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五桑饮增强SIRT1和Nrf2表达并减轻糖尿病小鼠肾损伤和纤维化

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中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 679-688页

作者：李文月娄玉杨晓萍盖云上海中医药大学附属第七人民医院全科医学科上海200137

目的:探讨五桑饮减轻糖尿病诱导的小鼠肾损伤及相关机制。方法:小鼠经含高脂高糖饲料喂养后,腹腔注射链脲佐菌素,从而建立糖尿病模型,并随机分为糖尿病模型组和五桑饮治疗组,另设正常对照组。采用生化分析、HE、PAS和Masson染色观察五... 详细信息

目的:探讨五桑饮减轻糖尿病诱导的小鼠肾损伤及相关机制。方法:小鼠经含高脂高糖饲料喂养后,腹腔注射链脲佐菌素,从而建立糖尿病模型,并随机分为糖尿病模型组和五桑饮治疗组,另设正常对照组。采用生化分析、HE、PAS和Masson染色观察五桑饮对糖尿病肾病小鼠肾功能、肾组织形态学和纤维化等相关参数的作用。采用TUNEL染色分析小鼠肾组织凋亡,DHE染色分析肾组织细胞内活性氧水平。比色法分析肾组织氧化应激指标,包括脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA),抗氧化酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和过氧化氢酶(catalase,CAT)。RT-qPCR检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Bax和Bcl-2的mRNA表达水平。采用Western blot法分析肾组织沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)和核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)蛋白表达。结果:五桑饮给药8周后,与对照组相比,模型组小鼠肾脏肥大指数、空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、总胆固醇、血清肌酐和血尿素氮显著升高(P<0.05)。五桑饮组小鼠的这些指标均显著低于模型组(P<0.05)。五桑饮组小鼠的24 h尿白蛋白排泄率和24 h尿总蛋白也比模型组小鼠显著升高。对小鼠肾组织进行HE、PAS和Masson染色显示:模型组小鼠肾小球肥大、基底膜增厚、出现肾纤维化改变,五桑饮组各种病变均明显减轻,肾组织纤维化相关分子α-SMA、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的mRNA表达均较模型组显著降低(P<0.05)。与模型组相比,五桑饮组小鼠肾组织凋亡水平,细胞内活性氧水平,肾组织脂质过氧化产物MDA含量显著降低,而SOD和CAT抗氧化酶的活性显著升高。五桑饮处理后小鼠肾组织SIRT1和Nrf2蛋白的水平明显高于模型组(P<0.05)。结论:五桑饮能改善糖尿病肾病小鼠肾功能,减轻肾脏病理损伤、纤维化、肾细胞凋亡和氧化应激反应,其肾保护作用可能与SIRT1和Nrf2蛋白的表达增强有关。

关键词：糖尿病肾病肾纤维化五桑饮沉默信息调节因子1 核因子E2相关因子2

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肠胃清对裸小鼠大肠癌皮下移植瘤生长及STAT3、Bcl-2剪接异构体表达的影响

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中医杂志 2024年第8期65卷 849-857页

作者：陈彬邓皖利梁芳袁旭谢曼丽刘慧上海中医药大学附属普陀医院上海市普陀区200062 上海中医药大学

目的探讨肠胃清治疗大肠癌的可能作用机制。方法选用HCT 116肠癌细胞株,制备沉默多聚嘧啶区结合蛋白3(PTBP3)基因、过表达PTBP3基因稳转的肠癌细胞;72只裸小鼠随机分为3组,各组分别通过腋下注射沉默PTBP3的稳转细胞、过表达PTBP3的稳转... 详细信息

