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基于蛋白质组学技术探究无机氟致大脑损伤的机制

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环境与职业医学 2024年第1期41卷 34-40页

作者：周箫万雯姜德文艾福军叶凌刘明海张艺刘艳洁贵州医科大学病理学教研室贵州贵阳550004 贵阳市花溪区人民医院贵州贵阳550004 贵州医科大学附属医院病理科贵州贵阳550004

[背景]慢性过量氟暴露会导致中枢神经系统出现损伤,造成一定程度的学习记忆功能损害,然而其损伤机制尚不明确,仍需进一步探究。[目的]应用4D非标记定量蛋白质组学技术探究慢性过量氟暴露致大脑损伤的差异表达蛋白及其潜在的作用机制。[... 详细信息

[背景]慢性过量氟暴露会导致中枢神经系统出现损伤,造成一定程度的学习记忆功能损害,然而其损伤机制尚不明确,仍需进一步探究。[目的]应用4D非标记定量蛋白质组学技术探究慢性过量氟暴露致大脑损伤的差异表达蛋白及其潜在的作用机制。[方法]选取SPF级成年SD大鼠24只,雌雄各半,采用随机数字表法分为对照组与染氟组,每组12只。其中,对照组饮用自来水(氟含量学检查,其余脑组织速冻后于-80℃保存。每组脑组织样本随机挑选3份进行蛋白质组学检测,筛选出差异表达蛋白并进行亚细胞定位分析,随后进行基因本体(GO)功能分析、京都基因和基因百科全书(KEGG)通路分析、聚类分析及蛋白相互作用网络分析获得关键蛋白。最后选用脑组织样本提取蛋白行蛋白免疫印迹实验检测关键蛋白的表达水平。[结果]饲养180 d后,染氟组SPF级成年SD大鼠的体重较对照组明显降低(P学检测共鉴定出6927个蛋白,经过筛选在对照组与染氟组中获得差异表达蛋白206个,包括96个表达上调蛋白和110个表达下调蛋白,差异蛋白主要定位于细胞质(30.6%)、细胞核(27.2%)、线粒体(13.6%)、质膜(13.6%)和胞外(11.7%)。GO分析结果显示差异表达蛋白主要参与铁离子运输、多巴胺神经元分化的调控和炎症反应中呼吸爆发的负调控等生物过程,行使亚铁结合、铁氧化酶活性、细胞因子活性等分子功能,位于滑面内质网膜、膜的固定成分、氯化物通道复合体等细胞组分。KEGG显著富集通路为次级代谢产物的生物合成、碳代谢和多样环境中的微生物代谢等。差异蛋白相互作用网络分析结果显示葡萄糖-6-磷酸异构酶(Gpi)连接度最高。经蛋白免疫印迹实验检测,Gpi在染氟组成年SD大鼠脑组织中表达水平较对照组降低(P<0.05)。[结论]慢性氟中毒大鼠脑组织中存在多种差异表达蛋白,其功能与次级代谢产物的生物合成、碳代谢和多样环境中的微生物代谢有关;Gpi可能参与慢性过量氟暴露致脑神经损伤。

关键词：慢性氟暴露大脑损伤蛋白质组学差异表达蛋白葡萄糖-6-磷酸异构酶

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儿童肠道菌群与食物过敏关系的研究进展

微生物学报 2024年第7期64卷 2224-2241页

作者：杨善平赵童余辉艳周催首都医科大学基础医学院北京100069 首都医科大学公共卫生学院北京100069

食物过敏(food allergy,FA)在儿童中的发生率逐年升高,严重影响其生活质量,已经成为全球面临的公共卫生问题之一。近年来,人们发现FA儿童的肠道菌群组成与健康儿童有显著差异。深入研究发现,肠道菌群可通过调节树突状细胞、辅助性T细胞... 详细信息

食物过敏(food allergy,FA)在儿童中的发生率逐年升高,严重影响其生活质量,已经成为全球面临的公共卫生问题之一。近年来,人们发现FA儿童的肠道菌群组成与健康儿童有显著差异。深入研究发现,肠道菌群可通过调节树突状细胞、辅助性T细胞、调节性T细胞、肥大细胞和粒细胞等免疫细胞维持免疫平衡,也可通过多种方式增强肠道屏障功能,抑制FA的发生。在已有研究基础上,益生菌和益生元在治疗儿童FA方面也得到了一定应用,但目前的应用效果并不明确。本文以婴幼儿FA在全球范围内患者规模日益扩大为背景,综述了肠道菌群影响FA的部分机制,总结了近年部分益生菌和益生元在治疗和预防婴幼儿FA方面的应用,并为肠道菌群在FA发生和发展中的作用机制研究和益生菌及其相关代谢产物在儿童FA治疗和预防中的应用提出了新思路,对促进婴幼儿FA治疗方法和策略的研究有重要意义。

