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进境比利时杜鹃中杜鹃塞弗特菌的检疫鉴定

菌物学报 2024年

作者：龚静如田沂民徐飞虞天华周淑辉易建平上海海关动植物与食品检验检疫技术中心

从进境比利时酒红杜鹃种苗花芽上获得1株真菌分离物 8033-2，通过形态学特征比较、内部转录间隔区（ITS）、翻译伸长因子（EF-1α）以及RNA聚合酶II第二大亚基（RPB）序列分析和致病性测定方法对分离物进行了鉴定。形态学观察结果表明... 详细信息

从进境比利时酒红杜鹃种苗花芽上获得1株真菌分离物 8033-2，通过形态学特征比较、内部转录间隔区（ITS）、翻译伸长因子（EF-1α）以及RNA聚合酶II第二大亚基（RPB）序列分析和致病性测定方法对分离物进行了鉴定。形态学观察结果表明，分离物8033-2初期菌落白色，茸毛状，气生菌丝较多；后期菌落致密，正面深灰色，背面橄榄绿色。分生孢子单细胞，平滑，近球形或椭圆形，灰褐色，大小为8.04(6.32–11.49)×5.60(4.38–7.40) μm。其ITS、EF-1α、RPB序列与GenBank中多株杜鹃塞弗特菌相应序列的相似性分别为100%、100%和99.90%；基于ITS序列的系统发育树显示，分离物8033-2与杜鹃塞弗特菌处于同一分支。人工伤口接种健康杜鹃花芽引起褐变枯死症状。根据上述结果，将分离物8033-2鉴定为杜鹃塞弗特菌Seifertia azaleae，这是我国口岸首次截获该种检疫性有害生物。

关键词：杜鹃塞弗特菌杜鹃鉴定

磁固相萃取结合超高效液相色谱串联质谱法检测绿茶中19种有机磷农药残留

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食品工业科技 2024年第3期45卷 253-261页

作者：郭春丽余晓峰韩芳贾学颖雷雨甜刘会佳吴琼林童伊雄海宋伟合肥海关技术中心食品安全分析与检测安徽省重点实验室安徽合肥230022 西宁海关技术中心青海西宁810000 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200003

本文采用化学共沉淀法合成磁性石墨烯(Fe_(3)O_(4)@G),并将其作为一种磁固相萃取剂用于绿茶中有机磷农药的萃取富集,结合超高效液相色谱串联质谱技术,建立同时检测绿茶中19种有机磷农药残留的分析方法。本实验选择吸附剂用量为40 mg,萃... 详细信息

本文采用化学共沉淀法合成磁性石墨烯(Fe_(3)O_(4)@G),并将其作为一种磁固相萃取剂用于绿茶中有机磷农药的萃取富集,结合超高效液相色谱串联质谱技术,建立同时检测绿茶中19种有机磷农药残留的分析方法。本实验选择吸附剂用量为40 mg,萃取时间20 min,样品溶液pH为7,3.0 mL丙酮解吸,氯化钠用量为4 g。结果表明,在5~500μg/L范围内,线性相关系数大于0.999,制备的Fe_(3)O_(4)@G材料具有良好的稳定性和可重复利用性。检出限(LOD)在5.0~6.0μg/kg,定量限(LOQ)在15.0~20.0μg/kg。当样品加标水平为20.0、40.0、200.0μg/kg时,回收率在61.2%~94.9%之间,相对标准偏差(RSD,n=6)在2.6%~10.2%之间。本方法适用范围广,前处理易操控,有机溶剂用量少,经济,安全,材料可重复使用,该磁分散固相萃取技术在茶叶中农药的富集分离有很好的应用前景。

关键词：磁固相萃取绿茶有机磷农药超高效液相色谱串联质谱

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检疫性真菌DNA条形码研究进展

菌物学报 2024年

作者：高瑞芳汪莹钟友婷郑铭森刘建冼嘉恒章桂明深圳海关动植物检验检疫技术中心深圳市检验检疫科学研究院

DNA条形码技术作为一项物种鉴定的新技术，在动物、植物、真菌等物种的快速准确鉴定方面日趋成熟，为进出境植物检疫及外来入侵物种鉴定提供了有力的工具。本文概述了真菌DNA条形码技术研究进展，分析了中国、美国等5个主要贸易国家/地... 详细信息

DNA条形码技术作为一项物种鉴定的新技术，在动物、植物、真菌等物种的快速准确鉴定方面日趋成熟，为进出境植物检疫及外来入侵物种鉴定提供了有力的工具。本文概述了真菌DNA条形码技术研究进展，分析了中国、美国等5个主要贸易国家/地区检疫性真菌物种DNA条形码收集现状，并从柄锈菌属、疫霉属等重要检疫性真菌所在类群DNA条形码现状分析了DNA条形码筛选、现有数据库资源等存在的问题，提出全基因组水平筛选检疫性真菌DNA条形码的思路以期提高鉴定准确性，提出加强国际合作、建立检疫性真菌DNA条形码数据库等建议。

