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肺炎克雷伯菌钼酸盐转运体modA基因缺失株的构建及其生物学特性

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南方医科大学学报 2024年第4期44卷 748-756页

作者：王慧姜晓宇李飞雨黄石市妇幼保健院(湖北理工学院附属妇幼保健院)检验科湖北黄石435000 黄石爱尔眼科医院湖北黄石435000 黄石市中医医院湖北黄石435000 湖北医药学院基础医学院湖北十堰442000

目的利用同源重组技术构建肺炎克雷伯菌NTUH-K2044株钼酸盐转运系统modA基因缺失株和回补株,探讨modA基因对肺炎克雷伯菌厌氧硝酸盐呼吸生长及表型的影响。方法利用自杀载体pKO3-Km质粒构建modA基因缺失株,同时扩增包含modA基因启动子... 详细信息

目的利用同源重组技术构建肺炎克雷伯菌NTUH-K2044株钼酸盐转运系统modA基因缺失株和回补株,探讨modA基因对肺炎克雷伯菌厌氧硝酸盐呼吸生长及表型的影响。方法利用自杀载体pKO3-Km质粒构建modA基因缺失株,同时扩增包含modA基因启动子、开放阅读框(ORF)和终止子区域的整条序列片段,将其克隆至pGEM-T-easy质粒中获得重组质粒modA-pGEM-T-easy,电转化至modA缺失株中得到回补株C-modA,通过体外厌氧硝酸盐呼吸生长测定、竞争力指数实验、生物膜结晶紫定量实验、黏度定量实验以及菌株形态ImageJ测量法比较分析NTUH-K2044野生株、modA基因缺失株、回补株的厌氧硝酸盐呼吸生长、细菌竞争力、生物膜合成能力及超黏表型、菌株形态改变。结果利用自杀载体pKO3-Km质粒成功构建肺炎克雷伯菌modA基因缺失株ΔmodA;随后将重组质粒modA-pGEM-T-easy电转化入ΔmodA中,得到回补株C-modA;相较于肺炎克雷伯菌野生株(WT)、C-modA,modA基因缺失株厌氧硝酸盐呼吸生长受抑制;ΔmodA相对野生株WT的体外厌氧培养竞争力明显减弱(P<0.05);ΔmodA厌氧生长生物膜合成减少,与WT、C-modA差异具有统计学意义(P<0.05);modA基因缺失株厌氧条件下黏液表型明显被削弱,相对WT、C-modA差异具有统计学意义(P<0.01);厌氧条件下ΔmodA菌体形态由正常的短杆状变为球型,与WT、C-modA长度差异有统计学意义(P<0.0001)。结论钼酸盐转运系统编码基因modA与肺炎克雷伯菌的厌氧硝酸盐呼吸、细菌体外竞争力、生物膜形成、超黏表型以及菌体形态变化等致病力因素相关。

关键词：肺炎克雷伯菌 ModA蛋白厌氧生长菌体形态

子宫内膜癌组织中IGF2BP1mRNA,PEG10mRNA表达及与增殖基因表达的相关性和预后研究

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现代检验医学杂志 2024年第4期39卷 16-22页

作者：伍雯莹黄娅芬梅巧黄石市妇幼保健院(湖北理工学院附属妇幼保健院)妇女保健科湖北黄石435000 黄石市妇幼保健院(湖北理工学院附属妇幼保健院)妇科湖北黄石435000 黄石市妇幼保健院(湖北理工学院附属妇幼保健院)中医妇科湖北黄石435000

