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橘皮素调控PI3K/Akt信号通路介导的自噬对脑缺血/再灌注损伤大鼠神经细胞焦亡的影响

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中国药学杂志 2024年第6期59卷 511-521页

作者：孙军温昌明张丽阳高军张在行陈笛时彩丽兰端云张保朝河南省南阳市中心医院神经内科河南南阳473009 河南省南阳市中心医院优诊室门诊河南南阳473009 河南省南阳市中心医院护理部河南南阳473009 河南省南阳市中心医院内分泌科河南南阳473009

目的探究橘皮素(tangeretin,TAN)对脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经元细胞焦亡的影响及作用机制。方法采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉2 h后再灌注复制CIRI模型。实验1:将SD大鼠随机分为假手术组(s... 详细信息

目的探究橘皮素(tangeretin,TAN)对脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)大鼠神经元细胞焦亡的影响及作用机制。方法采用线栓法阻塞大鼠大脑中动脉2 h后再灌注复制CIRI模型。实验1:将SD大鼠随机分为假手术组(sham)、CIRI组、TAN-5 mg·kg^(-1)组、TAN-10 mg·kg^(-1)组、TAN-20 mg·kg^(-1)组、阳性对照药依达拉奉组(EDA-10 mg·kg^(-1)),每组各10只,各组大鼠于再灌注24 h后进行指标检测及病理取材。Zea-Longa法进行神经功能缺失评分;2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)法检测脑梗死比率;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织形态结构,筛选出TAN最佳给药剂量;碘化丙啶染色(PI)检测神经元焦亡比率;免疫荧光双染检测神经元微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(microtubule-associated proteins light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)阳性表达率;Western blot检测脑组织焦亡相关蛋白、磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)通路相关蛋白和自噬相关蛋白(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62)表达。实验2:将SD大鼠随机分为sham组、CIRI组、TAN组、TAN+PI3K抑制剂组(LY294002),每组各10只,各组大鼠于再灌注24 h后进行指标检测及病理取材。Zea-Longa法进行神经功能缺失评分;TTC染色法检测脑梗死比率;Western blot检测脑组织焦亡相关蛋白和自噬相关蛋白表达。结果与CIRI组相比,各给药剂量组大鼠神经功能缺失评分降低、脑梗死体积比率降低、脑组织病理性损伤减轻,筛选得到TAN-20 mg·kg^(-1)为最佳给药剂量组。与CIRI组相比,TAN-20 mg·kg^(-1)组大鼠神经元细胞焦亡率降低,且焦亡相关蛋白表达下调,神经元LC3-Ⅱ阳性细胞率和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达均降低,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p62表达升高。与TAN-20 mg·kg^(-1)组相比,PI3K抑制剂LY294002能够抑制上述指标变化,逆转TAN对CIRI大鼠的神经功能保护作用。结论TAN能够通过调控PI3K/Akt介导的细胞自噬,抑制脑缺血再灌注诱导的神经元细胞焦亡。

关键词：脑缺血/再灌注损伤橘皮素细胞焦亡自噬磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B通路

日常饮食中添加摄食甜菜碱对APP/PS1转基因小鼠的影响

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中成药 2024年第2期46卷 620-625页

作者：张丽阳孙军陈笛张在行南阳市中心医院神经内科河南南阳473000

目的研究日常饮食中添加摄食甜菜碱对APP/PS1转基因小鼠的影响。方法 C57BL/6J小鼠作为空白对照组,APP/PS1小鼠分为正常饮食组和甜菜碱补充饮食组(含5 g/kg甜菜碱),每组15只,饮食持续3个月。水迷宫实验评估小鼠的记忆行为;免疫荧光法... 详细信息

目的研究日常饮食中添加摄食甜菜碱对APP/PS1转基因小鼠的影响。方法 C57BL/6J小鼠作为空白对照组,APP/PS1小鼠分为正常饮食组和甜菜碱补充饮食组(含5 g/kg甜菜碱),每组15只,饮食持续3个月。水迷宫实验评估小鼠的记忆行为;免疫荧光法观察海马和皮质中β-淀粉样蛋白(Aβ)的沉积情况;巢蛋白(Nestin)和双皮质素(DCX)标记法以及神经元核抗原(NeuN)和EdU双标法观察海马神经再生情况;GFP-AAV脑立体注射并用荧光显微镜观察CA1区神经元的棘突情况;电生理记录海马CA1区长时程增强效应(LTP);Western blot法检测海马中突触后致密蛋白-95(PSD-95)、突触小泡蛋白(SYN)、微管相关蛋白(MAP-2)表达。结果与正常饮食组比较,甜菜碱补充饮食组APP/PS1小鼠逃避潜伏期缩短(P神经元数均增多(P神经发生和突触可塑性。

