检索结果-南通市图书馆

基于截短适配体-二硫化钼纳米片信号增强免标记荧光检测金刚烷胺

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

分析化学 2024年第2期52卷 208-223页

作者：兰艺凤侯博雅尉志文刘文张潮左雅慧贠克明山西医科大学法医学院山西医科大学基础医学院中国辐射防护研究院

金刚烷胺（AMD）可与其核酸适配体特异性结合，导致构象由单链转换成茎环结构。为避免多余的核苷酸影响适配体与靶标结合形成复杂的空间结构，本研究通过保留适当的茎环结构对AMD原适配体J进行截短优化，开发出新的截短适配体。与原适... 详细信息

金刚烷胺（AMD）可与其核酸适配体特异性结合，导致构象由单链转换成茎环结构。为避免多余的核苷酸影响适配体与靶标结合形成复杂的空间结构，本研究通过保留适当的茎环结构对AMD原适配体J进行截短优化，开发出新的截短适配体。与原适配体相比，截短适配体J-7与AMD的亲和力和特异性更好。以J-7为特异性识别元件，结合二硫化钼纳米片（MoS2Ns）信号放大技术构建了一种基于核酸适配体-MoS2Ns的超灵敏免标记荧光法用于AMD的检测，检出限为0.11 ng/mL。将本方法用于实际牛奶、酸奶及SD大鼠血清样品中AMD的检测，回收率为86.6%～108.2%。本研究为其它长序列适配体的截短提供了参考依据，也为食品中AMD残留的检测提供了更灵敏的检测方法。

关键词：截短适配体二硫化钼纳米片信号增强金刚烷胺免标记荧光法

来源：博看期刊

分泌型PD-1抗体可提高c-Met CAR-T细胞对胰腺癌细胞的杀伤作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2024年

作者：闵静婷彭上杜娜娜安然甄翔程曹佳威周陈航李正红蚌埠医科大学基础医学院蚌埠医科大学公共基础学院蚌埠医科大学临床医学院蚌埠医科大学口腔医学院蚌埠医科大学生命科学学院

目的设计并制备能够分泌PD-1抗体和靶向c-Met的CAR-T细胞，以消除肿瘤对CAR-T细胞的免疫抑制作用，从而提高CAR-T细胞对胰腺癌的治疗效果。方法采用Kaplan-Meier Plotter、GEPIA和Timer2.0生物信息学数据库，分析c-Met在胰腺癌中的表... 详细信息

目的设计并制备能够分泌PD-1抗体和靶向c-Met的CAR-T细胞，以消除肿瘤对CAR-T细胞的免疫抑制作用，从而提高CAR-T细胞对胰腺癌的治疗效果。方法采用Kaplan-Meier Plotter、GEPIA和Timer2.0生物信息学数据库，分析c-Met在胰腺癌中的表达、生存期及免疫浸润。免疫组化检测胰腺癌临床样本c-Met和PD-L1表达，流式细胞术验证胰腺癌细胞Aspc-1 c-Met和PD-L1表达通过基因编辑将PD-1分泌型抗体和HIS标签连接至2代c-Met CAR分子后，构建PD-1/c-Met CAR质粒并包被慢病毒，慢病毒感染至活化T细胞内，通过流式细胞技术检测CAR-T阳性率和细胞亚群；Western blotting检测分泌型PD-1抗体在细胞上清液中的存在；体外功能试验中，通过LDH释放实验检测CAR-T对靶细胞的杀伤效率，CCK-8检测靶细胞存在下PD-1抗体对CAR-T增殖的促进作用。ELISA检测PD-1/c-Met CAR-T和c-Met CAR-T活化后细胞因子的分泌量。结果生信分析结果显示，胰腺癌组织c-Met表达高于正常组织（P<0.01）;c-Met表达水平与胰腺癌患者生存期呈负相关（P<0.01）。c-Met的表达可能与多种免疫细胞浸润成正相关。免疫组化结果显示，胰腺癌c-Met和PD-L1表达均高于癌旁组织（P<0.01）；流式细胞术结果显示，Aspc-1细胞c-Met和PD-L1表达量为90.7%和57.7%，琼脂糖凝胶电泳显示成功制备四代PD-1/c-Met CAR分子；流式细胞术和Western blotting显示，成功构建PD-1/c-Met CAR-T且PD-1抗体可顺利分泌。体外功能验证中LDH结果显示，PD-1/c-Met CART对肿瘤细胞杀伤效率在效靶比为20:1时高于c-Met CAR-T(P<0.01);CCK-8实验结果显示，靶细胞刺激72 h后增殖效率高于c-Met CAR-T(P<0.01); ELISA结果显示，PD-1/c-Met CAR-T分泌的细胞因子IL-2和TNF-α高于c-Met CAR-T(P<0.01)。结论 PD-1抗体分泌型c-Met CAR-T可成功构建，并在体外胰腺癌细胞上显示出优于c-Met CAR-T肿瘤杀伤效率和增殖效率。

