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无核荔枝僵果病的病原菌鉴定、入侵途径及快速检测技术

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热带作物学报 2024年第3期45卷 602-608页

作者：王伟博李松刚胡美姣曹学仁李敏李焕苓李芳高兆银海南大学植物保护学院/热带农林生物灾害绿色防控教育部重点实验室海南海口570228 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南海口571101 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所海南海口571101

2022年在海南无核荔枝上发现一种僵果病,与海南常见的荔枝病害炭疽病、酸腐病等病症差别明显,主要为害幼果,发病时幼果果实外观无明显变化,但无核荔枝完成疏果后,果实长至蚕豆大小时,发病果实的外果皮颜色变暗,剖开后内果皮发生不规则褐... 详细信息

2022年在海南无核荔枝上发现一种僵果病,与海南常见的荔枝病害炭疽病、酸腐病等病症差别明显,主要为害幼果,发病时幼果果实外观无明显变化,但无核荔枝完成疏果后,果实长至蚕豆大小时,发病果实的外果皮颜色变暗,剖开后内果皮发生不规则褐变,果实不再膨大,形成僵果,易造成严重的经济损失。本研究对该病害的病原菌进行分离和鉴定,对入侵途径和快速检测技术进行研究。结果表明:通过形态学鉴定、ITS、RBP2和TEF1基因序列分析,鉴定引起无核荔枝新型僵果病的病原菌为伯氏镰刀菌(Fusarium pernambucanum)。无核荔枝幼果期果实果皮受农事操作、风、刺吸性昆虫为害等损伤后,易受到病原菌的入侵发病,而果实表面无伤口时不发病。病原菌入侵主要集中在果实纵经3.2~4.8 mm的幼果期,随着果实的生长、果皮保护组织的增加和伤口的减少,病原菌难以入侵,果实发病率快速降低。基于TUB基因序列,以伯氏镰刀菌及其他分离获得的镰刀菌属菌株基因组DNA为模板进行扩增测序,根据序列信息设计筛选出一对伯氏镰刀菌的特异性引物,构建了基于普通PCR的快速高效分子检测方法,该检测方法灵敏、高效,可用于指导无核荔枝僵果病的早期诊断与预防。

关键词：无核荔枝僵果病病原菌鉴定检测

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基于多尺度特征的病理图像焦点质量快速评估

计算机应用与软件 2024年

作者：郭晓彤张家意高欣中国科学技术大学生物医学工程学院(苏州)生命科学与医学部中国科学院苏州生物医学工程技术研究所济南国科医工科技发展有限公司

病理全切片图像受扫描仪振动等因素影响经常出现失焦情况，临床中主要依赖人工检查，主观性强，效率不高。针对该问题，提出一种基于多尺度特征的病理图像焦点质量快速评估方法DPIFocus，设计一种双分支并行的双重池化网络架构，在最大... 详细信息

病理全切片图像受扫描仪振动等因素影响经常出现失焦情况，临床中主要依赖人工检查，主观性强，效率不高。针对该问题，提出一种基于多尺度特征的病理图像焦点质量快速评估方法DPIFocus，设计一种双分支并行的双重池化网络架构，在最大池化分支中融入多尺度特征融合模块，实现网络对病理图像清晰度特征的全面提取。实验结果显示，与目前最先进的病理图像焦点质量评估方法FocusLiteNN相比，在公开数据集FocusPath和TCGA@Focus上，DPIFocus 的皮尔逊线性相关系数分别提升2.6%与3.3%，表明其准确性更高，泛化性更强，且推理时间仅为14.5ms，满足实时性需求，将有效提升病理切片扫描质量与效率，为人工智能辅助病理诊断提供重要支撑，助力精准医学快速发展。

