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亚精胺通过PI3K/AKT/mTOR通路调节自噬抑制心肌细胞肥大的机制研究

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中国医院药学杂志 2024年

作者：朱磊谌赟童婷谈文娟程波刘敏江汉大学附属医院全科医学科

目的：探讨亚精胺通过调节自噬对心肌细胞肥大的作用及其机制。方法：异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）处理心肌细胞H9c2，构建心肌细胞肥大模型。RT-qPCR检测心肌肥大标志基因心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide，ANP）和β型... 详细信息

目的：探讨亚精胺通过调节自噬对心肌细胞肥大的作用及其机制。方法：异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）处理心肌细胞H9c2，构建心肌细胞肥大模型。RT-qPCR检测心肌肥大标志基因心房钠尿肽（atrial natriuretic peptide，ANP）和β型肌球蛋白重链（β-myosin heavy chain，β-MHC）mRNA的表达，进行模型鉴定。不同浓度亚精胺处理H9c2细胞，测量各组细胞表面积，CCK-8检测细胞活力，RT-qPCR检测细胞中ANP和β-MHC mRNA的表达，Western blot检测细胞中自噬相关蛋白LC3-I、LC3-II的表达。为进一步验证亚精胺对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响，用PI3K激活剂740Y-P处理细胞，流式细胞术检测细胞凋亡，RT-qPCR检测细胞中ANP和β-MHC mRNA的表达，Western blot检测细胞中自噬相关蛋白LC3-I、LC3-II、p62和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白PI3K、p-PI3K、mTOR、p-mTOR的表达。结果：亚精胺干预后能够提高细胞活力和细胞内LC3-II/I水平（P<0.01），降低细胞表面积及ANP和β-MHC mRNA的表达（P<0.05），且呈剂量依赖性。PI3K激活剂740Y-P干预后，细胞凋亡率、细胞中ANP和β-MHC mRNA表达水平、p62和p-mTOR蛋白表达水平升高（P<0.01），LC3-II/I水平降低（P<0.01），而SPD与740Y-P联合干预能够逆转740Y-P的上述作用（P<0.01）。结论：亚精胺能够通过激活细胞自噬抑制心肌细胞肥大，其机制可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

关键词：亚精胺自噬心肌肥大 PI3K/AKT/mTOR信号通路

亚精胺通过miR-451介导自噬缓解阿霉素诱导的心肌细胞衰老

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华中科技大学学报(医学版) 2024年

作者：戴婷徐亚宁谌赟蔡毅刘敏江汉大学附属医院武汉市第六医院综合科

目的评估亚精胺（spermidine，SPD）对miR-451-5p的调控作用，及通过调控miR-451-5p对衰老的心肌细胞增殖活性和自噬的影响。方法阿霉素处理大鼠心肌H9C2细胞，构建心脏衰老细胞模型。将细胞分为对照（Control）组，模型（Model）组... 详细信息

目的评估亚精胺（spermidine，SPD）对miR-451-5p的调控作用，及通过调控miR-451-5p对衰老的心肌细胞增殖活性和自噬的影响。方法阿霉素处理大鼠心肌H9C2细胞，构建心脏衰老细胞模型。将细胞分为对照（Control）组，模型（Model）组，阴性对照（NC）+SPD组和miR-451-5p抑制剂（Inhibitor）+SPD组。除Control组外，其余组均采用阿霉素构建心脏衰老细胞模型，NC+SPD组和Inhibitor+SPD组细胞造模后分别转染miR-NC和miR-451-5pinhibitor，并用10μmol/L的SPD处理24h。CCK8检测细胞增殖活性，β-半乳糖苷酶染色检测心肌细胞衰老情况，Westernblot检测细胞中心脏衰老标志物P21蛋白的表达，qRT-PCR检测细胞中miR-451-5p、自噬标志物（LC3Ⅱ和Beclin1）的mRNA表达。结果与正常H9C2细胞相比，心脏衰老细胞模型中miR-451-5p低表达（P<0.05）。与Control组相比，Model组细胞增殖活性下降（P<0.05），SA-β-gal阳性的染色面积增加，P21蛋白表达上调（P<0.05），miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1mRNA表达下调（均P<0.05）。与Model组相比，NC+SPD组细胞增殖活性增加，SA-β-gal阳性的染色面积减少（P<0.05），P21蛋白表达下调（P<0.05），miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1mRNA表达上调（均P<0.05）。与NC+SPD组相比，Inhibitor+SPD组细胞增殖活性下降（P<0.05），SA-β-gal阳性的染色面积增加，P21蛋白表达上调（P<0.05），miR-451-5p、LC3Ⅱ和Beclin1mRNA表达下调（均P<0.05）。结论亚精胺可通过上调miR-451-5p的表达促进心脏衰老模型细胞的增殖和自噬，进而缓解心肌细胞的衰老。

