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秋水仙碱通过激活AMPK减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤

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南方医科大学学报 2024年第2期44卷 226-235页

作者：陈国栋罗素新重庆医科大学附属第一医院心血管内科重庆400016

目的探究秋水仙碱(CCC)对心肌缺血再灌注损伤(I/R)的影响与相关机制。方法采用缺氧复氧(H/R)的方式在H9C2细胞上模拟缺血再灌注损伤,使用3 nmol/L秋水仙碱对行H/R处理的细胞进行干预;采用手术的方式在雄性C57/BL6小鼠上建立心肌缺血再... 详细信息

目的探究秋水仙碱(CCC)对心肌缺血再灌注损伤(I/R)的影响与相关机制。方法采用缺氧复氧(H/R)的方式在H9C2细胞上模拟缺血再灌注损伤,使用3 nmol/L秋水仙碱对行H/R处理的细胞进行干预;采用手术的方式在雄性C57/BL6小鼠上建立心肌缺血再灌注模型,将32只小鼠随机分为:假手术(SO)组,I/R组、I/R+CCC组和I/R+CCC+Dorsomorphin(DSMP)组,每组8只。使用CCK-8检测细胞活力,使用Western blot检测AMPK及其磷酸化水平、氧化应激指标(NOX4、NRF2、SOD2)和凋亡指标(BAX、Bcl-2、cleaved caspase-3),使用商用试剂盒检测心肌组织ATP含量,使用免疫荧光染色检测心肌组织8-OHdG和cleaved caspase-3阳性率,分离心肌线粒体和胞浆后分别检测线粒体BAX(Mito-BAX)和胞浆细胞色素C(Cyt-Cyto C),使用心脏超声评估心脏功能,使用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液染色评估梗死面积,使用商用试剂盒检测血清乳酸脱氢酶(LDH)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量,为明确AMPK在其中的作用,使用DSMP抑制小鼠体内AMPK活性。结果体外实验中,H/R可以导致AMPK磷酸化水平、NRF2、SOD2和Bcl-2表达水平和细胞活力显著降低(P<0.05),并提高NOX4、BAX、cleaved caspase-3表达水平(P<0.05);秋水仙碱处理可以减轻H/R的损伤效应(P<0.05)。体内实验中,与SO组相比,I/R组AMPK磷酸化水平、ATP含量、NRF2、SOD2和Bcl-2表达水平、心脏功能均显著降低(P<0.05),NOX4、Mito-BAX、Cyt-Cyto C、BAX、cleaved caspase-3表达水平,心肌切片8-OHdG和cleaved caspase-3阳性染色率,心肌梗死面积,血清LDH和cTnT含量显著升高(P<0.05),秋水仙碱治疗可以逆转I/R带来的损伤效应(P<0.05),但DSMP可以抵消秋水仙碱的保护作用(P<0.05)。结论秋水仙碱可以通过激活AMPK减轻氧化应激和凋亡来减轻小鼠心肌缺血再灌注损伤,保护心功能。

关键词：秋水仙碱心肌缺血再灌注损伤 AMPK 氧化应激凋亡

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南瓜多糖调控Nrf2/γ-GCS通路对缺氧/复氧心肌细胞损伤的影响

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中国免疫学杂志 2024年第9期 1871-1875页

作者：郑婉杨珊珊林云魏俊萍颜亚妮海南医科大学第一附属医院心血管内科

目的：探讨南瓜多糖（PP）调控Nrf2/γ-GCS通路对缺氧/复氧（H/R）诱导的心肌细胞（H9C2）损伤的影响。方法：建立HR细胞模型，确定PP给药浓度，将H9C2细胞分为Control组、H/R组、南瓜多糖组（PP组，2 mg/L PP）、Nrf2抑制剂组（ML385组... 详细信息

