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基于ORAI1/NFAT信号轴探讨镇心安神方对1-氯-2,4-二硝基苯诱导特应性皮炎小鼠的作用及机制

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中药新药与临床药理 2024年第2期35卷 168-173页

作者：陈若曦姜姗姗杨洁杨晓宇徐蕊瑶方琳赵一丁陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省中医药研究院陕西西安710003 陕西省中医医院陕西西安710003

目的基于钙通道调节分子1(ORAI1)/T细胞核因子(NFAT)信号轴探讨镇心安神方(龙骨、牡蛎、淡竹叶、骨碎补、茯苓)对特应性皮炎(AD)小鼠的作用及机制。方法将36只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、西替利嗪组(1.3 mg·kg^(-1))及镇... 详细信息

目的基于钙通道调节分子1(ORAI1)/T细胞核因子(NFAT)信号轴探讨镇心安神方(龙骨、牡蛎、淡竹叶、骨碎补、茯苓)对特应性皮炎(AD)小鼠的作用及机制。方法将36只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、西替利嗪组(1.3 mg·kg^(-1))及镇心安神方组(36.36 g·kg^(-1)),每组9只。采用1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)诱导建立AD小鼠模型。灌胃给药,每日1次,连续给药2周。给药结束后,测定皮损面积,并对皮损严重程度进行评分;测定脾脏质量,计算脾脏指数;采用HE染色法观察皮损组织病理变化;ELISA法检测血清中白细胞介素4(IL-4)、IL-13及胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的含量;Western Blot法检测皮损组织中ORAI1、钙调磷酸酶A(CaN)、T细胞核因子2(NFAT2)蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组小鼠的皮损评分显著升高(P<0.01),皮损面积显著扩大(P<0.01);表皮层及真皮层厚度显著增加(P<0.01),表皮过度角化,棘层肥厚,真皮层可见嗜酸性粒细胞、淋巴细胞等炎性细胞浸润;脾脏指数及血清IL-4、IL-13、TSLP水平显著升高(P<0.01);皮损组织中CaN、NFAT2、ORAI1蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,镇心安神方组小鼠的皮损评分显著降低(P<0.01),皮损面积显著缩小(P<0.01);表皮层及真皮层厚度显著降低(P<0.01),表皮过度角化减轻,棘层轻度肥厚,真皮层有少量炎性细胞浸润;脾脏指数及血清IL-4、IL-13、TSLP水平显著降低(P<0.01);皮损组织中CaN、NFAT2、ORAI1蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论镇心安神方能够改善DNCB诱导AD小鼠的皮肤病理损伤,可能与其抑制ORAI1、CaN及NFAT2蛋白表达,降低血清TSLP、IL-4、IL-13等2型炎症因子水平,通过免疫调节改善皮肤炎症及瘙痒有关。

关键词：镇心安神方特应性皮炎 ORAI1/NFAT信号轴免疫调节小鼠

HPLC法同时测定补肾活血散结胶囊中12种成分的含量

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中成药 2024年第1期46卷 1-6页

作者：尹继瑶胡静沈霞崔小敏任慧曲彤李宁鲁文静陈志永屈凯陕西中医药大学陕西咸阳712083 陕西省中医药研究院陕西西安710003 陕西省中医医院陕西西安710003

目的建立HPLC法同时测定补肾活血散结胶囊中没食子酸、原儿茶酸、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、丹酚酸B、丹酚酸A、朝藿定C、淫羊藿苷的含量。方法分析采用Agilent 5 TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);... 详细信息

目的建立HPLC法同时测定补肾活血散结胶囊中没食子酸、原儿茶酸、莫诺苷、马钱苷、獐牙菜苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、丹酚酸B、丹酚酸A、朝藿定C、淫羊藿苷的含量。方法分析采用Agilent 5 TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长240 nm。结果12种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率97.11%~101.14%,RSD 0.60%~2.65%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于补肾活血散结胶囊的质量控制。

关键词：补肾活血散结胶囊化学成分含量测定 HPLC

基于UHPLC-Q-Exactive Focus-MS/MS的太白茶化学成分研究

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中国现代应用药学 2024年第1期41卷 71-79页

作者：李莎莎狄志彪胡静李雅娟毛阿娟李凡李芳张红王卫锋陕西省中医药研究院西安710003 陕西中医药大学陕西咸阳712046

目的应用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q-Exactive Focus-MS/MS)对太白茶醇提物进行快速定性研究。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯... 详细信息

