基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨如金解毒散对巨噬细胞焦亡模型的影响

作     者：马宇慧 李祎楠 孟佳磊 齐璐瑶 雷鸣 孙芳园 

作者机构：上海中医药大学附属普陀医院全科医学科 上海中医药大学附属第七人民医院 

出 版 物：《中国免疫学杂志》 (Chinese Journal of Immunology)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：上海市卫生健康委员会卫生行业临床研究专项(20214Y0281) 上海市卫健委中医药三年行动计划—华东片区及市级中医专科专病联盟建设(ZY(2021-2023)0302) 浦东新区中医高端人才引入工程(PDZY-2022-0701) 浦东新区中医高级师承培养计划(PDZY-2022-0601) 

主　　题：如金解毒散 急性肺损伤 巨噬细胞 细胞焦亡 炎症小体 

摘      要：目的：观察如金解毒散对RAW264.7细胞焦亡模型的治疗作用，并探讨其抗炎机制。方法：RAW264.7细胞经LPS刺激4 h，ATP刺激30min构建细胞焦亡模型。分组包括对照组（Control）、模型组（LPS+ATP）、如金解毒散低剂量组（RJJDS50μg/ml）、如金解毒散中剂量组（RJJDS100μg/ml）、如金解毒散高剂量组（RJJDS200μg/ml）、地塞米松组（DEX组）。随后收集各组细胞及上清液，检测上清液中LDH释放量，正倒置荧光显微镜观察细胞ROS水平，ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的含量，蛋白免疫印迹法（Westernblotting）检测细胞中NLRP3、Caspase-1p45、Caspase-1p20、GSDMD-FL和GSDMD-N的蛋白水平，正倒置荧光显微镜观察PI阳性细胞数量。结果：与对照组相比，模型组细胞上清液中LDH、TNF-α、和IL-1β的含量显著升高（P 0.05）；模型组细胞ROS水平显著升高（P0.05）；NLRP3、Caspase-1p20和GSDMD-N 的蛋白水平上调（P 0.05）；PI 阳性细胞数增多（P 0.05）。与模型组相比，如金解毒散各治疗组和阳性药DEX组显著降低了RAW264.7细胞焦亡模型上清液中LDH、TNF-α和IL-1β的含量（P 0.05）；下调了NLRP3、Caspase-1 p20和GSDMD-N蛋白的表达（P 0.05）；PI阳性细胞数显著减少（P 0.05）。结论：如金解毒散抑制巨噬细胞焦亡，发挥抗炎作用涉及NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号。