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羟基红花黄色素A对糖氧剥夺后bEnd.3细胞自噬作用的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1734-1738页

作者：戴瑶瑶舒梦琦魏汝恒苗珠月丁智斌马东黄建军宋丽娟马存根山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室山西晋中030619 山西白求恩医院神经内科山西太原030032 国药同煤集团总医院神经外科山西大同037003 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001

目的探究羟基红花黄色素A(HSYA)对糖氧剥夺(OGD)后bEnd.3细胞自噬作用的影响及机制。方法将bEnd.3细胞分为正常组(常规培养)、模型组(OGD模型)、HSYA组(OGD模型+75μmol·L^(-1)HSYA)、3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3MA)抑制药组(5 mmol·L^(-1)3MA+OGD模型)、3MA+HSYA组(5 mmol·L^(-1)3MA+OGD模型+75μmol·L^(-1)HSYA)。用TUNEL荧光染色法测定细胞凋亡水平;用蛋白质印迹法测定自噬、血脑屏障(BBB)相关蛋白的表达水平;用实时荧光定量聚合酶链反应法测定沉默信息调节因子1(SIRT1)、人叉头蛋白O3A(FOXO3A)mRNA的表达水平。结果正常组、模型组、HSYA组、3MA抑制药组和3MA+HSYA组中TUNEL染色阳性细胞分别为5.00±1.00、28.00±2.00、21.00±3.00、35.33±2.51和29.67±2.52;微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ/-Ⅰ(LC3-Ⅱ/-Ⅰ)表达水平分别为0.90±0.20、1.34±0.10、1.95±0.14、0.76±0.15和1.14±0.09;泛素结合蛋白P62(P62)表达水平分别为0.99±0.02、0.60±0.02、0.38±0.01、0.67±0.04和0.54±0.01;闭合蛋白(Occludin)表达水平分别为1.39±0.17、0.62±0.15、1.00±0.09、0.40±0.13和0.80±0.15;紧密连接蛋白1(ZO-1)表达水平分别为1.63±0.20、0.64±0.06、0.98±0.14、0.37±0.14和0.87±0.04;SIRT1 mRNA表达为1.00±0.00、0.75±0.07、1.69±0.09、0.31±0.02和0.56±0.01;FOXO3A mRNA表达为1.00±0.00、0.80±0.05、1.47±0.09、0.40±0.01和0.62±0.09。模型组与正常组比较,HSYA组与模型组比较,3MA+HSYA组与3MA抑制药组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论HSYA可能通过SIRT1/FOXO3A通路增强OGD后bEnd.3细胞自噬水平,抑制细胞凋亡减轻BBB损伤。

关键词：羟基红花黄色素A 糖氧剥夺自噬 bEnd.3细胞沉默信息调节因子1/人叉头蛋白O3A通路

防风多糖部分酸水解降解产物的免疫调节活性与结构研究

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中国现代中药 2024年

作者：徐畅李洁孙萌范海涛张薇姜艳艳刘斌北京中医药大学中药学院北京电子科技职业学院生物工程学院国家中医药管理局中药经典名方有效物质发现重点研究室

目的：基于防风多糖（SP）的部分酸水解降解产物探究其免疫调节活性与结构特征。方法：选取不同浓度的三氟乙酸对SP进行控制性降解；采用长春瑞滨（NVB）诱导的免疫低下斑马鱼模型评价SP酸水解降解产物的免疫调节活性；基于亲水作用色谱... 详细信息

目的：基于防风多糖（SP）的部分酸水解降解产物探究其免疫调节活性与结构特征。方法：选取不同浓度的三氟乙酸对SP进行控制性降解；采用长春瑞滨（NVB）诱导的免疫低下斑马鱼模型评价SP酸水解降解产物的免疫调节活性；基于亲水作用色谱-蒸发光散射法（HILIC-ELSD）和超高效液相色谱-Q Exactive四极杆-静电场轨道离子阱串联质谱法（UHPLC-Q-Orbitrap MS/MS）初步分析SP降解产物。结果：三氟乙酸能够有效裂解SP的糖苷键，得到丰富的寡糖片段；不同条件下降解的SP酸水解降解产物对NVB造成的免疫细胞损伤均具有治疗作用。酸水解条件越剧烈，降解生成的寡糖片段越丰富，提高斑马鱼免疫细胞密度的能力越显著。在寡糖片段最丰富的样品中共鉴定出42个酸水解降解产物，包括8个单糖、13个糖醛酸、21个寡糖[聚合度为2～5]。结论：通过酸水解方法降解结构复杂的多糖，测定相应的免疫调节活性，可为多糖的构效关系研究提供依据。