目的探讨肠胃清治疗大肠癌的可能作用机制。方法选用HCT 116肠癌细胞株,制备沉默多聚嘧啶区结合蛋白3(PTBP3)基因、过表达PTBP3基因稳转的肠癌细胞;72只裸小鼠随机分为3组,各组分别通过腋下注射沉默PTBP3的稳转细胞、过表达PTBP3的稳转细胞、未转染的肠癌细胞,构建沉默模型、过表达模型、对照模型3种大肠癌细胞皮下移植瘤模型,每种模型24只。造模成功后将对照模型裸小鼠随机分为对照模型组、对照肠胃清组、对照奥沙利铂组,沉默模型裸小鼠随机分为沉默模型组、沉默肠胃清组、沉默奥沙利铂组,过表达模型裸小鼠随机分为过表达模型组、过表达肠胃清组、过表达奥沙利铂组,每组均为8只。各肠胃清组肠胃清口服液灌胃剂量为35.9625 g/kg,腹腔注射0.2 ml生理盐水;各模型组以0.5 ml生理盐水灌胃,腹腔注射0.2 ml生理盐水;各奥沙利铂组腹腔注射奥沙利铂5 mg/kg(0.2 ml),以0.5 ml生理盐水灌胃,各组均灌胃每日1次,腹腔注射每周3次。给药31天后检测各组皮下瘤瘤重并计算抑瘤率,免疫组化法检测增殖细胞核抗原Ki67表达水平、细胞凋亡水平;实时荧光定量法、Western Blot检测各组皮下瘤组织PTBP3、信号转导及转录活化因子3(STAT3)剪接异构体α(STAT3α)、STAT3剪接异构体β(STAT3β)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)剪接异构体α(Bcl-2α)、Bcl-2剪接异构体β(Bcl-2β)的mRNA及蛋白表达。结果在对照模型、沉默模型和过表达模型中,各肠胃清组和奥沙利铂组皮下瘤瘤重、皮下瘤组织Ki67表达水平均低于各相应模型组,细胞凋亡水平均高于各相应模型组(P<0.05或P<0.01);沉默肠胃清组和过表达肠胃清组皮下瘤组织PTBP3、STAT3α、Bcl-2α的mRNA和蛋白表达水平均低于相应模型组,STAT3β、Bcl-2β的mRNA和蛋白表达水平均高于相应模型组(P<0.05或P<0.01)。沉默各组皮下瘤瘤重、皮下瘤组织Ki67表达水平及皮下瘤组织中PTBP3、STAT3α、Bcl-2α的mRNA和蛋白表达水平均低于对照相应各组,细胞凋亡水平及皮下瘤组织STAT3β、Bcl-2β的mRNA和蛋白表达水平均高于对照相应各组;过表达各组皮下瘤瘤重、皮下瘤组织Ki67表达水平及皮下瘤组织中PTBP3、STAT3α、Bcl-2αmRNA和蛋白表达水平均高于对照相应各组,细胞凋亡水平及皮下瘤组织STAT3β、Bcl-2β的mRNA和蛋白表达水平均低于对照相应各组(P<0.05或P<0.01)。各奥沙利铂组抑瘤率分别高于各肠胃清组。与对照相应各组比较,沉默相应各组抑瘤率均为正值,过表达相应各组抑瘤率均为负值。结论PTBP3可促进肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,上调肠癌细胞中STAT3α、Bcl-2α的表达,下调STAT3β、Bcl-2β的表达;肠胃清治疗大肠癌可能与其可抑制PTBP3,进而调控STAT3α、STAT3β、Bcl-2α、Bcl-2β表达作用相关。

关键词：大肠癌选择性剪接肠胃清多聚嘧啶区结合蛋白3 信号转导及转录活化因子3 B细胞淋巴瘤/白血病2

基于AMPK信号通路探讨芪术方改善非酒精性脂肪性肝炎的机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 49-56页

作者：张秋怡周振华上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海中医药大学附属曙光医院安徽医院合肥230011

目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路探讨芪术方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏脂质代谢及氧化应激的改善与作用机制。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组10只,造模组50只。造模组采用高脂高胆固醇饲料喂养16周造成N... 详细信息

目的:基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路探讨芪术方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)小鼠肝脏脂质代谢及氧化应激的改善与作用机制。方法:60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组10只,造模组50只。造模组采用高脂高胆固醇饲料喂养16周造成NASH小鼠模型后,随机分为模型组、芪术方低、中、高剂量组、易善复组各10只。芪术方各组按4.75、9.50、19.00 g·kg^(-1)剂量、易善复组按228 mg·kg^(-1)剂量行每日1次灌胃,正常组和模型组予等体积纯水,连续给药8周。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、葡萄糖(GLU)水平;苏木素-伊红(HE)和油红O染色观察肝组织病理变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、游离脂肪酸(FFA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)、线粒体解偶联蛋白2(UCP2)mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝组织AMPK、p-AMPK、ACC、CPT1A、UCP2蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组小鼠肝脏脂肪变性明显,可见多处炎症聚集灶,胞内出现大量脂质沉积,血清AST、ALT活力,IL-6、IL-1β、TNF-α、FFA、MDA水平显著升高,CAT、SOD活力显著降低,ACC mRNA及蛋白表达显著升高,CPT1A、UCP2 mRNA及蛋白表达显著降低,p-AMPK蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,芪术方各剂量组及易善复组小鼠肝脏脂肪变性程度减轻,血清AST、ALT活力,IL-6、IL-1β、TNF-α、FFA、MDA水平显著降低,CAT、SOD活力显著升高(P<0.01),芪术方中、高剂量组小鼠肝组织ACC mRNA及蛋白表达显著降低,CPT1A、UCP2 mRNA及蛋白,p-AMPK蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:芪术方可通过激活AMPK信号通路,改善NASH小鼠肝脏脂质代谢,减少氧化应激,促进肝细胞修复。

