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重症肌无力不同抗体检测及其临床意义

重症肌无力不同抗体检测及其临床意义

作者：李媛贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:检测重症肌无力(MG)患者血清乙酰胆碱受体抗体(ACh R-Ab)、肌肉特异性酪氨酸激酶抗体(Mu SK-Ab)及低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体(LRP4-Ab)含量,并分析各型抗体阳性患者的临床特点,进而推断不同类型MG的免疫学发病机制。方法:本次... 详细信息

目的:检测重症肌无力(MG)患者血清乙酰胆碱受体抗体(ACh R-Ab)、肌肉特异性酪氨酸激酶抗体(Mu SK-Ab)及低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体(LRP4-Ab)含量,并分析各型抗体阳性患者的临床特点,进而推断不同类型MG的免疫学发病机制。方法:本次试验共纳入2012年12月至2014年12月就诊于贵阳医学院附属医院与贵阳中医学院附属第二医院神经内科的116例MG确诊患者为实验组,40例其他神经免疫疾病患者及40例健康体检者为对照组,均采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测ACh R-Ab和Mu SK-Ab;采用细胞免疫荧光(CBA)的方法检测LRP4-Ab。结果:(1)116例MG患者中,女性:男性=1.47:1。ACh R-Ab阳性率为50.0%。ACh R-Ab阴性的MG患者中仅有6例检测出Mu SK-Ab,其阳性率约为10.7%。有2例MG患者血清ACh R-Ab和Mu SK-Ab均为阳性。同欧美人种比较,ACh R-Ab和Mu SK-Ab阳性率较低,但与中国大陆及台湾地区相接近。(2)50例(43.1%)MG患者无法检测出ACh R-Ab和Mu SK-Ab,称之为血清双阴性MG患者(d SN-MG)。(3)对50例d SN-MG患者采用CBA法检测LRP4-Ab,发现LRP4-Ab阳性患者共2例(阳性率为4%)。ACh R-Ab和Mu SK-Ab阳性MG组、疾病对照组与健康对照组中均未发现LRP4-Ab阳性。(4)各型抗体阳性MG患者的临床特点略有差异:ACh R-Ab阳性MG患者年龄分布较广;多数伴有胸腺异常;胆碱酯酶抑制剂(ACh EI)及糖皮质激素效果尚可。Mu SK-Ab阳性MG患者临床分型均为全身型,Mu SK-Ab的滴度水平与疾病严重程度相关,ACh EI及激素治疗效果不佳。LRP4-Ab阳性MG患者的临床特点:均为同一居住地的年轻女性;分型均为Osserman I;均伴有胸腺异常;经ACh EI及小剂量糖皮质激素治疗后均获得稳定缓解。结论:ACh R-Ab、Mu SK-Ab、LRP4-Ab的临床表现及治疗方案有所差异,故上述抗体的联合检测给MG的及时准确诊断提供了较可靠的依据。据此,针对各型患者的免疫学特点采用个体化的治疗方案及评估预后对临床诊疗有着重要意义。

关键词：重症肌无力乙酰胆碱受体抗体肌肉特异性酪氨酸激酶抗体低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体

通过磁敏感加权成像技术（SWI）研究帕金森病患者脑铁分布差异和应用α-硫辛酸治疗的铁螯合机制

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通过磁敏感加权成像技术（SWI）研究帕金森病患者脑铁分布差异和...

作者：蔡立君贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:1.通过磁敏感加权成像(SWI)测定帕金森病(PD)患者黑质、红核、尾状核(头)、壳核、苍白球、丘脑、额叶和颞叶脑区的相位值,了解铁在不同脑区的分布差异以及是否会产生脑区间的移行。2.通过SWI了解α-硫辛酸(LA)的铁螯合机制和评估P... 详细信息

