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胃食管反流病与阻塞性睡眠呼吸暂停之间的关系:孟德尔随机化研究

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中国循证医学杂志 2024年第9期24卷 1004-1010页

作者：焦欣邵阿雪何清清吴文玉刘建博王凯广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的使用孟德尔随机化(Mendelian randomization,MR)方法探讨胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)与阻塞性睡眠呼吸暂停(obstructive sleep apnea,OSA)及其典型症状(打鼾、白天嗜睡)之间的因果关联。方法采用逆方差加权法(inverse variance-weighted,IVW)作为主要的分析方法来评估因果关系,以留一法进行敏感性分析,MR-Egger法进行多效性分析,然后进行异质性检验。结果在MR分析中,基因预测的GERD与更高的OSA风险相关[IVW:OR=1.528,95%CI(1.374,1.699),P=5.315E-15],其他的MR分析结果与IVW结果一致,没有发现多效性和异质性。IVW法分析结果也显示GERD与打鼾[OR=0.959,95%CI(0.949,0.969),P=1.507E-15]、白天嗜睡[OR=1.024,95%CI(1.021,1.036),P=4.580E-5]之间存在因果关系,未发现多效性。结论本研究支持GERD与OSA及典型症状(打鼾、白天嗜睡)发生的风险之间存在因果关系。

关键词：胃食管反流病阻塞性睡眠呼吸暂停打鼾白天嗜睡孟德尔随机化因果关系

心理一致感视角下晚期癌症患者疾病应对体验的质性研究

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中华护理杂志 2024年第5期59卷 526-532页

作者：黄咏琪田霞王峥孙咪咪周丽群肖文莉广州中医药大学护理学院广州市510006 广州中医药大学第一附属医院肿瘤中心

目的在心理一致感视角下,探索晚期癌症患者的疾病应对体验,为识别其应对资源、制订有效的应对策略提供参考依据。方法采用描述性质性研究法,通过目的抽样,于2023年3月—5月对广州市某三级甲等医院肿瘤中心收治的18例晚期癌症患者进行半... 详细信息

目的在心理一致感视角下,探索晚期癌症患者的疾病应对体验,为识别其应对资源、制订有效的应对策略提供参考依据。方法采用描述性质性研究法,通过目的抽样,于2023年3月—5月对广州市某三级甲等医院肿瘤中心收治的18例晚期癌症患者进行半结构式访谈,采用定向内容分析法对访谈结果进行归纳和提炼主题。结果共归纳出3个主题:①理解疾病经历,包括反思健康行为、正视患病事实、接受生命规律;②管理疾病威胁,包括应对多重困难、调动应对资源;③体会疾病应对意义,包括认同疾病应对意义、感知疾病获益、做好人生规划。结论有效的应对资源可帮助晚期癌症患者应对患病过程中的多重困难。医护人员应加强癌症相关知识宣教,帮助晚期癌症患者挖掘积极应对资源,并强化疾病应对意义,从而增强患者的疾病应对能力,促进其身心健康。

关键词：心理一致感晚期癌症应对体验质性研究护理

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基于人用经验的证候类中药新药研发策略

中国中药杂志 2024年第3期49卷 849-852页

作者：杨忠奇何星灵刘东华唐雅琴汤慧敏凌燕杜彦萍广州中医药大学第一附属医院广东广州510407

我国药品注册法规一直为证候类中药新药保留位置,但迄今为止尚无证候类中药新药批准上市。该文阐述我国证候类中药新药相关政策法规和相关技术,指出应用中医证候动物模型开展药效学研究和中医证候临床疗效评价标准是证候类中药新药研发... 详细信息

我国药品注册法规一直为证候类中药新药保留位置,但迄今为止尚无证候类中药新药批准上市。该文阐述我国证候类中药新药相关政策法规和相关技术,指出应用中医证候动物模型开展药效学研究和中医证候临床疗效评价标准是证候类中药新药研发的主要技术难点;不是所有的证候都适合开发新药,证候类中药新药适应证应以“恒证”为宜。在“单纯证候”“以证统病”“证症结合”3种研发模式中,推荐“证症结合”研发模式。临床定位是证候类中药新药的关键环节,鼓励通过开展高质量的人用经验研究,确定证候类中药新药的临床定位,以及目标人群、剂量、疗程、初步的有效性和安全性,申请豁免非临床有效性研究。证候类中药新药临床试验应以目标症状或体征为主要疗效指标,中医证候疗效作为次要疗效指标,临床研究方案设计应贯彻“以患者为中心”理念,引入临床结局评估指标;临床安全性评价要考虑证候传变等特殊情况。随着人用经验技术体系构建与“三结合”中药注册审评证据体系推进,相信未来将开发出一批高质量的证候类中药新药。

