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良方温经汤调控CHCHD4表达干预寒凝血瘀型子宫内膜异位症乏氧的机制研究

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中国中药杂志 2024年第14期49卷 3818-3827页

作者：邢易果金玉刘鹏郭权磊成秀梅康佳梦任艳青河北中医药大学河北石家庄050091 河北省中药配方颗粒技术创新中心河北石家庄050091 中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心河北石家庄050091

探究良方温经汤调控卷曲螺旋卷曲螺旋结构域4(CHCHD4)表达干预寒凝血瘀型子宫内膜异位症(EMs)乏氧环境的机制。冰水浴法制备大鼠寒凝血瘀证模型,在此基础上采用自体移植法建立EMs模型,随机分为模型组,良方温经汤低、中、高(4.7、9.4、18... 详细信息

探究良方温经汤调控卷曲螺旋卷曲螺旋结构域4(CHCHD4)表达干预寒凝血瘀型子宫内膜异位症(EMs)乏氧环境的机制。冰水浴法制备大鼠寒凝血瘀证模型,在此基础上采用自体移植法建立EMs模型,随机分为模型组,良方温经汤低、中、高(4.7、9.4、18.8 g·kg^(-1))剂量组及少腹逐瘀汤组,另设假手术组,每组10只,灌胃给药4周。造模期间进行大鼠一般情况观察及阴道涂片,并通过激光散斑衬比成像(LSCI)检测耳部及子宫血流,以判断寒凝血瘀证候情况;给药结束后观察大鼠一般情况;卡尺测量异位病灶面积;免疫组织化学法检测CHCHD4、乏氧诱导因子^(-1)α(HIF^(-1)α)的定位与表达;实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)及蛋白免疫印迹检测CHCHD4、HIF^(-1)αmRNA和蛋白的表达。进行EMs患者异位子宫内膜间质细胞(ESCs)原代培养,构建CHCHD4过表达质粒,转染建立CHCHD4过表达ESCs模型。将细胞分为空白对照组、CHCHD4过表达组、CHCHD4过表达+空白血清组、CHCHD4过表达+良方温经汤血清组,蛋白免疫印迹检测CHCHD4、HIF^(-1)α蛋白的表达;并检测葡萄糖消耗量及乳酸水平;MTT法检测细胞增殖情况。结果显示,与正常大鼠相比,造模大鼠出现精神萎靡、饮食饮水减少、动情周期紊乱,耳部及子宫微血管血液循环受阻等寒凝血瘀证候表征。与假手术组相比,模型组大鼠异位病灶隆起,CHCHD4、HIF^(-1)αmRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,各给药组大鼠寒凝血瘀表征均有改善,异位病灶面积显著缩小(P<0.05或P<0.01),CHCHD4、HIF^(-1)αmRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。在细胞模型中,与空白对照组相比,CHCHD4过表达组CHCHD4、HIF^(-1)α蛋白表达、葡萄糖消耗量、乳酸水平、细胞增殖活力均显著升高(P<0.01);与CHCHD4过表达组相比,空白血清组各指标均无明显变化,良方温经汤血清组CHCHD4、HIF^(-1)α蛋白表达显著下降(P<0.05或P<0.01),葡萄糖消耗量、乳酸水平显著降低(P<0.01),细胞增殖活力显著下降(P<0.01)。由上可知,良方温经汤对寒凝血瘀型EMs的治疗作用与降低CHCHD4表达,进而改善异位病灶及异位ESCs乏氧有关。

关键词：良方温经汤寒凝血瘀型子宫内膜异位症卷曲螺旋卷曲螺旋结构域4(CHCHD4) 乏氧诱导因子-1α(HIF-1α) 子宫内膜间质细胞

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基于HS-GC-MS和电子感官技术比较不同产地金银花气味和味道差异

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中草药 2024年第6期55卷 2085-2093页

作者：马涵玉钱琪王凤霞周英森贾振华孙帅牛丽颖河北中医药大学河北石家庄050091 河北省中药配方颗粒技术创新中心河北石家庄050091 中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心河北石家庄050091 河北省科学院河北石家庄050052

