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基于谷胱甘肽抗氧化系统探讨督脉电针对脑卒中后肢体痉挛大鼠氧化应激的影响

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北京中医药大学学报 2024年第1期47卷 124-132页

作者：张建云梅紧紧张帅迪顾昌宇李晶晶郭健冯晓东李瑞青河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学第一附属医院

目的通过观察谷胱甘肽抗氧化系统相关因子的变化,评估督脉电针对脑卒中后肢体痉挛的作用机制。方法60只SD大鼠任意分为正常组(12只)、假手术组(12只)和造模组(36只)。造模组采用线栓法制备大脑中动脉阻塞模型,选取造模成功的24只大鼠任... 详细信息

目的通过观察谷胱甘肽抗氧化系统相关因子的变化,评估督脉电针对脑卒中后肢体痉挛的作用机制。方法60只SD大鼠任意分为正常组(12只)、假手术组(12只)和造模组(36只)。造模组采用线栓法制备大脑中动脉阻塞模型,选取造模成功的24只大鼠任意分为模型组和电针组,每组12只。造模后第3天,电针组选取督脉穴位“大椎”“脊中”“后会”行电针治疗,每次30 min,每日1次,共治疗7 d。采用Zea Longa神经功能缺损评分评估大鼠神经功能,采用改良Ashworth肌张力分级和电生理描记法检测大鼠肌张力,采用干湿重法测定大鼠脑组织含水量,TTC染色法检测大鼠脑梗死体积,比色法检测大鼠皮质谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,蛋白质印迹法和实时荧光PCR法检测大鼠大脑皮层谷胱甘肽还原酶(GR)、谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)C、GCLM、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白和mRNA表达。结果与正常组和假手术组大鼠比较,模型组大鼠Zea Longa神经功能缺损评分、改良Ashworth肌张力分级、脑梗死体积、脑组织含水量及大脑皮层GSSG、MDA含量增加,张力信号值及大脑皮层GR、GCLC、GCLM、GPX4蛋白和mRNA表达降低,大脑皮层GSH、CAT、SOD含量降低(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠Zea Longa神经功能缺损评分、改良Ashworth肌张力分级、脑梗死体积、脑组织含水量及大脑皮层GSSG、MDA含量降低,张力信号值及大脑皮层GR、GCLC、GCLM、GPX4蛋白和mRNA表达增加,大脑皮层GSH、CAT、SOD含量增加(P<0.05)。结论督脉电针可改善缺血性脑卒中后大鼠的肢体痉挛严重程度,其机制可能与调节大脑皮层谷胱甘肽抗氧化系统有关。

关键词：脑卒中肢体痉挛督脉电针谷胱甘肽抗氧化系统氧化应激大鼠

基于“肾络癥瘕”探讨800例过敏性紫癜性肾炎儿童肾脏微观血瘀证与肾脏病理分级及相关理化指标的关系

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北京中医药大学学报 2024年第1期47卷 97-106页

作者：高敏丁樱吴瑞红任献青徐炎韩姗姗代彦林黄岩杰杨晓青徐闪闪河南中医药大学儿科医学院郑州450046 河南中医药大学第一附属医院儿科医院河南中医药大学第一附属医院信息科

目的探讨过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿的肾脏微观血瘀证与肾脏病理分级及相关理化指标的关系。方法回顾性分析河南中医药大学第一附属医院800例HSPN患儿的病历资料,对其实验室指标(血常规、尿常规、凝血六项、肝功能)及肾脏病理指标进行... 详细信息