目的：探讨南瓜多糖（PP）调控Nrf2/γ-GCS通路对缺氧/复氧（H/R）诱导的心肌细胞（H9C2）损伤的影响。方法：建立HR细胞模型，确定PP给药浓度，将H9C2细胞分为Control组、H/R组、南瓜多糖组（PP组，2 mg/L PP）、Nrf2抑制剂组（ML385组，2.0μmol/L ML385）、PP+ML385组（2.0 mg/L PP+2.0μmol/L ML385），分别检测H9C2细胞凋亡、线粒体膜电位变化、氧化应激（LDH、MDA、SOD、ROS）、炎症因子（TNF-α、IL-6、IL-1β）水平及Nrf2、γ-GCS蛋白表达。结果：与Control组比较，H/R组细胞形态发生变化，细胞损伤及线粒体膜电位下降，H9C2细胞活力、SOD及Nrf2、γ-GCS蛋白表达水平显著降低，细胞凋亡率、LDH、MDA、ROS及TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著升高（P<0.05）；与H/R组比较，PP组细胞损伤减轻，线粒体膜电位恢复，H9C2细胞活力、SOD及Nrf2、γ-GCS蛋白表达水平显著升高，细胞凋亡率、LDH、MDA、ROS及TNF-α、IL-6、IL-1β水平显著降低（P<0.05），而ML385与PP作用效果相反，ML385可逆转PP的抗氧化、抗炎作用。结论：PP上调Nrf2/γ-GCS通路发挥抗氧化、抗炎作用，减轻H/R诱导的H9C2细胞损伤。

关键词：南瓜多糖缺氧/复氧心肌细胞损伤 Nrf2/γ-GCS通路

Mettl3通过PI3K/AKT信号通路调控Ang Ⅱ诱导肾脏纤维化的机制研究

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中华心血管病杂志 2024年第7期52卷 814-826页

作者：邓熠王艳何平平李娇刘围围袁近松赵鸿彦刘志江沈长银石蓓遵义医科大学附属医院心血管内科遵义563000

目的:探讨甲基转移酶3(Mettl3)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导周细胞向肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化过程中的作用及相关机制。方法:使用C57BL/6J小鼠,(1)细胞实验中,采用磁珠分选法培养纯化小鼠肾脏周细胞,并予以1×10 6 mmol/L的Ang ... 详细信息

目的:探讨甲基转移酶3(Mettl3)在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导周细胞向肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化过程中的作用及相关机制。方法:使用C57BL/6J小鼠,(1)细胞实验中,采用磁珠分选法培养纯化小鼠肾脏周细胞,并予以1×10 6 mmol/L的Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化,为Ang Ⅱ组;正常培养的周细胞为对照组。采用免疫荧光染色、蛋白质印迹(Western blot)及实时反转录PCR(RT-qPCR)检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以验证转分化成功。采用斑点印迹、RT-qPCR、Western blot检测N6-甲基腺苷(m6A)修饰水平及相关酶[Mettl3、Mettl14、Wilms肿瘤蛋白1相关蛋白(WTAP)、肥胖相关蛋白(FTO)、ALKB同源蛋白5(ALKBH5)、YTH结构域家族蛋白(YTHDF)1、YTHDF2、YTHDC1、YTHDC2、YTHDC3]的表达水平。采用慢病毒转染Mettl3 shRNA的方法抑制细胞中的Mettl3表达,为sh-Mettl3组、Ang Ⅱ+sh-Mettl3组;以转染慢病毒空载体作为阴性对照,为Ang Ⅱ+sh-NC组,观察Ang Ⅱ对周细胞转分化的影响,并检测下游磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路蛋白的表达,包括PI3K、AKT(丝氨酸磷酸化位点473)[p-AKT(S473)]、AKT(苏氨酸磷酸化位点308)[p-AKT(T308)]等。加入放线菌素D与各组周细胞共培养以抑制PI3K基因的转录,通过检测不同共培养时间残余PI3K mRNA表达量以计算PI3K mRNA半衰期。在Ang Ⅱ+sh-Mettl3组周细胞中加入AKT激动剂SC79,观察是否可逆转Mettl3抑制对Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化的作用。(2)动物实验中,分为假手术组(仅给予0.9%无菌生理盐水)、Ang Ⅱ组(泵入Ang Ⅱ溶液)、sh-Mettl3组(注射Mettl3 shRNA慢病毒溶液)、Ang Ⅱ+sh-Mettl3组(泵入Ang Ⅱ溶液+注射Mettl3 shRNA慢病毒溶液)、Ang Ⅱ+sh-Mettl3+SC79组(Ang Ⅱ+sh-Mettl3组处理基础上注射SC79),每组6只。手术前后采用尾夹法测定血压,术后4周测定血清肌酐、尿素含量及尿液白蛋白含量。28 d后取肾脏组织,采用苏木精-伊红(HE)及Masson三色法对组织切片进行染色,检测肾脏纤维化程度。结果:(1)磁珠分选法可获得原代肾脏周细胞,以1×10 6 mmol/L的Ang Ⅱ处理周细胞48 h可成功诱导其向肌成纤维细胞转分化。斑点印迹结果显示,Ang Ⅱ组总RNA的m6A修饰水平高于对照组( P<0.05),RT-qPCR及Western blot结果显示,与对照组相比,Ang Ⅱ组中Mettl3 mRNA及蛋白表达水平上调( P均<0.05)。Ang Ⅱ+sh-Mettl3组细胞中的Mettl3蛋白表达水平低于Ang Ⅱ组,α-SMA、波形蛋白、肌间线蛋白、成纤维细胞激活蛋白a(FAPa)以及Ⅰ型胶原蛋白的表达水平亦低于Ang Ⅱ组( P均<0.05)。与对照组相比,Ang Ⅱ组的PI3K mRNA表达水平上调,且p-AKT(S473)和p-AKT(T308)蛋白高表达;Ang Ⅱ+sh-Mettl3组的PI3K mRNA表达水平低于Ang Ⅱ组,p-AKT(S473)和p-AKT(T308)蛋白表达下调( P均<0.05)。Ang Ⅱ+sh-Mettl3组的半衰期短于Ang Ⅱ+sh-NC组(2.34 h比3.42 h)。而Mettl3抑制对Ang Ⅱ诱导周细胞-肌成纤维细胞转分化的改善作用可被SC79逆转。(2)动物实验结果显示,与假手术组比较,Ang Ⅱ组小鼠的血压更高,血清肌酐、尿素及24 h尿蛋白测量值更高,纤维化面积更大( P均<0.05);而Ang Ⅱ+sh-Mettle3组的纤维化面积小于Ang Ⅱ组( P<0.05),但在加入SC79后肾脏纤维化又加重。结论:Mettl3介导的RNA m6A表观遗传调控参与Ang Ⅱ诱导的肾脏周细胞-肌成纤维细胞转分化及肾脏纤维化,Mettl3可能通过影响PI3K的稳定性,进而影响PI3K/AKT信号通路发挥调控作用。