关键词：芪术方非酒精性脂肪性肝炎腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路脂质代谢氧化应激

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金芪降糖片对使用预混胰岛素2型糖尿病(气虚内热证)患者降糖疗效及血糖波动的影响

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中草药 2024年第2期55卷 534-539页

作者：陈艺蕾陆灏杨华杨宏杰吴坚章丽琼上海中医药大学附属曙光医院上海200021 上海中医药大学附属龙华医院上海200032 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院上海200437 上海中医药大学附属上海市中西医结合医院上海200082

目的观察金芪降糖片对使用预混胰岛素2型糖尿病(气虚内热证)患者降糖疗效及血糖波动的影响。方法采用随机、双盲、安慰剂对照、多中心临床试验设计,选取预混胰岛素治疗的2型糖尿病(气虚内热证)患者60例,随机分成试验组和对照组,试验组... 详细信息

目的观察金芪降糖片对使用预混胰岛素2型糖尿病(气虚内热证)患者降糖疗效及血糖波动的影响。方法采用随机、双盲、安慰剂对照、多中心临床试验设计,选取预混胰岛素治疗的2型糖尿病(气虚内热证)患者60例,随机分成试验组和对照组,试验组在常规治疗基础上给予金芪降糖片(0.56 g/片,每天3次,每次3片,餐前0.5 h口服)治疗,对照组在常规治疗基础上给予金芪降糖片模拟片(每天3次,每次3片,餐前0.5 h口服)治疗。疗程均为12周。比较两组的临床疗效。观察治疗前后两组葡萄糖目标范围内时间(time in range,TIR)、平均血糖波动幅度(mean amplitude of glycemic excursion,MAGE)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、餐后2 h血糖(2-hour postprandial blood glucose,2hPG)的变化。结果治疗后,试验组TIR、MAGE明显改善(P0.05),两组治疗后比较差异有统计学意义(P0.05),且试验组HbA1c达标率明显高于对照组(P0.05)。治疗后,试验组2hPG明显降低(P0.05),且试验组明显低于对照组(P中医证候改善总有效率(40.0%)明显高于对照组(6.7%),且差异有统计学意义(P0.05)。结论金芪降糖片可进一步降低使用预混胰岛素的2型糖尿病(气虚内热证)患者的血糖,并减少其血糖波动,达到良好的血糖控制目标,改善患者的临床症状,值得临床推广使用。

关键词：金芪降糖片 2型糖尿病血糖波动糖化血红蛋白空腹血糖餐后2 h血糖

基于中医“衡-和”思维辨治恶性肿瘤理论探微与体系建构

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 60-64页

作者：温俊凯汪舒云范忠泽邓皖利上海中医药大学附属普陀医院上海200062

中医药的应用贯穿于恶性肿瘤辨治的各个阶段,成效日益突显。为继承并发扬中医独到的原创优势,文章从古代中庸哲学思想与中医思维出发,钩沉“衡-和”思维之渊薮,围绕恶性肿瘤发病时机体内部稳态倾移与偏颇之特点,首倡以调衡致和为纲,求... 详细信息

中医药的应用贯穿于恶性肿瘤辨治的各个阶段,成效日益突显。为继承并发扬中医独到的原创优势,文章从古代中庸哲学思想与中医思维出发,钩沉“衡-和”思维之渊薮,围绕恶性肿瘤发病时机体内部稳态倾移与偏颇之特点,首倡以调衡致和为纲,求衡于动、时、势、气4个层面,致和于阴阳、形神、五脏、天人4个维度。总结凝练“衡-和”六法,由博返约,化简驭繁,为创建肿瘤辨治新体系提供形而上的思度与探索。

