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顺铂诱导肾损伤模型在C57BL/6小鼠J和N亚型中的差异性研究

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 792-797页

作者：王婵邱会琴唐亚婷朱方媛范彦英杨彩红山西医科大学基础医学院药理学教研室山西太原030001

目的探讨C57BL/6 J和N亚型小鼠在顺铂诱导肾损伤模型中的易感性差异,为选择药物肾损伤模型提供理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠J和N两种亚型,各随机分为正常组(Control)、模型组(cisplatin,CDDP)。模型组腹腔注射顺铂(3.33 mg·kg^(-1))... 详细信息

目的探讨C57BL/6 J和N亚型小鼠在顺铂诱导肾损伤模型中的易感性差异,为选择药物肾损伤模型提供理论依据。方法雄性C57BL/6小鼠J和N两种亚型,各随机分为正常组(Control)、模型组(cisplatin,CDDP)。模型组腹腔注射顺铂(3.33 mg·kg^(-1)),隔天给药,持续2周,记录小鼠体重变化、存活率;检测Scr、BUN和β2-MG评价肾功能;HE、Masson和PAS染色法观察肾皮质病理改变。IL-6、IL-1β和IL-18等炎症因子检测顺铂导致的肾脏炎症反应。结果与Control组相比,CDDP组两种亚系小鼠Scr、BUN和β2-MG均明显升高;组织学结果显示肾小管损伤,胶原纤维化和糖原沉积均增加;IL-6、IL-1β和IL-18炎症因子含量和肾皮质蛋白表达均明显升高。C57BL/6N与C57BL/6J系小鼠比较,C57BL/6N系小鼠肾功能指标Scr和BUN均值明显偏高(P<0.01),组织学评分各病理损伤较C57BL/6J亚系小鼠明显偏高,反映纤维化的Masson染色差异具有统计学意义(P<0.01);IL-6、IL-1β和IL-18均值明显偏高,但差异无统计学意义。结论C57BL/6 J和N亚型小鼠均可使用顺铂诱导成功肾损伤模型,相比于C57BL/6J小鼠,C57BL/6N亚系小鼠在肾功能、组织学以及炎症因子等方面损伤明显,提示C57BL/6N亚系小鼠更适于作为药物或者其他肾功能损伤模型的建立。

关键词：顺铂亚急性肾损伤 C57BL/6亚系炎症因子 IL-6 IL-1β IL-18

橙皮素通过Nrf2-ARE通路对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

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中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1803-1807页

作者：翟鑫铎金敏刘宇山西医科大学药理学教研室山西太原030001

目的研究橙皮素(HSP)对大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的作用,并探讨其作用机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、HSP预处理组、全反式维甲酸(ATRA)预处理组(ATRA+I/R)、HSP+ATRA预处理组(HSP+ATRA+I/R),每组10只。假手术... 详细信息

目的研究橙皮素(HSP)对大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)的作用,并探讨其作用机制。方法将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、HSP预处理组、全反式维甲酸(ATRA)预处理组(ATRA+I/R)、HSP+ATRA预处理组(HSP+ATRA+I/R),每组10只。假手术组仅打开腹腔暴露双肾。其余各组采用夹闭双侧肾蒂45 min,再用灌注24 h的方法建立RIRI模型。用苏木精-伊红(HE)染色法确定肾组织损伤水平;用微板法检测血清肌酸酐(Scr)水平;用脲酶法检测血清尿素氮(BUN)水平;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;用试剂盒法检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和过氧化氢酶(CAT)水平;用蛋白质印迹法检测肾组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)及其下游抗氧化蛋白血红素氧合酶-1(HO-1)和醌氧化物还原酶1(NQO1)的表达。结果假手术组、模型组、HSP预处理组肾小管损伤评分分别为(0.20±0.45)、(4.20±0.84)和(2.40±0.55)分;Scr含量分别为(55.52±11.23)、(207.10±19.22)和(105.60±18.11)μmol·L^(-1);IL-6含量分别为(33.66±6.83)、(172.50±8.09)和(105.40±10.03)pg·mL^(-1)。假手术组、模型组、HSP预处理组、ATRA预处理组和HSP+ATRA预处理组SOD水平分别为(57.04±3.44)、(37.29±3.60)、(51.61±9.41)、(32.55±5.58)和(37.40±3.66)U·mg·prot^(-1);Nrf2蛋白相对表达水平分别为0.37±0.24、0.57±0.28、1.31±0.34、0.44±0.17和0.77±0.25;HO-1蛋白相对表达水平分别为0.26±0.14、0.57±0.30、1.32±0.61、0.53±0.28和0.67±0.50。模型组与假手术组相比,肾小管损伤评分、Scr、IL-6、SOD指标比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01);HSP预处理组与模型组相比,上述指标在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论HSP可能通过激活Nrf2-抗氧化反应元件(ARE)通路上调其下游抗氧化蛋白的表达,减轻氧化应激对肾的损伤,进而改善RIRI。