关键词：血管紧张素Ⅱ 周细胞肌成纤维细胞转分化 N6-甲基腺苷甲基转移酶3

miR-133a-3p修饰的间充质干细胞外泌体促进心肌梗死后大鼠心肌修复

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中华心血管病杂志 2024年第1期52卷 72-78页

作者：孙铃朱文武张健赵鹏程朱叶倩张凤祥南京医科大学第一附属医院、江苏省人民医院心血管内科南京210029 徐州市中心医院心血管内科徐州221000

目的探讨miR-133a-3p修饰的人源脐带血间充质干细胞(ucMSC)衍生的外泌体对急性心肌梗死(AMI)后大鼠心肌修复的作用。方法体外扩增培养ucMSC,将携带miR-133a-3p的慢病毒载体及阴性对照载体分别转染至ucMSC,分别提取其分泌的外泌体,命名为... 详细信息

目的探讨miR-133a-3p修饰的人源脐带血间充质干细胞(ucMSC)衍生的外泌体对急性心肌梗死(AMI)后大鼠心肌修复的作用。方法体外扩增培养ucMSC,将携带miR-133a-3p的慢病毒载体及阴性对照载体分别转染至ucMSC,分别提取其分泌的外泌体,命名为miR-133a-3p-Exo及miR-NC-Exo。采用冠状动脉左前降支结扎术构建大鼠AMI模型,分别于梗死区边缘原位注射miR-133a-3p-Exo或miR-NC-Exo进行干预。干预后28 d,采用超声心动图检测大鼠心功能;采用Masson染色检测大鼠梗死后心肌纤维化面积;采用TUNEL染色评估梗死后大鼠心肌凋亡情况;采用免疫荧光染色评估梗死后大鼠血管新生情况。结果与miR-NC-Exo组相比,miR-133a-3p-Exo组在AMI后28 d左心室射血分数较高[(64.2%±8.9%)比(47.4%±9.8%),P血管的数量均较多[CD31:(13.9±2.0)条比(2.9±0.9)条,α-SMA:(11.0±1.6)条比(3.5±0.9)条,P均血管新生,从而改善AMI后大鼠的心功能。

