龙芪降脂方治疗非酒精性脂肪性肝炎伴肝纤维化分子机制

作     者：雍秋红 黄超原 杨希玲 杨喆彦萱 郑逸远 赵利娜 彭冲 刘凤斌 1.广州中医药大学第一临床医学院 2.广州中医药大学岭南医学实验研究中心 3.广州中医药大学第二附属医院脾胃病科 4.上海中医药大学附属市中医医院脾胃病科 5.广州中医药大学第一附属医院肝胆病科 6.广州中医药大学第一附属医院白云医院脾胃病科 7.广州中医药大学第一附属医院岭南脾胃病研究所 

作者机构：广州中医药大学第一临床医学院 广州中医药大学岭南医学实验研究中心 广州中医药大学第二附属医院脾胃病科 上海中医药大学附属市中医医院脾胃病科 广州中医药大学第一附属医院肝胆病科 广州中医药大学第一附属医院白云医院脾胃病科 广州中医药大学第一附属医院岭南脾胃病研究所 

出 版 物：《中国中西医结合杂志》 (Chinese Journal of Integrated Traditional and Western Medicine)

年 卷 期：2024年

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金青年项目(No.82104549) 中国博士后科学基金面上项目(No.2020M672603,No.2021M700960) 广东省中医药重点学科建设项目(No.20220087) 2023年“攀登计划”广东大学生科技创新培育专项基金项目(No.pdjh2023a0118) 

主　　题：龙芪降脂方 非酒精性脂肪性肝炎 肝纤维化 Toll样受体4 NOD样受体热蛋白结构域蛋白3 中药复方 

摘      要：目的 观察龙芪降脂方对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）伴肝纤维化的疗效，并基于Toll样受体4(TLR4)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路探讨其分子机制。方法 将32只雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：对照组、模型组、低剂量组、高剂量组，每组8只。采用蛋氨酸及胆碱缺乏饲料喂养4周，构建NASH伴肝纤维化动物模型；低剂量组及高剂量组分别给予260、520 g/L的龙芪降脂方中药原液灌胃治疗。实验结束后取材，用生化试剂盒检测各组小鼠血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、葡萄糖（GLU）含量和肝脏中TC含量；用HE、油红O、Masson染色观察各组小鼠肝脏病理情况；用酶联免疫吸附实验检测各组小鼠血清中白介素（IL）-6、IL-1β含量；采用定量实时聚合酶链反应（RT-qPCR）检测各组小鼠肝脏中单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、NLRP3 mRNA表达量；用Western Blot检测各组小鼠肝脏中组织金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、Ⅰ型胶原蛋白（CollagenⅠ）、TLR4、MyD88、磷酸化核因子κB抑制蛋白α/核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα/IκBα)、磷酸化核因子κB/核因子κB(p-NF-κB/NF-κB)、NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase1)及Caspase1前体（pro-Caspase1）蛋白表达量。结果 与对照组比较，模型组小鼠肝脏体积偏小、颜色偏黄、表面颗粒感明显；血清中TC、TG、GLU含量降低（P0.01）,ALT、AST、IL-1β、IL-6含量升高（P0.01）；肝脏中炎性细胞浸润、脂质沉积和胶原纤维沉积明显，TC含量升高（P0.01）,MCP-1、TNF-α、TLR4、MyD88、NLRP3 mRNA表达量及TIMP-1、CollagenⅠ、TLR4、My D88、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3、Caspase1、pro-Caspase1蛋白表达量升高（P0.05,P0.01）。与模型组比较，低、高剂量组小鼠肝脏大小无明显变化，但颜色红润、有光泽；血清中GLU含量升高（P0.01）,ALT、AST、IL-1β、IL-6含量降低（P0.05,P0.01）；肝脏中炎性细胞浸润、脂质沉积和胶原纤维沉积较轻，TC含量降低（P0.01）,MCP-1、TNF-α、TLR4、My D88、NLRP3 mRNA表达量及TIMP-1、CollagenⅠ、TLR4、My D88、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB/NF-κB、NLRP3、Caspase1、pro-Caspase1蛋白表达量降低（P0.05,P0.01）。结论 龙芪降脂方能改善NASH伴肝纤维化，其机制与抑制TLR4/NLRP3信号通路有关。