关键词：橙皮素肾缺血再灌注损伤炎症氧化应激

秋水仙碱经由Hippo信号通路对小鼠肝癌的影响及其机制研究

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 185-192页

作者：徐燕燕朱乐乐李苗苗杨雁安徽医科大学药理学教研室合肥230032

目的探明秋水仙碱经由Hippo信号通路对小鼠肝癌的影响及其机制研究。方法 6周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组、模型组、秋水仙碱组,建立二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(CCl_(4))/乙醇(C_(2)H_(5)OH)诱导小鼠肝癌模型及秋水仙碱(0... 详细信息

目的探明秋水仙碱经由Hippo信号通路对小鼠肝癌的影响及其机制研究。方法 6周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组:对照组、模型组、秋水仙碱组,建立二乙基亚硝胺(DEN)/四氯化碳(CCl_(4))/乙醇(C_(2)H_(5)OH)诱导小鼠肝癌模型及秋水仙碱(0.1 mg/kg)干预。第1至2周,模型组和秋水仙碱组腹腔注射1.0%DEN,每周1次;第3周至第7周,灌胃_(4)溶于橄榄油溶液(5 ml/kg)每周2次;第8周至第18周,灌胃20%CCl_(4)溶于橄榄油溶液(6 ml/kg)每周2次。秋水仙碱组连续灌胃给药20周。对照组给予相应的溶媒。进行肝指数、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)血清生化指标的检测,蛋白印迹(Western blot)和免疫荧光检测各组小鼠肝组织中MST1、pYAP、YAP、pTAZ、TAZ蛋白的表达水平。结果对照组小鼠肝脏表面光滑,质地柔软,模型组肝脏粗糙,质地较硬,有颗粒状结节,秋水仙碱组以上病变得到明显改善。HE染色显示,对照组小鼠肝小叶结构正常,模型组肝小叶结构紊乱,可见少量脂滴,组织广泛坏死,炎性细胞浸润,存在脂肪空泡,而秋水仙碱干预后小鼠肝脏病变程度减轻。免疫荧光和Western blot结果显示,模型组小鼠较对照组小鼠肝组织中pYAP、pTAZ的蛋白表达水平降低,MST1、YAP、TAZ的蛋白表达水平增加;秋水仙碱干预后,上调MST1、pYAP、pTAZ蛋白表达水平,下调YAP、TAZ的蛋白表达水平。结论秋水仙碱对小鼠肝癌的治疗作用可能与其激活的Hippo信号通路有关。

关键词：秋水仙碱 Hippo信号通路肝癌二乙基亚硝胺四氯化碳乙醇

LncRNA-CCRR通过调控UBA6影响钠通道泛素化进而调控心梗后心律失常

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中国药理学通报 2024年第8期40卷 1437-1446,F0001页

作者：孙飞涵李聃宁杨华王圣洁罗惠珊郭建军宣立娜孙丽华哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨心梗后心律失常钠通道泛素化的调节机制,深入研究lncRNA-CCRR在心肌梗死后调控心脏电生理重构的机制,对心梗后心律失常的防治具有重要意义。方法应用lncRNA-CCRR转基因鼠,C57BL/6小鼠在体注射lncRNA-CCRR过表达腺相关病毒,感染... 详细信息

目的探讨心梗后心律失常钠通道泛素化的调节机制,深入研究lncRNA-CCRR在心肌梗死后调控心脏电生理重构的机制,对心梗后心律失常的防治具有重要意义。方法应用lncRNA-CCRR转基因鼠,C57BL/6小鼠在体注射lncRNA-CCRR过表达腺相关病毒,感染4周后结扎冠状动脉左前降支12 h构建小鼠急性心肌梗死模型,程序性电刺激检测心律失常发生率。将lncRNA-CCRR过表达/敲减腺相关病毒、阴性对照转染至原代乳鼠心肌细胞中,缺氧12 h。FISH检测lncRNA-CCRR表达,Western blot和实时荧光定量PCR检测Na_(v)1.5和UBA6蛋白以及Na_(v)1.5的mRNA表达,免疫荧光检测Na_(v)1.5和UBA6表达,RIP检测lncRNA-CCRR与UBA6作用关系,全细胞膜片钳检测细胞CCRR过表达及敲减后I_(Na)电流密度。结果心梗小鼠心肌梗死边缘区lncRNA-CCRR表达降低,心律失常发生率升高,CCRR和Na_(v)1.5 mRNA表达下调,Na_(v)1.5蛋白表达下调,UBA6蛋白表达上调;过表达CCRR可逆转上述变化。转染AAV-CCRR可逆转缺氧后下调的CCRR和Na_(v)1.5 mRNA水平,改善Na_(v)1.5和UBA6蛋白表达,且lncRNA-CCRR与UBA6蛋白具有相互结合作用;转染AAV-CCRR后I_(Na)密度增加;转染AAV-si-CCRR后I_(Na)密度降低。结论心梗后lncRNA-CCRR表达降低;lncRNA-CCRR可通过抑制UBA6,增加Na_(v)1.5蛋白表达和I_(Na)电流密度改善心梗后心律失常。

