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秋水仙碱经由Hippo信号通路对小鼠肝癌的影响及其机制研究

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 185-192页

作者：徐燕燕朱乐乐李苗苗杨雁安徽医科大学药理学教研室合肥230032

目的探明秋水仙碱经由Hippo信号通路对小鼠肝癌的影响及其机制研究。方法 6周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组、模型组、秋水仙碱组,建立二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(CCl_(4))/乙醇(C_(2)H_(5)OH)诱导小鼠肝癌模型及秋水仙碱(0... 详细信息

目的探明秋水仙碱经由Hippo信号通路对小鼠肝癌的影响及其机制研究。方法 6周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组、模型组、秋水仙碱组,建立二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(CCl_(4))/乙醇(C_(2)H_(5)OH)诱导小鼠肝癌模型及秋水仙碱(0.1 mg/kg)干预。第1至2周,模型组和秋水仙碱组腹腔注射1.0%DEN,每周1次;第3周至第7周,灌胃_(4)溶于橄榄油溶液(5 ml/kg)每周2次;第8周至第18周,灌胃20%CCl_(4)溶于橄榄油溶液(6 ml/kg)每周2次。秋水仙碱组连续灌胃给药20周。对照组给予相应的溶媒。进行肝指数、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)血清生化指标的检测,蛋白印迹(Western blot)和免疫荧光检测各组小鼠肝组织中MST1、pYAP、YAP、pTAZ、TAZ蛋白的表达水平。结果对照组小鼠肝脏表面光滑,质地柔软,模型组肝脏粗糙,质地较硬,有颗粒状结节,秋水仙碱组以上病变得到明显改善。HE染色显示,对照组小鼠肝小叶结构正常,模型组肝小叶结构紊乱,可见少量脂滴,组织广泛坏死,炎性细胞浸润,存在脂肪空泡,而秋水仙碱干预后小鼠肝脏病变程度减轻。免疫荧光和Western blot结果显示,模型组小鼠较对照组小鼠肝组织中pYAP、pTAZ的蛋白表达水平降低,MST1、YAP、TAZ的蛋白表达水平增加;秋水仙碱干预后,上调MST1、pYAP、pTAZ蛋白表达水平,下调YAP、TAZ的蛋白表达水平。结论秋水仙碱对小鼠肝癌的治疗作用可能与其激活的Hippo信号通路有关。

关键词：秋水仙碱 Hippo信号通路肝癌二乙基亚硝胺四氯化碳乙醇

2型糖尿病合并痛风性关节炎患者单核细胞高密度脂蛋白胆固醇比值与非酒精性脂肪肝关系研究

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中国实用内科杂志 2024年第5期44卷 397-402页

作者：石红宾李中南陈明月彭甜甜陈理王玉安徽中医药大学第一临床医学院安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031

目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并痛风性关节炎(GA)患者单核细胞(MONO)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)比值(MHR)与非酒精性脂肪肝(NAFLD)的关系,分析NAFLD发生的影响因素。方法选取2019年12月至2022年12月在安徽中医药大学第一附属医院内分泌... 详细信息

目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并痛风性关节炎(GA)患者单核细胞(MONO)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)比值(MHR)与非酒精性脂肪肝(NAFLD)的关系,分析NAFLD发生的影响因素。方法选取2019年12月至2022年12月在安徽中医药大学第一附属医院内分泌科住院治疗的T2DM合并GA患者214例,根据是否合并NAFLD分为NAFLD组、非NAFLD组,比较两组一般资料、理化指标,NAFLD组根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平进行亚组分析;根据MHR三分位数分为Q1MHR、Q2MHR、Q3MHR三组,比较HOMA-IR水平的差异,以及各组NAFLD的发生率;logistic回归分析T2DM合并GA患者NAFLD的危险因素,受试者工作特征曲线(ROC)评估MHR在T2DM合并GA患者中NAFLD的临床价值。结果与非NAFLD组比较,NAFLD组Fins、HOMA-IR、AST、ALT、TG、CRP、MONO、MHR均升高(P<0.05),HDL-c降低(P<0.05)。NAFLD组中,与HOMA-IR<2.5亚组相比,HOMA-IR≥2.5亚组BMI、WHR、FPG、SUA、TC、TG、LDL-c、CRP、MONO、MHR水平升高(P<0.05)。根据MHR三分位数分组,HOMA-IR水平在Q3MHR[4.67(2.93,7.29)]亚组明显高于Q1MHR[3.44(1.85,4.89)]、Q2MHR[4.15(2.13,6.03)]亚组(P<0.05),NAFLD发生率比较,Q3MHR亚组高于Q1MHR、Q2MHR亚组(74.51%比23.08%、39.22%,P<0.05),Q2MHR亚组高于Q1MHR(39.22%比23.08%,P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,LDL-c、CRP、MHR是T2DM合并GA患者发生NAFLD的危险因素(P<0.05)。ROC曲线结果显示,MHR预测T2DM合并痛风性关节炎患者发生NAFLD的曲线下面积(AUC)为0.759,灵敏度72.9%,特异度71.4%。结论 MHR与T2DM合并痛风性关节炎患者NAFLD发生相关,MHR对T2DM合并痛风性关节炎患者NAFLD发生有一定的预测价值。