目的应用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-Q-Exactive Focus-MS/MS)对太白茶醇提物进行快速定性研究。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(–1),柱温30℃;质谱条件为电喷雾离子源(ESI),负离子模式扫描,扫描范围m/z 80~1 200。根据高分辨质谱数据分析,参考文献及对照品确认,对太白茶中的化学成分进行快速、全面的定性分析。结果从太白茶共鉴定出了39种成分,包括多取代单苯环类化合物9种,缩酚酸类11种,缩酚酸环醚类5种,二苯并呋喃类2种,脂肪酸类10种及其他2种。结论该方法可快速、全面鉴定太白茶中的化学成分,其中3种成分(苔色酸、松萝酸、黑茶渍素)与对照品比对后准确鉴定,19种成分首次在太白茶中发现,可为太白茶药效物质研究及质量评价提供重要依据。

关键词：太白茶液质联用化学成分

西洋参-红花有效成分治疗早期糖尿病肾病的网络药理学和实验验证

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世界中医药 2024年第14期19卷 2072-2080页

作者：周婷屈凯陈志永李宁刘厚利武云丁焱霖谢磊许建秦西安国际医学中心西安710100 陕西省中医医院西安710003 陕西省中医药研究院西安710003

目的:通过网络药理学、分子对接技术及细胞实验探讨西洋参-红花有效成分治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获得西洋参-红花活性成分的干扰靶点,再与GeneCards、TTD等数据库中早期DN基... 详细信息

目的:通过网络药理学、分子对接技术及细胞实验探讨西洋参-红花有效成分治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:运用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获得西洋参-红花活性成分的干扰靶点,再与GeneCards、TTD等数据库中早期DN基因靶点相映射即为交集靶点。采用STRING数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,运用Cytoscape 3.8.2软件筛选出核心靶点;通过DAVID数据库进行基因本体(GO)富集分析和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,运用Cytoscape 3.8.2软件进行“有效成分-关键靶点-通路-疾病”网络图展示;通过Autodock Tools软件进行分子对接,采用MTT法检测有效成分对脂多糖(LPS)诱导的人肾小球系膜细胞(HMC)活性,利用酶联免疫吸附试验检测有效成分对炎症介质的影响。结果:得到西洋参-红花治疗早期DN的活性成分有24个,对应的药物靶点207个,其中72个和早期DN相关。网络拓扑参数分析得出了肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β等15个关键靶点,KEGG通路分析筛选出晚期糖基化终末产物(AGE)-AGE受体(RAGE)、TNF、低氧诱导因子-1(HIF-1)、IL-17、核因子κB等20个信号通路;分子对接表明IL-6与槲皮素、木犀草素、黄芩素、人参皂苷rh2稳定结合。细胞实验得出西洋参-红花活性成分槲皮素、木犀草素、黄芩素能显著抑制IL-6、TNF-α和IL-1β表达。结论:本研究初步证实西洋参-红花有效成分能有效抑制早期DN炎症,对肾脏具有保护作用,为后期深入研究提供了依据。

关键词：西洋参-红花早期糖尿病肾病网络药理学分子对接细胞实验晚期糖基化终末产物-晚期糖基化终末产物受体信号通路炎症介质

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头痛宁胶囊对偏头痛大鼠模型和脂多糖诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制

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世界中医药 2024年第11期19卷 1632-1637页

作者：支文冰刘洋宗时宇王春柳孙婷婷李晔刘峰张红陕西省中医药研究院/陕西省中医医院西安710003 陕西步长制药有限公司西安710075

目的:探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法:将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组,分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)。... 详细信息

目的:探讨头痛宁胶囊(TTN)对偏头痛大鼠模型和脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞的影响及作用机制。方法:将21只无特定病原体(SPF)级斯泼累格·多雷(SD)雄性大鼠按照随机数字表法分为3组,分别为空白组、模型组、头痛宁给药组(TTN给药组)。TTN给药组大鼠给予TTN 640 mg/kg灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d,预给药7 d。末次给药后30 min, TTN给药组和模型组大鼠给予皮下注射硝酸甘油注射液10 mg/kg造模,空白组给予皮下注射等体积生理盐水。用酶联免疫吸附试验法测定大鼠血清5-HT的水平、脑组织中DA。脂多糖(LPS)诱导神经小胶质细胞(BV2)模拟中枢敏化,将细胞分为空白组、脂多糖组和头痛宁高、低剂量给药组,噻唑蓝实验检测TTN和LPS对BV2细胞活力的影响;硝酸还原酶法检测细胞上清中一氧化氮(NO);酶联免疫吸附试验法检测细胞上清中脑源性生长因子(BDNF)、5-HT、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫组织化学法和蛋白质印迹法检测BV2细胞中Toll样受体4(TLR4)和磷酸化p65(p-p65 NF-κB)蛋白表达。结果:模型组大鼠血清5-HT、脑组织中DA水平低(P<0.05),TTN给药组血清5-HT、脑组织中DA水平高(P<0.05)。TTN(1.25~20μg/mL)及LPS(1、2、4和8μg/mL)对BV2细胞活力无显著影响。与空白组比较,LPS组细胞上清液中BDNF、5-HT水平低(P<0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高(P<0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达高(P<0.05);与LPS组比较,TTN给药组细胞上清液中BDNF、5-HT水平高(P<0.05),NO、IL-6、TNF-α水平高低(P<0.05),细胞中TLR4、p-p65 NF-κB蛋白表达低(P<0.05)。结论:头痛宁胶囊通过抑制TLR4/NF-κB信号通路,减轻了LPS诱导的BV2细胞炎症反应,缓解大鼠偏头痛症状。