目的探讨过敏性紫癜性肾炎(HSPN)患儿的肾脏微观血瘀证与肾脏病理分级及相关理化指标的关系。方法回顾性分析河南中医药大学第一附属医院800例HSPN患儿的病历资料,对其实验室指标(血常规、尿常规、凝血六项、肝功能)及肾脏病理指标进行规范化梳理,根据肾脏病理微观病变指标判断肾脏血瘀证严重程度,将肾脏微观血瘀证分为脉络不和、死血凝着和肾内癥积3个类型。采用Spearman等级相关性、二元Logistic回归分析等方法分析肾脏微观血瘀证类型及肾内癥积型与实验室指标、肾脏病理指标的相关性。结果(1)不同中医证候下的肾脏微观血瘀证类型分布差异无统计学意义。(2)肾脏微观血瘀证不同类型的HSPN患儿的白蛋白、纤维蛋白原的含量及分级分布差异有统计学意义(均P一项实验室指标。

关键词：过敏性紫癜性肾炎病理分级凝血指标血瘀纤维蛋白原

基于Caspase-1/GSDMD通路探讨加味苇茎汤对巨噬细胞焦亡模型干预作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 27-33页

作者：尚东方赵晨露王思颖周铖刘鸣昊朱平生马素平赵文霞河南中医药大学郑州450000 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

目的:探讨加味苇茎汤对RAW264.7巨噬细胞焦亡模型干预作用,以及对胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路的影响。方法:采用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞模拟巨噬细胞焦亡模型。空白组给予空白血清,加味苇茎汤组分别给予不同... 详细信息

目的:探讨加味苇茎汤对RAW264.7巨噬细胞焦亡模型干预作用,以及对胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)焦亡通路的影响。方法:采用脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞模拟巨噬细胞焦亡模型。空白组给予空白血清,加味苇茎汤组分别给予不同体积分数的加味苇茎汤含药血清,培养24 h,细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测LPS对RAW264.7细胞增殖活性的影响和不同浓度含药血清对细胞活力的影响,扫描电镜观察各组细胞的焦亡情况,相差显微镜观察各组细胞形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白表达情况,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组细胞中白细胞介素(IL)-18和IL-1β的表达情况。结果:电镜观察RAW264.7细胞,空白组细胞形态和结构最好,与空白组比较,模型组细胞明显焦亡,部分细胞内容物释放至胞外;与模型组比较,各干预组细胞焦亡状态均有不同程度减轻,其中高剂量组最接近空白组。光镜观察各组细胞形态,空白组细胞基本呈圆形,与空白组比较,模型组细胞形态不规则,大部分长触角,与模型组比较,加味苇茎汤组形态均有改善,其中加味苇茎汤组(20%)最接近空白组。与空白组比较,模型组NLRP3、Caspase-1、GSDMD mRNA和蛋白的表达升高(P<0.05),与模型组比较,加味苇茎汤组上述指标表达有明显降低(P<0.05)。与空白组比较,模型组细胞IL-18、IL-1β表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,加味苇茎汤组(10%、20%)细胞IL-18、IL-1β的表达显著降低(P<0.01)。结论:加味苇茎汤可能通过下调Caspase-1/GSDMD通路抑制巨噬细胞焦亡,减少炎症因子的释放,发挥治疗非精酒性脂肪性肝炎的作用。

关键词：加味苇茎汤非酒精性脂肪性肝炎巨噬细胞焦亡抗炎作用

电针对脑缺血再灌注学习记忆障碍大鼠海马脑源性神经营养因子转化和突触可塑性的影响

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针刺研究 2024年第4期49卷 391-397页

作者：余明月苏凯奇申昕刘环环高静郭健冯晓东河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

目的:观察电针“百会”“神庭”对脑缺血再灌注学习记忆障碍大鼠行为学、海马组织中脑源性神经营养因子前体(proBDNF)向成熟型脑源性神经营养因子(mBDNF)转化及突触可塑性的影响,探讨电针改善脑缺血再灌注学习记忆障碍的作用机制。方法... 详细信息