目的:1.通过磁敏感加权成像(SWI)测定帕金森病(PD)患者黑质、红核、尾状核(头)、壳核、苍白球、丘脑、额叶和颞叶脑区的相位值,了解铁在不同脑区的分布差异以及是否会产生脑区间的移行。2.通过SWI了解α-硫辛酸(LA)的铁螯合机制和评估PD的疗效,为PD的治疗提供新的手段和理论依据。方法:1.选取2013年4月014年9月我院住院治疗的PD患者40例作为研究组,并选取20例年龄、性别匹配体检或健康志愿者作为正常对照组,均行3.0T头颅MR扫描、SWI成像检查,其中PD患者根据Hoehn-Yahr(H&Y)分级分为0-5级,观察SWl图像表现,直接测量第一次,第二次在高通滤波后得到校正相位图,再测量黑质、红核、尾状核(头)、壳核、苍白球、丘脑、额叶和颞叶相位值,经公式计算得到校正相位值,再进行统计学分析。2.选取PD患者40例,随机分为研究组和对照组各20例,在基础治疗的同时,研究组应用LA与单唾液酸四己糖神经节苷脂钠(GM1)进行治疗,对照组仅予GM1治疗,观察两组治疗前后黑质相位值变化。结果:1.(1)经过高通滤波的校正相位图所测得相位值较未滤波者更准确,显示铁沉积脑区图像更清晰,显示核团更清楚,干扰更小,能定量测定致密带宽度(SNc)。(2)PD组与正常对照组比较,黑质、颞叶、红核及壳核所测各脑区相位值经独立样本t检验,有统计学意义,右侧黑质、左侧黑质、右侧红核P0.05,差异无统计学意义,两组的相位值无明显差异,即铁沉积无明显差异。(3)H&Y分级≤2.5级与>2.5级PD患者各脑区相位值进行t检验,右侧壳核、左侧额叶、右侧颞叶P2.5级患者上述部位铁沉积增多;其余部位相位值无明显统计学差异,即铁沉积无明显差异。(4)PD组患者与对照组SNc宽度、SN宽度、SNc/中脑前后径在左右两侧分别比较及平均值比较,结果均较对照组均明显变小,SN面积则两组之间无明显差异。(5)PD组患者各脑区总相位值右侧与左侧比较P>0.05,差异无统计学意义,说明左右两侧脑区铁沉积无明显差异。(6)正常对照组各脑区右侧与左侧比较P>0.05,差异无统计学意义,说明左右两侧铁沉积无明显差异。(7)左侧起病者双侧脑区与右侧起病者双侧脑区分别进行比较,左右两侧脑区铁沉积无明显差异。(8)PD组铁沉积在男女患者间无明显差异。(9)正常对照组铁沉积在男女间无明显差异。(10)左侧起病者与右侧起病者进行比较,左右两侧SNc宽度、SN宽度、SNc/中脑前后径、SN面积无明显差异。(11)PD患者与正常对照组脑内总铁含量无明显差异。2.(1)予LA治疗后研究组黑质相位值升高,铁沉积较治疗前减少;对照组治疗前后黑质相位值无明显变化;两组比较有显著性差异(P<0.05),说明LA可螯合铁。(2)短时间LA治疗前后SNc宽度及SN面积无明显变化。结论:1.经过高通滤波的校正相位图所测得相位值较未滤波者更准确,可区别SNc与SNr,故可定量测定SNc宽度,显示铁沉积脑区图像及核团影像更清晰,干扰更小。2.脑铁沉积水平与疾病的严重程度有一定相关性,SWI测量相位值可以辅助早期PD患者的诊断,并能达到定量评估PD的病情严重程度的水平。***患者脑内铁沉积在中脑黑质明显,在颞叶铁沉积减少,而全脑总铁含量无明显差别,说明铁可在PD患者的脑区间移行。4.在PD组患者与正常对照组性别之间铁沉积均无明显差异。5.在PD组患者与正常对照组左右两侧脑区铁沉积均无明显差异。***患者使用LA治疗后黑质的铁沉积减少,临床症状改善,LA是安全有效的治疗PD的金属螯合剂。

关键词：帕金森病磁敏感加权成像铁 α-硫辛酸

mTORC2/AKT反馈激活拮抗隐丹参酮对HepG2细胞的抑制作用

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mTORC2/AKT反馈激活拮抗隐丹参酮对HepG2细胞的抑制作用

作者：洪鎏贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:本实验主要研究隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶活性的影响及其在抑制肝癌细胞株中生长的作用。方法:Western印迹检测隐丹参酮在Hep G2细胞对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的影响以及联合哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的抑制剂PP242后检测其凋亡... 详细信息