关键词：嵌合抗原受体T细胞 c-Met PD-1分泌型抗体胰腺癌

丹酚酸B抑制HuH-7细胞的Hippo/YAP通路机制研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药理学通报 2024年第1期40卷 106-113页

作者：余新梅李利利张傲邓洁杨雁安徽医科大学基础医学院安徽合肥230032 安徽医科大学第一临床医学院安徽合肥230032 安徽医科大学第二临床医学院安徽合肥230032

目的探讨丹酚酸B(salvianolic acid B,Sal B)对人肝癌HuH-7细胞是否具有抑制作用,并探讨其是否通过Hippo/YAP信号通路发挥作用。方法采用TGF-β1 (9 pmol·L^(-1))或MST1/2抑制剂XMU-MP-1 (5、10μmol·L^(-1))刺激HuH-7细胞,用Sal B(50μmol·L^(-1))处理HuH-7细胞。用CCK-8和EdU检测细胞增殖情况,用细胞划痕实验检测细胞迁移情况,用免疫荧光染色法检测YAP和TAZ的表达和分布,用Western blot检测p-MST1、MST1、p-YAP、YAP、p-TAZ、TAZ和CTGF的蛋白表达水平。结果 Sal B抑制了TGF-β1或XMU-MP-1刺激的HuH-7细胞的增殖。同时,Sal B抑制了TGF-β1刺激的HuH-7细胞的迁移。值得注意的是,与XMU-MP-1对HepG2细胞迁移能力的促进作用不同,XMU-MP-1在本实验中不能明显促进HuH-7细胞的迁移。此外,Sal B可上调p-MST1、MST1、p-YAP、p-TAZ的蛋白表达,降低YAP、TAZ、CTGF的表达。结论 Sal B抑制HuH-7细胞的作用可能与激活Hippo/YAP信号通路有关。

关键词：丹酚酸B HuH-7 肝癌 Hippo/YAP TGF-β1 XMU-MP-1

维普期刊数据库博看期刊

分泌型PD-1抗体可提高c-Met CAR-T细胞对胰腺癌细胞的杀伤作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

南方医科大学学报 2024年第10期44卷 1976-1984页

作者：闵静婷彭上杜娜娜安然甄翔程曹佳威周陈航李正红蚌埠医科大学基础医学院安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学公共基础学院安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学临床医学院安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学口腔医学院安徽蚌埠233000 蚌埠医科大学生命科学学院安徽蚌埠233000

目的设计并制备能够分泌PD-1抗体和靶向c-Met的CAR-T细胞,以消除肿瘤对CAR-T细胞的免疫抑制作用,从而提高CAR-T细胞对胰腺癌的治疗效果。方法采用Kaplan-Meier Plotter、GEPIA和Timer2.0生物信息学数据库,分析c-Met在胰腺癌中的表达、... 详细信息

