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四妙丸上调高尿酸血症大鼠小肠ABCG2表达促进肠道尿酸排泄的作用

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中国实验方剂学杂志 2022年第22期28卷 33-39页

作者：张永琪陈杰伟叶博闻郝泽瀚戴号上海中医药大学上海201203 上海中医药大学附属光华医院上海200052

目的:研究四妙丸对高尿酸血症大鼠小肠三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)表达和肠道尿酸排泄的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、苯溴马隆组(4.7 mg·kg^(-1))和四妙丸高、中、低剂量组(2260.6、1130.3、565.2 mg·kg... 详细信息

目的:研究四妙丸对高尿酸血症大鼠小肠三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)表达和肠道尿酸排泄的影响。方法:48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、苯溴马隆组(4.7 mg·kg^(-1))和四妙丸高、中、低剂量组(2260.6、1130.3、565.2 mg·kg^(-1)),每组8只。以氧嗪酸钾和次黄嘌呤制备高尿酸血症模型,连续21 d。第8天予相应药物干预,1次/d,持续14 d。第21天处死大鼠,检测血尿酸、肠道尿酸、血肌酐、血尿素氮等指标,以蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠小肠ABCG2蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小肠ABCG2 mRNA表达,免疫组化法检测小肠ABCG2蛋白表达和定位。结果:与正常组比较,模型组血尿酸、血肌酐、血尿素氮显著升高(P<0.01);与模型组比较,四妙丸各剂量组和苯溴马隆组大鼠血尿酸水平均显著降低(P<0.01),四妙丸中、低剂量组肠道尿酸明显升高(P<0.05,P<0.01),苯溴马隆组血肌酐显著升高(P<0.01),低剂量组血尿素氮明显降低(P<0.05),四妙丸低剂量组与苯溴马隆组血尿酸比较差异无统计学意义。Western blot结果显示,与正常组比较,模型组ABCG2蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,四妙丸中、低剂量组ABCG2蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),四妙丸高剂量组及苯溴马隆组升高但差异无统计学意义。Real-time PCR分析显示,与正常组比较,模型组ABCG2 mRNA表达差异无统计学意义;与模型组比较,四妙丸中、低剂量组ABCG2 mRNA表达明显升高(P<0.05)。免疫组化显示,ABCG2蛋白主要分布于肠绒毛,与正常组比较,模型组ABCG2蛋白表达差异无统计学意义;与模型组比较,四妙丸各剂量组ABCG2蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论:四妙丸可显著降低高尿酸血症大鼠血尿酸,其中低剂量四妙丸具有与苯溴马隆等效的降尿酸作用,同时可保护肾功能,其机制可能与上调肠道ABCG2表达促进肠道尿酸排泄有关。

关键词：四妙丸高尿酸血症肠道尿酸三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(ABCG2)

矢志方抑制NLRP3减轻高尿酸血症小鼠肾小管上皮细胞焦亡的研究

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中华中医药杂志 2023年第7期38卷 3358-3363页

作者：周嘉宝张栩铭吴志远吴燕升高建东上海中医药大学附属曙光医院肾病科上海中医药大学中医肾病研究所教育部肝肾疾病重点实验室(上海中医药大学)上海市中医临床重点实验室上海201203

目的:探讨矢志方抑制高尿酸血症(H U A)小鼠肾小管上皮细胞焦亡和抗炎的作用机制。方法:40只BALB/c小鼠随机分成正常组、模型组、别嘌醇组、矢志方组。除正常组外,其余组采用腹腔注射氧嗪酸钾(P O)诱导H U A,分别给予矢志方、别嘌醇治疗... 详细信息

目的:探讨矢志方抑制高尿酸血症(H U A)小鼠肾小管上皮细胞焦亡和抗炎的作用机制。方法:40只BALB/c小鼠随机分成正常组、模型组、别嘌醇组、矢志方组。除正常组外,其余组采用腹腔注射氧嗪酸钾(P O)诱导H U A,分别给予矢志方、别嘌醇治疗,观察血清尿酸(S U A)、血清肌酐(S C r)、血尿素氮(BUN);HE染色观察病理改变;Western Blot和免疫荧光技术检测焦亡相关蛋白表达;ELISA检测IL-1β、IL-18。培养人肾小管上皮细胞(HK-2),采用尿酸(UA)干预,分别给予矢志方、炎性小体3(NLRP3)抑制剂(MCC950)处理48 h,CCK-8法检测细胞活力;Western Blot检测焦亡相关蛋白表达;ELISA检测细胞上清IL-1β、IL-18含量。结果:与正常组小鼠比较,模型组SCr、BUN、SUA显著升高(P<0.01),肾组织NLRP3、Caspase-1、Cleaved-caspase-1、GSDMD、pro-IL-1β、IL-1β、IL-18表达升高(P<0.01),血清IL-1β和IL-18水平升高(P<0.01);与模型组比较,矢志方可有效降低HUA小鼠的SUA、SCr、BUN水平(P<0.01)和血清IL-1β和IL-18分泌水平(P<0.01,P<0.05)。与空白组细胞比较,UA诱导细胞NLRP3、cleaved-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、N-GSDMD表达升高(P<0.01);矢志方和MCC950可显著抑制UA诱导下细胞NLRP3、Caspase-1、cleaved-Caspase-1、GSDMD、N-GSDMD的表达(P<0.01,P<0.05),减少IL-1β、IL-18产生(P<0.01,P<0.05)。结论:矢志方靶向抑制NLRP3,抑制HUA小鼠肾小管上皮细胞焦亡,减轻肾脏炎性损伤。