目的:观察电针“百会”“神庭”对脑缺血再灌注学习记忆障碍大鼠行为学、海马组织中脑源性神经营养因子前体(proBDNF)向成熟型脑源性神经营养因子(mBDNF)转化及突触可塑性的影响,探讨电针改善脑缺血再灌注学习记忆障碍的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,每组6只。采用改良线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型。电针组电针“百会”“神庭”,每次30 min,每日1次,连续14 d。于造模后24 h和干预后观察各组大鼠神经功能缺损评分变化;TTC染色法观察各组大鼠病灶侧脑梗死体积;Morris水迷宫实验评价各组大鼠学习记忆能力;Western blot法检测各组大鼠海马组织中proBDNF、mBDNF、组织型纤溶酶原激活物(tPA)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)、p75神经营养因子受体(p75NTR)蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分升高(P一。

关键词：脑缺血再灌注学习记忆障碍电针脑源性神经营养因子突触可塑性

中药调控PI3K/Akt信号通路治疗脑缺血再灌注损伤的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 253-261页

作者：高京刘飞祥张运克河南中医药大学郑州450000 河南中医药大学第一附属医院郑州450046

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是指脑缺血后梗死区脑组织血流和氧供恢复,引起缺血脑组织继发性损伤的一种复杂的瀑布级联反应过程。目前尽快溶栓,恢复脑组织供血仍是治疗脑卒中的唯一策略,但相当一部分患者再灌注后其症状较前会更加严重,使患... 详细信息

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是指脑缺血后梗死区脑组织血流和氧供恢复,引起缺血脑组织继发性损伤的一种复杂的瀑布级联反应过程。目前尽快溶栓,恢复脑组织供血仍是治疗脑卒中的唯一策略,但相当一部分患者再灌注后其症状较前会更加严重,使患者面临神经功能损伤甚至死亡等不良结局,严重影响患者的生活质量和生命安全,因此深入探索脑缺血再灌注损伤的作用机制与治疗策略具有重要的临床意义。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路响着细胞的增殖、生长和分化,作为经典的抗凋亡/促生殖的信号传导通路之一,是预防CIRI的关键级联信号通路,在线粒体障碍、细胞凋亡、细胞自噬、氧化应激和炎症反应等多种机制中处于核心位点,与CIRI的发生发展密切相关。传统中医药对于临床治疗脑卒中及其并发症已有上千年历史,近年来中医药防治CIRI的临床成效也得到大量研究结果的肯定,进一步阐明了中药单体、活性成分及其复方可凭借多靶点、多组分和多途径的生物学优势直接或间接调控PI3K/Akt信号通路,并对CIRI起到整体性保护作用。笔者通过分析近年来国内外中医药相关研究进展,对调控PI3K/Akt信号通路在CIRI中的防治作用及机制进行综述,以期为中医药临床防治CIRI的作用机制研究提供进一步的理论依据。

关键词：中药中药复方脑缺血再灌注损伤磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路研究进展

经典名方托里消毒散的古籍文献与现代临床应用分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 176-186页

作者：王顺喜牛蔚露刘学伟耿菁珂李萌月河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

托里消毒散是《古代经典名方目录(第一批)》中的第65首方剂,笔者运用文献计量学方法,从历史源流、方药组成与剂量、主治病证、煎法服法、药物炮制等方面将有关托里消毒散的古籍总结梳理和考证。据考证研究,托里消毒散具体成方年代未有定... 详细信息

托里消毒散是《古代经典名方目录(第一批)》中的第65首方剂,笔者运用文献计量学方法,从历史源流、方药组成与剂量、主治病证、煎法服法、药物炮制等方面将有关托里消毒散的古籍总结梳理和考证。据考证研究,托里消毒散具体成方年代未有定论,最早可追溯至明代薛己《立斋外科发挥》,其流传广泛,处方组成版本较多,现代影响力较大的版本出自明代陈实功的《外科正宗》,由人参、川芎、白芍、黄芪、当归、白术、茯苓、金银花、白芷、甘草、皂角刺、桔梗12味药组成;其药物基原基本与2020年版《中华人民共和国药典》一致,其中白芷推荐使用杭白芷Angelica dahurica ***,甘草推荐使用豆科植物甘草Glycryyhiza uralensis,所有药味均建议生用;药物剂量建议每服人参、川芎、白芍、黄芪、当归、白术、茯苓、金银花各3.73 g,白芷、甘草、皂角刺、桔梗各1.87 g;制用法建议水煎服,加水400 mL,煮取160 mL,每日2~3服;该方具有益气养血、托毒透脓之功,在古代主要用于治疗疮疡类疾病的正虚邪实证,在现代其治疗病症十分广泛,涉及皮肤及软组织、五官、骨骼、消化、泌尿生殖、乳腺及肛肠等诸多系统病症,也同样主要用于正虚邪实之证。该研究经考证,总结了托里消毒散的古今应用,确定了其关键信息,为其更广泛地临床运用、深入研究及制剂开发提供了依据。