关键词：中医证候人用经验中药新药

基于HIF1A/EZH2/ANTXR2通路探讨罗氏内异方治疗子宫内膜异位症大鼠的作用机制

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中药新药与临床药理 2024年第7期35卷 993-1000页

作者：裴芳利贾金金陈晓鑫林树红林增娴吴李征曾诚广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学广东广州510006

目的基于缺氧诱导因子1A(HIF1A)/zeste增强子同源物2(EZH2)/炭疽热毒素受体2(ANTXR2)信号通路探讨罗氏内异方(又名益母调经化瘀合剂)对子宫内膜异位症(EMs)大鼠在位子宫内膜增殖及血管生成的干预作用及机制。方法将SD大鼠随机分为伪手... 详细信息

目的基于缺氧诱导因子1A(HIF1A)/zeste增强子同源物2(EZH2)/炭疽热毒素受体2(ANTXR2)信号通路探讨罗氏内异方(又名益母调经化瘀合剂)对子宫内膜异位症(EMs)大鼠在位子宫内膜增殖及血管生成的干预作用及机制。方法将SD大鼠随机分为伪手术组、模型组、达那唑组(4.2 g·kg^(-1))及罗氏内异方低、高剂量组(15.74、31.48 g·kg^(-1)),每组8只。采用自体子宫内膜移植联合多因素干预法复制气滞血瘀型EMs病证结合大鼠模型。灌胃给药,每天1次,连续28 d。采用HE染色法观察子宫内膜组织病理变化;免疫组化法检测子宫内膜组织中增殖细胞蛋白67(Ki67)和血小板内皮细胞黏附分子1(CD31)蛋白表达水平;qRT-PCR及Western Blot法检测子宫内膜组织中HIF1A、EZH2、ANTXR2 mRNA及蛋白表达水平;Western Blot法检测子宫内膜组织中Yes关联蛋白1(YAP1)、吞噬细胞糖蛋白1(CD44)、β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平。结果与伪手术组相比,模型组大鼠在位子宫内膜组织上皮细胞增厚,间质细胞排列紊乱,炎性细胞增多;子宫内膜组织中Ki67、CD31的表达水平均显著升高(P<0.01),HIF1A、ANTXR2 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),而EZH2 mRNA及蛋白表达水平显著下降(P<0.01),YAP1、CD44及β-catenin蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组大鼠在位子宫内膜组织上皮层变薄,间质部细胞紊乱和炎症浸润均有改善,子宫内膜组织中Ki67、CD31的表达水平均显著降低(P<0.01);达那唑组与罗氏内异方高剂量组大鼠子宫内膜组织中HIF1A、ANTXR2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),EZH2 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01);各给药组大鼠子宫内膜组织中YAP1、CD44及β-catenin蛋白表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论罗氏内异方可通过抑制在位子宫内膜细胞的增殖及血管生成能力来发挥治疗EMs的作用,其机制可能与抑制HIF1A/EZH2/ANTXR2信号通路有关。

关键词：子宫内膜异位症罗氏内异方益母调经化瘀合剂在位子宫内膜细胞增殖血管生成 HIF1A/EZH2/ANTXR2信号通路大鼠

基于NLRP3炎症小体探讨补冲调经方对卵巢储备功能减退模型大鼠卵巢组织铁死亡的作用及机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王艺绚李祖昂郑允玲李堉成罗颂平朱玲广州中医药大学第一临床医学院广州中医药大学岭南医学研究中心广州中医药大学第一附属医院

目的:从NLRP3炎症小体和铁死亡角度探讨补冲调经方对卵巢储备功能减退（DOR）大鼠的疗效作用机制。方法:将48只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、补冲调经方低、中、高剂量组和MCC950组，每组8只。除正常组外，其余各组大鼠均于颈背... 详细信息

