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体外产生可移植的人造血干细胞的研究进展

中国实验血液学杂志 2020年第1期28卷 320-324页

作者：张庆云董芳 Hideo Ema 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 实验血液学国家重点实验室国家血液病临床医学研究中心北京协和医学院干细胞与再生医学系天津300020

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)移植被广泛应用于恶性血液病、非恶性衰竭性血液疾病以及非血液系统疾病(遗传性疾病和某些实体瘤)的治疗,并取得了良好疗效。临床上常用的移植HSC源有骨髓、动员的外周血及脐带血。但是,由于这... 详细信息

造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)移植被广泛应用于恶性血液病、非恶性衰竭性血液疾病以及非血液系统疾病(遗传性疾病和某些实体瘤)的治疗,并取得了良好疗效。临床上常用的移植HSC源有骨髓、动员的外周血及脐带血。但是,由于这些组织中HSC含量很少,及组织相容性抗原特异的供者稀缺等问题,导致许多病人无法获得足够量的组织相容性匹配的HSC。因此,如何通过体外培养获得满足临床需要的HSC已成为近年来学者们研究的热点问题。目前体外产生HSC的主要来源为人多能干细胞(human pluripotent stem cell,hPSC),包括人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)和人诱导多潜能干细胞(human induced pluripotent stem cell,hiPSC),并且有望成为HSC移植的新来源。虽然有研究首次证实通过iPSC可以在体外产生HSC,但是体外产生HSC的功能特性以及其产生的分子机制的探究仍是一个巨大挑战。本文旨在对近年来体外产生人HSC策略和方法的最新研究进展作一综述,并就其存在的问题及面临的挑战展开讨论。

关键词：造血干细胞体外产生人多能干细胞人胚胎干细胞人诱导多潜能干细胞

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从米糠中提取菲丁并制取肌醇

化学世界 1990年第11期31卷 518-521页

作者：邵建华吴金谷江苏省如皋轻工研究所

本文从实用角度出发,详细叙述了从米糠中提取菲丁并制取肌醇的工艺原理和工艺流程;具体介绍了菲丁、肌醇生产的操作方法和注意事项;分析了影响菲丁、肌醇得率和质量的因素;对菲丁和肌醇的工业化生产具有一定的指导意义。

关键词：菲丁肌醇米糠

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新型除草剂苯黄隆的合成

化学世界 1992年第3期33卷 117-119页

作者：孔繁蕾胡兴华王兰青曹维群江苏省激素研究所 213200

本文报道了以双氰胺和糖精为基本原料,经七步反应合成除草剂苯黄隆的方法及其工艺操作条件和光谱测试数据。

关键词：除草剂苯黄隆合成磺酰脲

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我国山药类药材对动物降血糖和降血脂的作用

植物资源与环境 1994年第4期3卷 59-60页

作者：杭悦宇江苏省植物研究所

我国山药类药材对动物降血糖和降血脂的作用杭悦宇（江苏省植物研究所，中国科学院植物研究所，南京２１００１４）ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｏｎｌｏｗｉｎｇｔｈｅｂｌｏｏｄｓｕｇａｒａｎｄｂｌｏｏｄ... 详细信息

我国山药类药材对动物降血糖和降血脂的作用杭悦宇（江苏省植物研究所，中国科学院植物研究所，南京２１００１４）ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｏｎｌｏｗｉｎｇｔｈｅｂｌｏｏｄｓｕｇａｒａｎｄｂｌｏｏｄｌｉｐｉｄｓｌｅｖｅｌｏｆＲｈｉｚ...

关键词：山药血糖血脂

靶向生存素基因的shRNA抑制膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长

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江苏医药 2007年第11期33卷 1126-1128,F0003页

作者：杨慎敏温端改侯建全何军岑建农苏州大学附属第一医院泌尿外科 215006 江苏省血液研究所

目的观察稳定转染靶向生存素（survivin）基因短发夹RNA（shRNA）对膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法将靶向生存素基因的shRNA真核表达载体转染人膀胱癌细胞T24并获得稳定的单克隆细胞,实时定量PCR检测转染后生存素mRNA表达的变化... 详细信息

目的观察稳定转染靶向生存素（survivin）基因短发夹RNA（shRNA）对膀胱癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法将靶向生存素基因的shRNA真核表达载体转染人膀胱癌细胞T24并获得稳定的单克隆细胞,实时定量PCR检测转染后生存素mRNA表达的变化;分别将转染和未转染细胞种植于裸鼠皮下,观察肿瘤生长情况;通过免疫组化检测肿瘤组织生存素蛋白表达的差异。结果RNA干扰使T24细胞生存素表达下调92.86%;未转染组在20～29d均形成体积超过2000mm3的肿瘤,转染组在43d时经病理证实3只裸鼠形成肿瘤,最大体积62.5mm3;免疫组化显示转染组形成的肿瘤生存素蛋白表达明显减弱。结论靶向生存素基因的shRNA明显下调了生存素表达,并抑制了膀胱癌细胞T24裸鼠移植瘤的生长。