关键词：微RNAs 间充质干细胞外泌体急性心肌梗死心肌修复

肾动脉消融治疗高血压——从生理解剖基础谈选择性消融

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中国实用内科杂志 2024年第8期 645-648页

作者：刘航孙英贤殷跃辉重庆医科大学附属第二医院心血管内科中国医科大学附属第一医院心血管内科

经皮去肾神经术（RDN）能够持久有效地降低血压。其临床证据充分，但尚存在降压效果不稳定等问题。近年来对肾脏神经支配和生理功能的认识逐渐加深，尤其是证实肾脏副交感神经的存在。肾脏副交感神经在功能上与交感神经相互拮抗，消融... 详细信息

经皮去肾神经术（RDN）能够持久有效地降低血压。其临床证据充分，但尚存在降压效果不稳定等问题。近年来对肾脏神经支配和生理功能的认识逐渐加深，尤其是证实肾脏副交感神经的存在。肾脏副交感神经在功能上与交感神经相互拮抗，消融过程破坏了肾脏副交感神经可能是当前RDN效果不满意的一个重要原因。肾神经刺激引导的选择性消融可能是RDN技术未来的一个极具潜力的发展方向。

关键词：经皮去肾神经术肾脏副交感神经肾神经刺激选择性消融

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高血压强化降压循证证据与实践

中国实用内科杂志 2024年第8期 621-624页

作者：于莎莎孙国哲王畅孙英贤中国医科大学附属第一医院心血管内科

高血压是全球性公共卫生问题，近年来强化降压目标备受关注。多项研究表明，将血压严格控制至更低水平可显著降低心脑血管事件和死亡风险。国际和国内指南逐渐认可强化降压策略。中国农村高血压控制项目（CRHCP）进一步证实了强化降压... 详细信息

高血压是全球性公共卫生问题，近年来强化降压目标备受关注。多项研究表明，将血压严格控制至更低水平可显著降低心脑血管事件和死亡风险。国际和国内指南逐渐认可强化降压策略。中国农村高血压控制项目（CRHCP）进一步证实了强化降压在全人群中的有效性和安全性。文章介绍了国内外关于强化降压的相关研究以及国内的相关实践结果。

关键词：高血压心血管疾病强化降压

心力衰竭患者心理资源损耗与恢复过程的质性研究

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中华护理杂志 2024年第6期59卷 706-712页

作者：孙姝怡孙国珍高敏王洁于甜栖刘沈馨雨汤志杰温高芹南京医科大学护理学院南京市211166 南京医科大学第一附属医院心血管内科

目的探索心力衰竭患者心理资源损耗与恢复过程的特征。方法基于自我损耗理论,采用描述性现象学研究方法,于2022年9月—11月,对南京市某三级甲等综合医院心血管内科16例心力衰竭患者进行半结构式深度访谈,采用Colaizzi七步法对资料进行... 详细信息

目的探索心力衰竭患者心理资源损耗与恢复过程的特征。方法基于自我损耗理论,采用描述性现象学研究方法,于2022年9月—11月,对南京市某三级甲等综合医院心血管内科16例心力衰竭患者进行半结构式深度访谈,采用Colaizzi七步法对资料进行分析、提炼。结果共提炼出急性心理损耗源(角色转换导致心理应激、生理痛苦引发心理资源危机),慢性心理损耗源(躯体症状导致原有行为习惯改变、持续的不适症状令患者备受煎熬、不确定性使患者深陷反刍思维、治疗费用加重经济负担),自我损耗表现(消极思维模式与浅层认知加工、复杂交织的负性情绪、行为执行力弱化),心理资源恢复(激发个人成长,实现自我疗愈;多方资源支持,营造复愈性环境)4个主题,11个亚主题。结论心力衰竭患者病程中存在急、慢性损耗源,可导致多种自我损耗表现,损耗与恢复并存且动态变化。医护人员应密切关注心理损耗源对患者的影响,判断自我损耗的表现及严重程度,及时采取恢复措施,维持患者心理资源平衡,提高自我调节能力。