关键词：心肌细胞亚精胺 miR-451 自噬细胞衰老

EGFR通路在动脉粥样硬化机制中的作用研究

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中国免疫学杂志 2024年第2期40卷 278-282页

作者：涂艳虹程波江汉大学附属医院武汉市第六医院综合科武汉430015

目的:通过巨噬细胞构建泡沫细胞,探讨EGFR通路在动脉粥样硬化机制中的作用。方法:采用C57BL/6J小鼠巨噬细胞诱导泡沫细胞,油红O染色鉴定模型。qRT-PCR、Western blot检测各靶点干扰效率。qRT-PCR检测IL-6和TNF-α表达。Western blot检测... 详细信息

目的:通过巨噬细胞构建泡沫细胞,探讨EGFR通路在动脉粥样硬化机制中的作用。方法:采用C57BL/6J小鼠巨噬细胞诱导泡沫细胞,油红O染色鉴定模型。qRT-PCR、Western blot检测各靶点干扰效率。qRT-PCR检测IL-6和TNF-α表达。Western blot检测EGFR、p-EGFR、CHOP、ATF4、EIF2α、p-EIF2α和Cyt-C蛋白表达。流式细胞术检测ox-LDL的提取和活性氧的生成。ELISA检测IL-6和TNF-α含量。结果:EGFR抑制剂转染细胞后,EGFR表达下降(P<0.01),其中EGFR sh-RNA3干扰效率最好。EGFR抑制剂(AG1478或EGFR shRNA3)能够显著降低细胞对ox-LDL的提取(P<0.01),显著降低IL-6、TNF-α和活性氧水平(P<0.01),抑制细胞质中Cyt-C表达,显著降低p-EIF2α、Chop和ATF4表达(P<0.01)。结论:EGFR通路可能通过降低炎症和氧化应激减轻动脉粥样硬化。

关键词：巨噬细胞源性泡沫细胞动脉粥样硬化炎症

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机器学习在癫痫方面的应用进展

中华神经科杂志 2024年第2期57卷 185-191页

作者：董志远阳勇于跃王雁青岛大学附属医院神经内科青岛266000 青岛市市立医院康复科青岛266011

癫痫是由脑部神经元高度同步化异常放电引起的发作性、短暂性、刻板性的脑功能失调,发作时机难以预测,目前主要治疗方式为抗癫痫药物与手术治疗。其诊断和治疗需要大量的辅助手段与临床经验。在癫痫的发作预测、药物治疗预后、手术治疗... 详细信息

癫痫是由脑部神经元高度同步化异常放电引起的发作性、短暂性、刻板性的脑功能失调,发作时机难以预测,目前主要治疗方式为抗癫痫药物与手术治疗。其诊断和治疗需要大量的辅助手段与临床经验。在癫痫的发作预测、药物治疗预后、手术治疗评估等多个临床方面,机器学习可以通过对数据的深层次挖掘、纳入多个临床和影像因素、建立对应的学习模型,提高癫痫的诊断效率与准确性,实现抗癫痫药物的个体化应用,改善癫痫患者的术前评估与预后情况。

关键词：癫痫脑电图描记术机器学习抗发作药物

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肌动蛋白成核因子Spire的研究进展

生理学报 2024年第2期76卷 341-345页

作者：庞涛张丽霞白安娜杨文郝利霞内蒙古医科大学附属医院康复科呼和浩特010030

肌动蛋白成核因子主要分为3类:Arp2/3复合体、Spire和Formin蛋白。其中Spire通过稳定的纵向四聚体成核组装微丝,将肌动蛋白结合到微丝生长端。早在1999年Wellington等人就发现Spire是肌动蛋白的成核剂,然而多年来的研究大多数着眼于Arp... 详细信息