关键词：食物过敏儿童肠道菌群益生菌

眼内液检测对急性视网膜坏死综合征继发视网膜脱离的预测作用

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中华眼底病杂志 2024年第7期40卷 512-517页

作者：赵玥汤凌云姚进蒋沁张明顺南京医科大学附属眼科医院南京210029 南京医科大学基础医学院免疫学系南京210029

目的探讨眼内液检测对急性视网膜坏死综合征(ARN)继发视网膜脱离(RD)的预测作用。方法回顾性临床研究。2019年1月至2023年10月于南京医科大学附属眼科医院检查确诊的ARN患者40例40只眼纳入研究。根据随访期间是否发生RD,将患者分为发生R... 详细信息

目的探讨眼内液检测对急性视网膜坏死综合征(ARN)继发视网膜脱离(RD)的预测作用。方法回顾性临床研究。2019年1月至2023年10月于南京医科大学附属眼科医院检查确诊的ARN患者40例40只眼纳入研究。根据随访期间是否发生RD,将患者分为发生RD组(A组)、未发生RD组(B组),分别为18例18只眼、22例22只眼。患者均在确诊后行玻璃体腔注射20 mg/ml更昔洛韦0.1 ml(含更昔洛韦2 mg)治疗,2~3次/周。首次玻璃体腔注射更昔洛韦前抽取前房水,检测其中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(BFGF)、血管细胞黏附因子(VCAM)、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-10浓度;荧光定量聚合酶链反应检测其中单纯疱疹病毒(HSV)、水痘带状疱疹病毒(VZV)载量。受试者工作特征曲线(ROC曲线)计算并分析房水中炎性细胞因子以及HSV-DNA、VZV-DNA载量预测ARN患者发生RD的ROC曲线下面积(AUC),评判其预测价值。结果A组18只眼、B组22只眼中,感染VZV、HSV分别为16、2只眼和21、1只眼。两组患眼房水VZV-DNA、HSV-DNA载量比较,差异有统计学意义(Z=-3.762,P学意义(P学意义(Z=-0.054,P=0.957)。ROC曲线分析结果显示,VEGF、病毒载量、IL-10、IL-8、IL-6、BFGF预测ARN发生RD的AUC分别为0.871、0.848、0.828、0.823、0.806、0.737;VEGF、IL-10、IL-8、IL-6、BFGF联合预测ARN发生RD的AUC为0.924。最佳截断值:病毒载量为0.40×106拷贝/ml,IL-10、IL-8、IL-6分别为50.65、1695.50、6634.00 pg/ml。结论房水病毒载量以及细胞因子单独或联合对ARN发生RD具有较高的预测价值。

关键词：急性视网膜坏死综合征视网膜脱离房水病毒核酸细胞因子

基于剪接因子SRSF9在头颈部鳞状细胞癌中的表达及临床意义的生物信息学分析

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吉林大学学报（医学版） 2024年第2期50卷 379-391页

作者：刘玉婷喻莹黎桂珍史沁雪李彬彬广东医科大学基础医学院病理生理学教研室广东东莞523808 广东医科大学第二临床医学院广东东莞523808

目的:基于生物信息学方法分析富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子9(SRSF9)在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达情况、临床意义以及与肿瘤免疫浸润的关系,并探讨其作用机制。方法:利用癌症基因图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库中GSE30... 详细信息

目的:基于生物信息学方法分析富含丝氨酸/精氨酸的剪接因子9(SRSF9)在头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)中的表达情况、临床意义以及与肿瘤免疫浸润的关系,并探讨其作用机制。方法:利用癌症基因图谱(TCGA)数据库、基因表达综合(GEO)数据库中GSE30784和GSE13601数据集、临床蛋白质组学肿瘤分析联盟(CPTAC)数据库、基因表达交互分析(GEPIA)数据库和Kaplan-Meier plotter数据库分析SRSF9在HNSCC中的表达及与患者临床病理特征和预后的关系;利用cBioPortal数据库分析SRSF9基因变异情况;应用ESTIMATE算法和肿瘤免疫估计资源(TIMER)数据库评估SRSF9表达与肿瘤微环境和肿瘤免疫细胞浸润的关系;利用LinkedOmics数据库分析SRSF9在HNSCC中的共表达基因及其调控通路;基于TCGA SpliceSeq数据库分析HNSCC中SRSF9调控的可变剪接事件,并对靶基因进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。结果:TCGA数据库、GEO数据库中GSE30784和GSE13601数据集分析,HNSCC组织中SRSF9 mRNA表达水平较癌旁正常组织明显升高(P免疫评分均较SRSF9 mRNA低表达组低(P免疫细胞浸润相关,可成为HNSCC诊断、预后评估和治疗的潜在分子靶标。