关键词：高尿酸血症肾小管上皮细胞矢志方炎性小体3 细胞焦亡炎性损伤

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金复康调控免疫衰老抑制肺癌转移

肿瘤防治研究 2022年第11期49卷 1134-1138页

作者：姚望阙祖俊姚嘉良于盼罗斌田建辉上海中医药大学附属龙华医院肿瘤科上海200032 上海中医药大学附属市中医医院肿瘤临床医学中心上海200071

目的探讨免疫衰老对肺癌转移的影响,并揭示扶正中药金复康防治肺癌转移的作用机制。方法不同月龄C57BL/6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌细胞建立肺移植瘤模型;其中6月龄组小鼠采用金复康连续灌胃42天;观察小鼠肺部肿瘤转移情况;流式细胞术检... 详细信息

目的探讨免疫衰老对肺癌转移的影响,并揭示扶正中药金复康防治肺癌转移的作用机制。方法不同月龄C57BL/6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌细胞建立肺移植瘤模型;其中6月龄组小鼠采用金复康连续灌胃42天;观察小鼠肺部肿瘤转移情况;流式细胞术检测小鼠外周血中记忆T细胞、NK细胞比例的变化。结果15月龄和6月龄小鼠较2月龄小鼠肺转移成瘤率显著上升(均P<0.05)。外周血记忆CD4+T细胞丰度与小鼠年龄呈正相关(2月龄vs.6月龄,P=0.041;2月龄vs.15月龄,P=0.041)。NK细胞丰度与年龄呈负相关(2月vs.6月,P=0.009;2月vs.15月,P=0.009)。金复康给药组小鼠的生存期较0.9%NaCl组有延长趋势,但差异无统计学意义,而给药组外周血NK细胞水平较0.9%NaCl组显著升高(P=0.029)。结论免疫衰老可促进肺癌转移发生,金复康延长小鼠生存期可能与延缓免疫衰老和改善NK细胞水平有关。

关键词：免疫衰老肺癌转移 NK细胞

黄芪甲苷对angiotensin Ⅱ诱发的血管内皮细胞炎症反应的影响及机制研究

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中国中药杂志 2022年第21期47卷 5900-5907页

作者：张诗雨孙阳张静李世杰崔琳谢世阳高原邢作英王幼平河南中医药大学第一附属医院中心实验室河南郑州450000

该实验拟明确黄芪甲苷对心血管疾病最主要的致病因素血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的抑制作用,以及在该过程中钙离子(Ca2+)/phosphatidylinositol-3-kinase(PI3K)/protein kinase B(Akt)/血管... 详细信息

该实验拟明确黄芪甲苷对心血管疾病最主要的致病因素血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, AngⅡ)所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应的抑制作用,以及在该过程中钙离子(Ca2+)/phosphatidylinositol-3-kinase(PI3K)/protein kinase B(Akt)/血管内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)/一氧化氮(nitric oxide, NO)信号通路的作用。通过人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)培养模型,利用ELISA、cell-based ELISA,Western blot及单核细胞黏附实验等方法,明确黄芪甲苷对AngⅡ所诱发的炎症反应的抑制作用及相关机制。实验结果显示,黄芪甲苷明显增加HUVECs产生和释放NO,呈剂量和时间依赖性,并伴有eNOS蛋白的磷酸化(P实验结果表明黄芪甲苷通过激活Ca2+/PI3K/Akt/eNOS/NO信号通路抑制AngⅡ所诱发的血管内皮细胞介导的炎症反应。

关键词：黄芪甲苷血管紧张素Ⅱ 血管内皮细胞炎症 NF-κB

芝类提取物改善Walker-256腹水大鼠免疫功能

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第二军医大学学报 2017年第8期38卷 1016-1022页

作者：赵若琳殷佩浩倪振华孙健徐可何裕民上海中医药大学中医基础理论教研室上海201203 上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062