关键词：防风多糖酸水解寡糖免疫调节活性

超声辅助酶法优化鸡骨草多糖提取工艺与抗炎研究

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甘肃医药 2024年第3期43卷 193-197,212页

作者：戴颖戴薇李翔宁青南京中医药大学附属中西医结合医院江苏南京210028 江苏省中医药研究院国家中医药管理局中药口服制剂释药系统重点研究室江苏南京210028

目的:在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化超声辅助酶法提取鸡骨草多糖的最佳工艺,并通过体外实验研究其抗炎活性。方法:单因素试验考查加酶量、液料比、酶解pH、酶解-超声功率、酶解-超声时间、酶解-超声温度对鸡骨草多糖提取率... 详细信息

目的:在单因素试验的基础上,采用响应面试验优化超声辅助酶法提取鸡骨草多糖的最佳工艺,并通过体外实验研究其抗炎活性。方法:单因素试验考查加酶量、液料比、酶解pH、酶解-超声功率、酶解-超声时间、酶解-超声温度对鸡骨草多糖提取率的影响,采用响应面试验优化多糖提取工艺。ELISA法检测炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10含量。结果:鸡骨草多糖最佳提取工艺:纤维素酶加酶量2.8%、液料比21∶1(mL/g)、酶解pH 5.0、酶解-超声功率250 W、酶解-超声时间90 min、酶解-超声温度49℃,提取率为13.26%。与LPS组比较,鸡骨草多糖可降低促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6含量,增加抗炎细胞因子IL-10含量,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:超声辅助酶法提取鸡骨草多糖效率高,获得的多糖具有较强的抗炎活性。

关键词：鸡骨草多糖超声辅助酶法响应面法抗炎

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金蒲橘泡腾片喷雾干燥、成型工艺优化

中成药 2024年第9期46卷 2892-2898页

作者：许玲牛晓静吴延娆岳亚楠徐立然段晓颖沙薇余萍河南中医药大学药学院河南郑州450008 河南中医药大学第一附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室河南省中药临床应用、评价与转化工程研究中心河南省中药临床药学中医药重点实验室河南郑州450000 西藏天晟泰丰药业有限公司西藏拉萨850000

目的优化金蒲橘泡腾片喷雾干燥、成型工艺。方法以浓缩液相对密度、进风温度、泵药速度为影响因素,出粉率为评价指标,正交试验结合反向传播人工神经网络(BP-ANN)优化喷雾干燥工艺。以浸膏粉用量、酸(无水柠檬酸)碱(碳酸氢钠)比例、酸碱... 详细信息

目的优化金蒲橘泡腾片喷雾干燥、成型工艺。方法以浓缩液相对密度、进风温度、泵药速度为影响因素,出粉率为评价指标,正交试验结合反向传播人工神经网络(BP-ANN)优化喷雾干燥工艺。以浸膏粉用量、酸(无水柠檬酸)碱(碳酸氢钠)比例、酸碱总量为影响因素,感官评分、崩解时间、吸湿性、发泡量的综合评分为评价指标,正交试验结合层次分析(AHP)-熵权法优化成型工艺。结果最佳喷雾干燥工艺为浓缩液相对密度1.15,进风温度135℃,泵药速度15%,出粉率为84.63%。最佳成型工艺为浸膏粉用量20%,酸碱比例1∶0.9,酸碱总量75%,综合评分为93分。结论该方法稳定可行,可为金蒲橘泡腾片工业化生产奠定基础。

关键词：金蒲橘泡腾片喷雾干燥工艺成型工艺正交试验反向传播人工神经网络(BP-ANN) 层次分析(AHP)-熵权法

法舒地尔通过抑制NLRP3炎症小体激活抑制Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎症反应

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中国免疫学杂志 2024年第9期40卷 1833-1837页

作者：郭敏芳章培军于婧文孟涛李艳花李娜李梦迪李玉璐宋丽娟尉杰忠马存根山西大同大学脑科学研究所大同037009 山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心晋中030619 山西医科大学生理学系太原030001 大同市第五人民医院大同037008

目的:基于NLRP3炎症小体探讨法舒地尔减轻Aβ_(1-42)诱导的BV2小胶质细胞损伤的机制。方法:BV2细胞分为:正常对照组、Aβ刺激组、Aβ+法舒地尔联合干预组、Aβ+MCC950(NLRP3抑制剂)联合干预组。显微镜下观察细胞形态;CCK8测定细胞活性;G... 详细信息