关键词： 2型糖尿病痛风性关节炎单核细胞高密度脂蛋白胆固醇比值非酒精性脂肪肝

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四川大学学报（医学版） 2024年第3期55卷 619-629页

作者：薛秋云黄玉蓉李慧李辰程成龙王玉亭缪成贵安徽中医药大学中西医结合学院合肥230012

目的基于分泌Frizzled相关蛋白2(secreted frizzled-related protein 2, SFRP2)-Wnt/β-catenin信号通路探讨催乳颗粒(Cuiru Keli, CRKL)治疗产后缺乳的效果及其作用机制。方法通过向分娩后第3天的雌鼠灌胃2 mL1.6 mg/mL甲磺酸溴隐亭... 详细信息

目的基于分泌Frizzled相关蛋白2(secreted frizzled-related protein 2, SFRP2)-Wnt/β-catenin信号通路探讨催乳颗粒(Cuiru Keli, CRKL)治疗产后缺乳的效果及其作用机制。方法通过向分娩后第3天的雌鼠灌胃2 mL1.6 mg/mL甲磺酸溴隐亭来建立产后缺乳大鼠模型。将产仔时间差小于48 h的雌性大鼠随机分为7组:正常组(不造模,不给药);模型组;CRKL低剂量组(模型组+3 g/kg CRKL);CRKL中剂量组(模型组+6 g/kg CRKL)、CRKL高剂量组(模型组+9 g/kg CRKL);阳性药组(模型组+3 mg/kg多潘立酮);NC组(模型组+生理盐水);每组6只。除正常组和模型组外,其余5组按分组药物和剂量连续灌胃给药,每天1次,共10 d。取7组大鼠,测量10 d仔鼠总窝质量变化、HE染色观察乳腺病理变化。取除阳性对照组之外的6组大鼠,HE染色观察垂体病理变化,检测血清中PRL含量(ELISA)、乳腺组织(mammary tissue, MT)中PRLR的表达(免疫组化染色)、MT中乳汁合成相关基因mRNA的表达(RT-qPCR),然后以网络药理学和分子对接研究CRKL对产后缺乳的治疗作用和机制,特别是其是否通过SFRP2-Wnt/β-catenin信号通路治疗产后缺乳;再通过检测相关通路基因(RT-qPCR)和蛋白(Western blot)进行验证。然后进行细胞实验验证:取鉴定后的大鼠乳腺上皮细胞(rat mammary epithelial cell, RMEC),将RMEC分为4组:正常组(原代培养的RMEC,不处理)、 SFRP2过表达组(原代培养的RMEC+SFRP2过表达载体)、 SFRP2过表达+CRKL组(SFRP2过表达组+10%含药血清)、阴性对照组(原代培养的RMEC+空载体)。RT-qPCR检测过表达SFRP2后CRKL对于乳汁合成相关基因FASN、CSN2和GLUT1 mRNA表达的影响。结果与模型组相比,低、中、高剂量的CRKL均可以提高仔鼠10 d体质量增加量(P药理学表明,Wnt信号通路可能是CRKL治疗产后缺乳的关键通路。分子对接结果表明CRKL和CCND1、SFRP2具有良好的结合能力。与模型组相比,低、中、高剂量的CRKL均抑制体内SFRP2基因的表达(P<0.01),激活了产后缺乳大鼠乳腺中的Wnt/β-catenin信号通路中CCND1、c-Myc的基因和蛋白的表达(P<0.05或P<0.01)。细胞实验表明,过表达SFRP2后,与正常组相比,乳汁合成相关基因FASN、CSN2和GLUT1的mRNA水平也降低(P<0.01)。加入含药血清后,上述基因的表达上调(与SFRP2过表达组相比,P<0.01)。结论 CRKL通过SFRP2-Wnt/β-catenin信号通路治疗产后缺乳,SFRP2可能成为产后缺乳诊断和治疗的新靶点。这揭示了CRKL治疗产后缺乳的新机制,并促进了其临床推广。