目的比较河南、河北、山东产地金银花挥发性成分、气味和味道的差异,为鉴别不同产地金银花提供参考。方法基于顶空-气相色谱-质谱法(head space-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)及电子鼻和电子舌2种智能感官技术对不同... 详细信息

目的比较河南、河北、山东产地金银花挥发性成分、气味和味道的差异,为鉴别不同产地金银花提供参考。方法基于顶空-气相色谱-质谱法(head space-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GC-MS)及电子鼻和电子舌2种智能感官技术对不同产地金银花药材进行测定。以变量投影重要性(variable importance projection,VIP)>1、P河北、河南与山东、河北与山东样品间差异挥发性成分分别为15、11、13个,其中己醛和丁香醛为3个产地的共有差异性挥发成分。电子鼻和电子舌均能较好区分不同产地的金银花样品。通过pearson相关分析确定了11种引起金银花气味差异的挥发性成分。另外,建立的味道判别函数模型可对不同产地金银花进行准确判别。结论HS-GC-MS、电子鼻和电子舌技术结合多元统计分析可较好的区分不同产地的金银花,并阐明其挥发性成分、气味与味道的差异,对金银花的产地鉴别和质量评价具有一定指导意义。

关键词：金银花挥发性成分己醛丁香醛顶空-气相色谱-质谱电子鼻电子舌

基于HS-GC-MS和电子鼻技术的不同产地旋覆花挥发性成分差异分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 170-176页

作者：赵玉珍解泽阳高乐王相田伟牛丽颖河北中医药大学药学院石家庄050200 河北中医药大学河北省中药配方颗粒技术创新中心中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心石家庄050091

目的:通过分析不同产地旋覆花的挥发性成分及气味的差异,为完善旋覆花的质量评价方法提供参考。方法:收集山东德州、山东平邑、河南安阳、河北4个产区共20批旋覆花样品,利用PEN型电子鼻识别各样品气味信息,运用主成分分析(PCA)与方差分... 详细信息

目的:通过分析不同产地旋覆花的挥发性成分及气味的差异,为完善旋覆花的质量评价方法提供参考。方法:收集山东德州、山东平邑、河南安阳、河北4个产区共20批旋覆花样品,利用PEN型电子鼻识别各样品气味信息,运用主成分分析(PCA)与方差分析多重比较对不同产地间气味的差异性进行辨识。利用顶空气相色谱-质谱法(HS-GC-MS)对不同产地旋覆花样品的挥发性成分进行鉴定与相对定量,并采用PCA和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)对不同产地间挥发性成分的差异性进行分析,根据变量重要性投影(VIP)值>1且P河北产区的旋覆花样品。采用HS-GC-MS共检测出48个挥发性成分,主要包含醛类、烯烃类、羧酸类、芳香类和醇类。PCA与PLS-DA结果表明不同产区具有明显差异,并筛选出19个差异化合物,其中以正己醛相对含量最高;挥发性差异化合物与产地相关分析得到15个成分可作为区分产地的特征性成分;电子鼻传感器与产地相关性分析结果表明W1W传感器与河北产区相关性最强,可作为河北与其他产区显著区分的标志,W2W、W5S传感器与山东德州、河南安阳产区相关性较强。W1W、W2W、W5S传感器与差异化合物的Person相关性分析表明气味产生的物质基础为糠醛、2-正戊基呋喃、正己醛、芳樟醇及3-甲基-1-戊醛,可将其作为区分不同产地主要的气味物质。结论:该研究利用HS-GC-MS联合电子鼻技术能够较好地区分不同产地的旋覆花。筛选出的15个挥发性差异化合物及5个气味物质基础可为旋覆花的气味特征阐释及质量评价研究提供参考。

关键词：旋覆花挥发性成分电子鼻顶空气相色谱-质谱法(HS-GC-MS) 产地气味物质基础质量评价

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基于UPLC-Q TOF MS/MS技术结合SWATH采集法同时定性定量分析地胆草中的化学成分

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药物分析杂志 2024年第8期44卷 1331-1342页

作者：果佳慧蔡于罗田伟高乐李葆林甄亚钦牛丽颖河北中医药大学石家庄050091 河北省中药配方颗粒技术创新中心石家庄050091 中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心石家庄050091