关键词：病理全切片智能精准诊断多尺度特征融合焦点质量评估

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湿热证诊疗的现代研究进展

中华中医药杂志 2024年第9期39卷 4793-4798页

作者：方俐晖张佳琪唐旭东北京中医药大学研究生院北京100029 中国中医科学院西苑医院脾胃病研究所北京100091

湿热证是中医临床常见的证型之一。文章对湿热证的流行病学、诊断标准、现代病理机制研究和中医药治疗进展进行了综述,从湿热证与基因表达、程序性细胞死亡、免疫及炎症、蛋白质组学、代谢组学、微生态系统等角度总结其发病机制,并从经... 详细信息

湿热证是中医临床常见的证型之一。文章对湿热证的流行病学、诊断标准、现代病理机制研究和中医药治疗进展进行了综述,从湿热证与基因表达、程序性细胞死亡、免疫及炎症、蛋白质组学、代谢组学、微生态系统等角度总结其发病机制,并从经典方剂现代运用、药效基础及作用机制的微观研究和异病同治的探索等方面为中药治疗湿热证提供科学基础,同时提出未来可借助系统生物学、网络药理学等现代技术进一步阐明湿热证的现代科学内涵,建立湿热证现代诊疗标准。

关键词：湿热证中医诊疗研究进展作用机制代谢组学微生态系统异病同治

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毫米波功率应用研究进展(特邀)

红外与毫米波学报 2024年第4期43卷 503-519页

作者：鲁钝傅文杰 Mikhail Glyavin 唐相伟胡旻刘盛纲电子科技大学电子科学与工程学院太赫兹科学技术四川省重点实验室四川成都610054 俄罗斯科学院应用物理研究所俄罗斯下诺夫哥罗德603950 广东美的厨房电器制造有限公司创新中心广东佛山528311

微波功率应用是一种直接利用微波的功率和能量与物质互作用的应用。近年来,随着毫米波功率源技术的发展,微波功率应用逐渐向毫米波频段发展。由于毫米波波长较短,在功率应用中展现出诸多独特特性,并发展出一系列独特应用。本文对毫米波... 详细信息

微波功率应用是一种直接利用微波的功率和能量与物质互作用的应用。近年来,随着毫米波功率源技术的发展,微波功率应用逐渐向毫米波频段发展。由于毫米波波长较短,在功率应用中展现出诸多独特特性,并发展出一系列独特应用。本文对毫米波在物理科学、材料科学、生物医学等领域的研究工作进行了评述,主要包括聚变等离子体加热与诊断、材料加工与分析、生物效应应用等,对目前研究和发展中的主要瓶颈问题进行了介绍,并对未来发展进行了展望。

关键词：真空电子器件毫米波功率应用聚变等离子体材料加工与分析生物效应研究进展

赤羽病病毒N蛋白原核表达及单克隆抗体的制备

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生物工程学报 2024年第5期40卷 1548-1558页

作者：林永玉石正旺罗俊聪朱昱茜席韬周静张帆石鑫泰王川田宏甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 中国农业科学院兰州兽医研究所、兰州大学动物医学与生物安全学院、动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000

为制备赤羽病病毒(akabane virus,AKAV) N蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),本研究利用原核表达系统表达了AKAV N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞,采用间接酶联免疫吸附方法(enz... 详细信息

为制备赤羽病病毒(akabane virus,AKAV) N蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),本研究利用原核表达系统表达了AKAV N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞,采用间接酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)筛选获得阳性杂交瘤细胞。经3次亚克隆筛选得到两株特异性针对AKAV N蛋白的杂交瘤细胞株,分别命名为2C9与5E9。通过ELISA、免疫印迹(Western blotting)、间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)对其进行鉴定。结果显示,成功筛选到特异性针对AKAV N蛋白的单克隆抗体。IFA发现其与AKAV N蛋白具有良好的反应性,亚型鉴定试剂盒鉴定2C9 mAb重链为IgG2b型,轻链为κ链;5E9 mAb重链为IgG1型,轻链为κ链;ELISA检测效价均为1:4 096 000。本研究成功制备了两株特异性针对AKAV N蛋白的单克隆抗体,为赤羽病诊断方法的开发、疾病的防控以及AKAV N蛋白功能的研究奠定了基础。