目的:从NLRP3炎症小体和铁死亡角度探讨补冲调经方对卵巢储备功能减退（DOR）大鼠的疗效作用机制。方法:将48只雌性SD大鼠随机分为正常组、模型组、补冲调经方低、中、高剂量组和MCC950组，每组8只。除正常组外，其余各组大鼠均于颈背部皮下注射D-半乳糖制备DOR大鼠模型。从造模第15天起，对补冲调经方低、中、高剂量组大鼠分别以每日14.4、28.8、57.6 g·kg-1的剂量灌胃。MCC950组大鼠予腹腔注射MCC950 10 mg·kg-1，隔日1次。各组连续给药4周。阴道脱落细胞涂片观察大鼠动情周期；HE染色观察卵巢中卵泡和黄体发育情况；生化及酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清性激素及白细胞介素1-β（IL-1β）的水平；实时荧光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢NOD样受体热蛋白结构域蛋白3（NLRP3）炎症小体、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）、转铁蛋白受体1（TFR1）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的mRNA和蛋白表达；氧化应激试剂盒检测卵巢超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量。结果:实验过程中补冲调经方高剂量组有1只大鼠死亡，最终共有47只大鼠纳入指标检测和统计。与空白组比较，模型组大鼠动情周期明显紊乱，闭锁卵泡数量增多，血清性激素水平明显紊乱。卵巢组织NLRP3炎症小体、ACSL4和TFR1的mRNA和蛋白表达上调，而GPX4的mRNA和蛋白表达显著下调（P＜0.01），卵巢SOD含量显著降低，MDA含量升高（P＜0.01）。药物干预后，大鼠动情周期基本恢复规律，各级卵泡结构更完整且数量明显增多，血清性激素和IL-1β水平显著改善，卵巢NLRP3炎症小体、ACSL4和TFR1的mRNA和蛋白表达下调，GPX4的mRNA和蛋白表达显著上调，卵巢氧化应激水平明显减轻（P＜0.05，P＜0.01），其中尤以补冲调经方高剂量组和MCC950组效果明显。结论:DOR大鼠卵巢发生炎性损伤和铁死亡，补冲调经方能够抑制卵巢NLRP3炎症小体，减轻卵巢铁死亡程度，提高卵巢储备。

关键词：卵巢储备功能减退补冲调经方 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3(NLRP3)炎症小体铁死亡氧化应激

靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的疗效观察及对下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

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针刺研究 2024年第1期49卷 57-63页

作者：李美晨王毓婷李柯谊许小燕庄礼兴广州中医药大学第二临床医学院广州510405 广州中医药大学针灸康复临床医学院广州510405 广州中医药大学第一临床医学院广州510405 广州中医药大学第一附属医院康复中心广州510405

目的:观察靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的临床疗效,从下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的角度探讨其作用机制。方法:将54例卒中后焦虑患者按照随机数字表法分为假针组(26例)和靳三针调神针组(28例)。两组患者均接受基础药物治疗及康复治疗,... 详细信息

目的:观察靳三针调神针法治疗卒中后焦虑的临床疗效,从下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的角度探讨其作用机制。方法:将54例卒中后焦虑患者按照随机数字表法分为假针组(26例)和靳三针调神针组(28例)。两组患者均接受基础药物治疗及康复治疗,两组均取四神针、神庭、印堂及双侧神门、三阴交、合谷、太冲,靳三针调神针组予真实针刺,假针组予假针刺,每次30 min,每日1次,每周连续针刺5次,共治疗3周。比较两组治疗前、开始治疗后第10天及治疗后第21天汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评分、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的变化,ELISA法检测血清促肾上腺皮质激素(ACTH)及血清皮质醇(CORT)含量,并记录不良反应。结果:与本组治疗前比较,靳三针调神针组治疗第10、21天HAMA评分及NIHSS评分降低(P一步结合血清学指标的下降趋势,推测其作用机制可能与调节HPA轴有关。

关键词：卒中后焦虑靳三针调神针法假针刺下丘脑-垂体-肾上腺轴

基于p53/SLC7A11/GPX4通路研究疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第8期30卷 74-82页

作者：蔡晓钧杨仁义王智槟龚怡琳王科林丽珠钟崇李菁湖南中医药大学第一附属医院长沙410007 湖南中医药大学中西医结合学院长沙410208 湖南中医药大学长沙410208 广州中医药大学第一附属医院广州510405

目的:基于肿瘤蛋白53(p53)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡。方法:将MHCC97H细胞分为空白血清组(含10%空白血清培养基)、疏肝祛瘀解毒方(SGQYJDF)低浓度组(含5%含药... 详细信息