关键词：甜菜碱 APP/PS1转基因小鼠阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白神经发生突触可塑性

急性感染性坏死性胰腺炎微生态免疫制剂肠内营养支持治疗的应用效果

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中华医院感染学杂志 2024年 3402-3407页

作者：和青森钱国武张雪丹史娟闪海霞孙晓林南阳市中心医院神经重症一病区南阳市中心医院普通外科胃肠二病区南阳市中心医院脾脏外科南阳市中心医院感染性疾病一病区南阳市中心医院护理部

目的探究急性感染性坏死性胰腺炎(IPN)微生态免疫制剂肠内营养(EN)支持治疗的应用效果。方法选取2020年12月—2023年10月南阳市中心医院收治的急性IPN患者97例为研究对象,按不同EN治疗方式分为研究组52例(给予常规EN干预及微生态免疫... 详细信息

目的探究急性感染性坏死性胰腺炎(IPN)微生态免疫制剂肠内营养(EN)支持治疗的应用效果。方法选取2020年12月—2023年10月南阳市中心医院收治的急性IPN患者97例为研究对象,按不同EN治疗方式分为研究组52例(给予常规EN干预及微生态免疫制剂治疗)和常规组45例(给予常规EN干预)。对比两组患者干预前后的实验室指标、肠道菌群;比较随访28 d内患者并发症发生率及预后情况。结果两组患者干预后血清免疫球蛋白(Ig)A、IgM、IgG、血钙水平及厚壁菌门、放线菌门相对丰度均高于干预前(P<0.05),且研究组高于常规组(P<0.05);两组患者干预后血清白细胞介素-6、C-反应蛋白、降钙素原、白细胞计数、淀粉酶、脂肪酶、乳酸脱氢酶水平及变形菌门、拟杆菌门相对丰度均低于干预前(P<0.05),且研究组低于常规组(P<0.05);两组干预后腹内压及Ranson评分均低于干预前(P<0.05),且研究组低于常规组(P<0.05);研究组患者并发症发生率低于常规组(P<0.05);两组28 d内病死率比较,无统计学差异。结论相较于常规EN支持,微生态免疫制剂EN支持可提高急性IPN患者免疫功能,减轻炎症,缓解病情,改善肠道菌群,降低并发症发生风险,改善预后。

关键词：微生态免疫制剂肠内营养急性感染性坏死性胰腺炎胃肠功能免疫球蛋白

低剂量氯胺酮通过小胶质细胞NF-κB/iNOS通路减轻小鼠颅脑创伤后的微循环障碍

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中华神经医学杂志 2024年第1期23卷 10-17页

作者：张国栋何锋李远超赵岗张家旗郭锋杰程振国新乡市中心医院神经外科新乡453000

目的:探讨低剂量氯胺酮对颅脑创伤(TBI)小鼠神经炎症和微循环的影响。方法:采用随机数字表法将60只成年雄性C57BL/6小鼠分成假手术组、TBI组、假手术+氯胺酮组和TBI+氯胺酮组,每组15只;后2组小鼠采用控制性皮质撞击法(CCI)建立开放性TB... 详细信息

目的:探讨低剂量氯胺酮对颅脑创伤(TBI)小鼠神经炎症和微循环的影响。方法:采用随机数字表法将60只成年雄性C57BL/6小鼠分成假手术组、TBI组、假手术+氯胺酮组和TBI+氯胺酮组,每组15只;后2组小鼠采用控制性皮质撞击法(CCI)建立开放性TBI模型。假手术+氯胺酮组和TBI+氯胺酮组于造模后30 min腹腔注射氯胺酮30 mg/kg,1次/d,连续3 d。假手术组和TBI组分别于相同时间点经腹腔注射等量生理盐水。每组取6只小鼠分别于造模前、造模后即刻、造模后30 min、造模后1 d及造模后3 d利用激光散斑对比血流成像(LSCI)技术测量脑皮层血流量。另取6只小鼠于造模后第3天经心脏灌注取材行免疫组织化学染色和免疫荧光双标染色,检测小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白抗体-1(Iba-1)及核因子(NF)-κB p65核转位情况。剩余每组3只小鼠于造模后第3天处死后制成组织原浆,通过Western blotting实验检测皮质脑组织NF-κB p65、p-NF-κB p65、p-IκB及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白水平,通过ELISA法检测皮层脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、iNOS、氧自由基(ROS)、氮自由基(RNS)表达水平。结果:LSCI检测结果显示,造模后3 d,与TBI组比较,TBI+氯胺酮组小鼠脑局部微循环相对血流量明显增加,差异有统计学意义( P神经炎症,改善脑微循环血流,其作用机制可能与抑制小胶质细胞NF-κB/iNOS通路有关。