关键词：检疫性真菌 DNA条形码全基因组测序数据库

固相萃取-液相色谱串联质谱法测定奶及奶粉中12种同化激素药物残留量

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分析试验室 2024年

作者：赵善贞杨惠琴伊雄海郭德华盛永刚封卓然上海海关动植物与食品检验检疫技术中心

建立了奶及奶粉中12种同化激素多残留的固相萃取净化-液相色谱串联质谱（SPE-LC-MS/MS）的检测方法。样品经乙腈提取、HLB固相萃取柱净化、氮气吹干后，残留物用乙腈∶水（50∶50，V/V）溶解定容，液相色谱串联质谱仪以多反应监测（MRM... 详细信息

建立了奶及奶粉中12种同化激素多残留的固相萃取净化-液相色谱串联质谱（SPE-LC-MS/MS）的检测方法。样品经乙腈提取、HLB固相萃取柱净化、氮气吹干后，残留物用乙腈∶水（50∶50，V/V）溶解定容，液相色谱串联质谱仪以多反应监测（MRM）模式测定，内标法定性定量分析。12种同化激素的检出限（LOD）均为0.5 μg/kg，定量限（LOQ）均为1.0 μg/kg。在1.0～10.0 μg/L添加水平上，12种同化激素在牛奶基质中的回收率在71.4%～109.0%之间；在羊奶基质中的回收率在72.9%～121.5%之间；在牛奶粉基质中的回收率在67.4%～113.0%之间，相对标准偏差（RSD）均<15%。该方法可应用于奶及奶粉中甲睾酮、表睾酮、诺龙、勃地龙、群勃龙、脱氢表雄酮、甲地孕酮、甲羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸甲羟孕酮、醋酸美仑孕酮、醋酸氯地孕酮等同化激素的定性定量分析。

关键词：液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS) 奶及奶制品同化激素

基于RAA-CRISPR/Cas13a的口蹄疫病毒检测方法的建立

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中国动物传染病学报 2024年

作者：蒋静林颖峥蔡一村冯之航王艳郁蕾熊炜李树清李健薛俊欣张强上海海关动植物与食品检验检疫技术中心

CRISPR/Cas核酸检测技术是新一代生物病原体核酸检测技术，具有灵敏度高、特异性强、准确快速的优点，结合RAA等温扩增技术，可以放大检测的灵敏度。本研究通过对FMDV全基因全序列比对，设计两套引物和相应crRNA针对7个不同血清型FMDV... 详细信息

CRISPR/Cas核酸检测技术是新一代生物病原体核酸检测技术，具有灵敏度高、特异性强、准确快速的优点，结合RAA等温扩增技术，可以放大检测的灵敏度。本研究通过对FMDV全基因全序列比对，设计两套引物和相应crRNA针对7个不同血清型FMDV。样品核酸经RAA扩增后，加入CRISPR/Cas13a体系进行反应，检测荧光信号，建立了口蹄疫病毒RAA-CRISPR/Cas13a新型分子生物学检测方法，对其灵敏性、特异性和一致性进行了检测。研究结果显示，本研究建立的方法对RAA检测有放大作用，方法灵敏度达到102拷贝/μL，且特异性强。对临床样本开展检测，结果与标准荧光RT-PCR检测结果几乎完全一致。本研究建立的RAA-CRISPR/Cas13a方法可以特异性检测口蹄疫7个血清型毒株，方法灵敏度较高、重复性好，可以丰富FMDV的现有检测手段。

关键词：口蹄疫病毒快速检测 RAA Cas13a

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全自动间断化学分析仪测定食品中的二氧化硫

食品科技 2024年第6期49卷 322-327页

作者：林妮林起辉张建莹杨丽丹张诗华潘清陈润梅深圳海关食品检验检疫技术中心广东深圳518000

文章研究了甲醛吸收、盐酸副玫瑰苯胺显色的全自动间断化学分析仪测定食品中二氧化硫含量的方法。经过甲醛缓冲溶液处理的样品,释放出的二氧化硫会被甲醛溶液吸收并形成稳定的羟甲基磺酸衍生物;通过加入氢氧化钠促使衍生物分解,进而释... 详细信息

文章研究了甲醛吸收、盐酸副玫瑰苯胺显色的全自动间断化学分析仪测定食品中二氧化硫含量的方法。经过甲醛缓冲溶液处理的样品,释放出的二氧化硫会被甲醛溶液吸收并形成稳定的羟甲基磺酸衍生物;通过加入氢氧化钠促使衍生物分解,进而释放出二氧化硫;盐酸副玫瑰苯胺与释放的二氧化硫发生反应,生成蓝紫色络合物,在550 nm处用全自动间断化学分析仪测定食品中的二氧化硫。对该方法的检出限、定量限、线性、准确性、重复性等进行分析,结果表明:该方法的检出限为2 mg/kg,定量限为5 mg/kg,在0.0~20.0 mg/L范围内吸光度与二氧化硫含量呈良好的线性关系(r=0.999),相对标准偏差小于5%(n=6),与国标方法相比无显著性差异,测定有证标准物质的测定值在标准参考值范围内。建立的分析方法自动化程度高,准确、灵敏、精密,操作简便快速,同时避免汞的毒性和污染,能满足大批量食品中二氧化硫含量的测定。