关键词：经典名方托里消毒散中医古籍历史沿革现代临床应用文献研究关键信息

鳖甲煎丸调控lncRNA SNHG5/miRNA-26a-5p/GSK-3β信号轴干预原发性肝癌的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第4期30卷 107-113页

作者：邵范雷陈秋平毕倩杜冰曌刘卫红邵明义河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

目的:基于长链非编码RNA SNHG5(lncRNA SNHG5)/微小RNA-26a-5p(miRNA-26a-5p)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号轴探究鳖甲煎丸干预原发性肝癌的作用机制。方法:双荧光素酶报告实验验证HepG2细胞内lncRNA SNHG5与miRNA-26a-5p,miRNA-26a-5p与GSK-3β的靶向互作关系。建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型,随机分为模型组,鳖甲煎丸低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g·kg^(-1)),索拉非尼组(100 mg·kg^(-1)),每组10只。分别予以生理盐水或药物灌胃28 d,并于不同时间测量裸鼠瘤体积。苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织形态学改变;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肿瘤组织中lncRNA SNHG5、miRNA-26a-5p、GSK-3β及β-连环蛋白(β-catenin)mRNA的核酸水平差异;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肿瘤组织中GSK-3β、β-catenin的蛋白表达水平。结果:与SNHG5-野生型(WT)+miRNA内参(NC)组比较,SNHG5-WT+miRNA-26a-5p mimic(模拟物)组的相对荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。与GSK-3β-WT+miRNA NC组比较,GSK-3β-WT+miRNA-26a-5p mimic组的相对荧光素酶活性明显降低(P<0.05)。与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组裸鼠肿瘤体积明显减小(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,鳖甲煎丸各剂量组裸鼠瘤体组织内细胞排列明显稀疏,部分细胞坏死,且呈浓度依赖性变化。与模型组比较,鳖甲煎丸各剂量组lncRNA SNHG5、GSK-3β及β-catenin的表达均明显下降(P<0.05,P<0.01),miRNA-26a-5p的表达均明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,鳖甲煎丸各剂量组的关键蛋白GSK-3β及β-catenin表达均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:鳖甲煎丸可能通过lncRNA SNHG5/miRNA-26a-5p/GSK-3β信号轴,影响肝癌细胞坏死从而发挥抗肿瘤作用,该研究为鳖甲煎丸临床应用提供更多的理论依据。

关键词：鳖甲煎丸肝癌长链非编码RNA SNHG5(lncRNA SNHG5) 微小RNA-26a-5p(miRNA-26a-5p) 糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)

电针调节RIP1/RIP3/MLKL通路对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元程序性坏死的影响

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针刺研究 2024年第2期49卷 127-134页

作者：陈净任彬彬马素娜韦慧麟杨悦悦吴松河南中医药大学郑州450000 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

目的:探讨电针“曲池”“足三里”对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用及对大脑皮层神经元程序性坏死的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、抑制剂组,每组15只。模型组、电针组及抑制剂组大鼠采用改良线栓法制备左... 详细信息