关键词：生存素核糖核酸干扰短发夹核糖核酸膀胱癌

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基因DCAF8在多发性骨髓瘤中的临床意义

中国肿瘤生物治疗杂志 2021年第10期28卷 990-997页

作者：孙浩王可飞方腾郝牧北京协和医学院暨中国医学科学院血液病医院/中国医学科学院血液学研究所实验血液学国家重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心天津300020

目的:寻找多发性骨髓瘤(MM)基因芯片数据集中的潜在致病基因、疾病诊断和预后相关因子并阐明其作用机制。方法:获取基因芯片数据集GSE13591和Zhan Myeloma,使用R语言进行基因差异表达分析。对共同高表达基因进行Meta分析,得到P值中位秩... 详细信息

目的:寻找多发性骨髓瘤(MM)基因芯片数据集中的潜在致病基因、疾病诊断和预后相关因子并阐明其作用机制。方法:获取基因芯片数据集GSE13591和Zhan Myeloma,使用R语言进行基因差异表达分析。对共同高表达基因进行Meta分析,得到P值中位秩次TOP10基因。CCLE数据库分析TOP10基因在各肿瘤细胞系中的mRNA表达情况,筛选出蛋白酶体通路相关基因8(DCAF8)。cBioPortal数据库中分析DCAF8基因在各肿瘤细胞系的突变率。WB检测DCAF8蛋白在骨髓瘤细胞系中的表达情况。SPSS和Graph Pad软件分析DCAF8表达量和MM患者临床特征之间的相关性,进行受试者工作特征曲线(ROC曲线)绘制和生存分析。R语言Custer Profiler Package和Metascape数据库对DCAF8互作蛋白基因和共表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。结果:数据集GSE13591和Zhan Myeloma的上调基因取交集得到477个共同高表达基因。在合并数据集中对上述基因进行Meta分析,得到P值中位秩次TOP10基因,DCAF8在MM细胞系中的平均表达水平最高。DCAF8基因在浆细胞骨髓瘤中的突变率位于各肿瘤细胞系的第一位。DCAF8蛋白在多种MM细胞系中的表达量显著升高(P<0.01)。DCAF8表达量与MM患者的肿瘤负荷显著正相关,1q21扩增阳性组的DCAF8的表达量显著高于1q21阴性组。ROC曲线显示DCAF8的表达水平可以很好地区分MM患者和正常人(P<0.01)。DCAF8高表达组比DCAF8低表达组中位生存时间显著缩短。蛋白互作网络显示DCAF8可与XPO1蛋白直接相互作用。GO和KEGG功能富集分析结果表明,DCAF8与蛋白酶体功能、剪切体活性、组蛋白乙酰化酶活性、RNA转运等功能相关。结论:DCAF8在MM中显著高表达,其表达水平可以很好地区分MM患者和正常人;其高表达与MM患者的生存预后显著负相关,且与1q21扩增和XPO1蛋白相关。

关键词：多发性骨髓瘤蛋白酶体通路相关基因8 泛素-蛋白酶体通路 XPO1蛋白

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蓝莓自然发酵酒中优良酵母菌的筛选及鉴定

中国食品学报 2013年第4期13卷 202-206页

作者：王英周剑忠朱佳娜马艳弘黄开红江苏省农业科学研究院农产品加工研究所南京210014

从自然发酵蓝莓果酒中分离筛选优良酵母,为开发蓝莓果酒提供酵母菌资源。采用镜检和杜氏管发酵法初筛,分离出19株酵母菌。通过产酒精能力、耐性能力测试进行复筛,最终确定LM-8为最优菌株。采用18S rDNA序列测定及系统发育分析,对所筛选... 详细信息

从自然发酵蓝莓果酒中分离筛选优良酵母,为开发蓝莓果酒提供酵母菌资源。采用镜检和杜氏管发酵法初筛,分离出19株酵母菌。通过产酒精能力、耐性能力测试进行复筛,最终确定LM-8为最优菌株。采用18S rDNA序列测定及系统发育分析,对所筛选菌株进行分子生物学鉴定,结果酵母菌LM-8与酿酒酵母(Z75578)的遗传距离最近,两者之间的同源性为99%。该菌株被鉴定为酵母属的酿酒酵母。