关键词：全自动间断化学食品二氧化硫甲醛吸收盐酸副玫瑰苯胺显色

镍钴物料的来源分析及进口可用做原料的可行性探讨

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冶金分析 2024年第6期44卷 49-56页

作者：余淑媛王刚徐勤任聪孙乐纯冯均利深圳海关工业品检测技术中心深圳市检验检疫科学研究院蛇口海关

对一例申报为“镍钴物料”的进口货物进行多技术联用表征，通过分析确认其来源属性，并对其是否可用作原料的可行性进行了探讨，结果为进口监管提供了技术支撑。采用X射线荧光光谱分析、碳硫分析、顶空气相色谱质谱分析、裂解气相色谱... 详细信息

对一例申报为“镍钴物料”的进口货物进行多技术联用表征，通过分析确认其来源属性，并对其是否可用作原料的可行性进行了探讨，结果为进口监管提供了技术支撑。采用X射线荧光光谱分析、碳硫分析、顶空气相色谱质谱分析、裂解气相色谱质谱分析、X射线衍射分析、电镜能谱分析、电位滴定分析、原子吸收光谱分析、热重分析、感观检测等多种技术手段进行测试，并与相关文献资料对比进行溯源分析，对样品进行微观形貌、元素组成、物相组成、毒害物质、有机物等特征的分析。结果表明：样品主要为镍钴锰酸锂三元材料，还含有少量金属铝屑、单质碳以及有机物，具有锂离子电池正极片的组成特征，结合样品的外观和组成特征，确认样品是锂离子电池正极片的回收粉料。

关键词：镍钴物料电池回收料多技术表征来源分析

SARS-CoV-2 Omicron变异株多重微滴式数字PCR定量方法的建立及应用

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生物技术通报 2024年第2期40卷 80-89页

作者：郑巧林华徐浩安微薛昌华张婧韩国全成都海关技术中心成都610000 四川农业大学食品学院雅安625014 深圳海关动植物检验检疫技术中心深圳518045

【目的】为建立精准、高效的多重微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量分析检测方法,开发可同时鉴别新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)ORF1ab基因、N基因、E基因以及Omicron变异株S基因的检测体系,提高病毒性传染疾病的诊断效率及传播风险监测能力。【方法】通过筛选保守基因序列并设计特异性引物与探针,优化反应体系和扩增程序,对该方法的特异性、灵敏度及稳定性进行评价。以临床样本为实验材料,利用建立的ddPCR方法进行检测和验证,确定阳性检出率。【结果】多重ddPCR反应体系中,各对引物探针对目的片段均能有效扩增,SARS-CoV-2 ORF1ab基因、N基因、E基因以及Omicron变异株S基因灵敏度检测下限分别为0.59、0.68、1.44、1.03 copies/μL。在20份临床样本的核酸检测中,共检出16份阳性样本,阳性率达80%(16/20),经荧光定量PCR方法复测符合率一致。【结论】研究建立的多重ddPCR方法特异性强、灵敏度高,可实现对临床样本中微量新冠病毒的精确定量检测。

关键词：微滴式数字PCR 新型冠状病毒 Omicron变异株定量

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基于气相色谱-质谱法测定茶叶中8种卡西酮类新精神活性物质

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食品科学 2024年第16期45卷 262-267页

作者：唐庆强王君张惠琴王巧霞曹晓钢吴春灯杨方福州海关技术中心福建福州350001 三明海关综合技术服务中心福建三明365001 拉萨海关技术中心西藏拉萨850002 上海海关动植物与食品检验检疫技术中心上海200135 福州大学生物科学与工程学院福建福州350108

在优化前处理条件和色谱分离的基础上,建立同时测定茶叶中常见8种卡西酮类新精神活性物质的气相色谱-质谱测定方法。优化样品的提取、净化、色谱及质谱条件,最终选择用碱化甲醇提取,N-丙基乙二胺填料和HLB固相萃取小柱净化,经DB-17MS毛... 详细信息

在优化前处理条件和色谱分离的基础上,建立同时测定茶叶中常见8种卡西酮类新精神活性物质的气相色谱-质谱测定方法。优化样品的提取、净化、色谱及质谱条件,最终选择用碱化甲醇提取,N-丙基乙二胺填料和HLB固相萃取小柱净化,经DB-17MS毛细管柱(30 m×0.25 mm,0.25μm)分离,使用电子电离源,选择离子监测模式进行质谱监测。结果表明:该方法在0~200μg/L质量浓度范围具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))均大于0.998;方法的检出限(R_(SN)=3)和定量限(R_(SN)=10)分别为7、25μg/kg;在阴性样品中进行1、2、10倍定量限3个水平的加标回收实验,8种卡西酮类化合物的加标回收率为67.2%~117.6%,相对标准偏差(n=6)为4.3%~12.3%。该方法稳定性好、灵敏度高,能够满足茶叶样品中卡西酮的检测要求。

关键词：卡西酮茶叶气相色谱-质谱新精神活性物质筛查