目的:本实验主要研究隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶活性的影响及其在抑制肝癌细胞株中生长的作用。方法:Western印迹检测隐丹参酮在Hep G2细胞对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的影响以及联合哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的抑制剂PP242后检测其凋亡标志物c-Parp的表达、以及丝/苏氨酸蛋白激酶的激活途径。CCK-8法检测隐丹参酮与丝/苏氨酸蛋白激酶抑制剂MK2206或哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的抑制剂PP242联合用药对Hep G2的生长抑制作用。结果:1.隐丹参酮增强Hep G2细胞中丝/苏氨酸蛋白激酶的磷酸化。2.抑制丝/苏氨酸蛋白激酶的反馈激活增强隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用,结果发现MK2206明显增强了隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用。3.隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的增强作用依赖于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性,结果发现PP242能够抑制隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的增强作用,证明隐丹参酮对丝/苏氨酸蛋白激酶磷酸化的增强作用依赖于哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性。4.抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性增强隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用,结果发现联合使用PP242明显增强了隐丹参酮对Hep G2细胞的生长抑制作用。5.抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性增强隐丹参酮对Hep G2细胞的凋亡诱导效应,由于丝/苏氨酸蛋白激酶信号通路在肿瘤细胞存活中发挥重要作用,说明抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2活性能够增强隐丹参酮对Hep G2细胞的凋亡诱导效应。结论:我们的研究证明在Hep G2细胞中,AKT丝/苏氨酸蛋白激酶依赖哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2能够激活p-AKT473位点的磷酸化,通过抑制丝/苏氨酸蛋白激酶及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物2都能够提高隐丹参酮在Hep G2细胞中的生长抑制作用,为隐丹参酮肿瘤治疗的临床联合用药提供了理论基础。

关键词：丝/苏氨酸蛋白激酶隐丹参酮肝癌 HepG2细胞

无创PDD检测肝有效血流量在慢加急性肝功能衰竭患者中短期预后价值

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无创PDD检测肝有效血流量在慢加急性肝功能衰竭患者中短期预后价值

作者：吴婧贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:探索无创肝有效血流量(Effective Hepatic Blood Flow EHBF)对慢加急性肝功能衰竭(Acute-on-chronic Liver Failure ACLF)短期预后的评估。探索终末期肝病模型(Model for end-stage liver diseas MELD)联合肝有效血流量(EHBF)对慢加急性肝功能衰竭患者的短期预后的评估方法:1、前瞻性研究63例慢加急性肝功能衰竭患者的临床资料,随访3个月,以死亡为终点,将患者分为生存组和死亡组,并分别检测患者确诊为肝衰竭的肝有效血流量(EHBF)、吲哚菁绿15分钟滞留率(Indocyanine Green 15 min ICGR15),及肝肾功能、凝血功能、血常规、电解质等指标,同时计算肝脏储备功能评估(Child-Turcotte-Pugh分级CTP分级)、MELD评分、终末期肝病模型联合血清钠(Model for end-stage liver diseas and serum sodium MELD-Na)评分以及皇家医学院医院标准(King’s College Hospital KCH标准)、终末期肝病模型联合吲哚菁绿(Model for end-stage liver diseas and Indocyanine Green 15 min MELD-ICGR15)并比较各模型下的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve ROC曲线)下面积。2、将MELD评分与EHBF引入logistic回归分析建立MELD-EHBF模型,并将该模型与生化指标做相关性分析,并应用Cox比例风险回归模型(Cox’s proportional hazards regression model COX模型计算各模型的似然比X2(Likelihood LRX2)、Cox回归模型的AIC(Akaike information criterion)(判别能力)和一致性指数(index of concordance C-index)。结果:EHBF的均值在21例死亡组患者中为0.18±0.06L/min,42例存活组中为0.25±0.11 L/min(P=0.03);EHBF与谷草转氨酶(Aspartate transaminase AST)、总胆红素(Total bilirubin TBIL)、间接胆红素(Direct bilirubin DBIL)、白蛋白(Albumin ALB)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase GGT)有较好的相关性(r=-0.26,、-0.37、-0.34、-0.29、0.48);预后相关因素分析提示EHBF是影响ACLF预后的主要相关因素之一,EHBF的ROC曲线下面积分别为0.669(95%CI 0.539,0.782),与MELD评分0.711(95%CI0.510,0.758,P=0.07)相比无显著差异,而明显优于CTP分级的0.581(95%CI0.495,0.738,P0.221时为16%(X2=5.6,P=0.018)。然后将MELD评分与EHBF引入logistic回归分析建立EHBF-MELD模型:ln(P)=0.18*MELD-1.03*EHBF*102-3.29,将所建立的模型与常规的生化指标进行相关性分析,MELD-EHBF均与生化指标均有的相关性,并应用COX模型计算各模型的LRX2、AIC和C-index,可得知,MELD-EHBF模型的最大似然卡方最大,AIC值最小,该模型的ROC曲线下面积0.756(0.632,0.856),临界值为51.77,敏感性47.6%,特异性为95.2%。结论:EHBF、ICG和MELD评分能够较准确的预测慢加急性肝功能衰竭患者的短期预后,且优于CTP分级和KCH标准;而MELD-EHBF模型的预测价值与MELD-Na、MELD-ICG模型相当,且优于任何单一模型。