关键词：心肌梗死 lncRNA-CCRR UBA6 钠通道泛素化心律失常

穿心莲内酯对糖尿病大鼠胰岛素抵抗、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1信号通路影响的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第7期32卷 540-545页

作者：武莉冯吉波王延茹李锦平山西医科大学汾阳学院药理教研室汾阳032200

目的探讨穿心莲内酯对DM大鼠IR、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1(Snail1)信号通路的影响。方法选取70只SPF级Wistar雄性大鼠,其中30只进行穿心莲内酯LD50试验,确定致死量后选取50 mg/kg进行给药及观察,其余40只中10只作为空白对照... 详细信息

目的探讨穿心莲内酯对DM大鼠IR、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1(Snail1)信号通路的影响。方法选取70只SPF级Wistar雄性大鼠,其中30只进行穿心莲内酯LD50试验,确定致死量后选取50 mg/kg进行给药及观察,其余40只中10只作为空白对照组(NC),30只建立DM模型,共28只建模成功,分为T2DM组(n=9)、二甲双胍灌胃组(Met,n=9)及穿心莲内酯灌胃组(And,n=10)。NC、T2DM组不做处理,干预14 d后观察各组变化。结果与NC组比较,T2DM、Met、And组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、拟杆菌门、厚壁菌门丰度水平、Notch、Snail1 mRNA及蛋白表达、阳性表达率升高(P<0.05),乳酸杆菌、双歧杆菌丰度水平降低(P<0.05)。与T2DM组比较,Met、And组乳酸杆菌、双歧杆菌丰度水平升高(P<0.05),HOMA-IR、拟杆菌门、厚壁菌门丰度水平、Notch、Snail1 mRNA及蛋白表达、阳性表达率降低(P<0.05)。结论 DM大鼠经穿心莲内酯干预后IR缓解,菌群失调改善,Notch/Snail1信号通路受抑制。

关键词：穿心莲内酯糖尿病胰岛素抵抗菌群失调 Notch/锌指蛋白转录因子1信号通路

8-型磷酸二酯酶抑制剂PF-04957325对冈田酸诱导阿尔茨海默病小鼠认知障碍的改善作用及机制

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中国药理学通报 2024年 1719-1726页

作者：吕玉丽郭天洋仇念壮张汉霆王浩山东第一医科大学药理学研究所青岛大学药学院药理教研室

目的探讨磷酸二酯酶8 （phosphodiesterase 8,PDE8）抑制剂PF-04957325对冈田酸（okadaic acid,OA）诱导阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD）小鼠学习记忆、焦虑、抑郁的影响,并对其机制进行初步探讨。方法选取21只2月龄雄性C57BL... 详细信息