关键词：偏头痛头痛宁胶囊大鼠神经小胶质细胞 Toll样受体4/核因子κB信号通路中枢敏化炎症反应脂多糖

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电针对帕金森病小鼠脑肠氧化应激的影响

针刺研究 2024年第3期49卷 256-264页

作者：刘凡刘智斌马雪王强王渊陕西中医药大学陕西咸阳712046 陕西省针药结合重点实验室陕西咸阳712046 陕西省中医脑病重点实验室陕西咸阳712046

目的:观察电针干预对帕金森病(PD)模型小鼠行为学、结肠及中脑黑质氧化应激因子的影响,探讨电针治疗帕金森病的作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及电针组,每组12只。采用鱼藤酮连续灌胃4周构建PD小鼠模型。电针组于... 详细信息

目的:观察电针干预对帕金森病(PD)模型小鼠行为学、结肠及中脑黑质氧化应激因子的影响,探讨电针治疗帕金森病的作用机制。方法:将C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及电针组,每组12只。采用鱼藤酮连续灌胃4周构建PD小鼠模型。电针组于造模成功后电针刺激“百会”“曲池”“足三里”,20 min/次,1次/d,针刺5 d,休息2 d,共针刺14次。干预结束后采用步态分析实验评估各组小鼠运动能力及运动协调性;肠道推进率评估各组小鼠肠道传输功能;流式细胞术检测小鼠结肠活性氧(ROS)水平;ELISA法检测各组小鼠结肠及中脑黑质中总蛋白(TP)、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;免疫荧光染色法检测小鼠中脑黑质中核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的阳性表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠平均速度、步率、正常步序比、足间距、步幅长度、摆动速度、最大接触面积的最大强度降低(P<0.0001,P<0.01,P<0.001),步态最大变化率升高(P<0.001),肠道推进率降低(P<0.0001),结肠中ROS荧光强度升高(P<0.01),结肠及中脑黑质中GSH-Px、SOD活性降低(P<0.01,P<0.05),MDA含量升高(P<0.01),中脑黑质中Nrf2阳性表达降低(P<0.0001)。与模型组比较,电针组小鼠平均速度、步率、正常步序比、足间距、步幅长度、摆动速度、最大接触面积的最大强度升高(P<0.01,P<0.05,P<0.001,P<0.0001),步态最大变化率降低(P<0.01),肠道推进率升高(P<0.001),结肠中ROS荧光强度降低(P<0.01),结肠及中脑黑质中GSH-Px、SOD活性升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.01),中脑黑质中Nrf2阳性表达升高(P<0.0001)。结论:电针可改善PD模型小鼠的运动障碍、步态紊乱及肠道运动功能,保护多巴胺能神经元免受损害,其机制可能与电针可拮抗脑肠氧化应激有关。

关键词：帕金森病电针氧化应激脑肠轴多巴胺能神经元

职业院校劳动教育与专业教育融合发展的必然、实然与应然

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教育理论与实践 2024年第6期44卷 23-26页

作者：弓迎宾山西省中医学校药学院山西太原030619

职业院校将劳动教育融入专业教育既是落实立德树人根本任务的重要举措,又是培养有担当、有责任的新时代劳动者的重要抓手,也是培养创新型人才的重要途径,更是职业教育高质量发展的必然选择。当前,部分职业院校劳动教育融入专业教育存在... 详细信息