关键词：颅脑创伤氯胺酮小胶质细胞微循环神经炎症

基于TLR4/NLRP3信号通路探讨化浊行血汤促进高血压脑出血患者术后神经功能恢复的作用

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辽宁中医杂志 2024年

作者：胡昱月张晓冬范晶晶南阳市中心医院

目的探究化浊行血汤促进高血压脑出血（HICH）患者术后神经功能恢复的作用及对Toll样受体4（TLR4）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路的影响。方法研究对象为2021年1月至2023年7月本院收治的120例HICH患者，按随机数字表法分成对照组... 详细信息

目的探究化浊行血汤促进高血压脑出血（HICH）患者术后神经功能恢复的作用及对Toll样受体4（TLR4）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路的影响。方法研究对象为2021年1月至2023年7月本院收治的120例HICH患者，按随机数字表法分成对照组（60例）和实验组（60例）。对照组予以常规术后治疗，实验组予以化浊行血汤+常规术后治疗，时长均为1个月。比较两组疗效、美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）、改良Barthel指数（MBI）评分、脑血流动力学（脑血管平均流速、平均流量、血管外周阻力）、氧化应激及炎性因子指标[基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）]水平、TLR4/NLRP3炎性小体表达水平和用药安全性。结果实验组治疗总有效率高于对照组（P＜0.05）；实验组治疗后NIHSS评分低于对照组，MBI评分高于对照组（P＜0.05）；实验组治疗后血管外周阻力低于对照组，脑血管平均流速、平均流量高于对照组（P＜0.05）；实验组治疗后MMP-9、TNF-α、MDA、TLR4、NLRP3mRNA表达水平低于对照组，SOD高于对照组（P＜0.05）；两组不良反应发生率无明显差异（P>0.05）。结论化浊行血汤可能通过抑制TLR4/NLRP3信号通路的活化降低炎症及氧化应激反应，改善脑血流动力学，促进HICH患者术后神经功能恢复。

关键词：化浊行血汤高血压脑出血 Toll样受体4 NOD样受体蛋白3 神经功能

大面积脑梗死术后患者早期活动循证实践方案的构建与应用

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中国实用护理杂志 2024年第4期40卷 289-295页

作者：虞云霞张纯朱丽娟温州市中心医院神经外科温州325000

目的探讨大面积脑梗死术后患者早期活动循证实践方案的构建与应用。方法选取2021年7月至2023年4月温州市中心医院收治的96例大面积脑梗死术后患者作为研究对象进行临床试验,采用随机数字表法分为对照组48例和观察组48例。对照组给予大... 详细信息

目的探讨大面积脑梗死术后患者早期活动循证实践方案的构建与应用。方法选取2021年7月至2023年4月温州市中心医院收治的96例大面积脑梗死术后患者作为研究对象进行临床试验,采用随机数字表法分为对照组48例和观察组48例。对照组给予大面积脑梗死术后常规护理,观察组给予基于循证的系统化早期活动训练。2组均随访至患者出院1个月后。比较2组术后住院时间、住院费用,术后48 h的生命体征及疼痛情况,干预前及出院后7 d、1个月的日常生活能力、神经功能缺损评分和随访期间的并发症。结果对照组男29例,女19例,年龄43~67(56.87±1.76)岁;观察组男31例,女17例,年龄43~68(57.02±1.82)岁。观察组住院时间为(6.87±0.65)d,对照组为(9.06±0.72)d,2组比较差异有统计学意义(t=15.64,P神经功能缺损评分分别为(84.65±2.45)、(23.65±2.65)分,与对照组的(79.76±1.97)、(28.54±2.73)分比较差异均有统计学意义(t=10.26、8.91,均P神经功能缺损评分分别为(95.45±1.43)、(18.65±1.98)分,与对照组的(87.87±1.39)、(21.54±2.76)分相比差异均有统计学意义(t=26.33、5.90,均P神经功能,有效缩短患者住院时间,并减少并发症的发生。