关键词：催乳颗粒产后缺乳大鼠模型网络药理乳腺上皮细胞作用机制中医药

基于IL-6/JAK2/STAT3信号轴研究阳和平喘颗粒调控哮喘大鼠气道重塑作用机制

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海南医学院学报 2024年第1期30卷 15-20,28页

作者：吕川朱慧志刘向国曹晓梅夏咏琪张秋萍余子奇安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230031 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230031 安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012

目的:研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及白细胞介素-6(IL-6)/Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号轴在其中的作用机制。方法:选取健康雄性SD大鼠42只,随机数字法分为正常对照组7只与造模组35只,造模组... 详细信息

目的:研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠气道重塑及白细胞介素-6(IL-6)/Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录活化因子3(STAT3)信号轴在其中的作用机制。方法:选取健康雄性SD大鼠42只,随机数字法分为正常对照组7只与造模组35只,造模组采用卵清蛋白(OVA)联合氢氧化铝腹腔注射2周的方式进行致敏,正常对照组采用等量的生理盐水;2周后将造模组随机分为模型组、阳和平喘高、中、低剂量组和地塞米松组,每组7只;后4周采用OVA雾化+灌胃的方式进行激发和治疗,阳和平喘高中低组每日分别予以15.48、7.74、3.87 g/kg阳和平喘颗粒灌胃,地塞米松组予以0.0625 mg/kg地塞米松进行灌胃,其余组灌胃等量生理盐水。HE、PAS、Masson染色观察大鼠肺组织病理学变化;ELISA检测大鼠血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平;Western blot检测肺组织中JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3蛋白表达量;qRT-PCR检测大鼠肺组织中IL-6、JAK2、STAT3的mRNA水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肺组织有大量炎性细胞浸润,杯状细胞增生、上皮下胶原纤维沉积、气道上皮增厚较为明显;血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平显著升高(P<0.01),肺组织JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3的蛋白表达量和IL-6、JAK2、STAT3的mRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组炎性细胞浸润、杯状细胞增生、上皮下胶原纤维沉积、气道上皮增厚程度明显减轻,血清中IL-6、IL-23、IL-17A水平显著降低(P<0.01),肺组织JAK-2、P-JAK2、STAT3、P-STAT3的蛋白表达量和IL-6、JAK2、STAT3的mRNA水平显著降低(P<0.01)。结论:阳和平喘颗粒可明显缓解哮喘大鼠气道重塑,其机制可能是通过抑制IL-6/JAK2/STAT3信号轴发挥作用。

关键词：哮喘阳和平喘颗粒气道重塑 IL-6/JAK2/STAT3信号轴机制研究

论“尊重教育”视域下康复护理学课程思政的教学改革

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中国基层医药 2024年第7期31卷 1090-1092页

作者：朱宇吴月红李白坤安徽中医药大学护理学院合肥230012 安徽中医药大学中医学院合肥230012

在专业课教学中开展"课程思政"是当前高校立德育人教学的新理念、新模式, 在培养学生专业知识和技能时, 将思政德育融入课程教学的各个环节是实施护理专业课程思政的精髓。"尊重教育"常被作为德育教育内容进行课堂教学, 然而鲜有在护理... 详细信息

在专业课教学中开展"课程思政"是当前高校立德育人教学的新理念、新模式, 在培养学生专业知识和技能时, 将思政德育融入课程教学的各个环节是实施护理专业课程思政的精髓。"尊重教育"常被作为德育教育内容进行课堂教学, 然而鲜有在护理学专业课程教学中的报道。本研究从"课程思政"与"尊重教育"的内涵、主要内容、关联以及如何基于"尊重教育"开展康复护理学课程思政的教学改革进行阐述, 以期以课程为依托培育和践行社会主义核心价值观, 培养高质量的护理人才。