目的:基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q TOF MS/MS)技术,系统表征地胆草中化学成分并同时测定其中13个化学成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、芹菜素-... 详细信息

目的:基于超高效液相色谱串联四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q TOF MS/MS)技术,系统表征地胆草中化学成分并同时测定其中13个化学成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草苷、异绿原酸B、异绿原酸A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异绿原酸C、去氧地胆草素、异去氧地胆草素、异地胆草种内酯、地胆草种内酯)的含量。方法:采用UPLC-Q TOF MS/MS技术,结合顺序窗口采集所有理论质谱模式(SWATH),采集不同批次地胆草样品的数据。使用Waters HSS T3 C_(18)(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温35℃,进样量2μL。采用电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式下采集数据。结合对照品信息,参考相关文献完成对地胆草中化学成分的结构鉴定。同时建立地胆草中13个化学成分的含量测定方法并进行方法学考察。结果:地胆草中初步鉴定出36个化学成分,其中包括有机酸类20个,黄酮类7个,倍半萜内酯类6个,香豆素类1个及其他成分2个;含量测定的13个成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数≥0.9990,精密度、稳定性、重复性等均符合要求,平均加样回收率为94.9%~103.5%,RSD≤3.8%。不同批次地胆草所含化学成分基本相似,但13个成分的含量存在一定差异。结论:本研究建立的UPLC-Q TOF MS/MS方法,可同时对地胆草进行定性定量分析,方法灵敏准确,稳定性和重复性良好,可以为地胆草的质量控制及开发提供方法参考及数据支撑。

关键词：地胆草超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱顺序窗口采集所有理论质谱模式化学成分鉴定含量测定质量控制

UHPLC-MS/MS同时测定半夏白术天麻汤基准样品中25个成分的含量

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中国药学杂志 2024年第1期59卷 88-96页

作者：蔡于罗果佳慧甄亚钦姜国志田伟牛丽颖河北中医药大学石家庄050091 河北省中药配方颗粒技术创新中心石家庄050091 中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心石家庄050091 神威药业集团有限公司石家庄051430

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定半夏白术天麻汤基准样品(冻干粉)中腺苷、鸟苷、琥珀酸、葫芦巴碱、天麻素、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、绿原酸、新绿原酸、芸香柚... 详细信息

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定半夏白术天麻汤基准样品(冻干粉)中腺苷、鸟苷、琥珀酸、葫芦巴碱、天麻素、巴利森苷A、巴利森苷B、巴利森苷C、巴利森苷E、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、绿原酸、新绿原酸、芸香柚皮苷、橙皮苷、芦丁、川陈皮素、桔皮素、茯苓酸A、甘草苷、甘草酸、甘草素、异甘草苷、芹糖异甘草苷、环磷酸腺苷的含量。方法采用Shim-pack GIST C_(18)(2.1 mm×100 mm,2μm)色谱柱进行分离,流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1);进样量1μL。质谱条件采用电喷雾(ESI)离子源正、负离子模式进行检测,多重反应监测(MRM)模式用于定量测定。结果所测25种化学成分在测定浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.991;精密度、重复性和稳定性良好;平均加样回收率为95.57%~104.98%,RSD为0.55%~4.68%。结论本方法专属性强,灵敏度高,可为半夏白术天麻汤的质量控制研究提供实验依据。

关键词：半夏白术天麻汤基准样品超高效液相色谱串联质谱法含量测定质量控制

UPLC-MS/MS法同时测定红五参胶囊中11个成分的含量

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药物分析杂志 2024年第4期44卷 567-576页

作者：孙帅王相高乐谢文超刘宸男牛丽颖王鑫国河北中医药大学河北省中药配方颗粒技术创新中心、中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心石家庄050091 华北制药河北华维健康产业有限公司石家庄052165

目的:建立UPLC-MS/MS同时测定红五参胶囊中11个成分(咖啡酸、阿福豆苷、没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、红景天苷、紫丁香苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd)含量的方法。方法:采用Shim-pack GIST C18(100 mm×2.1 mm,2... 详细信息