关键词：慢加急性肝衰竭短期预后肝有效血流量

慢性氟中毒大鼠脑组织Nrf2/ARE信号转导通路改变

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慢性氟中毒大鼠脑组织Nrf2/ARE信号转导通路改变

作者：王娅贵阳医学院

学位级别：硕士

目的观察慢性氟中毒大鼠脑组织Nrf2/ARE信号转导通路中核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid2-related factor2, Nrf2）、胞质蛋白伴侣分子（kelch-like ECH-associated protein-1, Keap1）及经该通路的主要抗氧化蛋白依赖还原型辅酶/醌氧化还原酶1（quinone oxidoreductase-1，NQO1）和血红素氧合酶1（heme Oxygenase-1，HO1）的表达改变，探讨它们在慢性氟中毒脑损伤机制中的作用，为地方性氟中毒的防治提供理论依据。方法Sprague Dawley大鼠90只，雌雄各半,随机分为正常对照组、染氟组（饮水氟含量50mg/L,加入氟化钠）、维生素E（vitamin E, VitE）拮抗组（饮水氟含量50mg/L,同时每天给予VitE5mg/kg灌胃）3组;实验期为10个月。观察大鼠氟斑牙情况;用氟离子选择电极法测定大鼠尿氟及骨氟含量;用Morris水迷宫方法中的定向航行实验检测大鼠学习能力，空间探索实验检测大鼠记忆能力;光镜下观察脑组织结构;用生化方法测定超氧化物歧化酶（superoxide Dismutase，SOD）活性及丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量;用蛋白印迹方法、免疫组织化学方法以及实时荧光定量PCR分别检测脑组织中Nrf2、Keap1、NQO1、HO1在蛋白和mRNA表达水平的变化，并作了相关统计分析。结果1.染氟组和VitE拮抗组大鼠出现不同程度的氟斑牙，染氟组重于VitE拮抗组。2.染氟组与VitE拮抗组大鼠尿氟和骨氟含量均高于对照组，染氟组高于VitE拮抗组，差异具有统计学意义（P＜0.05）;3.染氟组和VitE拮抗组大鼠第五天逃避潜伏期较对照组显著延长，染氟组和VitE拮抗组大鼠空间探索总次数较对照组显著减少，VitE拮抗组改变不如染氟组明显，差异具有统计学意义（P＜0.05）;4.病理形态学检查显示，各组大鼠脑组织HE染色未见明显改变，尼氏染色发现染氟组大鼠脑组织神经细胞中尼氏体数量较对照组明显减少，VitE拮抗组大鼠亦有所减少，差异具有统计学意义（P＜0.05）。5.免疫组化结果显示，染氟组和VitE拮抗组大鼠脑组织中Nrf2、Keap1、NQO1及HO1阳性表达较对照组升高，VitE拮抗组升高程度不如染氟组，差异均有统计学意义（P＜0.05）;6.染氟组大鼠脑组织中SOD活性明显低于对照组，MDA含量明显高于对照组，VitE拮抗组大鼠脑组织的改变不如染氟组明显（P＜0.05）。7.染氟组大鼠脑组织中Nrf2、Keap1、NQO1、HO1mRNA表达均高于对照组（P＜0.05），VitE拮抗组表达上调程度亦不如染氟组;8.蛋白印迹检测结果显示，染氟组大鼠脑组织中Nrf2、Keap1、NQO1、HO1蛋白表达均高于对照组，VitE拮抗组表达亦高于对照组，但升高程度与染氟组相比明显减弱（P＜0.05）;9.相关分析结果显示，染氟组大鼠脑组织中Nrf2、Keap1、NQO1及HO1表达水平与MDA含量成正比，与SOD活性成反比。结论慢性氟中毒引起大鼠脑组织中Nrf2/ARE信号转导通路相关因子表达明显升高，与机体氧化应激状态的改变和调节有关，可能参与慢性氟中毒脑损伤的发生机制;抗氧化剂（VitE）可拮抗高氟对脑组织的神经毒性作用。

