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珍珠水解液对肝窦内皮细胞活力及肝窦毛细血管化的干预作用

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中国医学科学院学报 2023年第2期45卷 185-192页

作者：彭岳杨妙林江赵铁建刘鹏刘茜玉郭伟倩广西中医药大学基础医学院病理生理教研室南宁530000 广西中医药大学研究生学院南宁530000 广西中医药大学基础医学院方剂学教研室南宁530000 广西中医药大学基础医学院生物化学教研室南宁530000

目的探讨珍珠水解液对肝纤维化时肝窦毛细血管化病变的干预作用及机制。方法合浦珍珠水解液与肝窦内皮细胞(HSEC)和肝星状细胞(HSC-LX2)共同孵育,采用MTT比色法测定HSEC和HSC-LX2的细胞增殖抑制率,流式细胞术测定HSC-LX2的细胞周期及细... 详细信息

目的探讨珍珠水解液对肝纤维化时肝窦毛细血管化病变的干预作用及机制。方法合浦珍珠水解液与肝窦内皮细胞(HSEC)和肝星状细胞(HSC-LX2)共同孵育,采用MTT比色法测定HSEC和HSC-LX2的细胞增殖抑制率,流式细胞术测定HSC-LX2的细胞周期及细胞凋亡情况,透射电镜观察HSEC的窗孔及基底膜等微结构的变化情况。结果瘦素激活后,HSC-LX2细胞活性显著增高(P=0.041),HSEC则出现细胞活性显著降低(P=0.004)、窗孔数量减少、窗孔直径下降、连续基底膜形成等肝窦毛细血管化现象。瘦素干预后给予低、中、高不同浓度珍珠水解液治疗,各浓度组均可使缩小及消失了的HSEC窗孔发生增多和扩大(低浓度组:P=0.020;中浓度组:P=0.028;高浓度组:P=0.032),使HSEC外成片的基膜变得稀薄甚至消失(低浓度组:P=0.020;中浓度组:P=0.028;高浓度组:P=0.032);使活化的HSC-LX2活力下降(低浓度组:P=0.018;中浓度组:P=0.013;高浓度组:P=0.009),并诱导其发生细胞凋亡(低浓度组:P=0.012;中浓度组:P=0.006;高浓度组:P=0.005)。随着珍珠水解液给药浓度上升,干预肝窦毛细血管化的效果有梯度增高,具有剂量依赖性(低浓度组:P=0.020;中浓度组:P=0.028;高浓度组:P=0.032)。高浓度珍珠水解液干预肝窦毛细血管化的效果强于治疗剂量的秋水仙碱(P=0.034)和丹参酚酸B(P=0.038)。结论合浦珍珠水解液可使HSEC细胞的活性增加、窗孔面积恢复、基底膜消失,使激活的HSC-LX2细胞丧失活力并发生凋亡,具有针对HSEC及HSC-LX2的显著的抗肝窦毛细血管化药理学作用。

关键词：珍珠水解液抗肝纤维化肝窦毛细血管化窗孔基底膜

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蛇床苦参煎煮液抑制化合物48/80诱导ICR小鼠瘙痒的作用研究

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广西师范大学学报(自然科学版) 2024年

作者：伍师坚黄光羡宋芊芊黄春华刘佳敏伍冠一广西中医药大学药学院广西中医药大学基础医学院

蛇床子和苦参是常用止痒中药，但它们联合对瘙痒的作用尚未完全明确。本研究通过制备蛇床苦参煎煮液，灌胃ICR小鼠，采用行为学法观察药物对小鼠瘙痒行为的影响；伊文思蓝染色观察血管通透性变化；ELISA、WB法评价煎煮液对RBL-2H3细胞... 详细信息