关键词：头颈部鳞状细胞癌富含丝氨酸/精氨酸剪接因子9 可变剪接肿瘤免疫生物信息学

基于大学生创新能力培养的医学免疫学实验改革

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基础医学教育 2024年第8期26卷 655-659页

作者：龚巧巧马龙马昕赵云娟王松周晓涛新疆医科大学基础医学院免疫学教研室乌鲁木齐830017

医学免疫学是医学专业课程中重要的课程,同时也是一门年轻、充满活力的前沿交叉学科,在生命科学和医学领域发挥着重要的作用。医学免疫学实验课是免疫学课程的重要组成部分,有助于学生理解抽象复杂的免疫学理论知识。但当下的实验课教... 详细信息

医学免疫学是医学专业课程中重要的课程,同时也是一门年轻、充满活力的前沿交叉学科,在生命科学和医学领域发挥着重要的作用。医学免疫学实验课是免疫学课程的重要组成部分,有助于学生理解抽象复杂的免疫学理论知识。但当下的实验课教学模式过于传统,缺乏创新,导致学生对免疫学理论知识不能形象地理解以及对实验技能掌握度不高,从而实验课程未能达到实验教学目的。新疆医科大学免疫学教研室通过制定合理的教学计划,录制生动教学视频,嵌入翻转课堂,整合加入虚拟仿真实验以及优化考核方式等方法对医学免疫学实验教学进行改革。最终帮助学生多维度轻松学习,促进了学生对理论知识的理解、实践能力的培养以及创新思维的发散,提升了整体教学质量。

关键词：医学免疫学实验改革教学改革创新能力考核体系

慢病毒干扰HDAC4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响及稳转株建立

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中国老年学杂志 2024年第16期 3919-3923页

作者：许永劼陈钢林海容黄昶煜东韦思佳杨婷婷朱丽英李兴潘卫贵州医科大学附属医院产前诊断中心贵州医科大学医学检验学院贵州医科大学公共卫生与健康学院贵州中医药大学基础医学院

目的观察慢病毒干扰组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 CCK-8法检测慢病毒感染后神经元细胞活性的变化；确定慢病毒载体感染最适感染复数(MOI);确定最适嘌呤霉素浓度；筛选干扰HDAC4表达效率最高序列，... 详细信息

目的观察慢病毒干扰组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4对HT-22小鼠海马神经元凋亡的影响。方法 CCK-8法检测慢病毒感染后神经元细胞活性的变化；确定慢病毒载体感染最适感染复数(MOI);确定最适嘌呤霉素浓度；筛选干扰HDAC4表达效率最高序列，构建稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株；CCK-8法检测干扰HDAC4表达对神经元活性的影响；流式细胞术和Western印迹检测干扰HDAC4表达对神经元凋亡的影响。结果慢病毒载体对神经元活性无显著影响；最适MOI为20;最适嘌呤霉素浓度为2μg/ml;成功筛选稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株，干扰效率为71%;干扰HDAC4表达导致神经元活性降低和凋亡增加。结论成功构建稳定敲低HDAC4的HT-22细胞株，干扰HDAC4表达可导致HT-22神经元凋亡水平增加。

关键词：慢病毒载体 HT-22海马神经元组蛋白去乙酰转移酶(HDAC)4 稳转株建立

运动及复杂环境抑制细菌脂多糖诱导的中脑黑质多巴胺能神经元损伤

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解剖学报 2024年第3期55卷 253-259页

作者：曹聪黄沁雯王红许泽婷张婵单亦文范肖肖廖敏温州医科大学基础医学院浙江温州325035 温州医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室浙江温州325035 温州医科大学检生学院生物学实验教学中心浙江温州325035 温州医科大学公共卫生与管理学院浙江温州325035

目的探讨运动和复杂环境对细菌脂多糖(LPS)诱导的中脑黑质多巴胺能神经元死亡的影响。方法将C57BL/6小鼠分为对照组、LPS组、LPS+游泳组和LPS+复杂环境组,每组各7只。LPS组小鼠通过脑立体定位注射建立帕金森病炎症模型,置于鼠笼中生活2... 详细信息