目的:探讨电针“曲池”“足三里”对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用及对大脑皮层神经元程序性坏死的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、抑制剂组,每组15只。模型组、电针组及抑制剂组大鼠采用改良线栓法制备左侧大脑中动脉阻塞模型;假手术组大鼠仅暴露颈动脉。给予电针组大鼠右侧“曲池“”足三里”电针治疗,30 min/次,1次/d,给予抑制剂组大鼠腹腔注射坏死抑素-1(0.6 mg/kg),均连续干预7 d。观察各组大鼠神经功能缺损评分;HE染色检测梗死区大脑皮层病理损伤程度;TUNEL染色检测梗死区大脑皮层神经元凋亡情况;ELISA法检测梗死区大脑皮层肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量;荧光定量PCR及Western blot法分别检测梗死区大脑皮层受体相互作用蛋白(RIP)1、RIP3、底物混合谱系激酶样蛋白(MLKL)mRNA及蛋白的表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高(P<0.01);HE染色显示,梗死区大脑皮层表现出明显脑缺血再灌注病理损伤;梗死区大脑皮层神经元凋亡率,梗死区大脑皮层中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,梗死区大脑皮层RIP1、RIP3、MLKL mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,电针组大鼠神经功能缺损评分降低(P<0.01);HE染色显示,梗死区大脑皮层病理损伤程度明显改善;梗死区大脑皮层神经元凋亡率,梗死区大脑皮层中TNF-α、IL-1β、IL-6含量,梗死区大脑皮层RIP1、RIP3、MLKL mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:电针干预可能通过抑制大鼠大脑皮层神经元程序性坏死,缓解脑缺血再灌注损伤,发挥神经保护作用。

关键词：脑缺血再灌注损伤受体相互作用蛋白1/受体相互作用蛋白3/底物混合谱系激酶样蛋白通路程序性坏死炎性反应

基于免疫反应-肠道微生物轴探究大肠癌湿热蕴结病机的生物学内涵

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中国实验方剂学杂志 2024年第6期30卷 228-237页

作者：吴毅娟孙兴红郭海霞张相安河南中医药大学郑州450046 河南中医药大学第一附属医院郑州450000

大肠癌(CRC)是以排便习惯改变,便血、及疼痛为主要临床表现的肠道恶性肿瘤。近年来随着生活方式及饮食结构的改变,发病率逐年上升。CRC的发病机制与异常免疫反应及慢性炎症、肠道微生物失调及致癌代谢产物产生等密切相关。肠道微生物群... 详细信息

大肠癌(CRC)是以排便习惯改变,便血、及疼痛为主要临床表现的肠道恶性肿瘤。近年来随着生活方式及饮食结构的改变,发病率逐年上升。CRC的发病机制与异常免疫反应及慢性炎症、肠道微生物失调及致癌代谢产物产生等密切相关。肠道微生物群和机体免疫之间是一种双向沟通,不仅在维持机体健康方面起着关键作用,而且还与疾病的发生发展有密切关系。越来越多的研究表明,异常的免疫反应通过产生炎症因子、引起机体慢性炎症,破坏肠黏膜屏障及增加黏膜通透性,造成肠道微生物生态失调,大量致病性微生物及其代谢产物加速疾病进程;另一方面,肠道微生物失调,通过抑制正常的免疫反应,导致体内多种代谢途径紊乱,影响肠道内外应激反应,诱导炎症发生,从而产生疾病。故免疫反应-肠道微生物轴之间复杂的串扰机制与大肠癌的发生关系密切。基于中医理论及临床研究发现,饮食因素是CRC发病的重要诱因,正气不足是其致病之本,湿热蕴结是关键病机。通过现代医学与生物学研究,认为异常的免疫反应是湿热内蕴的微观表现,而肠道微生物失调是毒注大肠生物学基础,并且在CRC的发病中,免疫反应-肠道微生物轴失衡与中医湿热蕴结相契合。从免疫反应-肠道微生物轴探讨CRC湿热蕴结的生物学内涵,力争用客观数据诠释CRC湿热蕴结的病机内涵,对于CRC湿热蕴结证的发病机制及诊疗策略提供新的思路及理论依据。

关键词：免疫反应-肠道微生物轴大肠癌免疫反应肠道微生物串扰机制湿热蕴结生物学内涵