目的探讨芝类提取物(GLE)对Walker-256腹水大鼠免疫功能的影响及其机制。方法根据不同处理方法将60只Wistar大鼠随机分为6组:对照组、模型组、低剂量GLE组、中剂量GLE组、高剂量GLE组和顺铂组,每组10只。采用Walker-256大鼠腹水癌细胞... 详细信息

目的探讨芝类提取物(GLE)对Walker-256腹水大鼠免疫功能的影响及其机制。方法根据不同处理方法将60只Wistar大鼠随机分为6组:对照组、模型组、低剂量GLE组、中剂量GLE组、高剂量GLE组和顺铂组,每组10只。采用Walker-256大鼠腹水癌细胞接种法造模后,高、中、低剂量GLE组大鼠分别给予GLE 0.84、1.68、3.36g/(kg·d)灌胃,每天2次,每次2mL,连续14d;顺铂组大鼠给予0.004g/(kg·d)顺铂(溶于生理盐水)腹腔注射,每周1次。对照组(未造模大鼠)和模型组均给予生理盐水灌胃,每天2次,每次2mL,连续14d。观察各组大鼠的一般情况,测定腹水质量,称量计算大鼠脾、胸腺和肾脏器指数,检测肾功能;流式细胞术检测各组大鼠胸腺和骨髓的细胞周期、外周血T淋巴细胞亚群分布和自然杀伤(NK)细胞数;血清免疫因子蛋白芯片检测对照组、模型组和中剂量GLE组大鼠血清免疫细胞因子的水平。结果 GLE可有效减少大鼠腹水质量(P<0.05)。与对照组相比,模型组和顺铂组均出现胸腺、脾和肾损伤,给予中、高剂量GLE干预后大鼠胸腺指数、肾指数提高,血肌酐和尿素氮值降低(P<0.05);模型组和顺铂组大鼠胸腺和骨髓细胞发生G0/G1期阻滞,给予GLE干预后G0/G1期阻滞减少、G2/M和S期细胞比例升高(P<0.05)。与模型组相比,给予GLE干预使大鼠外周血中CD4+细胞比例、CD4+/CD8+细胞比值和NK细胞比例均增加,CD8+细胞比例降低(P<0.05)。中剂量GLE组大鼠血清中干扰素γ(IFN-γ)、白介素(IL)-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-10和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达与模型组相比均升高(P<0.05)。结论GLE可有效减少Walker-256腹水大鼠腹水生成,改善大鼠免疫功能,且与顺铂相比无肾脏损害。

关键词：灵芝腹水免疫细胞因子类 T淋巴细胞天然杀伤细胞

基于均匀设计的蠲瘤散结方治疗肺腺癌主效应中药分析

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中国中医药信息杂志 2022年第6期29卷 87-91页

作者：潘彦宾王宇立骆莹滨吴建春方志红许荣忠李雁上海中医药大学附属市中医医院上海200070

目的基于均匀设计法筛选并验证蠲瘤散结方治疗肺腺癌的主效应药物或药物组合。方法构建Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型,以蠲瘤散结方中6味药物(白英、夏枯草、海藻、石见穿、石上柏、牡蛎)为考察因素,选用U12(12^(10))均匀设计表,每因素6... 详细信息

目的基于均匀设计法筛选并验证蠲瘤散结方治疗肺腺癌的主效应药物或药物组合。方法构建Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型,以蠲瘤散结方中6味药物(白英、夏枯草、海藻、石见穿、石上柏、牡蛎)为考察因素,选用U12(12^(10))均匀设计表,每因素6个水平,重复1次,按组方设计所得12种不同药物组合进行给药干预,以小鼠瘤体体积及瘤体质量为结局指标,通过建立回归方程筛选主效应药物或药物组合。对筛选所得主效应药物,再通过上述均匀设计方法及动物实验进行药效学验证,探索最佳剂量配比和核心效应药物。结果筛选实验表明,与对照组比较,第10组小鼠瘤体体积和质量显著下降(P实验结果表明,3味主效应药物不同配比与蠲瘤散结方抑瘤作用相当,最佳药物配比为白英∶石见穿∶石上柏=3∶2∶1。白英是蠲瘤散结方发挥抗肺腺癌作用的核心药物。结论以白英为主的清热解毒药组是蠲瘤散结方发挥抑瘤作用的主效应药物,其抗肺腺癌疗效与蠲瘤散结方相当。

关键词：蠲瘤散结方均匀设计肺腺癌主效应中药

大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型的建立与评估

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中国比较医学杂志 2023年

作者：余奎梁晓强韩冕张静喆上海中医药大学附属龙华医院上海中医药大学附属龙华医院浦东分院上海中医药大学附属龙华医院中医外科研究所

目的建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型，检测其病理生理指标，为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法选用SPF级雄性SD大鼠，采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建，... 详细信息