目的研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)mRNA,父系表达遗传印记基因10(patrilineal expression of genetic imprinting gene 10,PEG10)mRNA表达及与增殖基因表达的相关性及预后。方法选取2017年1月~2019年1月湖北理工学院附属妇幼保健院诊治的100例EC患者。实时荧光定量PCR检测EC癌组织和癌旁组织中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA,细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA,细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达。免疫组织化学检测IGF2BP1,PEG10蛋白表达。相关性采用Pearson相关分析。Kaplan-Meier曲线分析不同IGF2BP1,PEG10表达组EC患者的预后差异。COX回归分析EC患者的预后影响因素。结果EC癌组织中IGF2BP1 mRNA(1.84±0.33),PEG10 mRNA(2.12±0.40),PCNA mRNA(3.14±0.42),cyclinD1 mRNA(2.81±0.36),CDK4 mRNA(2.37±0.34)高于癌旁组织(0.78±0.21,0.91±0.25,0.74±0.13,0.67±0.21,0.59±0.18),差异具有统计学意义(t=25.652~54.588,均P<0.05)。癌组织中IGF2BP1(70.00%),PEG10(72.00%)蛋白阳性率高于癌旁组织(100%,9.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=75.000,82.363,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA表达与PCNA mRNA,cyclinD1 mRNA,CDK4 mRNA表达呈正相关(r=0.562~0.625,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA与PEG10 mRNA表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、并发淋巴结转移EC癌组织中IGF2BP1(86.49%,87.50%),PEG10(89.19%,90.63%)阳性率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(60.32%,61.90%)、无淋巴结转移(61.77%,63.24%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.863~8.608,均P<0.05)。IGF2BP1阳性组患者三年总体生存率70.00%(49/70)低于阴性组的90.00%(27/30);PEG10阳性组患者三年总体生存率为69.44%(50/72),低于阴性组的92.86%(26/28),差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.133,5.491,P=0.042,0.019)。FIGO分期Ⅲ期(OR=1.449,95%CI:1.148~1.830)、并发淋巴结转移(OR=1.442,95%CI:1.124~1.850),IGF2BP1阳性(OR=1.637,95%CI:1.239~2.163)及PEG10阳性(OR=1.576,95%CI:1.136~1.187)是影响EC患者生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论EC中IGF2BP1,PEG10表达升高,两者与增殖基因表达呈正相关,是EC预后评估的肿瘤标志物。

关键词：子宫内膜癌胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1 父系表达遗传印记基因10 增殖临床病理特征

新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症合并地中海贫血1例及文献复习

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检验医学与临床 2024年第3期21卷 414-416页

作者：柯海燕邹甜甜雷琳费世暖江鸿李胜湖北理工学院附属妇幼保健院/黄石市妇幼保健院医学检验科湖北黄石435000 出生缺陷防治黄石市重点实验室湖北黄石435000 湖北理工学院附属妇幼保健院/黄石市妇幼保健院儿童保健科湖北黄石435000 湖北理工学院附属妇幼保健院/黄石市妇幼保健院儿科湖北黄石435000

目的探讨新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症(CPSⅠD)的临床特点及实验室分析结果。方法收集1例CPSⅠD患者的临床资料及基因测序结果,并结合相关文献进行分析。结果患儿出生2 d即出现吮奶差,随后出现精神反应差,拒奶,嗜睡,昏迷和高氨血... 详细信息

目的探讨新生儿型氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ缺乏症(CPSⅠD)的临床特点及实验室分析结果。方法收集1例CPSⅠD患者的临床资料及基因测序结果,并结合相关文献进行分析。结果患儿出生2 d即出现吮奶差,随后出现精神反应差,拒奶,嗜睡,昏迷和高氨血症,1个月后开始出现贫血;患儿外周血及其父母外周血染色体核型均显示正常,基因测序结果显示患儿为2个CPSⅠ基因变异,均位于2号染色体,分别源于父方和母方,其中c.2359(exon19)C>T是致病突变位点,c.3389(exon27)C>A基因突变位点临床意义不明;地中海贫血血红蛋白电泳检测结果Bart′s2.9,基因型诊断为SEA杂合,血串联质谱瓜氨酸显著降低。结论新生儿疾病筛查技术结合基因测序有利于疾病的早发现早诊断,新生儿起病迅速,常规治疗未见明显改善时应高度怀疑遗传代谢性疾病,并进行相应的筛查和精准确诊。

关键词：氨甲酰磷酸合成酶1 地中海贫血新生儿

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IL-33及ST2在肺炎支原体肺炎患儿外周血中的表达及其与肺功能的相关性

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临床和实验医学杂志 2024年第8期23卷 860-863页