蛇床子和苦参是常用止痒中药，但它们联合对瘙痒的作用尚未完全明确。本研究通过制备蛇床苦参煎煮液，灌胃ICR小鼠，采用行为学法观察药物对小鼠瘙痒行为的影响；伊文思蓝染色观察血管通透性变化；ELISA、WB法评价煎煮液对RBL-2H3细胞释放细胞因子的影响。结果发现：煎煮液抑制瘙痒行为以及血管通透性的升高，但不影响小鼠探索能力、肌张力；煎煮液减少RBL-2H3细胞释放β-己糖氨酸酶、组胺、IL-31、IL-4、IL-13和CXCL10，且能抑制ERK蛋白的磷酸化。本研究表明蛇床苦参煎煮液通过抑制RBL-2H3细胞脱颗粒和瘙痒相关细胞因子的释放来抑制化合物48/80诱导的急性瘙痒。

关键词：蛇床子苦参瘙痒化合物48/80

健脾益气方通过抑制DEN肝癌大鼠肝组织NLRP3炎性小体的激活影响血清炎症因子水平

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基因组学与应用生物学 2022年第6期41卷 1350-1359页

作者：乐宁杨琪音金萍岳紫晨王超卓少元广西中医药大学基础医学院南宁530200

炎性小体(inflammasome)作为炎症反应的中心环节,与包括肿瘤在内的很多疾病密切相关。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)常以炎性小体为活化支架,促进白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等炎症因子的成熟与释放。前期证实,健脾益气方(Jianpi Yiqi decoction,JYD)可通过调节肝癌细胞中的Caspase-1水平来抑制肝癌细胞的增殖与侵袭,并诱导部分肝癌细胞凋亡,但该方是否通过调节Caspase-1而影响炎性小体活化及其相关炎症因子的表达尚不清楚。本研究基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)炎性小体活化通路,用低、中和高剂量的健脾益气方(5.25、10.5、21.0 g/kg)分别干预经二乙基亚硝胺(N-nitrosodiethylamine,DEN)诱导的肝癌大鼠,同时以Caspase-1抑制剂(VX-765)为阳性对照,采用HE染色观察大鼠肝组织病理变化,用比色法测定大鼠血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷氨酰转移酶(gamma-glutamyl transpeptidase,GGT)和α-L-岩藻糖苷酶(alpha-L-fucosidase,AFU)及肝组织Caspase-1酶活性;用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、核因子κB蛋白(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB)、高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB-1)、钙结合蛋白(calprotectin)S100A8和S100A9的水平;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝组织NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC)和Caspase-1蛋白前体(pro-Caspase-1)表达水平。结果显示:与正常组相比,模型组大鼠肝组织出现众多大小不一的灰白色癌变结节、大量炎性细胞浸润和病理性核分裂,血清ALT、AST、GGT、AFU、IL-1β、IL-18、NF-κB、HMGB-1、S100A8和S100A9的水平,肝组织NLRP3、ASC和pro-Caspase-1蛋白水平及Caspase-1酶活性均明显上调(P0.05)。以上结果表明,健脾益气方可通过抑制Caspase-1使NLRP3炎性小体的激活及相关炎症因子的表达下调,具有抑制肝癌大鼠肝功能恶化和炎症程度加剧的作用。

关键词：健脾益气方原发性肝癌 Caspase-1 NLRP3炎性小体炎症因子

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糖尿病肾脏疾病的内质网应激与自噬交互作用的研究进展

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中国糖尿病杂志 2023年第6期31卷 456-460页

作者：王茜茜韦晓洁广西中医药大学基础医学院南宁530200

全球DKD发病率逐渐升高,严重危害患者健康和生活质量。DKD早期内质网应激(ERS)与自噬交互作用,有维护细胞内环境稳态和肾脏保护作用,后期逐渐向细胞杀伤性作用转变,是DKD病理机制的影响因素。本文综述DKD的ERS与自噬交互作用的研究进展。

关键词：糖尿病肾脏疾病内质网应激自噬交互作用

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基于中西医临床病证特点的缺血性中风动物模型评价分析

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中药药理与临床 2024年

作者：杨皓博周铭晗范文涛陕西中医药大学基础医学院

本文根据缺血性中风的中西医临床病证特点，归纳现有的缺血性中风病动物模型的造模方法、模型表现及优缺点。评价分析缺血性中风动物模型的中西医临床病证吻合度。结果发现线栓阻塞大脑中动脉模型在中西医诊断方面吻合度均较高，能够很... 详细信息