关键词：中医 “衡-和”思维恶性肿瘤理论探微体系建构

超重人群中健康者与非酒精性脂肪性肝病患者的临床特征及血清脂质组学分析

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临床肝胆病杂志 2024年第2期40卷 284-291页

作者：陈小燕袁乙富杜晟楠曹勤蒋元烨上海中医药大学附属普陀医院消化内科上海200062

目的探究超重人群中,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者与健康人的临床指标与脂质代谢差异。方法本研究将体质量指数(BMI)>23 kg/m^(2)定义为超重人群,选取2020年8月—2021年4月上海中医药大学附属普陀医院收治的62例超重NAFLD患者纳入超重... 详细信息

目的探究超重人群中,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者与健康人的临床指标与脂质代谢差异。方法本研究将体质量指数(BMI)>23 kg/m^(2)定义为超重人群,选取2020年8月—2021年4月上海中医药大学附属普陀医院收治的62例超重NAFLD患者纳入超重NAFLD组,另选取同期超重健康体检者50例作为对照。记录所有受试者的临床信息以及血液生化指标数据。应用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)进行血清脂质组学分析;使用主成分分析法和正交偏最小二乘法判别分析对脂质组学数据进行多元统计分析。计数资料两组间比较采用χ^(2)检验。计量资料两组间比较采用成组t检验或Wilcoxon秩和检验。结果超重NAFLD组BMI显著高于超重对照组(Z=-2.365,P=0.018)。血清学指标中,超重NAFLD组红细胞、血红蛋白、红细胞比容、尿酸、总蛋白、球蛋白、ALP、GGT、ALT、AST、胆碱酯酶、低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白B、血糖水平均显著高于超重对照组(P值均1,P3的甘油三酯含量较超重对照组降低(P<0.001),而不饱和键数≤3的甘油三酯含量较超重对照组增多(P<0.001)。结论超重NAFLD患者的部分生化指标及脂质代谢产物明显异于超重健康人,血液内脂肪酸明显升高,甘油三酯中的含饱和脂肪链的种类显著升高。

关键词：非酒精性脂肪性肝病超重体征和症状脂质组学

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灵宝护心丹对动脉粥样硬化小鼠肠道黏膜屏障和肠道菌群的影响

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中草药 2024年第12期55卷 4075-4083页

作者：芦瑞霞林文勇靳琪鹏王肖龙上海中医药大学附属曙光医院上海200100

目的探讨灵宝护心丹对动脉粥样硬化模型小鼠的改善效果及其对肠道菌群结构的调节作用,并比较其与他汀类药物对肠道菌群影响的差异性。方法高脂饮食喂养ApoE^(−/−)小鼠12周诱导动脉粥样硬化模型,随机分为模型组及灵宝护心丹低、中、高剂... 详细信息

目的探讨灵宝护心丹对动脉粥样硬化模型小鼠的改善效果及其对肠道菌群结构的调节作用,并比较其与他汀类药物对肠道菌群影响的差异性。方法高脂饮食喂养ApoE^(−/−)小鼠12周诱导动脉粥样硬化模型,随机分为模型组及灵宝护心丹低、中、高剂量(4.68、9.36、18.72 mg/kg)组和阿托伐他汀(2.4 mg/kg)组。造模成功后连续给药8周,C57BL/6小鼠喂养普通饲料作为空白组。通过油红O染色和苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察小鼠主动脉窦的斑块面积和病理结构改变,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triacylglycerol,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholestero,LDL-C)水平,采用16S rRNA测序技术检测小鼠粪便微生物群的多样性和丰度,免疫荧光染色和qRT-PCR检测结肠紧密连接蛋白Occludin的表达情况。结果与模型组比较,灵宝护心丹能够有效减少动脉斑块沉积和局部炎症损伤,降低TC、TG、LDL-C水平(P<0.01、0.001),改善肠道微生物的丰富度和多样性,且与他汀类药物治疗后的肠道微生物有显著差异,灵宝护心丹组的差异物种是Parasutterella属、Sutterellaceae科、Burkholderiales目和γ-变形菌纲等,阿托伐他汀组的差异物种是拟杆菌属、拟杆菌科、Butyricimonas属和Marinifilaceae科等。免疫荧光和qRT-PCR结果显示灵宝护心丹显著增加结肠Occludin的表达(P<0.05),提高小鼠肠道黏膜屏障的完整性。结论灵宝护心丹具有改善动脉粥样硬化、调血脂、保护肠黏膜屏障的作用,其机制可能与调节肠道菌群有关。