目的探讨磷酸二酯酶8 （phosphodiesterase 8,PDE8）抑制剂PF-04957325对冈田酸（okadaic acid,OA）诱导阿尔茨海默病（Alzheimer's disease,AD）小鼠学习记忆、焦虑、抑郁的影响,并对其机制进行初步探讨。方法选取21只2月龄雄性C57BL/6J小鼠进行实验,随机分为对照组、AD模型组、PDE8抑制剂组(0.1 mg·kg-1)。模型组和PDE8抑制剂组小鼠双侧海马定位注射OA（每侧50 ng）诱导AD模型,注射OA 2 d后,PDE8抑制剂组给予0.1 mg·kg-1抑制剂,AD模型组和对照组给予等剂量溶剂,共给药21 d。给予抑制剂d 13,对小鼠学习记忆能力及焦虑抑郁行为进行相关行为学检测,HE染色观察小鼠海马DG、CA1、CA3区神经细胞形态,Western blot检测小鼠海马内不同位点磷酸化Tau蛋白水平以及PDE8/cAMP/CREB通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,AD模型组Y迷宫轮替比、新物体识别指数、被动回避逃避潜伏期明显缩短（P<0.01）,水迷宫穿越平台次数及在目标象限停留的时间减少（P <0.05）,表现出学习记忆能力的下降,而给予PF-04957325可明显改善AD小鼠学习记忆能力;AD模型组进入旷场中央区次数及在中央区停留时间明显减少（P <0.05）、悬尾不动时间明显增加（P <0.01）,提示小鼠有焦虑抑郁情况,给予PF-04957325后小鼠焦虑行为没有得到改善,对抑郁行为有一定改善;AD模型组小鼠海马DG、CA1、CA3区表现出核仁固缩、神经元排列不整齐,给予PF-04957325可缓解小鼠海马神经细胞的损伤。与对照组相比,AD模型组小鼠海马中Tau蛋白Ser199、Ser396和Ser202位点的磷酸化水平明显升高（P <0.01）、PDE8 A及PDE8 B蛋白表达量明显增加（P<0.01）、p-PKA/PKA和BDNF蛋白表达量降低（P <0.05）,给予PF-04957325后Tau蛋白Ser396和Ser202位点的磷酸化水平明显降低（P<0.01）、PDE8A和PDE8B蛋白表达量明显降低（P<0.01）、p-PKA/PKA、p-CRE B/CREB和BDNF蛋白表达量明显升高（P<0.01）。结论 PDE8抑制剂PF-04957325能够提高AD小鼠的学习记忆能力、降低认知功能障碍,恢复Tau蛋白功能,减轻AD小鼠海马内神经元细胞的损害,具有改善AD的作用。作用机制可能与激活PDE8/cAMP/CREB通路、抑制Tau蛋白磷酸化有关。

关键词：磷酸二酯酶 PDE8抑制剂阿尔茨海默病学习记忆 Tau蛋白冈田酸

硫代乙酰胺诱导的小鼠肝内胆管癌模型特点研究

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中国药理学通报 2024年第5期40卷 992-998页

作者：张玉梅琼沈玉先安徽医科大学基础医学院药理学教研室生物药物研究所安徽合肥230032

目的建立硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的小鼠肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)模型并探讨该模型的特点及形成机制,为ICC的病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。方法C57BL/6J小鼠分为正常对照组和TAA组,正常对... 详细信息

目的建立硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导的小鼠肝内胆管癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)模型并探讨该模型的特点及形成机制,为ICC的病理机制和治疗药物的研究提供实验基础。方法C57BL/6J小鼠分为正常对照组和TAA组,正常对照组小鼠饮用灭菌水,模型组小鼠饮用600 mg·L^(-1)的TAA溶液,连续饮用32周。眼球取血,检测血清中ALT、AST、DBIL和TBIL的水平;观察两组小鼠肝脏形态;HE、天狼猩红、Masson和普鲁士蓝染色观察肝脏组织病理改变;免疫组化检测CK7、CK19、Ki67、CD68、TNF-α和α-SMA的表达水平;RT-qPCR和Western blot检测ICC相关标志物mRNA和蛋白的水平;免疫荧光双标记检测肝脏组织中HNF4α+CK19+双阳性细胞。结果与正常对照组比较,TAA组小鼠肝脏表面呈细颗粒状、质硬,肝内呈肿块性病变;病理检查结果显示,肝组织有炎症细胞浸润,肿瘤细胞排列成管状,肝组织有明显的纤维化;血清中ALT、AST、DBIL和TBIL水平升高;肝脏组织中ICC标志物CK7、CK19及细胞增殖标志物Ki67表达上调;免疫细胞标志分子CD68和TNF-α表达增多,肝星状细胞活化标志物α-SMA的阳性染色增多;肝组织中出现HNF4α+CK19+双表型细胞。结论TAA可用于诱导小鼠ICC模型,该模型具有炎症免疫细胞浸润、纤维化及ICC分子标志物增高等特点,这与人类的ICC非常相似,可用于评价内源性分子和外源性药物对ICC作用的研究。

关键词：硫代乙酰胺肝内胆管癌小鼠模型肝纤维化炎症

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8-型磷酸二酯酶抑制剂PF-04957325对冈田酸诱导阿尔茨海默病小鼠认知障碍的改善作用及机制