目的:基于肿瘤蛋白53(p53)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方诱导肝癌细胞铁死亡。方法:将MHCC97H细胞分为空白血清组(含10%空白血清培养基)、疏肝祛瘀解毒方(SGQYJDF)低浓度组(含5%含药血清、5%空白血清培养基)、SGQYJDF中浓度组(含7.5%含药血清、2.5%空白血清培养基)、SGQYJDF高浓度组(含10%含药血清的培养基)和索拉非尼组(索拉非尼浓度为10μmol·L-1的10%空白血清培养基)。按分组干预24 h后,采用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测细胞存活率;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测细胞增殖能力;亚铁离子荧光探针(FerroOrange)染色法检测细胞内亚铁离子(Fe2+)水平;比色法检测细胞内丙二醇(MDA)及谷胱甘肽(GSH)水平;透射电镜观察细胞线粒体超微形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测铁死亡相关蛋白p53、SLC7A11和GPX4表达水平。结果:细胞活性方面,与空白血清组比较,SGQYJDF各浓度组能够呈浓度相关性地降低MHCC97H细胞存活率,SGQYJDF中、高浓度组的MHCC97H细胞存活率显著降低(P<0.01);同时EdU结果显示SGQYJDF中、高浓度组均能够明显抑制MHCC97H细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01)。铁死亡生化指标方面,与空白血清组比较,SGQYJDF中、高浓度组能够呈浓度相关性地提高细胞内Fe2+水平(P<0.01);SGQYJDF低、中、高浓度组能够呈浓度相关性地降低MHCC97H细胞内GSH的水平(P<0.01),同时提高细胞内MDA水平(P<0.05,P<0.01)。在通路相关蛋白表达方面,与空白血清组比较,SGQYJDF中、高浓度组可显著增加p53表达(P<0.01);SGQYJDF低、中、高浓度组能够显著降低GPX4表达(P<0.01);SGQYJDF高浓度组能够显著降低SLC7A11的表达(P<0.01)。铁死亡细胞形态方面,与空白血清组比较,透射电镜发现SGQYJDF低浓度组存在变性线粒体,而SGQYJDF中、高浓度组可观察到线粒体体积缩小、双层膜密度增加和线粒体嵴减少,这些特征与索拉非尼组诱导的铁死亡相似。此外与索拉非尼组比较,SGQYJDF高浓度组细胞存活率、增殖能力、Fe2+水平、MDA水平和GSH水平差异无统计学意义。结论:提示SGQYJDF可能通过上调肝细胞癌MHCC97H细胞内p53的表达、抑制GPX4和SLC7A11的表达,下调GSH的水平,同时导致细胞内Fe2+和MDA的累积,从而诱导其发生铁死亡,抑制其增殖。

关键词：疏肝祛瘀解毒方肝细胞癌铁死亡增殖

龙芪降脂方治疗非酒精性脂肪性肝炎伴肝纤维化分子机制

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中国中西医结合杂志 2024年

作者：雍秋红黄超原杨希玲杨喆彦萱郑逸远赵利娜彭冲刘凤斌 1.广州中医药大学第一临床医学院 2.广州中医药大学岭南医学实验研究中心 3.广州中医药大学第二附属医院脾胃病科 4.上海中医药大学附属市中医医院脾胃病科 5.广州中医药大学第一附属医院肝胆病科 6.广州中医药大学第一附属医院白云医院脾胃病科 7.广州中医药大学第一附属医院岭南脾胃病研究所广州中医药大学第一临床医学院广州中医药大学岭南医学实验研究中心广州中医药大学第二附属医院脾胃病科上海中医药大学附属市中医医院脾胃病科广州中医药大学第一附属医院肝胆病科广州中医药大学第一附属医院白云医院脾胃病科广州中医药大学第一附属医院岭南脾胃病研究所

目的观察龙芪降脂方对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）伴肝纤维化的疗效，并基于Toll样受体4(TLR4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路探讨其分子机制。方法将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：对照组、模型组、低剂量组、... 详细信息