关键词：灵宝护心丹动脉粥样硬化肠道菌群血脂 Occludin

败酱草中黄酮类化学成分影响大肠癌发生发展的作用机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 240-247页

作者：张平平贾茹岑戎刘宏杰王炎上海中医药大学附属曙光医院上海201203

大肠癌是消化系统常见恶性肿瘤,居全球癌症发病谱第3位和死因谱第2位。近年来大肠癌发病率呈上升趋势,发病年龄呈现年轻化,癌症负担沉重,因此防治大肠癌发生发展及复发转移对降低大肠癌发病率和死亡率具有重要意义。败酱草具有清热解毒... 详细信息

大肠癌是消化系统常见恶性肿瘤,居全球癌症发病谱第3位和死因谱第2位。近年来大肠癌发病率呈上升趋势,发病年龄呈现年轻化,癌症负担沉重,因此防治大肠癌发生发展及复发转移对降低大肠癌发病率和死亡率具有重要意义。败酱草具有清热解毒、消痈排脓的功效,对炎性肠病、消化道肿瘤、盆腔炎症、妇科肿瘤等多种疾病具有良好的疗效。临床常应用败酱草治疗大肠癌,但其作用机制尚不完全清楚。现代研究发现败酱草含有三萜类、皂苷、环烯醚萜类、黄酮类等多种化学成分,具有抗氧化、抗肿瘤、抗菌、抗病毒等多种药理作用,其中黄酮类化学成分是败酱草主要抗肿瘤成分,网络药理及谱效关系分析认为,槲皮素、木犀草素、芹菜素、异牡荆素、异红草苷在败酱草抑制大肠癌发生发展过程中起主要作用。体内外研究显示,败酱草中黄酮类化学成分可以从防止大肠癌癌前病变、抑制癌细胞生长增殖、阻滞癌细胞周期、促进癌细胞凋亡、逆转大肠癌耐药等多种途径发挥抗肿瘤作用。黄酮类化合物口服利用度低,肠道是黄酮类化合物在体内的主要代谢部位,其代谢途径与肠道微生物关系密切。该文对败酱草中主要黄酮类化学成分抗肿瘤机制及其对肠道微生物群影响相关研究做一综述,以期为深入研究败酱草抗大肠癌作用机制、转化临床应用提供研究思路。

关键词：败酱草黄酮类化合物大肠癌肠道菌群

基于中西医病证特点的腹泻型肠易激综合征动物模型的临床吻合度分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 218-227页

作者：蒋风茹何友成吴月潘可怡周淳宇蔡舒雨袁建业上海中医药大学附属龙华医院上海200032

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是临床常见的功能性肠病之一,其发病机制复杂且未被完全阐明,现代医学缺乏稳定且行之有效的治疗方式。建立符合中西医病证特点的IBS-D动物模型有助于进一步揭示其发病机制并完善治疗方案。临床吻合度是一种以... 详细信息

腹泻型肠易激综合征(IBS-D)是临床常见的功能性肠病之一,其发病机制复杂且未被完全阐明,现代医学缺乏稳定且行之有效的治疗方式。建立符合中西医病证特点的IBS-D动物模型有助于进一步揭示其发病机制并完善治疗方案。临床吻合度是一种以疾病中西医最新诊断标准为依据,评价动物模型对中西医病证模拟效果的指标。该文通过对IBS-D动物模型相关文献进行分析归纳,发现IBS-D模型所用动物多以大鼠为主,所用方法多为单因素诱导、双因素诱导和多因素联合诱导,所表现的疾病特征主要是与内脏痛觉过敏或(和)胃肠动力异常相关的症状和(或)体征。其中,单因素诱导IBS-D大鼠模型多具备很高的西医临床吻合度,而中医临床吻合度不足;双因素诱导和多因素诱导的IBS-D模型西医临床吻合度多数较高,但也存在吻合度水平参差不齐的情况。此外,IBS-D中医证候模型构建以肝郁脾虚证为主,而脾肾阳虚、脾胃湿热、脾虚湿盛,寒热错杂证候模型略显不足。因此,今后仍需进一步完善已有的或研发新的IBS-D动物模型,为本病的中西医病证机制探索和治疗手段研发提供更适用的工具。

关键词：腹泻型肠易激综合征动物模型中西医病证特点临床吻合度