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1719-1726页

作者：吕玉丽郭天洋仇念壮张汉霆王浩山东第一医科大学药理学研究所山东泰安271016 青岛大学药学院药理教研室山东青岛266073

目的探讨磷酸二酯酶8(phosphodiesterase 8,PDE8)抑制剂PF-04957325对冈田酸(okadaic acid,OA)诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠学习记忆、焦虑、抑郁的影响,并对其机制进行初步探讨。方法选取21只2月龄雄性C57BL/6J小鼠进行实验,随机分为对照组、AD模型组、PDE8抑制剂组(0.1 mg·kg^(-1))。模型组和PDE8抑制剂组小鼠双侧海马定位注射OA(每侧50 ng)诱导AD模型,注射OA 2 d后,PDE8抑制剂组给予0.1 mg·kg^(-1)抑制剂,AD模型组和对照组给予等剂量溶剂,共给药21 d。给予抑制剂d 13,对小鼠学习记忆能力及焦虑抑郁行为进行相关行为学检测,HE染色观察小鼠海马DG、CA1、CA3区神经细胞形态,Western blot检测小鼠海马内不同位点磷酸化Tau蛋白水平以及PDE8/cAMP/CREB通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,AD模型组Y迷宫轮替比、新物体识别指数、被动回避逃避潜伏期明显缩短(P<0.01),水迷宫穿越平台次数及在目标象限停留的时间减少(P<0.05),表现出学习记忆能力的下降,而给予PF-04957325可明显改善AD小鼠学习记忆能力;AD模型组进入旷场中央区次数及在中央区停留时间明显减少(P<0.05)、悬尾不动时间明显增加(P<0.01),提示小鼠有焦虑抑郁情况,给予PF-04957325后小鼠焦虑行为没有得到改善,对抑郁行为有一定改善;AD模型组小鼠海马DG、CA1、CA3区表现出核仁固缩、神经元排列不整齐,给予PF-04957325可缓解小鼠海马神经细胞的损伤。与对照组相比,AD模型组小鼠海马中Tau蛋白Ser199、Ser396和Ser202位点的磷酸化水平明显升高(P<0.01)、PDE8A及PDE8B蛋白表达量明显增加(P<0.01)、p-PKA/PKA和BDNF蛋白表达量降低(P<0.05),给予PF-04957325后Tau蛋白Ser396和Ser202位点的磷酸化水平明显降低(P<0.01)、PDE8A和PDE8B蛋白表达量明显降低(P<0.01)、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB和BDNF蛋白表达量明显升高(P<0.01)。结论PDE8抑制剂PF-04957325能够提高AD小鼠的学习记忆能力、降低认知功能障碍,恢复Tau蛋白功能,减轻AD小鼠海马内神经元细胞的损害,具有改善AD的作用。作用机制可能与激活PDE8/cAMP/CREB通路、抑制Tau蛋白磷酸化有关。

关键词：磷酸二酯酶 PDE8抑制剂阿尔茨海默病学习记忆 Tau蛋白冈田酸

网络认知行为疗法对青少年抑郁症状疗效Meta分析

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中国儿童保健杂志 2024年第7期32卷 778-784页

作者：许婷刘鹏鸿李树峰高胜利刘丽霞山西医科大学汾阳学院生理学教研室山西医科大学第一医院精神心理科山西医科大学汾阳学院预防医学教研室

目的系统评价网络认知行为疗法(iCBT)对青少年抑郁症状的疗效，以期为临床实践提供参考。方法网络检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、万方数据、维普网数据库中iCBT对青少年抑郁症状疗效的随机对照试... 详细信息

目的系统评价网络认知行为疗法(iCBT)对青少年抑郁症状的疗效，以期为临床实践提供参考。方法网络检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science、中国知网、万方数据、维普网数据库中iCBT对青少年抑郁症状疗效的随机对照试验(RCT),检索时限为建库至2023年2月，2名研究者独立筛选符合纳入标准的RCTs并提取数据，评价偏倚风险后运用RevMan 5.4.1和R 4.3.0软件的Metafor程序包进行统计分析。结果共纳入12个RCTs, 2 469例研究对象。Meta分析结果显示：对于干预后抑郁症状评分的组间比较，疗程≤8周，干预组比对照组降低得更多(SMD=-0.63, 95%CI:-0.93～-0.33),差异有统计学意义(P8周，干预组和对照组的变化都不明显(SMD=-0.23, 95%CI:-0.49～0.04),差异无统计学意义(P>0.05);对于长期随访后抑郁症状评分的组间比较，干预组比对照组降低得更多(SMD=-0.28, 95%CI:-0.53～-0.02),差异有统计学意义(P0.05)。结论 iCBT可改善青少年的抑郁症状，且疗效可持续较长时间，建议在临床实践中推广使用。

关键词：网络认知行为疗法青少年抑郁症状 Meta分析