关键词：赤羽病病毒 N蛋白原核表达单克隆抗体

人诺如病毒重组乳酸菌疫苗的制备及免疫效果评价

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国际病毒学杂志 2024年第1期31卷 1-7页

作者：曹颖雯薛亮徐锐权高珺珊寇晓霞广州市传染性疾病临床快速诊断与预警重点实验室、广州医科大学金域检验学院 510180 广东省科学院微生物研究所、华南应用微生物国家重点实验室、广东省微生物安全与健康重点实验室、农业农村部农业微生物组学与精准应用重点实验室广州510070

目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主... 详细信息

目的诺如病毒(norovirus,NoV)是导致人类急性胃肠炎的主要病原体之一,目前仍没有获批上市的NoV疫苗,开发安全有效且便于推广的NoV疫苗具有重要意义.本研究基于乳酸菌表达系统构建在体外表达GⅡ.2型人诺如病毒(human norovirus,HuNoV)主要衣壳蛋白(viral protein 1,VP1)的重组乳酸乳球菌,并评价其诱导机体产生黏膜免疫和体液免疫的能力.方法将HuNoV GⅡ.2型VP1基因片段无缝克隆至乳酸菌表达系统中,体外诱导表达目的蛋白VP1,并通过正交试验优化蛋白表达条件.对小鼠进行口服免疫后通过ELISA方法测定其血清和组织中的免疫因子水平.结果构建了一株针对HuNoV GⅡ.2型的新型重组乳酸乳球菌疫苗,口服免疫后可诱导小鼠产生NoV特异性IgG和IgA,并诱导产生黏膜免疫系统的主要效应分子sIgA.结论本研究构建的口服乳酸菌疫苗能够诱导小鼠产生针对NoV的先天性和获得性免疫,并产生对应的免疫分子.与被广泛用于研究的病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)疫苗相比,此口服疫苗还具有制备快捷、成本更低、运输方便的优势.

关键词：人诺如病毒口服疫苗乳酸菌 VP1

基于Ypt1靶标的非洲菊隐地疫霉TaqMan探针实时荧光定量PCR检测

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微生物学通报 2024年第9期51卷 3658-3672页

作者：王丽花孙爱青张艺萍许凤杨秀梅云南省农业科学院花卉研究所、云南省花卉育种重点实验室、国家观赏园艺工程技术研究中心云南昆明650205 云南大学农学院云南昆明650091

【背景】隐地疫霉(Phytophthora cryptogea P.)是一种可危害多种植物且危害症状较为严重的检疫性病原卵菌,在世界范围内危害严重。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高且能定量分析***携带情况的高效检测方法。【方法】根据隐地疫霉Ypt... 详细信息

【背景】隐地疫霉(Phytophthora cryptogea P.)是一种可危害多种植物且危害症状较为严重的检疫性病原卵菌,在世界范围内危害严重。【目的】建立一种特异性强、灵敏度高且能定量分析***携带情况的高效检测方法。【方法】根据隐地疫霉Ypt1基因的保守序列设计并筛选实时荧光定量PCR的特异性引物和探针,在优化引物浓度、探针浓度和退火温度的基础上获得最优反应体系和条件,利用最优反应条件构建标准曲线及检测体系,并验证检测体系的特异性、灵敏性和重复性。【结果】综合考虑Cq值、最终荧光信号值(relative fluorescence units,RFU)和经济角度,优化后的隐地疫霉荧光定量PCR最佳退火温度为60℃,上、下游引物浓度均为20μmol/L,探针浓度为10μmol/L;所建立的标准曲线为y=−3.323x+40.767,相关系数(R^(2))为0.998,扩增效率(E)为99.9%,相关性好、扩增效率高;对其他8种常见卵菌及真菌均无扩增曲线,表明所设计的引物探针组合特异性强;灵敏度检测结果显示最低检出限为1 copy,最低稳定检出限为10 copies,较常规PCR技术的灵敏度提高了10−100倍;同浓度批组内和批组间重复性试验Cq值标准差为0.04−0.13,变异系数(coefficient of variation,CV)为0.20%−0.58%,重复性及稳定性好、可靠性高。【结论】基于Ypt1靶标建立了非洲菊隐地疫霉TaqMan实时荧光定量PCR检测技术体系,可高效特异地鉴别出疫霉属中广泛侵染非洲菊的隐地疫霉病菌,对于口岸通关和田间隐地疫霉的快速高效检测,尤其是原原种、原种等核心材料的痕量病原菌的检测鉴定和病害早期精准诊断,以及有效防控意义重大,应用前景广阔。