职业院校将劳动教育融入专业教育既是落实立德树人根本任务的重要举措,又是培养有担当、有责任的新时代劳动者的重要抓手,也是培养创新型人才的重要途径,更是职业教育高质量发展的必然选择。当前,部分职业院校劳动教育融入专业教育存在着重视程度不够、融合形式单一、融合度不够等困境,需要纠正认识偏差、加强重视程度、丰富融合形式、提升融合深度、推进教材开发,不断激发大学生的劳动热情,使职业院校劳动教育与专业教育更好地融合发展。

关键词：职业院校劳动教育专业教育融合发展

滋肾益经活血汤治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能减退的疗效及对T淋巴细胞亚群水平的影响

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世界中医药 2024年第15期19卷 2314-2318页

作者：田颖杨东艳陕西省中医医院妇科西安710003

目的:探讨滋肾益经活血汤治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能减退(DOR)的疗效及对T淋巴细胞亚群水平的影响。方法:选取2019年4月至2022年4月陕西省中医医院收治的肾虚血瘀型DOR患者120例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组,... 详细信息

目的:探讨滋肾益经活血汤治疗肾虚血瘀型卵巢储备功能减退(DOR)的疗效及对T淋巴细胞亚群水平的影响。方法:选取2019年4月至2022年4月陕西省中医医院收治的肾虚血瘀型DOR患者120例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组,每组60例。对照组接受戊酸雌二醇环丙孕酮片治疗,观察组在对照组基础上接受滋肾益经活血汤治疗。治疗6个月经周期后,比较2组患者临床疗效和治疗后中医证候积分、窦卵泡计数(AFC)、卵巢动脉血流参数、促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、抗米勒管激素(AMH)、月经情况、T淋巴细胞亚群水平及不良反应发生率。结果:治疗后,观察组治疗总有效率为88.33%(53/60)高于对照组的71.67%(43/60),差异有统计学意义(P中医证候积分、AFC、FSH、E_(2)、AMH、卵巢动脉血流参数、月经情况和T淋巴细胞亚群水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组中医证候积分、FSH、CD8^(+)、阻力指数和月经周期、月经色质、月经量、经期评分低于对照组,AFC、舒张末期流速、收缩期峰值速度、E_(2)、AMH、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:滋肾益经活血汤治疗肾虚血瘀型DOR疗效显著,能有效改善患者临床症状、卵巢储备功能、月经异常和免疫功能,且不良反应较少。

关键词：卵巢储备功能减退肾虚血瘀型滋肾益经活血汤免疫功能 T淋巴细胞亚群窦卵泡计数卵巢动脉血流参数雌二醇

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玉女煎对棕榈酸诱导的L细胞损伤的影响

中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 706-712页

作者：王岩松苏萌吕洁雷莉妍陕西中医药大学陕西省中药资源产业化协同创新中心陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712000

目的:研究玉女煎对棕榈酸(PA)诱导的肠L细胞损伤的影响。方法:(1)将不同浓度(1.5、3和6 g/L)玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)溶液(100 mg/L)混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH·... 详细信息

目的:研究玉女煎对棕榈酸(PA)诱导的肠L细胞损伤的影响。方法:(1)将不同浓度(1.5、3和6 g/L)玉女煎溶液分别与二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)溶液(100 mg/L)混合并避光反应30 min,采用全波长酶标仪检测吸光度的变化,评价玉女煎对DPPH·的清除作用。(2)将小鼠肠内分泌细胞系GLUTag分为空白对照组、PA(400μmol/L)组、PA+玉女煎(1.5 g/L)组、PA+玉女煎(3 g/L)组和PA+玉女煎(6 g/L)组,通过Hoechst 33342细胞核染色实验和MTT实验评价玉女煎对PA诱导的细胞凋亡的影响。(3)将GLUTag细胞分为空白对照组、PA组和PA+玉女煎(6 g/L)组,采用免疫荧光染色检测细胞内胰高血糖素样肽1(GLP-1)表达水平,通过2´,7´-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,通过Western blot实验检测超氧化物歧化酶1(SOD1)表达水平。结果:(1)玉女煎在体外可显著清除DPPH·(P<0.01)。(2)与PA组比较,玉女煎能以浓度依赖性方式抑制PA诱导的GLUTag细胞活力降低,在6 g/L时效果最明显(P<0.01)。(3)与PA组比较,6 g/L玉女煎能显著恢复GLUTag细胞的GLP-1(P<0.05)和SOD1表达水平(P<0.01),降低ROS水平(P<0.01)。结论:玉女煎可能通过降低细胞内氧化应激水平抑制PA诱导的GLUTag细胞损伤。

关键词：玉女煎棕榈酸肠L细胞氧化应激

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