本文根据缺血性中风的中西医临床病证特点，归纳现有的缺血性中风病动物模型的造模方法、模型表现及优缺点。评价分析缺血性中风动物模型的中西医临床病证吻合度。结果发现线栓阻塞大脑中动脉模型在中西医诊断方面吻合度均较高，能够很好模拟出大脑中动脉缺血的表现，同时也能部分模拟出中医瘀血、痰瘀交结等证候。总体来看缺血性中风造模仍是以传统手术造模方法为主，建议在评分较高的手术性缺血性脑卒中模型基础上，施加以体现中医证型及其他干扰因素，建立不同中医证型的中西医病证结合动物模型，为进一步完善中西医临床病证特点的缺血性脑卒中动物模型提供参考。

关键词：缺血性中风动物模型临床病证特点

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紫河车化学成分和药理作用研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：钟文霞张琦成都中医药大学基础医学院

紫河车（Hominis Placenta， HP），又名“胞衣”，为健康产妇分娩出的胎盘，其在中国已经具有上千年的药用历史。紫河车通常以炮制品或干燥之品入药。根据中医理论，其具有“温肾补精，益气养血”的功效。本文通过对多个数据库有关紫... 详细信息

紫河车（Hominis Placenta， HP），又名“胞衣”，为健康产妇分娩出的胎盘，其在中国已经具有上千年的药用历史。紫河车通常以炮制品或干燥之品入药。根据中医理论，其具有“温肾补精，益气养血”的功效。本文通过对多个数据库有关紫河车的研究进行检索并整理发现，目前从紫河车中已经分离和鉴定出79余种化合物，包括各种氨基酸、蛋白质、脂质、多功能活性因子以及常见的无机物和有机化合物。研究表明，紫河车水溶剂提取物具有调节免疫、类激素作用、抗肿瘤、抗纤维、抗炎、抗过敏、抗感染等多种药理活性，并且其临床应用广泛，可用于治疗人体运动系统疾病，神经系统疾病，循环系统疾病，呼吸系统疾病，消化系统疾病，泌尿系统疾病以及生殖系统疾病等多个系统疾病。作为一味使用历史悠久的中药，紫河车在现代医学研究中引起了越来越多的关注，并有望为人们的健康做出更多贡献。随着科学技术的不断进步，对紫河车药理活性的研究将会更为深入，潜在的医学价值也将得到更好的发掘。未来，可以期待紫河车在治疗各种疾病和保健方面的应用不断扩大，为人们带来更多的福祉。

关键词：紫河车化学成分药理作用临床应用综述

低剂量白细胞介素-2对自身免疫性肝炎小鼠肝细胞损伤的保护机制研究

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解放军医学杂志 2024年

作者：陈晨李竹蓉吕思学郭地武嘉文杨娜刘杨山西中医药大学基础医学院

目的　探讨低剂量白细胞介素-2(IL-2)对刀豆蛋白A(Con A)诱导自身免疫性肝炎(AIH)小鼠的肝保护作用机制。方法　SPF级雌性C57BL/6小鼠18只随机分为正常组、模型组与治疗组，每组6只。治疗组小鼠皮下注射300 μl 10 000 U IL-2，给药频率... 详细信息

目的　探讨低剂量白细胞介素-2(IL-2)对刀豆蛋白A(Con A)诱导自身免疫性肝炎(AIH)小鼠的肝保护作用机制。方法　SPF级雌性C57BL/6小鼠18只随机分为正常组、模型组与治疗组，每组6只。治疗组小鼠皮下注射300 μl 10 000 U IL-2，给药频率为1次/d，连续12 d。末次给药2 h后，模型组和治疗组均通过尾静脉注射Con A(15 mg/kg)。造模8 h后，采用HE染色观察小鼠肝脏病理形态变化，ELISA法检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)水平，Western blotting检测凋亡蛋白caspase 8/9/3的表达情况，流式细胞术检测Treg、Th1细胞百分比。结果　与正常组比较，模型组小鼠肝脏指数、脾脏指数，肝组织坏死面积百分比，血清ALT、AST、TNF-α、IFN-γ水平，凋亡蛋白caspase 8/9/3的表达均明显升高(P0.05)，Th1/Treg比例明显降低(P<0.05)。结论　低剂量IL-2可有效改善AIH小鼠的肝损伤，其作用机制可能与诱导Tregs活化有关。