关键词：教育,护理康复护理课程护理人员教学职业

电针对单次长时间应激小鼠恐惧记忆消退及睡眠时相的影响及机制研究

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中国针灸 2024年第8期44卷 923-930页

作者：陈潇煜刘畅杜坤锐陈赟杨绍杰朱国旗王婧吉安徽中医药大学研究生院合肥230012 安徽中医药大学第二附属医院合肥230061 安徽中医药大学分子生物学/脑病重点实验室

目的:观察电针对单次长时间应激(SPS)小鼠恐惧记忆消退及睡眠时相的影响,从突触相关蛋白表达探究作用机制。方法:将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分成对照组、模型组、电针组和帕罗西汀组,每组8只。采用改良SPS法对模型组、电针组和帕罗西... 详细信息

目的:观察电针对单次长时间应激(SPS)小鼠恐惧记忆消退及睡眠时相的影响,从突触相关蛋白表达探究作用机制。方法:将32只雄性C57BL/6J小鼠随机分成对照组、模型组、电针组和帕罗西汀组,每组8只。采用改良SPS法对模型组、电针组和帕罗西汀组小鼠进行模型制备。造模结束后7 d,电针组小鼠于“百会”和双侧“足三里”行电针干预,选用疏密波,频率3 Hz/15 Hz,电流强度1 mA,干预30 min;帕罗西汀组小鼠予帕罗西汀溶液(2.5 g/L)灌胃(10 mg/kg)。两组均每日干预1次,连续10 d。采用条件性恐惧实验和高架十字迷宫实验观察各组小鼠恐惧记忆消退和焦虑样行为;Medusa大小鼠脑电肌电记录系统检测小鼠睡眠时相;Western blot法检测小鼠海马组织突触后密度蛋白95(PSD95)、活性调节细胞骨架(ARC)、脑源性神经营养因子(BDNF)、谷氨酸受体2A(GluN2A)、谷氨酸受体2B(GluN2B)和谷氨酸受体1(GluA1)的蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠恐惧再暴露3~15 min及恐惧消退0~3 min的凝滞时间延长(P<0.05),恐惧消退指数降低(P<0.05),在高架十字迷宫开放臂的停留时间缩短(P<0.05)。与模型组比较,电针组和帕罗西汀组小鼠恐惧再暴露3~6 min、12~15 min及恐惧消退0~3 min的凝滞时间缩短(P<0.05),恐惧消退指数升高(P<0.05);电针组小鼠在高架十字迷宫开放臂的停留时间延长(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠觉醒期(Wake)延长(P<0.05),非快速眼动睡眠期(NREM)和总睡眠时间(Sleep)缩短(P<0.05);与模型组比较,电针组和帕罗西汀组小鼠Wake缩短(P<0.05),NREM和Sleep延长(P<0.05)。与对照组比较,模型组小鼠海马组织PSD95、ARC、BDNF、GluN2A和GluA1蛋白表达降低(P<0.05),GluN2B蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,电针组和帕罗西汀组小鼠海马组织PSD95、ARC、BDNF、GluN2A和GluA1蛋白表达升高(P<0.05),GluN2B蛋白表达降低(P<0.05)。结论:电针“百会”“足三里”可改善SPS小鼠的焦虑样行为、恐惧记忆消退障碍和睡眠时相异常,其机制可能与调控海马突触传递和可塑性蛋白表达有关。

关键词：创伤后应激障碍电针恐惧记忆消退睡眠时相突触可塑性

抵当汤含药血清对高糖诱导大鼠肾小球内皮细胞损伤的影响

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中成药 2024年第9期46卷 2930-2935页

作者：罗宝璐储全根储俊李飞翔陈静王悦琦安徽中医药大学中医学院安徽合肥230012 安徽中医药大学新安医学教育部重点实验室安徽合肥230012

目的观察抵当汤含药血清对高糖诱导损伤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)的保护作用。方法大鼠灌胃给予蒸馏水或抵当汤制备空白血清或抵当汤含药血清,CCK8法筛选葡萄糖造模浓度及含药血清给药浓度。将RGECs分为空白组、模型组、抵当汤组(10%... 详细信息