关键词：慢性氟中毒大鼠脑 Nrf2/ARE通路氧化应激

荧光染色法在孢子丝菌病组织病理诊断中的应用

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临床皮肤科杂志 2024年第9期53卷 527-529页

作者：邵也张晓冬北华大学临床医学院吉林吉林132011 北华大学附属医院皮肤科吉林吉林132011

目的:探讨荧光染色法在孢子丝菌病组织病理切片的致病菌检测的应用价值,为孢子丝菌病的诊断提供新方法。方法:收集北华大学附属医院皮肤科就诊的疑诊孢子丝菌病患者的临床资料,取患者皮损处组织,分别进行真菌培养和组织病理学检查,对石... 详细信息

目的:探讨荧光染色法在孢子丝菌病组织病理切片的致病菌检测的应用价值,为孢子丝菌病的诊断提供新方法。方法:收集北华大学附属医院皮肤科就诊的疑诊孢子丝菌病患者的临床资料,取患者皮损处组织,分别进行真菌培养和组织病理学检查,对石蜡包埋组织进行平行试验,染色方法包括苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸雪夫(PAS)染色和基膜六胺银(PASM)染色和真菌荧光染色,以真菌培养阳性为金标准,比较其阳性率和染色效果。采用SPSS 24.0软件进行统计学分析。结果:45例临床疑诊孢子丝菌病患者真菌培养阳性36例(80.00%),HE染色均为非特异性肉芽肿性改变,PAS染色阳性30例(66.67%),PASM染色阳性30例(66.67%),荧光染色阳性40例(88.89%)。由真菌培养阳性病例中染色方式与阳性率的交叉列联表及卡方检验结果可知,染色方式与阳性率存在显著的相关关系(P<0.05);9例真菌培养阴性的疑诊孢子丝菌病患者,荧光染色阳性4例,HE、PAS及PASM染色法结果均阴性。结论:荧光染色法检测孢子丝菌病患者组织切片中病原体阳性率高,具有高灵敏、高特异性的优点,可为临床诊断提供依据,具备临床应用前景。

关键词：荧光染色法孢子丝菌病诊断真菌培养组织病理学检查

贵州省白血病和淋巴瘤患者弓形虫感染状况调查及其基因型分析

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贵州省白血病和淋巴瘤患者弓形虫感染状况调查及其基因型分析

作者：田梦圆贵阳医学院

学位级别：硕士

目的:对贵州省血液系统肿瘤患者的弓形虫感染状况进行血清学和分子流行病学调查,并用多重巢式-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Mn-PCR-RFLP)方法进行弓形虫基因分型,探讨血液系统肿瘤患者弓形虫感染状况以及贵州省弓形虫感染的分子... 详细信息

目的:对贵州省血液系统肿瘤患者的弓形虫感染状况进行血清学和分子流行病学调查,并用多重巢式-聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Mn-PCR-RFLP)方法进行弓形虫基因分型,探讨血液系统肿瘤患者弓形虫感染状况以及贵州省弓形虫感染的分子流行病学特点。方法:1.采集150例白血病、150例淋巴瘤患者(疾病组)和110份健康人(对照组)外周抗凝血标本。2.采用ELISA方法检测疾病组及健康对照组外周血血浆中人体内弓形虫特异性抗体(Ig G、Ig M)以及循环抗原(CAg)。3.采用PCR技术扩增疾病组和健康对照组所有外周血弓形虫高重复DNA片段-529 bp,以检测弓形虫核酸。4.弓形虫高重复DNA片段(529 bp)阳性的标本采用Mn-PCR-RFLP法分析弓形虫c22-8,c29-2,L358,PK1,SAG2(5`-SAG2,3`-SAG2,***2),BTUB,GRA6,SAG3,Apico,SAG1共10个不同遗传标记位点,以鉴定弓形虫的基因型,分析流行于贵州省弓形虫的基因型。另设110例正常健康人群对照,检测上述指标。分析贵州省血液系统患者弓形虫感染的分子流行病学特点。结果:1.健康人、白血病、淋巴瘤组弓形虫抗体阳性率分别为:8.18%(9/110)、18.67%(28/150)、21.33%(32/150)。3组人群中Ig G阳性率依次为6.36%(7/110)、16.00%(24/150)和20.00%(30/150),Ig M阳性率依次为0.91%(1/110)、2.67%(4/150)和1.33%(2/150),CAg阳性率依次为0.91%(1/110)、2.00%(3/150)和0.67%(1/150)。2.本次调查血液系统肿瘤患者及正常人中均未检测到弓形虫核酸即529 bp基因片段,未能进行弓形虫基因型鉴定。***-PCR-RFLP鉴定4份贵州株标本结果显示弓形虫的基因型一致,都属于非典型虫株Toxo DB#9即Chinese 1。结论:1.血液系统肿瘤白血病和淋巴瘤患者弓形虫感染率明显高于正常人群,提示血液肿瘤患者合并弓形虫感染较为常见,临床治疗时应加强对弓形虫感染的防治。2.贵州动物源性弓形虫虫株的基因型的鉴定再次明确了弓形虫Chinese 1型在贵州动物体内的感染流行。

