，对照组和模型组每日灌胃等体积生理盐水，各组均连续干预4周。给药结束后收集各组大鼠尿液、血清、肝组织和肾组织。检测24h尿蛋白定量（24 hUTP）和肾功能；病理染色观察肾组织病理改变；免疫荧光（immunofluorescence， IF）检测肾脏IgA和补体C3/C3b/C3c表达；电镜观察肾组织超微结构；酶联免疫吸附测试（enzyme linked immunosorbent assay， ELISA）检测血清和肾组织补体C3、可溶性端补体复合物（sC5b-9）蛋白表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝、肾补体C3/C3b/C3c、C5/C5a、C5b-9及B因子（complement factor B， CFB）蛋白表达；免疫组化（immunohistochemistry， IHC）进一步检测肾组织补体C3/C3b/C3c蛋白表达。结果显示，与对照组比较，模型组大鼠尿素氮（blood urea nitrogen， BUN）、血肌酐（serum creatinine， SCr）含量升高，肾小球代偿性扩张，球内系膜细胞增殖，系膜基质扩张，肾小球可见IgA免疫复合物或电子致密物沉积；血清补体C3含量增加；肾组织CFB，补体C3/C3b/C3c， C5/C5a， C5b-9蛋白表达升高；肝组织中补体C3/C3b/C3c和C5b-9蛋白表达升高。而经过MHLQ及其效应成分干预后，上述指标皆逆转。综上所述，MHLQ及其效应成分干预IgAN大鼠疗效肯定，能够改善肾功能，减轻肾脏免疫复合物沉积和病理损伤，其机制可能与抑制IgAN大鼠替代途径（alternative pathway， AP）补体激活有关。