目的:基于NLRP3炎症小体探讨法舒地尔减轻Aβ_(1-42)诱导的BV2小胶质细胞损伤的机制。方法:BV2细胞分为:正常对照组、Aβ刺激组、Aβ+法舒地尔联合干预组、Aβ+MCC950(NLRP3抑制剂)联合干预组。显微镜下观察细胞形态;CCK8测定细胞活性;Griess测定NO释放量;免疫荧光染色检测NLRP3、caspase 1和IL-18表达;Western blot检测NLRP3、ASC、caspase 1、IL-1β和IL-18表达。结果:与正常对照组比较,Aβ_(1-42)刺激组BV2细胞激活,呈阿米巴样形态,活性下降,NO释放量增加,NLRP3、ASC、caspase 1、IL-1β和IL-18表达增加。法舒地尔干预和MCC950干预均可改善Aβ_(1-42)诱导的BV2细胞损伤,使细胞形态趋于正常,细胞活性有所增加,NO释放量降低,同时下调NLRP3、ASC、caspase 1、IL-1β和IL-18表达,两组间差异无统计学意义。结论:法舒地尔可能通过抑制NLRP3炎症小体激活减轻Aβ_(1-42)诱导的BV2细胞损伤和炎症反应。

关键词：法舒地尔小胶质细胞 NLRP3炎症小体炎症反应

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气络学说精气神理论指导早衰防治及研究进展

中国实验方剂学杂志 2024年

作者：集川原李红蓉郝佳梦王丹东马玉聪马坤魏聪河北中医药大学中西医结合研究所河北省中西医结合肝肾病证研究重点实验室络病理论创新转化全国重点实验室河北以岭医院中国中医药科技发展中心(国家中医药管理局人才交流中心) 咸阳市中心医院石家庄市复方中药新药技术创新中心

早衰的理论基础源于《黄帝内经》，病因复杂，病机以虚为主，治法以补为主。气络学说精气神理论概括“精是生命起源，气是生命动力，神是生命体现”的生命规律，提出“肾精虚衰是衰老根本，元气亏虚是衰老关键，形神耗损是衰老表现”的... 详细信息

早衰的理论基础源于《黄帝内经》，病因复杂，病机以虚为主，治法以补为主。气络学说精气神理论概括“精是生命起源，气是生命动力，神是生命体现”的生命规律，提出“肾精虚衰是衰老根本，元气亏虚是衰老关键，形神耗损是衰老表现”的衰老核心病机，“补肾填精、燮理阴阳、温扶元气、充养形神”的治法及抗衰老代表药物。该文从天年、半百而衰、衰、老概念角度展开，解读早衰的源流及内涵，在气络学说精气神理论指导下阐释“肾精早夺、元气亏虚、积虚成损、形神衰损”的早衰病机，总结早衰治法及代表药物现代医学研究进展，发现该药物对整体早衰、系统性功能衰退和相关疾病疗效确切。该研究为解决早衰及老年病问题提供理论依据和新的思路。

关键词：气络学说精气神理论早衰抗衰老八子补肾胶囊

基于UPLC-Q-TRAP-MS分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后10个指标成分含量变化

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中华中医药学刊 2024年第5期42卷 190-195页

作者：吴溪许杨吴德玲赵想汪孰敏高家荣安徽中医药大学第一附属医院国家中医药管理局中药制剂三级实验室安徽合肥230031 安徽万邦医药科技股份有限公司安徽合肥230031 安徽中医药大学安徽合肥230031 皖南医学院安徽芜湖241002

目的分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法。方法采用Welch Ultimate XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40℃,梯度洗脱;质... 详细信息

目的分析养心安神药对酸枣仁-五味子配伍煎煮前后主要指标成分差异变化,并建立含量测定方法。方法采用Welch Ultimate XB-C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,流速0.4 mL/min柱温40℃,梯度洗脱;质谱采用电喷雾离子源(ESI),多反应监测离子扫描模式(MRM)。分别对该药对单煎液、单煎合并液与合煎液中主要指标成分酸枣仁皂苷A、斯皮诺素、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素、芦丁、槲皮素、山柰酚、山柰酚-3-O-云香糖苷进行含量测定,并分析药对配伍前后主要指标成分的含量变化差异。结果以上10种成分在一定浓度范围内均呈现良好的线性关系;精密度、重复性和稳定性RSD均良好;平均加样回收率在95.0%~102.1%,RSD为0.03%~3.7%。本次实验结果与前期试验认为酸枣仁与五味子在合煎后,主要指标成分降低保持一致性。结论多指标成分同时测定为该药对配伍质量全面控制提供新的方法并为其药效物质基础的深入研究提供依据。