目的建立一种稳定的大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型，检测其病理生理指标，为急性胆管炎、胆汁淤积等疾病的研究提供稳定可靠的标准化动物模型。方法选用SPF级雄性SD大鼠，采用胆总管下段注射类毒素及胆总管结扎方式进行模型构建，评估大鼠造模前后的体重变化、死亡情况、肝功能主要指标变化及肝组织病理改变情况。结果造模后模型组大鼠体重明显降低；假手术组大鼠无死亡，肝功能无异常；模型组大鼠死亡3只，模型组死亡率12%，肝功能主要指标及肝病理呈现出明显的胆汁淤积及肝功能损伤性改变。结论本研究成功建立了大鼠急性梗阻性化脓性胆管炎模型，该模型具有操作简便、损伤小、死亡率低、造模成功率高等优势，可为多种常见疾病的机制研究和药物研发提供标准化的实验动物模型。

关键词：急性梗阻性化脓性胆管炎胆总管梗阻动物模型大鼠

苍术酮对人肝癌细胞MHCC97-H增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及机制研究

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中药新药与临床药理 2023年第10期34卷 1370-1376页

作者：金源源麦静愔平键陈建杰成扬上海中医药大学附属曙光医院上海201203 上海市中医医院上海200071 上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海201203 上海市中医临床重点实验室上海201203

目的探讨苍术酮对人肝癌细胞MHCC97-H增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及机制。方法体外培养人肝癌细胞MHCC97-H,采用CCK-8法检测细胞活性,计算苍术酮的半数抑制浓度(IC50)。将MHCC97-H细胞分为对照组和苍术酮5、10、20μmol·L^(-1)浓度组... 详细信息

目的探讨苍术酮对人肝癌细胞MHCC97-H增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及机制。方法体外培养人肝癌细胞MHCC97-H,采用CCK-8法检测细胞活性,计算苍术酮的半数抑制浓度(IC50)。将MHCC97-H细胞分为对照组和苍术酮5、10、20μmol·L^(-1)浓度组,分别干预24 h。采用克隆形成实验(培养2周)检测细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;Western Blot法检测细胞上皮-间质转化(EMT)及凋亡相关蛋白的表达情况。结果苍术酮干预MHCC97-H细胞24 h的IC50为24.97μmol·L^(-1)。与对照组比较,苍术酮10、20μmol·L^(-1)组的MHCC97-H细胞集落数显著减少(P<0.01),细胞凋亡率显著升高(P<0.01),MHCC97-H细胞E-钙黏蛋白(E-cad)表达显著上调(P<0.01);苍术酮5、10、20μmol·L^(-1)组的MHCC97-H细胞迁移数及侵袭数均显著减少(P<0.05,P<0.01),MHCC97-H细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cad)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达显著下调(P<0.01),金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论苍术酮能够抑制人肝癌细胞MHCC97-H增殖、迁移和侵袭,并促进其凋亡,可能与调控细胞EMT及凋亡相关蛋白表达有关。

关键词：苍术酮肝癌细胞MHCC97-H 增殖迁移侵袭凋亡上皮-间质转化

基于“肺与大肠相表里”探讨IgA肾病的机制与治疗

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中华中医药学刊 2024年

作者：张艳玥张栩铭周嘉宝杨枫吴志远高建东上海中医药大学肝肾疾病病证教育部重点实验室上海中医药大学中医肾病研究所上海市中医临床重点实验室上海中医药大学附属曙光医院肾病科

IgA肾病（IgA nephropathy，IgAN）是全世界最常见的原发性肾小球疾病，是导致终末期肾病的常见原因。目前尚难解释其病因及发病机制，随着研究的深入，众多学者发现肠道菌群失调及黏膜免疫反应与本病的发生发展紧密相关。而呼吸道感染... 详细信息

IgA肾病（IgA nephropathy，IgAN）是全世界最常见的原发性肾小球疾病，是导致终末期肾病的常见原因。目前尚难解释其病因及发病机制，随着研究的深入，众多学者发现肠道菌群失调及黏膜免疫反应与本病的发生发展紧密相关。而呼吸道感染导致和加重IgA肾病的临床进展不容忽视。本文试从“肺与大肠相表里”的中医经典理论结合现代医学研究，综述分析肺、肠与IgAN的关系，以期思考药物基于“肺与大肠相表里”理论应用于IgAN的可能防治机制，为IgAN的临床治疗及研究提供新方向。

关键词：肺与大肠相表里 IgA肾病肠道菌群黏膜免疫