目的观察抵当汤含药血清对高糖诱导损伤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs)的保护作用。方法大鼠灌胃给予蒸馏水或抵当汤制备空白血清或抵当汤含药血清,CCK8法筛选葡萄糖造模浓度及含药血清给药浓度。将RGECs分为空白组、模型组、抵当汤组(10%抵当汤含药血清)、达格列净组(空白血清+2μmol/L达格列净)、抵当汤+达格列净组(10%抵当汤含药血清+2μmol/L达格列净),药物处理24 h后,RT-qPCR法和Western blot法检测细胞Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测细胞Nrf2荧光表达,比色法检测细胞SOD活性及MDA水平。结果与空白组比较,模型组RGECs中Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达以及SOD活性降低(P<0.01),MDA水平升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组Nrf2、HO-1、NQO-1 mRNA和蛋白表达以及SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),MDA水平降低(P<0.01)。结论抵当汤含药血清可以通过激活Nrf2信号通路从而抑制氧化应激,对高糖损伤的RGECs起到保护作用。

关键词：抵当汤大鼠肾小球内皮细胞(RGECs) 糖尿病肾病 Nrf2信号通路氧化应激

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术的黄芩清热除痹胶囊化学成分分析

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分析测试学报 2024年第6期43卷 814-825页

作者：姜娟娟刘晓闯张艳艳张明媚刘健安徽中医药大学第一附属医院药学部安徽合肥230031 安徽中医药大学药学院安徽合肥230012 安徽中医药大学第一附属医院风湿科安徽合肥230031

应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法,对黄芩清热除痹胶囊(HQC)的化学成分进行快速鉴定,采用Water ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾... 详细信息

应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)法,对黄芩清热除痹胶囊(HQC)的化学成分进行快速鉴定,采用Water ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离源(ESI)在正、负离子模式下分别采集HQC的基峰色谱图。建立HQC的化学成分数据库,基于天然产物后处理筛查平台(UNIFI)进行靶向分析,结合化合物的精确分子量、二级碎片离子信息、对照品和文献数据等进行化学结构确认。从HQC中共鉴定出82个化合物,包括37个黄酮类、11个有机酸类、14个萜类、7个苷类、5个氨基酸类、8个其他类化合物;HQC主要以黄酮类成分为主。UPLC-Q-TOF-MS/MS结合UNIFI平台的分析方法可快速鉴定HQC的化学成分。

关键词：黄芩清热除痹胶囊超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱 UNIFI分析平台化学成分类风湿关节炎

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电针通过影响海马突触可塑性改善糖尿病认知减退大鼠的学习和记忆

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中国病理生理杂志 2024年第4期40卷 619-626页

作者：付勤袁爱红杨骏樊吟秋叶敏张乐乐钱俊安徽中医药大学第一临床医学院安徽合肥230038 安徽中医药大学第一附属医院安徽合肥230031 经脉脏腑相关安徽省重点实验室安徽合肥230038

目的:通过观察电针(EA)对大鼠海马丝裂原活化蛋白激酶激酶7(Map2k7)、磷脂酶A2 IVE组(Pla2g4e)、突触小泡蛋白(SYN)和突触后致密蛋白95(PSD95)表达及海马CA1区突触可塑性的影响,探讨EA对糖尿病认知功能减退(DCI)大鼠学习和记忆的改善作... 详细信息

目的:通过观察电针(EA)对大鼠海马丝裂原活化蛋白激酶激酶7(Map2k7)、磷脂酶A2 IVE组(Pla2g4e)、突触小泡蛋白(SYN)和突触后致密蛋白95(PSD95)表达及海马CA1区突触可塑性的影响,探讨EA对糖尿病认知功能减退(DCI)大鼠学习和记忆的改善作用及其机制。方法:采用高糖高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(30 mg/kg)诱导2型糖尿病大鼠模型,再通过Morris水迷宫实验筛选出认知减退的大鼠,随机分成DCI组和DCI+EA组,并以正常大鼠作为对照组,每组10只。DCI+EA组在“胰俞”、“内庭”和“后三里”穴处给予针刺治疗,DCI组和对照组只固定于鼠板。造模前后和治疗后,分别检测各组大鼠的随机血糖和逃避潜伏期,EA治疗28 d后,HE染色观察各组大鼠海马CA1区病理变化,透射电镜观察各组大鼠海马CA1区突触数量、突触后致密物(PSD)厚度和突触超微结构变化情况,RT-qPCR和Western blot法检测各组大鼠海马组织Map2k7、Pla2g4e、SYN和PSD95的mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,DCI组大鼠随机血糖水平显著升高(P0.05);海马组织中Map2k7的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P0.05)。结论:EA可以改善DCI大鼠的学习和记忆,其机制可能与调节海马Map2k7、Pla2g4e、SYN和PSD95蛋白表达,提高突触可塑性有关。

关键词：糖尿病认知功能减退电针突触可塑性学习记忆

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