关键词：酸枣仁-五味子药对 UPLC-Q-TRAP-MS 含量测定

基于铁死亡探讨铁脂代谢紊乱的调节机制及中药干预的研究进展

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医药导报 2024年

作者：王姝雯白旭峰曹清雨刘亚丽胡慧明朱彦陈江西中医药大学药学院南昌医学院药学院江西省卫生健康药效与安全性评价重点实验室江西省中医药管理局抗炎类中药药效与质量评价重点研究室江西中医药大学计算机学院

铁死亡是铁脂代谢紊乱所致的铁依赖性细胞死亡形式，其发生机制主要包括脂质代谢和铁代谢等方面，这些途径受到各种代谢和信号通路复杂又严格的调节。目前研究证明，铁死亡与癌症、动脉粥样硬化和神经性疾病有关。中药具有活性成分多、... 详细信息

铁死亡是铁脂代谢紊乱所致的铁依赖性细胞死亡形式，其发生机制主要包括脂质代谢和铁代谢等方面，这些途径受到各种代谢和信号通路复杂又严格的调节。目前研究证明，铁死亡与癌症、动脉粥样硬化和神经性疾病有关。中药具有活性成分多、安全性较高、治疗成本较低等特点，临床应用具有独特优势，广泛应用于各类疾病的治疗，将中药调节铁死亡作为切入点可能是未来防治各类疾病的新方向。该文基于铁死亡讨论铁脂代谢紊乱的机制研究及中药干预研究进展，以期为相关疾病的防治提供参考和治疗策略。

关键词：铁死亡脂质代谢脂质过氧化铁代谢中药

祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠及其Th17/Treg平衡的影响

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时珍国医国药 2024年第8期35卷 1823-1827页

作者：马骏郭影苏小军王怀弟朱文菊包强马富海杨会军刘亚鹏甘肃中医药大学甘肃兰州730000 国家中医药管理局三级科研实验室中药药理实验室甘肃兰州730000 甘肃省中医院甘肃兰州730000 兰州市食品药品检验检测研究院甘肃兰州730000

目的观察祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠模型的作用以及对其Th17/Treg相关细胞因子与转录因子平衡的影响。方法 SD大鼠随机分出12只作为正常对照组,其余65只大鼠通过尾根部皮下注射Ⅱ型胶原乳剂并人工模拟寒湿刺激制备寒湿... 详细信息

目的观察祛寒逐风合剂对寒湿痹阻证类风湿关节炎大鼠模型的作用以及对其Th17/Treg相关细胞因子与转录因子平衡的影响。方法 SD大鼠随机分出12只作为正常对照组,其余65只大鼠通过尾根部皮下注射Ⅱ型胶原乳剂并人工模拟寒湿刺激制备寒湿痹阻型RA大鼠模型。选取造模成功的60只大鼠随机分为模型对照组、甲氨喋呤组(1.4 mg·kg^(-1))、祛寒逐风合剂低、中、高剂量组(20.1、40.2、80.5 g·kg^(-1)),各组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型对照组给予等容量生理盐水,连续28 d。实验过程中,观察各组大鼠的一般状况,于造模前、造模后、给药后每周测量各组大鼠踝关节周长。给药结束后,检测胸腺和脾脏指数,HE检测踝关节病理学变化,ELISA检测血清Th17/Treg相关细胞因子TNF-α、IL-6、IL-17、IL-10的含量,RT-qPCR检测滑膜组织中Th17/Treg相关转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA的表达量。结果与正常对照组比较,模型对照组大鼠关节肿胀明显,脾脏指数和胸腺指数升高(P<0.01),踝关节炎性细胞浸润、滑膜细胞增生严重,血清TNF-α、IL-6、IL-17水平显著升高(P<0.01),IL-10水平显著降低(P<0.01),RORγt mRNA表达升高(P<0.01),Foxp3 mRNA表达降低(P<0.01);与模型对照组比较,祛寒逐风合剂低、中、高剂量组均能抑制关节肿胀(P<0.05或P<0.01),祛寒逐风合剂中、高剂量组大鼠胸腺和脾脏指数显著降低(P<0.05或P<0.01),祛寒逐风合剂低、中、高剂量组均能改善踝关节病理损伤,降低TNF-α、IL-6、IL-17水平,升高IL-10水平(P<0.01),祛寒逐风合剂中、高剂量组RORγt mRNA表达显著降低(P<0.01),Foxp3 mRNA表达显著升高(P<0.01)。结论祛寒逐风合剂具有调节Th17/Treg平衡的作用,其机制可能与其调控Th17/Treg相关细胞因子及转录因子有关。

关键词：祛寒逐风合剂寒湿痹阻型类风湿关节炎 CIA大鼠 Th17/Treg平衡