关键词：自我损耗自我调节心理资源心力衰竭质性研究心理护理

累积液体平衡量对心力衰竭患者容量状态影响的研究

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中华护理杂志 2024年第14期59卷 1691-1698页

作者：王蔚云刘长红孙国珍汤一帆李珍宇苏子雯顾则娟南京医科大学第一附属医院心脏大血管外科南京市210029 南京医科大学第一附属医院心血管内科南京市210029 南京医科大学第一附属医院老年心血管内科南京市210029 南京医科大学第一附属医院手术室南京市210029 南京医科大学第一附属医院护理部南京市210029

目的分析心力衰竭患者入院1~7 d累积液体平衡量与血浆容量升高、淤血症状加重的相关性,探讨累积液体平衡量对预测心力衰竭患者容量负荷过重的应用价值。方法采用便利抽样法,选取江苏省南京市、连云港市以及河南省驻马店市3所三级甲等综... 详细信息

目的分析心力衰竭患者入院1~7 d累积液体平衡量与血浆容量升高、淤血症状加重的相关性,探讨累积液体平衡量对预测心力衰竭患者容量负荷过重的应用价值。方法采用便利抽样法,选取江苏省南京市、连云港市以及河南省驻马店市3所三级甲等综合医院2022年10月至2023年2月住院治疗的235例心力衰竭患者,根据血浆容量和淤血症状,将患者分为血浆容量降低组、血浆容量升高组以及淤血症状减轻组、淤血症状加重组。收集研究对象的一般资料、临床特征及1~7 d累积液体平衡量,比较各组累积液体平衡量的差异。采用Logistic回归分析比较累积液体平衡量对患者血浆容量和淤血症状的影响。采用受试者操作特征曲线分析累积液体平衡量预测血浆容量升高、淤血症状加重的最佳截断值。结果剔除15例提前出院和3例液体出入量记录不准确的患者,共纳入患者217例,累积1 d液体正平衡发生率最低,为65.90%,累积量最少,为(0.235±0.983)L;累积6 d液体正平衡发生率最高,为75.58%,累积量最多,为(2.444±5.445)L。血浆容量升高组累积4~7 d的液体平衡量高于血浆容量降低组,差异具有统计学意义(P<0.05);累积4~7 d的液体平衡量是血浆容量升高的独立影响因素,累积4~7 d的液体平衡量分别达到2.308、3.361、3.518、3.702 L时,可预测血浆容量升高,受试者操作特征曲线下面积分别为0.686、0.721、0.647、0.766。淤血症状加重组累积4~7 d的液体平衡量均高于淤血症状减轻组,差异具有统计学意义(P<0.05);累积4~7 d的液体平衡量是淤血症状加重的独立影响因素,累积4~7 d的液体平衡量分别达到2.574、3.383、4.995、4.235 L时,可预测淤血症状加重,受试者操作特征曲线下面积分别为0.640、0.693、0.654、0.720。结论心力衰竭患者累积液体正平衡发生率高,累积液体平衡量能够较好地预测容量负荷加重的发生,血浆容量增加先于淤血症状的出现。建议临床护理人员密切关注累积液体正平衡3 d以上的心力衰竭患者,当累积液体正平衡量超过2.308 L时,及时采取措施排出过多的液体,避免容量负荷过重的发生。

关键词：心力衰竭容量状态累积液体平衡量血浆容量临床淤血评分护理

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肌少症与直立性低血压的关系研究进展

中国实用内科杂志 2024年第8期 691-694页

作者：刘晶晶李楠楠田文齐国先中国医科大学附属第一医院老年心血管内科

肌少症（sarcopenia）近年来已成为老年医学研究领域的热点和难点问题之一，它是一种与年龄相关，以肌肉力量、质量和功能进行性丧失为特征的疾病[1]。我国老年人群肌少症的患病率为14%～33%[2]。目前有认为肌少症是衰弱发生发展的生物... 详细信息

肌少症（sarcopenia）近年来已成为老年医学研究领域的热点和难点问题之一，它是一种与年龄相关，以肌肉力量、质量和功能进行性丧失为特征的疾病[1]。我国老年人群肌少症的患病率为14%～33%[2]。目前有认为肌少症是衰弱发生发展的生物学基础和重要途径[3]。

关键词：肌少症直立性低血压老年老年评估