目的观察龙芪降脂方对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）伴肝纤维化的疗效，并基于Toll样受体4(TLR4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路探讨其分子机制。方法将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：对照组、模型组、低剂量组、高剂量组，每组8只。采用蛋氨酸及胆碱缺乏饲料喂养4周，构建NASH伴肝纤维化动物模型；低剂量组及高剂量组分别给予260、520 g/L的龙芪降脂方中药原液灌胃治疗。实验结束后取材，用生化试剂盒检测各组小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、葡萄糖（GLU）含量和肝脏中TC含量；用HE、油红O、Masson染色观察各组小鼠肝脏病理情况；用酶联免疫吸附实验检测各组小鼠血清中白介素（IL）-6、IL-1β含量；采用定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组小鼠肝脏中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NLRP3 mRNA表达量；用Western Blot检测各组小鼠肝脏中组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）、TLR4、MyD88、磷酸化核因子κB抑制蛋白α/核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα/IκBα)、磷酸化核因子κB/核因子κB(p-NF-κB/NF-κB)、NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase1)及Caspase1前体（pro-Caspase1）蛋白表达量。结果与对照组比较，模型组小鼠肝脏体积偏小、颜色偏黄、表面颗粒感明显；血清中TC、TG、GLU含量降低（P<0.01）,ALT、AST、IL-1β、IL-6含量升高（P<0.01）；肝脏中炎性细胞浸润、脂质沉积和胶原纤维沉积明显，TC含量升高（P<0.01）,MCP-1、TNF-α、TLR4、MyD88、NLRP3 mRNA表达量及TIMP-1、CollagenⅠ、TLR4、My D88、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3、Caspase1、pro-Caspase1蛋白表达量升高（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较，低、高剂量组小鼠肝脏大小无明显变化，但颜色红润、有光泽；血清中GLU含量升高（P<0.01）,ALT、AST、IL-1β、IL-6含量降低（P<0.05,P<0.01）；肝脏中炎性细胞浸润、脂质沉积和胶原纤维沉积较轻，TC含量降低（P<0.01）,MCP-1、TNF-α、TLR4、My D88、NLRP3 mRNA表达量及TIMP-1、CollagenⅠ、TLR4、My D88、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3、Caspase1、pro-Caspase1蛋白表达量降低（P<0.05,P<0.01）。结论龙芪降脂方能改善NASH伴肝纤维化，其机制与抑制TLR4/NLRP3信号通路有关。

关键词：龙芪降脂方非酒精性脂肪性肝炎肝纤维化 Toll样受体4 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3 中药复方

罗氏内异方调控缺氧干预子宫内膜异位症SF-1的机制研究

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中国中药杂志 2024年第18期 4967-4976页

作者：吴李征陈晓鑫孙博文裴芳利蓝丹彤邝梓君张诗媛曾诚广州中医药大学广州中医药大学第一附属医院佛山市第一人民医院

观察罗氏内异方对子宫内膜异位症（EMs）中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和类固醇生成因子1（SF-1）的影响，探索罗氏内异方对EMs的治疗机制。免疫组化及qPCR法检测临床EMs组织中HIF-1α和SF-1的表达。提取鉴定人原代子宫内膜间质细胞（E... 详细信息

观察罗氏内异方对子宫内膜异位症（EMs）中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和类固醇生成因子1（SF-1）的影响，探索罗氏内异方对EMs的治疗机制。免疫组化及qPCR法检测临床EMs组织中HIF-1α和SF-1的表达。提取鉴定人原代子宫内膜间质细胞（ESCs）,免疫荧光及qPCR法检测HIF-1α和SF-1的表达。用氯化钴（CoCl2）模拟体外缺氧环境，构建HIF-1α敲低慢病毒，qPCR或蛋白免疫印迹检测HIF-1α或SF-1的表达。观察罗氏内异方含药血清对缺氧环境下在位ESCs增殖、迁移、雌激素（E2）、HIF-1α和SF-1的影响。采用自体子宫内膜移植法联合多因素干预法建立气滞血瘀证EMs大鼠模型，观察罗氏内异方对大鼠异位子宫内膜组织中HIF-1α和SF-1的影响。结果提示，与正常子宫内膜组织及间质细胞相比，异位内膜组织及间质细胞中HIF-1α和SF-1的蛋白和mRNA水平均升高。与对照组相比，50μmol·L-1CoCl2处理在位ESCs 24 h可促进细胞增殖，显著增加HIF-1α mRNA和SF-1蛋白表达，而敲低HIF-1α可显著减少SF-1和E2表达。与模型组相比，罗氏内异方含药血清组在位ESCs的增殖及迁移能力下降，E2、HIF-1α和SF-1表达下降。同样，EMs大鼠经罗氏内异方治疗后，异位内膜组织病理损伤减轻，HIF-1α、SF-1的表达水平也显著降低。综上，罗氏内异方对EMs的治疗作用可能与改善缺氧环境，抑制HIF-1α/SF-1轴有关。

关键词：子宫内膜异位症罗氏内异方 HIF-1α SF-1 缺氧

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