目的设计并制备能够分泌PD-1抗体和靶向c-Met的CAR-T细胞,以消除肿瘤对CAR-T细胞的免疫抑制作用,从而提高CAR-T细胞对胰腺癌的治疗效果。方法采用Kaplan-Meier Plotter、GEPIA和Timer2.0生物信息学数据库,分析c-Met在胰腺癌中的表达、生存期及免疫浸润。免疫组化检测胰腺癌临床样本c-Met和PD-L1表达,流式细胞术验证胰腺癌细胞Aspc-1 c-Met和PD-L1表达通过基因编辑将PD-1分泌型抗体和HIS标签连接至2代c-Met CAR分子后,构建PD-1/c-Met CAR质粒并包被慢病毒,慢病毒感染至活化T细胞内,通过流式细胞技术检测CAR-T阳性率和细胞亚群;Western blotting检测分泌型PD-1抗体在细胞上清液中的存在;体外功能试验中,通过LDH释放实验检测CAR-T对靶细胞的杀伤效率,CCK-8检测靶细胞存在下PD-1抗体对CAR-T增殖的促进作用。ELISA检测PD-1/c-Met CAR-T和c-Met CAR-T活化后细胞因子的分泌量。结果生信分析结果显示,胰腺癌组织c-Met表达高于正常组织(P<0.01);c-Met表达水平与胰腺癌患者生存期呈负相关(P<0.01)。c-Met的表达可能与多种免疫细胞浸润成正相关。免疫组化结果显示,胰腺癌c-Met和PD-L1表达均高于癌旁组织(P<0.01);流式细胞术结果显示,Aspc-1细胞c-Met和PD-L1表达量为90.7%和57.7%,琼脂糖凝胶电泳显示成功制备四代PD-1/c-Met CAR分子;流式细胞术和Western blotting显示,成功构建PD-1/c-Met CAR-T且PD-1抗体可顺利分泌。体外功能验证中LDH结果显示,PD-1/c-Met CART对肿瘤细胞杀伤效率在效靶比为20:1时高于c-Met CAR-T(P<0.01);CCK-8实验结果显示,靶细胞刺激72 h后增殖效率高于c-Met CAR-T(P<0.01);ELISA结果显示,PD-1/c-Met CAR-T分泌的细胞因子IL-2和TNF-α高于c-Met CAR-T(P<0.01)。结论PD-1抗体分泌型c-Met CAR-T可成功构建,并在体外胰腺癌细胞上显示出优于c-Met CAR-T肿瘤杀伤效率和增殖效率。

关键词：嵌合抗原受体T细胞 c-Met PD-1分泌型抗体胰腺癌

维普期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

紫外交联免疫沉淀技术原理及其应用

生物化学与生物物理进展 2024年第1期51卷 136-144页

作者：杜亚琼王琬瑶高帆徐旸时文涛天津医科大学基础医学院遗传学系天津300070 南开大学医学院天津300071

紫外交联免疫沉淀(UV cross-linking immunoprecipitation,CLIP)技术最初建立于2003年。通过紫外交联、免疫沉淀、逆转录及后续的高通量测序等步骤,可在全转录组范围鉴定特定RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)的靶标RNA序列和结合... 详细信息

紫外交联免疫沉淀(UV cross-linking immunoprecipitation,CLIP)技术最初建立于2003年。通过紫外交联、免疫沉淀、逆转录及后续的高通量测序等步骤,可在全转录组范围鉴定特定RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBP)的靶标RNA序列和结合位点。在近20年的应用过程中,该技术被不断改进和完善,可操作性、实验结果的准确性都有所提升,技术的应用范围也有所拓展。本文对CLIP技术的基本原理、实验方法、实际应用进行介绍,着重比较几种主流CLIP技术的异同,并对如何选择具体的技术路线提出建议。

关键词：紫外交联免疫沉淀高通量测序 RNA结合蛋白

水溶性冰片磷酸酯前药的设计、合成及生物活性评价

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药科大学学报 2024年第3期55卷 375-380页

作者：张璐璐孙美玲秦亚娟厉廷有南京医科大学药学院南京211166 南京医科大学基础医学院南京211166

对冰片进行结构优化,以改善冰片的溶解性,促进其在脑卒中治疗方面的进一步应用。利用磷酸酯修饰原理,设计并合成冰片前药BP-3。使用蒸发光散射检测器(ELSD)测定BP-3的溶解性,在小鼠血浆中测试原药释放的程度与速度,并在短暂性大脑中动... 详细信息