肌动蛋白成核因子主要分为3类:Arp2/3复合体、Spire和Formin蛋白。其中Spire通过稳定的纵向四聚体成核组装微丝,将肌动蛋白结合到微丝生长端。早在1999年Wellington等人就发现Spire是肌动蛋白的成核剂,然而多年来的研究大多数着眼于Arp2/3、Formin蛋白,作为肌动蛋白成核因子的一员,关于Spire的相关研究相对较少。有研究显示,Spire蛋白通过合成肌动蛋白参与到囊泡运输过程。近几年还有研究发现,Spire在神经发育方面也有着重要作用。本文希望通过对Spire的结构、表达、功能以及与疾病的关联等方面的研究进行梳理,以便找到未来针对Spire研究富有意义的可能方向。

关键词：肌动蛋白成核因子 Spire-2 神经元

我国康复医学卫生资源与服务能力发展现状及预测分析

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中国康复医学杂志 2024年第8期39卷 1219-1222页

作者：刘西花岳寿伟山东中医药大学附属医院康复科山东省济南市250014 山东大学齐鲁医院康复科

康复医学是卫生健康事业的重要组成部分,是疾病“三级预防”体系的重要环节,疾病早期康复治疗可以避免残疾发生或减轻残疾程度,改善患者生活质量,减轻家庭和社会的经济负担^([1])。新医改以来,国家先后出台了一系列推动康复医学发展的政... 详细信息

康复医学是卫生健康事业的重要组成部分,是疾病“三级预防”体系的重要环节,疾病早期康复治疗可以避免残疾发生或减轻残疾程度,改善患者生活质量,减轻家庭和社会的经济负担^([1])。新医改以来,国家先后出台了一系列推动康复医学发展的政策,康复医学服务体系基本完善,服务能力不断提升^([2—3])。同时,人民群众健康需求的个性化、多样化趋势,以及人口老龄化的不断加剧,对康复医学的发展带来了新的机遇和挑战^([4—5])。

关键词：康复医学三级预防残疾程度健康需求新医改早期康复治疗患者生活质量多样化趋势

蒙花苷通过抑制Hsa_circ_0001359/TGF-β1抗前列腺纤维化的研究

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中国现代应用药学 2024年第16期41卷 2199-2205页

作者：于洋邵显姝曾晶冯敏韩俊陈镜楼张燕南甘家乐方登攀刘建华江汉大学附属医院药学部武汉430015 江汉大学老年医学研究所武汉430056 江汉大学药学系武汉430056

目的观察蒙花苷对Hsa_circ_0001359水平和TGF-β1表达的抑制效应,揭示其改善良性前列腺增生腺体纤维化的作用机制。方法建立睾酮诱导的小鼠前列腺增生和人前列腺上皮细胞株增殖模型,Masson和天狼猩红染色观察腺体胶原沉积,分光光度法检... 详细信息

目的观察蒙花苷对Hsa_circ_0001359水平和TGF-β1表达的抑制效应,揭示其改善良性前列腺增生腺体纤维化的作用机制。方法建立睾酮诱导的小鼠前列腺增生和人前列腺上皮细胞株增殖模型,Masson和天狼猩红染色观察腺体胶原沉积,分光光度法检测腺体羟脯氨酸含量,免疫组织化学检测腺体上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)标记物的表达,实时荧光定量PCR检测腺体EMT转录因子及上皮细胞EMT标记物mRNAs,以及Hsa_circ_0001359的水平,蛋白印迹法检测TGF-β1的表达。结果在动物水平,与正常对照组比较,模型组前列腺胶原沉积和EMT特征明显,羟脯氨酸的含量以及TGF-β1的mRNA水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各蒙花苷组均改善腺体的胶原沉积与EMT,显著降低羟脯氨酸的含量以及TGF-β1的mRNA水平(P<0.01)。在细胞水平,50 mg·L^(−1)的蒙花苷显著抑制睾酮诱导的上皮细胞增殖和EMT,降低Hsa_circ_0001359的水平,抑制TGF-β1的表达(P<0.01或<0.05)。结论蒙花苷能够通过抑制Hsa_circ_0001359/TGF-β1而改善前列腺纤维化。

关键词：蒙花苷 Hsa_circ_0001359 前列腺纤维化

富血小板纤维蛋白联合柚皮苷对牙髓干细胞成骨分化及BMPs-ERK5通路的影响

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中国老年学杂志 2024年第8期44卷 1907-1911页