关键词：蓝莓果酒分离筛选酿酒酵母 18S rDNA

有丝分裂原激酶MEKK2调节白细胞介素2生成的研究

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中华血液学杂志 2005年第5期26卷 296-298页

作者：魏旭东范瑞华朱兴虎李玉富张䶮莉高全立刘艳艳汪萍宋永平河南省肿瘤医院血液科河南省血液病研究所郑州450003

目的探讨有丝分裂原激酶MEKK2对IL-2生成的影响。方法用MEKK2和JNK激酶活性测定、荧光素酶报告基因检测、逆转录聚合酶链反应及Westernblot等方法,检测在PHA/抗CD28抗体刺激Jurkat细胞后MEKK2对IL2转录和翻译的影响。结果经PHA/抗CD28... 详细信息

目的探讨有丝分裂原激酶MEKK2对IL-2生成的影响。方法用MEKK2和JNK激酶活性测定、荧光素酶报告基因检测、逆转录聚合酶链反应及Westernblot等方法,检测在PHA/抗CD28抗体刺激Jurkat细胞后MEKK2对IL2转录和翻译的影响。结果经PHA/抗CD28抗体刺激后,亲本Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性分别增加4倍和5倍,而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞AP1和IL-2启动子荧光素酶报告基因活性仅各增加1倍。经PHA/抗CD28抗体刺激后,亲本Jurkat细胞IL-2mRNA的转录和IL-2蛋白的表达明显增加,而MEKK2功能域灭活的Jurkat细胞I-L2mRNA的转录和IL-2蛋白的表达无明显增加。结论MEKK2在IL-2的生成过程中起重要的调节作用,MEKK2可以作为药物作用的靶点,从而筛选有效药物抑制免疫反应,提高移植物抗宿主病和自身免疫性疾病治疗的疗效。

关键词：有丝分裂原激酶 MEKK 白细胞介素2 自身免疫性疾病

CD3^+、CD4^+和CD8^+T细胞Vβ亚家族中PD-1免疫表型检测方法的建立

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中国病理生理杂志 2018年第12期34卷 2300-2304页

作者：陈少华黄静颖谭家雄陈友纯钟隽卢育洪郁志李扬秋暨南大学基础医学院血液学研究所广东广州510632 暨南大学附属第一医院血液科广东广州510632

目的:建立分析CD3^+、CD4^+和CD8^+T细胞Vβ亚家族中免疫抑制性受体程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)分子免疫表型的方法,从而了解人体外周血T细胞谱系中PD-1表型细胞的分布频率。方法:收集健康个体(HI)外周血10例,利用抗CD45、CD3、CD4、CD8... 详细信息

目的:建立分析CD3^+、CD4^+和CD8^+T细胞Vβ亚家族中免疫抑制性受体程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)分子免疫表型的方法,从而了解人体外周血T细胞谱系中PD-1表型细胞的分布频率。方法:收集健康个体(HI)外周血10例,利用抗CD45、CD3、CD4、CD8、PD-1等多色荧光流式单抗,以及T细胞受体(TCR) Vβ谱系试剂盒[IOTestBeta Mark TCR VβRepertoire Kit,共8管,每一管均为FITC和PE偶联的复合抗体(A～H),每一管复合抗体包含3个TCR Vβ亚家族的抗体],检测T细胞亚群TCR Vβ亚家族中PD-1的分布情况。结果:在10例HI的检测中,CD3^+、CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+T细胞亚群中检测的24个TCR Vβ亚家族总和符合试剂盒所提供的Quick Reference Card数据,初步结果显示,HI中CD3^+T细胞主要优势TCR谱系是Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5. 1、Vβ13. 1和Vβ13. 2;而在CD3^+CD4^+T细胞中的优势利用主要集中在Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5. 1和Vβ13. 1;在CD3^+CD8^+T细胞中则主要为Vβ1、Vβ2、Vβ3、Vβ9、Vβ13. 1和Vβ13. 2等亚家族。进一步分析显示PD-1^+细胞在HI的CD3^+、CD3^+CD4^+和CD3^+CD8^+T细胞24个TCR Vβ亚家族中均可以检测到,PD-1^+细胞在T细胞各亚群中分布频率有个体差异,在CD4^+T细胞中,以Vβ5. 2^+T细胞的分布频率较高,而在CD8^+T细胞中,以Vβ11^+和Vβ13. 6^+T细胞的分布频率较高。结论:本项工作利用健康人样本成功建立了多色荧光流式细胞术检测T细胞亚群TCR Vβ谱系中免疫抑制性受体PD-1分子免疫表型的方法,为进一步应用于分析白血病等病人TCR Vβ谱系的免疫抑制特点提供了新方法。

关键词：流式细胞术 T细胞受体程序性细胞死亡蛋白1 免疫表型