作者：温娜费世暖钟素红石锦黄石市妇幼保健院(湖北理工学院附属妇幼医院)儿科湖北黄石435000

目的探讨肺炎支原体(MPP)肺炎患儿外周血中白细胞介素(IL)-33和肿瘤发生抑制蛋白2(ST2)表达水平,并分析其与肺功能的相关性。方法前瞻性选取2020年7月至2022年12月于黄石市妇幼保健院收治的96例2~10岁的MPP患儿,根据是否存在哮鸣音分... 详细信息

目的探讨肺炎支原体(MPP)肺炎患儿外周血中白细胞介素(IL)-33和肿瘤发生抑制蛋白2(ST2)表达水平,并分析其与肺功能的相关性。方法前瞻性选取2020年7月至2022年12月于黄石市妇幼保健院收治的96例2~10岁的MPP患儿,根据是否存在哮鸣音分为MPP喘息组(n=46)和MPP非喘息组(n=50),并选取同期健康儿童作为对照组(n=50)。检测并比较3组研究对象血清中的IL-33、ST2水平和肺功能[呼气峰值流速(PEF)、用力呼气第一秒容积(FEV1)、FEV1/用力呼气第一秒容积占用力肺活量(FVC)的比例(FEV1/FVC)、以及在肺活量的75%、50%、25%水平时的最大呼气流速(V_(75)、V_(50)、V_(25))],分析MPP患儿外周血IL-33和ST2水平与肺功能指标的相关性。结果 MPP喘息组患儿外周血IL-33、ST2表达水平分别为(13.26±6.23) pg/mL、0.95±0.51,MPP非喘息组分别为(11.41±5.84) pg/mL、0.74±0.45,均明显高于对照组[(9.12±6.14) pg/mL、0.35±0.21],差异均有统计学意义(P<0.05)。肺功能测试结果显示,MPP喘息组患儿PEF、FEV1、FEV1/FVC、V_(75)、V_(50)、V_(25)水平分别为(72.61±5.81)%、(72.97±6.33)%、(73.84±5.79)%、(73.38±3.76)%、(43.38±8.87)%、(37.74±8.43)%,均明显低于MPP非喘息组[(90.62±6.62)%、(92.38±6.54)%、(84.57±4.47)%、(84.46±4.98)%、(78.83±6.77)%、(69.92±5.23)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。MPP患儿外周血IL-33和ST2的水平与PEF、FEV1、FEV1/FVC、V_(75)、V_(50)、V_(25)均呈负相关。结论 MPP患儿的血清IL-33和ST2水平不仅与疾病的严重程度有关,还与肺功能的损害程度呈负相关,这为MPP的诊断和治疗提供了新的思路和依据。

关键词：肺炎支原体肺炎白细胞介素-33 肿瘤发生抑制蛋白2 肺功能

血液流变学指标预测妊娠糖尿病患者妊娠结局的价值

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国际医药卫生导报 2024年第17期30卷 2965-2969页

作者：吴捷项琼莉黄石市妇幼保健院湖北理工学院附属妇幼保健院产科出生缺陷防治黄石市重点实验室黄石435000

目的探讨血液流变学变化对妊娠糖尿病(GDM)患者妊娠结局的预测价值。方法采用回顾性研究,选取2020年1月至12月于黄石市妇幼保健院产科检查并分娩的80例GDM孕妇(GDM组),根据妊娠结局分为妊娠结局良好组(35例)和妊娠结局不良组(45例),选... 详细信息