关键词：非洲菊隐地疫霉 Ypt1基因实时荧光定量PCR TaqMan探针

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牛轮状病毒多克隆抗体制备及特性分析

畜牧与兽医 2024年第7期56卷 72-77页

作者：孙心如孙敏周洪婷李素芬张雪寒周金柱贡嘎索朗斯珠李彬西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014

旨在优化G6P[1]型牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)在MARC-145细胞中的培养条件,制备其兔源多克隆抗体,并对制备的多抗进行效价检测及鉴定。对G6P[1]型BRV毒株NCDV进行不同病毒接种量及收毒时间优化,确定病毒在MARC-145细胞中的最佳... 详细信息

旨在优化G6P[1]型牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)在MARC-145细胞中的培养条件,制备其兔源多克隆抗体,并对制备的多抗进行效价检测及鉴定。对G6P[1]型BRV毒株NCDV进行不同病毒接种量及收毒时间优化,确定病毒在MARC-145细胞中的最佳培养条件;以1×10^(7) TCID_(50) NCDV活毒作为免疫原免疫成年兔,制备兔源多克隆抗体;通过间接ELISA检测多抗效价,并通过间接免疫荧光试验(IFA)及中和试验鉴定其特异性。结果:NCDV毒株以感染比0.1、感染时间24 h为最佳培养条件,病毒滴度可至4.9×10^(6) TCID_(50)/mL;间接ELISA结果显示,多克隆抗体的效价为1∶51 200,表明NCDV具有良好的免疫原性;IFA及中和试验结果表明,NCDV多克隆抗体与G6P[1]型、G9P[1]型和G10P[11]型BRV毒株均能发生特异性反应,存在良好的交叉中和效应,表明制备的多抗具有良好的反应性。综上,本试验成功优化了NCDV毒株在MARC-145细胞中的增殖条件,并制备了高效价的兔源多克隆抗体,为后续BRV感染的血清学诊断及疫苗研发奠定了理论基础。

关键词：牛轮状病毒 NCDV毒株 MARC-145细胞多克隆抗体

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血细胞活库支撑血细胞图谱计划和生态研究

中国科学：生命科学 2024年第6期54卷 1061-1070页

作者：马士卉谢小韦马艺戈韩星星郝莎程涛中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) 血液与健康全国重点实验室国家血液系统疾病临床医学研究中心细胞生态海河实验室天津300020 天津医学健康研究院天津301600

生物样本活库相较于传统生物样本库,对“血液生态”具有更高的研究利用价值.通过对血细胞活库的规范化建设,我们构建了“数据+样本+X”的一体化管理模式,为血细胞图谱计划提供坚实的资源支撑.率先建立单细胞水平全套造血细胞分子指纹图... 详细信息

生物样本活库相较于传统生物样本库,对“血液生态”具有更高的研究利用价值.通过对血细胞活库的规范化建设,我们构建了“数据+样本+X”的一体化管理模式,为血细胞图谱计划提供坚实的资源支撑.率先建立单细胞水平全套造血细胞分子指纹图谱,并成功创建了精细完整的血细胞单细胞数据共享平台.这些进展不仅为血液生理及相关疾病的研究提供了宝贵的研究资源和公共分析工具,而且为疾病的精准诊断和治疗提供新策略.

关键词：生物样本活库血细胞血细胞图谱血液生态