关键词：脑梗死循证护理学方案构建

丙泊酚镇静体外循环下心脏瓣膜置换术后谵妄发生的影响因素分析

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新乡医学院学报 2024年第1期41卷 65-70页

作者：杜守峰师文华孙君隽韩冬南阳市中心医院心脏大血管外科河南南阳473009

目的探讨丙泊酚镇静体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换术后谵妄发生的影响因素。方法选择2020年1月至2022年12月于南阳市中心医院行CPB下心脏瓣膜置换术患者152例为研究对象,依据丙泊酚镇静深度将患者分为观察A组[50≤脑电双频指数(BIS)0.05)... 详细信息

目的探讨丙泊酚镇静体外循环(CPB)下心脏瓣膜置换术后谵妄发生的影响因素。方法选择2020年1月至2022年12月于南阳市中心医院行CPB下心脏瓣膜置换术患者152例为研究对象,依据丙泊酚镇静深度将患者分为观察A组[50≤脑电双频指数(BIS)0.05);年龄、慢性阻塞性肺疾病、术前心功能不全、过度疼痛、术后LVEF、CPB时间与患者术后谵妄发生相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,年龄≥60岁、术前心功能不全、过度疼痛、CPB时间≥100 min是患者术后谵妄发生的危险因素(P<0.05),术后LVEF≥50%、丙泊酚镇静深度35≤BIS<45是患者术后谵妄发生的保护因素(P<0.05)。结论丙泊酚镇静深度为35≤BIS<45、术后LVEF≥50%可有效降低患者CPB下心脏瓣膜置换术后谵妄的发生风险,年龄≥60岁、术前心功能不全、过度疼痛、CPB时间≥100 min会增加患者术后谵妄的发生风险。

关键词：丙泊酚镇静深度体外循环心脏瓣膜置换术术后谵妄

二氢杨梅素调节HIF-1α/BNIP3信号通路对脑卒中大鼠神经元自噬和凋亡的影响

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miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

中国老年学杂志 2024年第13期 3249-3253页

作者：陈笛温昌明周静孙军高军张在行张东焕张保朝南阳市中心医院

目的探究二氢杨梅素(DHM)调节低氧诱导因子(HIF)-1α/E1B-19kDa相互作用蛋白(BNIP)3信号通路对脑卒中大鼠神经元自噬和凋亡的影响。方法实验分为假手术(NC)组、模型(model)组、DHM组(4 ml/kg)、HIF-1α/BNIP3抑制剂(BAY)组(4 mg/kg)、... 详细信息

目的探究二氢杨梅素(DHM)调节低氧诱导因子(HIF)-1α/E1B-19kDa相互作用蛋白(BNIP)3信号通路对脑卒中大鼠神经元自噬和凋亡的影响。方法实验分为假手术(NC)组、模型(model)组、DHM组(4 ml/kg)、HIF-1α/BNIP3抑制剂(BAY)组(4 mg/kg)、DHM+BAY组(4 ml/kg+4 mg/kg),每组20只。采用Longa法进行神经功能评分；采用DCFH-DA荧光探针法测定活性氧(ROS)表达水平；试剂盒测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量；2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色计算脑梗死体积百分比；透射电子显微镜检测神经元自噬；TUNEL染色法检测神经元细胞凋亡；Western印迹法检测大鼠脑组织细胞凋亡、自噬及HIF-1α/BNIP3通路相关蛋白表达水平。结果与NC组比较，model组神经元结构缺损且少量自噬小体出现，神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、胱天蛋白酶(caspase)-3、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)、苄氯素(Beclin)-1、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3B)、HIF-1α、BNIP3蛋白水平升高，SOD活性降低，差异显著(P神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、caspase-3、Bax蛋白水平降低，SOD活性、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白水平升高，差异显著(P神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、caspase-3、Bax蛋白水平升高，SOD活性、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白水平降低，差异显著(P神经功能评分、ROS水平、MDA含量、脑梗死体积百分比、细胞凋亡率、caspase-3、Bax蛋白水平降低，SOD活性、Beclin-1、LC3B、HIF-1α、BNIP3蛋白水平升高，差异显著(P神经元凋亡，增强自噬作用，减轻脑损伤，进而促进神经功能的恢复。

关键词：二氢杨梅素低氧诱导因子-1α/E1B-19kDa相互作用蛋白3信号通路脑卒中神经元

来源：评论

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 122-127页

作者：陈笛温昌明李祥欣孙军高军张在行张东焕张保朝南阳市中心医院河南南阳473000

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-... 详细信息

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平显著升高(P神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著降低(P神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著升高(P0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

关键词： miR-124 Toll样受体4/核因子κB/CC类趋化因子配体2 脑梗死神经元凋亡