关键词：白血病淋巴瘤刚地弓形虫 Mn-PCR-RFLP

AT1R在肾血管性高血压大鼠肠系膜动脉eNOS磷酸化调控中的作用

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AT1R在肾血管性高血压大鼠肠系膜动脉eNOS磷酸化调控中的作用

作者：乔东方贵阳医学院

学位级别：硕士

目的以肾血管性高血压大鼠为研究对象,探讨在高血压的发生发展过程中,AT1R在肠系膜动脉内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)磷酸化调控中的作用。方法采用成年雄性SD大鼠,双肾单夹法狭窄右侧肾动脉复制肾血管... 详细信息

目的以肾血管性高血压大鼠为研究对象,探讨在高血压的发生发展过程中,AT1R在肠系膜动脉内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)磷酸化调控中的作用。方法采用成年雄性SD大鼠,双肾单夹法狭窄右侧肾动脉复制肾血管性高血压大鼠(two-kidney one-clip renovascular hypertensive rats, 2K1C RHR)模型,设立Sham-4周(w)组(n=8)和Sham- 8w组(n=18)、2K1C-4w组(n=8)和2K1C-8w组(n=18)、AT1R阻滞剂(AngⅡtype 1 receptor blocker, ARB)治疗组(n=18)。采用无创血压测试仪检测大鼠尾动脉收缩压。至各组观测时间结束后处死大鼠,留取肠系膜动脉。采用Western Blotting方法检测各组大鼠肠系膜动脉组织eNOS总蛋白的表达、eNOS Ser179、eNOS Ser35、eNOS Thr97位点的磷酸化水平变化,Akt总蛋白的表达、Akt Thr08、Akt Ser73位点的磷酸化水平变化以及蛋白磷酸酶(protein phosphatase, PP)PP1、PP2A蛋白表达的变化。采用化学比色法检测肠系膜动脉组织一氧化氮(nitric oxide, NO)的含量。结果①与Sham组比较,2K1C术后2w血压开始明显升高(P系膜动脉AktSer位点磷酸化水平降低,2K1C-8w组肠系膜动脉Akt Ser、eNOS Ser、eNOS Ser635位点磷酸化水平降低,NO产量明显降低,这可能是在血压升高过程中造成血管内皮细胞损伤所致。eNOS SSer位点磷酸化水平降低可能与Akt Ser位点磷酸化水平下调有关,与PP1、PP2A蛋白表达无关。应用ARB治疗后可以明显提高Akt Ser、eNOS Ser、eNOS Ser位点的磷酸化水平,提示血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和内皮细胞膜上的AT1R结合后,抑制了PI3K/Akt信号通路,Akt Ser位点磷酸化水平降低,进一步使eNOS Ser位点磷酸化水平降低,以及eNOS Ser位点磷酸化水平降低,导致eNOS酶活性减低,从而使NO的合成减少,ARB可能有阻断AT1R抑制PI3K/Akt信号通路的作用。

关键词：肾血管性高血压内皮型一氧化氮合酶内皮功能紊乱磷酸化调控血管紧张素Ⅱ1型受体

河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析

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畜牧兽医学报 2024年第2期55卷 649-659页

作者：李思远付新成袁雪松毛立蔡旭航孙心如黄金谢玲玲王府周华张琪李基棕李彬西北农林科技大学动物医学院杨凌712100 江苏省农业科学院兽医研究所农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室南京210014 南京农业大学动物医学院南京210095 江苏大学生命科学学院食品与生物工程学院镇江212013 河北省廊坊市农业农村局廊坊065000 贵州省种畜禽种质测定中心贵阳550018 黔西市动物疫病预防控制中心黔西551500

牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还... 详细信息

牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。

关键词：病毒性腹泻牛冠状病毒流行病学调查腹泻病原