对冰片进行结构优化,以改善冰片的溶解性,促进其在脑卒中治疗方面的进一步应用。利用磷酸酯修饰原理,设计并合成冰片前药BP-3。使用蒸发光散射检测器(ELSD)测定BP-3的溶解性,在小鼠血浆中测试原药释放的程度与速度,并在短暂性大脑中动脉闭塞(tMCAO)小鼠模型中评估BP-3的神经保护作用。结果显示,BP-3在20 mg/mL时可以完全溶解于生理盐水;在小鼠血浆中,2 h内释放约40%的冰片;在tMCAO小鼠模型中,TTC染色结果显示BP-3可以有效减少梗死面积;尼氏染色结果表明,BP-3可以改善神经元损伤;握力和抓力测试结果阐明,BP-3可以减少损伤带来的运动能力降低;转棒测试结果证明,BP-3可以促进小鼠运动能力的恢复。BP-3具有良好的水溶性、适宜的原药释放速率以及优异的神经保护作用,具备广阔的药物开发前景。

关键词：冰片磷酸酯缺血性脑卒中水溶性改善

维普期刊数据库博看期刊

溴系阻燃剂孕期暴露对子代发育毒性及作用机制的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华劳动卫生职业病杂志 2024年第6期42卷 468-474页

作者：张磊邹璟李静徐州医科大学附属淮安医院儿科淮安223002 徐州医科大学公共卫生学院预防医学系徐州221004

溴系阻燃剂(brominated flame retardants,BFRs)是一类广泛用于电子电器、纺织、建筑材料等工业产品以提升阻燃性能的含溴化合物。由于其化学稳定性强,具有环境持久性、远距离传播性和生物蓄积性,目前母乳、血清及胎盘、脐带血中均可检... 详细信息

溴系阻燃剂(brominated flame retardants,BFRs)是一类广泛用于电子电器、纺织、建筑材料等工业产品以提升阻燃性能的含溴化合物。由于其化学稳定性强,具有环境持久性、远距离传播性和生物蓄积性,目前母乳、血清及胎盘、脐带血中均可检测到BFRs。研究表明孕期暴露BFRs与多种不良出生结局如低体重、畸形、胎龄改变、神经行为发育损害有关。本文总结了三大传统BFRs,多溴二苯醚、六溴环十二烷、四溴双酚A的污染与人群暴露情况、孕期暴露对子代出生结局、生长发育的影响及作用机制,对BFRs孕期暴露对子代的危害进行探讨,为职业人群的预防措施提供参考。

关键词：火焰抑制剂阻燃剂溴系阻燃剂多溴二苯醚六溴环十二烷四溴双酚A 孕期暴露发育毒性作用机制

白藜芦醇治疗非小细胞肺癌机制的网络药理学分析及实验验证

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

食品工业科技 2024年第1期45卷 28-36页

作者：董杨逗钮宇恒张羽霍如婕刘清华田新瑞山西医科大学基础医学院山西太原030001 山西医科大学第一临床医学院山西太原030001 山西医科大学第二医院山西太原030000

目的:采用网络药理学和分子对接技术识别分析白藜芦醇抗非小细胞肺癌(NSCLC)的潜在靶点和作用机制,并结合临床数据以及分子生物学实验进行初步验证。方法:通过Swiss Target Prediction数据库和Target net数据库筛选白藜芦醇靶点,通过数... 详细信息