目的:建立UPLC-MS/MS同时测定红五参胶囊中11个成分(咖啡酸、阿福豆苷、没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、红景天苷、紫丁香苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd)含量的方法。方法:采用Shim-pack GIST C18(100 mm×2.1 mm,2μm)色谱柱,以乙腈-0.1%乙酸-1 mmol·L^(-1)乙酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量为1μL;采用电喷雾电离源(ESI源),多反应监测(MRM)模式进行正负离子检测。结果:11个成分在测定浓度范围内线性关系良好,线性相关系数r均>0.9990;精密度RSD均<3%;重复性和稳定性良好,RSD值均<5%;平均加样回收率为97.1%~101.5%,RSD≤3.7%。10批红五参胶囊中咖啡酸、阿福豆苷、没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、红景天苷、紫丁香苷、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rd含量分别为0.010~0.013、0.0007~0.0014、0.035~0.038、0.312~0.315、0.413~0.417、0.411~0.416、4.355~4.358、0.030~0.032、0.993~0.999、1.120~1.124、2.536~2.538 mg·g^(-1)。结论:本方法准确灵敏,稳定性和重复性良好,可用于红五参胶囊的质量控制。

关键词：红五参胶囊红景天刺五加人参大健康产品红景天苷人参皂苷Rd 超高效液相色谱-串联质谱多重反应监测多成分含量测定质量控制

石楠叶药材-饮片-标准汤剂-配方颗粒量值传递规律研究

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药物评价研究 2024年第2期47卷 360-368页

作者：任逸飞马永犇田宇柔张泽昭何容格牛丽颖吴玲芳河北中医药大学河北石家庄050091 北京中医药大学附属东直门医院北京100007 河北省中药配方颗粒技术创新中心河北石家庄050091 中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心河北石家庄050091

目的以标准汤剂的绿原酸含量和特征图谱为基准,研究石楠叶配方颗粒的量值传递规律。方法制备石楠叶标准汤剂样品,建立其指标成分绿原酸含量及特征图谱测定方法;收集不同来源15批次石楠叶药材、饮片及3批中试配方颗粒,检测绿原酸含量及... 详细信息

目的以标准汤剂的绿原酸含量和特征图谱为基准,研究石楠叶配方颗粒的量值传递规律。方法制备石楠叶标准汤剂样品,建立其指标成分绿原酸含量及特征图谱测定方法;收集不同来源15批次石楠叶药材、饮片及3批中试配方颗粒,检测绿原酸含量及特征图谱,分析药材-饮片-标准汤剂-配方颗粒特征图谱的相关性及指标成分绿原酸量值传递规律。结果15批标准汤剂的出膏率平均值为21.5%(20.0%~22.4%);绿原酸的平均质量分数为21.63 mg·g^(-1)(20.04~22.81 mg·g^(-1));共标定9个特征峰,以绿原酸(2号峰)为S1峰,芦丁(4号峰)为S2峰。石楠叶药材、饮片、配方颗粒中绿原酸质量分数分别为5.91~7.33、5.79~6.98、15.61~15.72 mg·g^(-1),药材-饮片绿原酸转移率为91.94%~99.05%,饮片-标准汤剂绿原酸转移率为64.22%~81.36%,饮片-配方颗粒绿原酸转移率为55.31%~61.71%。石楠叶药材、饮片、配方颗粒特征图谱中均检测出9个特征峰,且相对保留时间均在规定范围内。结论以石楠叶标准汤剂为基准,其药材-饮片-标准汤剂-配方颗粒中9个特征峰相对保留时间、绿原酸量值传递规律稳定,含量均在标准汤剂范围内,表明石楠叶配方颗粒制备工艺合理,质量稳定。

关键词：石楠叶绿原酸标准汤剂配方颗粒特征图谱量值传递

基于指纹图谱和多成分含量测定的地胆草质量研究

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中药材 2024年 940-944页

作者：高乐田伟甄亚钦谢文超刘宸男果佳慧王鑫国河北省中药配方颗粒技术创新中心中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心河北中医药大学华北制药河北华维健康产业有限公司