作者：范文娟杨明曹直陈昊江汉大学附属医院武汉市第六医院口腔科湖北武汉430015 江汉大学附属医院武汉市第六医院综合科湖北武汉430015

目的探究富血小板纤维蛋白(PRF)联合柚皮苷(NRG)对牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化及骨形态发生蛋白(BMPs)-细胞外信号调节激酶(ERK)5通路的影响。方法将DPSCs分为对照(C)组、脂多糖(LPS)组、PRF组、NRG组、PRF+NRG组、PRF+NRG+ERK5通路抑制... 详细信息

目的探究富血小板纤维蛋白(PRF)联合柚皮苷(NRG)对牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化及骨形态发生蛋白(BMPs)-细胞外信号调节激酶(ERK)5通路的影响。方法将DPSCs分为对照(C)组、脂多糖(LPS)组、PRF组、NRG组、PRF+NRG组、PRF+NRG+ERK5通路抑制剂(BIX02189)组,分别加入PRF、NRG和(或)BIX02189干预。7 d后,噻唑蓝(MTT)法、碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色分别分析DPSCs增殖活性、ALP活性及钙质沉积程度;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测Runt相关转录因子(Runx)2、骨桥蛋白(OPN)和胶原蛋白Ⅰ(COL1)mRNA表达;Western印迹检测DPSCs中Runx2、OPN、COL1及BMPs-ERK5通路蛋白表达。结果PRF组、NRG组、PRF+NRG组ALP和茜素红染色均呈阳性反应,且PRF+NRG组阳性反应更强;C组、PRF+NRG+BIX02189组均呈弱阳性;LPS组均呈阴性。与C组相比,LPS组DPSCs细胞活力、ALP活性、钙质沉积程度、Runx2、OPN、COL1 mRNA和蛋白水平、BMP2、BMP7、BMP9、p-丝裂原激活蛋白激酶(MEK)5/MEK5、p-ERK5/ERK5蛋白水平显著较低(P<0.05);PRF、NRG或PRF+NRG干预均可显著增加DPSCs细胞活力、ALP活性、钙质沉积程度、Runx2、OPN、COL1 mRNA和蛋白水平、BMP2、BMP9、p-MEK5/MEK5、p-ERK5/ERK5蛋白水平,其中PRF+NRG效果更优,而BIX02189可减弱PRF+NRG的上述作用。结论PRF联合NRG可刺激BMPs-ERK5通路活化,通过增强ALP、Runx2、OPN、COL1等表达或活性,促进炎性环境下DPSCs的成骨活性。

关键词：富血小板纤维蛋白柚皮苷牙髓干细胞骨形态发生蛋白细胞外信号调节激酶5 成骨分化

基于真实世界的急性期针灸治疗特发性面神经麻痹：队列研究

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中国针灸 2024年

作者：胡林雁孙建华裴丽霞陈璐南京中医药大学附属医院/江苏省中医院针灸康复科

目的：观察急性期针灸对特发性面神经麻痹（IFP）的影响。方法：根据是否在急性期内接受针灸干预将198例IFP患者分为早期针灸组（118例）和非早期针灸组（80例），经倾向性评分匹配（PSM），最终早期针灸组与非早期针灸组各纳入70例。... 详细信息

目的：观察急性期针灸对特发性面神经麻痹（IFP）的影响。方法：根据是否在急性期内接受针灸干预将198例IFP患者分为早期针灸组（118例）和非早期针灸组（80例），经倾向性评分匹配（PSM），最终早期针灸组与非早期针灸组各纳入70例。在西医常规治疗基础上，两组均接受针灸治疗，早期针灸组于急性期（病程≤7 d）介入针灸，非早期针灸组于非急性期（病程＞7 d）介入针灸。急性期予温针灸治疗，穴取患侧翳风、下关、合谷、足三里；非急性期予电针治疗，穴取患侧攒竹、丝竹空、阳白等，予疏密波，频率2 Hz/100 Hz。比较两组患者治疗前、治疗1周和治疗4周后House-Brackmann（H-B）面神经功能分级、Sunnybrook面神经功能评分和面部残疾指数（FDI）评分。并于治疗1、4周后评定两组临床疗效。结果：治疗1、4周后，两组患者H-B面神经功能分级均较治疗前改善（P康复。

关键词：特发性面神经麻痹急性期针灸真实世界研究倾向性评分匹配