目的探讨运动和复杂环境对细菌脂多糖(LPS)诱导的中脑黑质多巴胺能神经元死亡的影响。方法将C57BL/6小鼠分为对照组、LPS组、LPS+游泳组和LPS+复杂环境组,每组各7只。LPS组小鼠通过脑立体定位注射建立帕金森病炎症模型,置于鼠笼中生活2周。LPS+游泳组小鼠模型制作后每日强迫进行游泳运动15 min,运动2周。LPS+复杂环境组小鼠模型制作后置于复杂环境生活2周。对照组小鼠不做处理。模型制作14 d后,对各组小鼠进行足迹、旷场和滚轴等行为学实验,检测小鼠的自主运动能力、运动平衡能力和抑郁水平;免疫组织化学染色和Western blotting检测中脑黑质中酪氨酸羟化酶(TH)的表达;Western blotting检测中脑黑质中脑源性神经生长因子(BDNF)、Caspase-3、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达;RT-PCR检测中脑黑质中IL-1β、IL-6和TNF-α转录水平。结果与对照组相比,LPS组、LPS+游泳组、LPS+复杂环境组小鼠的运动能力和平衡能力均有所下降,抑郁水平有所上升(P<0.001),TH阳性神经元存活数量和BDNF蛋白量均显著减少(P<0.001),Caspase-3及IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著增高(P<0.001)。与LPS组相比,LPS+游泳组和LPS+复杂环境组小鼠的运动能力和平衡能力均有所恢复,抑郁水平显著下降(P<0.01),TH阳性神经元存活数量及BDNF含量均显著增多(P<0.01),Caspase-3及IL-1β、IL-6和TNF-α均显著减少(P<0.01),且LPS+复杂环境组现象更为显著。结论运动和复杂环境能抑制LPS诱导的小鼠中枢神经系统炎症,从而减轻对中脑黑质神经元的损伤,且LPS+复杂环境组的抑制效果更为显著。

关键词：运动复杂环境炎症多巴胺能神经元细菌脂多糖行为学实验免疫印迹法小鼠

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椎间盘退行性变的机制及治疗方案研究进展

实用医学杂志 2024年

作者：靳级孙红庄勇宁旭刘淼贵州医科大学附属医院骨科贵州医科大学临床医学院

椎间盘退行性变（intervertebral disc degeneration, IDD）是多种慢性脊椎疾病的主要致病因素，其主要临床症状包括下腰痛和急性下肢神经根性疼痛。近年来，随着人口老龄化进展加速及生活方式改变，IDD的发病率显著上升且呈现年轻化趋... 详细信息

椎间盘退行性变（intervertebral disc degeneration, IDD）是多种慢性脊椎疾病的主要致病因素，其主要临床症状包括下腰痛和急性下肢神经根性疼痛。近年来，随着人口老龄化进展加速及生活方式改变，IDD的发病率显著上升且呈现年轻化趋势，严重影响了患者的生活质量，并给社会带来了巨大的经济和医疗负担。如何有效防治IDD已成为当前亟待解决的医学难题。现有研究表明，椎间盘细胞衰老在IDD的发生与进展中扮演着重要角色，靶向衰老椎间盘细胞的治疗策略，如抗细胞衰老药物、基因编辑及干细胞疗法等，正逐渐成为研究热点。本文综述了椎间盘细胞衰老的分子机制，阐述了针对衰老细胞的多种治疗策略及最新进展，旨在为IDD的防治提供新的研究思路和治疗靶点，并为后续研究提供参考。

关键词：椎间盘退行性变椎间盘细胞衰老细胞衰老通路抗衰老细胞药物

内质网应激、自噬与凋亡在斑蝥素致大鼠肝毒性中的作用

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中国现代应用药学 2024年第2期41卷 156-165页

作者：何天目陈宽熊丽娟林可欣陆椗瑒李晓飞张建永遵义医科大学基础医学院基础药理教育部重点实验室特色民族药教育部国际合作联合实验室贵州医科大学基础医学院遵义医科大学药学院基础药理教育部重点实验室特色民族药教育部国际合作联合实验室

目的探讨斑蝥素(cantharidin,CTD)致大鼠药物性肝损伤(drug-induced liver injury,DILI)的毒理学机制。方法采用不同剂量CTD(0.0614,0.0921,0.1841 mg·kg^(-1))连续灌胃SD大鼠28 d,检测肝脏指数和血清肝功能指标,HE染色评估肝脏病理变化。进一步采用免疫印迹法检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)、自噬和细胞凋亡通路蛋白。结果CTD干预后肝脏指数显著升高,生化指标ALT、AST、LDH、ALP和T-Bil显著升高,且呈剂量依赖性,肝脏组织出现结构破坏和中央静脉扩张等病理变化;GRP78、CHOP、ATF4、Beclin-1、LC3、Caspase-3、Caspase-8和Bax/Bcl-2的蛋白表达水平显著升高。分子对接结果显示,GRP78、ATF4和Beclin-1与CTD对接结果良好。结论CTD可激活大鼠ERS,进一步激活自噬,诱导下游凋亡,研究结果可为CTD诱导的DILI提供新的科学依据。

关键词：斑蝥素药物性肝损伤内质网应激自噬凋亡