目的:采用HPLC指纹图谱和多成分含量测定法评价地胆草的质量。方法:采用AgilentPoroshell120EC-C18(250mm×4.6mm,4μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0m L/min;柱温为35℃;检测波长为220、326nm;建立15批地胆... 详细信息

目的:采用HPLC指纹图谱和多成分含量测定法评价地胆草的质量。方法:采用AgilentPoroshell120EC-C18(250mm×4.6mm,4μm)色谱柱;以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为1.0m L/min;柱温为35℃;检测波长为220、326nm;建立15批地胆草药材的指纹图谱,并同时测定13个成分的含量。结果:建立的15批地胆草样品指纹图谱标定了22个共有峰,指认了其中13个成分。15批样品的相似度在0.936以上。定量分析方法学表明所建的方法适用于地胆草的含量测定,不同批次样品间有机酸类、黄酮类成分含量差异较大。结论:该研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法快速、准确,适用于地胆草的定性定量分析,可为地胆草的质量控制提供参考。

关键词：地胆草指纹图谱含量测定

基于电子鼻结合顶空-气相色谱-质谱法研究草果仁3种不同炮制品的差异

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中草药 2024年第15期55卷 5070-5082页

作者：任东姜晓娅雷京奇牛丽颖河北中医药大学河北省中药配方颗粒技术创新中心中药材品质评价与标准化河北省工程研究中心

目的探究草果Tsaoko Fructus仁不同炮制品（清炒草果仁、姜制草果仁和麸炒草果仁）的气味特征和挥发性成分之间的差异与特点。方法采用电子鼻联合顶空-气相色谱-质谱法（headspace-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GCMS）对... 详细信息

目的探究草果Tsaoko Fructus仁不同炮制品（清炒草果仁、姜制草果仁和麸炒草果仁）的气味特征和挥发性成分之间的差异与特点。方法采用电子鼻联合顶空-气相色谱-质谱法（headspace-gas chromatography-mass spectrometry,HS-GCMS）对清炒草果仁、姜制草果仁和麸炒草果仁共计30批草果仁不同炮制品中的成分进行检测，利用主成分分析（principal component analysis,PCA）、Loadings和绘制气味雷达图等方法分析电子鼻信号响应结果，同时对HS-GC-MS鉴定出的化合物做正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA），以筛选变量重要性投影（variable importance projection,VIP）值>1为标准筛选潜在差异性成分。结果电子鼻数据分析结果显示，气味差异主要集中在传感器W5S、W1W、W2W，表明草果仁不同炮制品在气味特征上存在差异。HS-GC-MS鉴定出66个化合物，其中共有化合物35个，进一步通过OPLS-DA对清炒草果仁、姜制草果仁和麸炒草果仁进行两两比较，筛选出差异成分25个。根据对挥发性差异成分与气味进行的Pearson相关性分析，结果显示区分草果仁3种不同炮制品的基础物质主要包括桉叶油醇、邻伞花烃等。据此推测，部分醇类、萜烯类、醛类和酚类成分可能通过引起传感器W5S、W1W、W2W的变化，进而实现对草果仁不同炮制品的区分。相关性热图分析结果进一步证实了这一推测。经查阅文献，选取了水芹烯、桉叶油醇、芳樟醇、萜品油烯、α-松油醇、柠檬醛、2,3-二氢-1H-茚-4-甲醛、甲基庚烯酮和月桂烯9种成分，通过系统的研究和对比分析，揭示了这9种成分与草果仁不同炮制品功效的关联。结论采用多元统计分析方法，研究草果仁3种不同炮制品-传感器响应值-挥发性成分之间的相关性，探究草果仁不同炮制品挥发性成分的差异，为草果仁不同炮制品临床应用提供新思路。

关键词：草果仁炮制品挥发性成分气味特征电子鼻顶空-气相色谱-质谱法多元统计分析差异物质主成分分析正交偏最小二乘法-判别分析 Pearson相关分析桉叶油醇邻伞花烃水芹烯芳樟醇萜品油烯 α-松油醇柠檬醛 2,3-二氢-1H-茚-4-甲醛甲基庚烯酮月桂烯