目的探讨血液流变学变化对妊娠糖尿病(GDM)患者妊娠结局的预测价值。方法采用回顾性研究,选取2020年1月至12月于黄石市妇幼保健院产科检查并分娩的80例GDM孕妇(GDM组),根据妊娠结局分为妊娠结局良好组(35例)和妊娠结局不良组(45例),选择同期产前检查健康孕妇68例作为对照组。GDM组年龄(30.55±4.23)岁,体重(67.52±6.34)kg,受教育程度:高中及以下30例、大专25例、本科及以上25例;对照组年龄(29.84±3.91)岁,体重(66.08±6.01)kg,受教育程度:高中及以下28例、大专20例、本科及以上20例。比较两组研究对象血液流变学参数的变化,采用χ^(2)检验、t检验进行比较,多变量logistic回归模型分析GDM患者妊娠结局不良的危险因素,受试者操作特征曲线(ROC)评估血液流变学参数预测GDM患者妊娠结局不良的诊断效能。结果GDM组的血浆黏度(PV)、血细胞压积(HCT)、高剪切全血黏度(HWBV)、低剪切全血黏度(LWBV)、红细胞沉降率(ESR)均高于对照组[(1.78±0.32)mPs·s比(1.54±0.33)mPs·s、(45.60±6.56)%比(37.64±5.71)%、(9.41±0.89)mPs·s比(7.61±1.44)mPs·s、(7.93±1.34)mPs·s比(5.36±1.73)mPs·s、(62.05±8.73)mm/h比(49.55±6.81)mm/h],差异均有统计统计学意义(均P0.05)。血液流变学指标中,PV、HCT、HWBV、LWBV升高是GDM患者不良妊娠结局的潜在风险因素(OR=17.618、1.160、5.697、1.890,均P<0.05),四者联合检测评估不良妊娠结局发生的灵敏度为95.6%、特异度为97.1%、曲线下面积为0.980。结论血液流变学指标在预测GDM患者妊娠结局中具有重要价值,联合检测可显著提高诊断的灵敏度和特异度。

关键词：妊娠糖尿病血液流变学妊娠结局预测

中美两国在遗传病基因检测发展上的差异及相关进展

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检验医学 2024年第2期39卷 114-119页

作者：江鸿宋婕萍李胜湖北理工学院附属妇幼保健院黄石市妇幼保健院黄石市儿童医院黄石市新生儿疾病筛查中心/出生缺陷防治中心湖北黄石435099 湖北省妇幼保健院医学遗传中心湖北武汉430070

目前,遗传病筛查和检测主要采用实验室自建项目(LDT)和商品化体外诊断(IVD)产品2种形式,但国内外在2种形式上略有差异。文章梳理了遗传病检测相关行业进展,介绍中国和美国在相关政策上的差异,并对未来发展趋势进行展望。

关键词：实验室自建项目体外诊断遗传病中国美国

超声引导下聚桂醇与无水乙醇注射硬化治疗肝囊肿患者疗效比较研究

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实用肝脏病杂志 2024年第3期27卷 450-453页

作者：李玮健刘昕舒红艳湖北省黄石市妇幼保健院超声医学科 435000 湖北理工学院附属妇幼保健院/儿童医院超声医学科

目的比较在超声引导下聚桂醇与无水乙醇硬化治疗肝囊肿(HC)患者的疗效。方法2019年10月~2022年10月我院收治的HC患者107例,被随机分为观察组54例和对照组53例,分别在超声引导下穿刺囊腔内注射聚桂醇或无水乙醇治疗,于治疗后6个月复查超... 详细信息

目的比较在超声引导下聚桂醇与无水乙醇硬化治疗肝囊肿(HC)患者的疗效。方法2019年10月~2022年10月我院收治的HC患者107例,被随机分为观察组54例和对照组53例,分别在超声引导下穿刺囊腔内注射聚桂醇或无水乙醇治疗,于治疗后6个月复查超声。采用荧光免疫分析法检测血清高尔基体蛋白73(GP73)、蛋白二硫化物异构酶A3(PDIA3)和壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)水平,采用ELISA法检测血清髓过氧化物酶(MPO)和皮质醇(Cor)水平,采用化学发光法检测血清淀粉样蛋白A(SAA)水平,采用视觉模拟评分法(VAS)评价疼痛程度。结果观察组治疗总有效率为98.1%,显著高于对照组的88.7%(P<0.05),在随访时,观察组囊肿复发率为3.7%,显著低于对照组的16.9%(P<0.05);在术后1w,观察组血清GP73、PDIA3和CHI3L1水平分别为(23.1±3.8)pg/L、(69.2±5.6)ng/mL和(44.9±4.9)ng/L,显著低于对照组【分别为(37.3±4.3)pg/L、(94.8±5.4)ng/mL和(67.7±4.6)ng/L,P<0.05】;观察组血清MPO、Cor和SAA水平分别为(121.5±18.3)U/L、(259.7±24.1)ng/L和(14.5±2.5)mg/L,显著低于对照组【分别为(158.1±20.1)U/L、(298.6±26.3)ng/L和(20.2±3.1)mg/L,P<0.05】;在术后1 d和3 d,观察组VAS评分分别为(3.1±0.6)分和(2.2±0.3)分,均显著低于对照组【分别为(4.5±0.5)分和(3.2±0.4)分,P<0.05】;术后,对照组出现腹痛和醉酒貌等不良反应发生率为20.8%,显著高于观察组的3.7%(P<0.05)。结论在超声引导下穿刺向囊腔内注射聚桂醇硬化治疗HC患者可能比注射无水乙醇有更好的临床疗效,且不良反应发生率低,可能与激起机体应激反应轻有关。