关键词：自身免疫性肝炎白细胞介素-2 调节性T细胞 Th1细胞

非酒精性脂肪性肝病大鼠模型的造模周期与抗氧化途径的关联研究

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中国免疫学杂志 2023年

作者：郅果果邵冰杰冯奕源朱砂穆杰王东成都中医药大学基础医学院

目的通过胆碱缺乏的高脂饮食（Choline-deficienthighfatdiet，CDHFD）构建非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)大鼠模型，并观察喂养周期与抗氧化通路的关联性。方法此次研究共耗时16周，分4个周期。检测不... 详细信息

目的通过胆碱缺乏的高脂饮食（Choline-deficienthighfatdiet，CDHFD）构建非酒精性脂肪性肝病（Non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)大鼠模型，并观察喂养周期与抗氧化通路的关联性。方法此次研究共耗时16周，分4个周期。检测不同周期大鼠肝脏的病理变化和抗氧化酶的表达量。结果2-4周为模型大鼠肝脏脂肪变和炎症的早期阶段，4-8周为NASH阶段，8-16周是肝纤维化进展阶段。机制研究表明，随着喂养周期的延长，NAFLD大鼠肝脏中抗氧化酶Nrf2（NuclearfactorE2-relatedfactor2）、SOD(Superoxidedismutase)和GSH-Px（Glutathioneperoxidase）的蛋白表达量逐渐降低。结论不同造模周期能够成功诱导大鼠肝脏出现脂肪变性、炎症和肝纤维化的病理改变，并且病理变化与抗氧化酶的表达量呈现时间相关性。

关键词：非酒精性脂肪性肝病(NAFLD) 胆碱缺乏的高脂饮食(CDHFD) 动物模型抗氧化 Nrf2信号通路

肾康注射液调节TGF-βI型受体/Smad通路抑制肾纤维化的作用机制

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世界科学技术-中医药现代化 2023年

作者：崔天梦黄更珍张莹莹马跃荣成都中医药大学基础医学院

目的肾康注射液(Shenkang injection,SKI)作为一种中药静脉注射剂，已在临床用于治疗慢性肾病。本研究探讨SKI调节TGF-βⅠ型受体/Smad通路抑制肾纤维化的作用机制。方法在37℃环境中，使用10 ng·mL-1TGF-β1处理人小管上皮细胞(Huma... 详细信息

目的肾康注射液(Shenkang injection,SKI)作为一种中药静脉注射剂，已在临床用于治疗慢性肾病。本研究探讨SKI调节TGF-βⅠ型受体/Smad通路抑制肾纤维化的作用机制。方法在37℃环境中，使用10 ng·mL-1TGF-β1处理人小管上皮细胞(Human kidney proximal tubular cell,HK-2)48 h，建立体外肾纤维化模型。用SKI处理细胞48 h后，通过显微镜观察细胞的形态；采用Western blot、RT-PCR和免疫荧光技术检测α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅲ型胶原(Collagen typeⅢ，COI-Ⅲ)、TGF-β1、Smad3、Smad7和TβR-I蛋白和基因的表达变化。结果 SKI能抑制肾纤维化相关蛋白和基因的表达，如α-SMA和COI-Ⅲ。SKI调控与TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达，通过下调TGF-β1、Smad3和TβR-Ⅰ蛋白，上调Smad7蛋白表达，延缓肾脏纤维化。结论 SKI抑制肾纤维化，可能通过下调TβR-Ⅰ、调控TGF-β/Smad通路相关分子的表达。

关键词：肾康注射液肾纤维化 TβR-Ⅰ型受体 HK-2细胞 TGF-β/Smad信号通路