目的:采用网络药理学和分子对接技术识别分析白藜芦醇抗非小细胞肺癌(NSCLC)的潜在靶点和作用机制,并结合临床数据以及分子生物学实验进行初步验证。方法:通过Swiss Target Prediction数据库和Target net数据库筛选白藜芦醇靶点,通过数据库Genecards、OMIM、TTD收集NSCLC靶点,利用Venny 2.1.0平台获得药物和疾病靶点的交集;应用Cytoscape 3.7.2软件与String数据库生成靶标蛋白互作网络(PPI),并进行拓扑分析;利用Metascape数据库对交集靶标进行基因本体(GO)功能富集与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,得到交集靶标的基因图谱;利用Autodock Vina软件对排名前三位的核心靶基因与白藜芦醇进行分子对接验证;通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库获得临床病例样本,分析相关靶基因在NSCLC患者(n=1017)和健康人群(n=627)的表达情况;细胞水平采用Western Blot检测不同浓度(30、50μmol/L)白藜芦醇对人肺腺癌A549细胞SRC、EGFR及PI3K/AKT信号通路蛋白表达的影响。结果:筛选得到的潜在靶点共有40个,经过拓扑分析得到关键靶点8个,其中EGFR、SRC、ESR1等靶点与NSCLC密切相关;白藜芦醇抗NSCLC主要涉及肿瘤蛋白多糖、雌激素信号通路、PI3K/AKT等多条信号通路;分子对接显示,白藜芦醇与关键靶点具有稳定的结合能力;临床样本结果显示,靶基因EGFR、SRC、ESR1、HSP90AA1以及MMP9的表达在NSCLC中上调;TNF、CDC42以及RELA的表达在NSCLC中下调;细胞实验结果表明,白藜芦醇药物干预以剂量依赖的方式抑制了人肺腺癌A549细胞中SRC、EGFR、p-PI3K和p-AKT的蛋白表达。结论:揭示了白藜芦醇在治疗NSCLC的过程中涉及多个作用靶点及多条信号通路,明确了白藜芦醇可通过抑制PI3K/AKT信号通路发挥其抗癌效应。

关键词：白藜芦醇非小细胞肺癌网络药理学癌症基因组图谱 PI3K/AKT信号通路

儿童青少年血压偏高的4种简化筛查方法效果评价

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国学校卫生 2024年第2期45卷 277-282页

作者：李坤坤田纬陶梦梦曹文君山西医科大学公共卫生学院太原030000 长治医学院公共卫生与预防医学系

目的根据中国高血压防治指南(2018年修订版)对儿童青少年血压偏高常用的4种简化筛查方法进行效果评价,为儿童青少年血压异常的早期识别提供参考依据。方法于2021年10—11月,采用分层整群随机抽样方法对山西省某市5211名儿童青少年进行... 详细信息

目的根据中国高血压防治指南(2018年修订版)对儿童青少年血压偏高常用的4种简化筛查方法进行效果评价,为儿童青少年血压异常的早期识别提供参考依据。方法于2021年10—11月,采用分层整群随机抽样方法对山西省某市5211名儿童青少年进行体质监测,将中国高血压防治指南作为金标准,分别计算公式法、身高别法、年龄组别表格法和性别年龄别表格法筛查血压偏高的灵敏度、特异度、曲线下面积(AUC)和Kappa值等指标评价筛检效果。结果金标准、公式法、身高别法、年龄组别表格法和性别年龄别表格法筛查儿童青少年血压偏高率分别为21.9%,24.0%,21.1%,24.5%和20.2%。公式法、性别年龄别表格法与金标准判定结果差异均无统计学意义(χ^(2)值分别为1.12,1.41,P值均>0.05),而身高别法和年龄组别表格法与金标准判定结果差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为20.39,67.09,P值均<0.05)。身高别法AUC最大,为0.94(95%CI=0.93~0.95);年龄组别表格法AUC最小,为0.87(95%CI=0.86~0.88)。身高别法和性别年龄别表格法的Kappa值分别为0.89,0.89,均大于0.85,与金标准的筛查效果更吻合。分性别、年龄和体质量指数(BMI)情况比较时,男生、6~11岁和非超重肥胖组的筛查效果与总体一致,而女生、12~17岁、超重组和肥胖组的筛查效果与总体不同。年龄组别表格法的AUC(0.87)、Kappa值(0.71)和灵敏度(82.33%)均最低,筛查效果最差。结论身高别法筛查儿童青少年血压异常效果更好,该方法适用于儿童青少年血压异常的早期识别和自我检测。

关键词：血压参考标准曲线下面积儿童青少年