关键词：肝囊肿聚桂醇无水乙醇硬化治疗超声引导治疗

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先天性肺气道畸形与支气管肺隔离症产前超声表现用于预测新生儿不良转归

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中国医学影像技术 2024年第7期40卷 1062-1066页

作者：黄田田孔德明肖海艳韦卫中华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院(武汉市妇幼保健院)妇幼超声科湖北武汉430019

目的观察先天性肺气道畸形(CPAM)与支气管肺隔离症(BPS)产前超声表现用于预测新生儿不良转归的价值。方法回顾性分析51胎CPAM、BPS或混合型病变单胎胎儿,观察其产前超声表现,测算肺部肿块体积与头围比(CVR);绘制受试者工作特征曲线,计... 详细信息

目的观察先天性肺气道畸形(CPAM)与支气管肺隔离症(BPS)产前超声表现用于预测新生儿不良转归的价值。方法回顾性分析51胎CPAM、BPS或混合型病变单胎胎儿,观察其产前超声表现,测算肺部肿块体积与头围比(CVR);绘制受试者工作特征曲线,计算曲线下面积(AUC),评估CVR预测肺部肿块胎儿新生儿期不良转归的效能。结果产前超声于51胎均检出肺部肿块,平均最大径(35.9±12.3)mm;其中28胎(28/51,54.90%)合并纵隔移位,3胎(3/51,5.88%)合并胸腔积液,3胎(3/51,5.88%)合并羊水过多,5胎(5/51,9.80%)合并其他肺外畸形;均未见胎儿水肿;根据病变供血动脉诊断29胎(29/51,56.86%)CPAM、20胎(20/51,39.22%)BPS及2胎(2/51,3.92%)混合型病变。以胎儿肺部肿块初次CVR(CVR_(1))、最大CVR(CVR_(2))及末次CVR(CVR_(3))测值预测新生儿呼吸窘迫及接受肺部手术治疗的AUC为0.907~0.993。CVR_(3)≥1.25为肺部肿块胎儿出生后发生新生儿呼吸窘迫的独立预测因素(OR=40.000,P=0.016)。结论CPAM及BPS产前超声表现具有一定特征性;CVR为预测CPAM及BPS胎儿出生后新生儿期不良转归的可靠指标。

关键词：先天性畸形肺支气管肺隔离症婴儿,新生儿超声检查

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超声引导下鞘内注射诺西那生钠治疗儿童脊髓性肌萎缩症

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中国医学影像技术 2024年第2期40卷 190-192页

作者：黎慧袁莉孙杰钱超付曼丽孙丹邓小龙华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院(武汉市妇幼保健院)儿童超声科湖北武汉430014 华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院(武汉市妇幼保健院)神经内科湖北武汉430014

脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy, SMA)是以近端肢体进行性肌无力及肌萎缩为主要特征的常染色体隐性遗传病,多由5q13运动神经元存活基因(survival motor neuron gene, SMN)1突变或缺失导致,是儿童最常见的神经肌肉病^([1])。鞘... 详细信息

脊髓性肌萎缩症(spinal muscular atrophy, SMA)是以近端肢体进行性肌无力及肌萎缩为主要特征的常染色体隐性遗传病,多由5q13运动神经元存活基因(survival motor neuron gene, SMN)1突变或缺失导致,是儿童最常见的神经肌肉病^([1])。鞘内注射诺西那生钠为治疗SMA的有效手段,但对于脊柱严重侧凸者,常需于影像学引导下完成^([2-3])。

关键词：脊髓性肌萎缩,儿童注射,脊髓超声检查