牛轮状病毒多克隆抗体制备及特性分析

作     者：孙心如 孙敏 周洪婷 李素芬 张雪寒 周金柱 贡嘎 索朗斯珠 李彬 SUN Xinru;SUN Min;ZHOU Hongting;LI Sufen;ZHANG Xuehan;ZHOU Jinzhu;GONG Ga;SUOLANG Sizhu;LI Bin

作者机构：西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014 

出 版 物：《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第56卷第7期

页      面：72-77页

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(23)1029] 财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系(CARS-37) 

主　　题：牛轮状病毒 NCDV毒株 MARC-145细胞 多克隆抗体 

摘      要：旨在优化G6P[1]型牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)在MARC-145细胞中的培养条件,制备其兔源多克隆抗体,并对制备的多抗进行效价检测及鉴定。对G6P[1]型BRV毒株NCDV进行不同病毒接种量及收毒时间优化,确定病毒在MARC-145细胞中的最佳培养条件;以1×10^(7) TCID_(50) NCDV活毒作为免疫原免疫成年兔,制备兔源多克隆抗体;通过间接ELISA检测多抗效价,并通过间接免疫荧光试验(IFA)及中和试验鉴定其特异性。结果:NCDV毒株以感染比0.1、感染时间24 h为最佳培养条件,病毒滴度可至4.9×10^(6) TCID_(50)/mL;间接ELISA结果显示,多克隆抗体的效价为1∶51 200,表明NCDV具有良好的免疫原性;IFA及中和试验结果表明,NCDV多克隆抗体与G6P[1]型、G9P[1]型和G10P[11]型BRV毒株均能发生特异性反应,存在良好的交叉中和效应,表明制备的多抗具有良好的反应性。综上,本试验成功优化了NCDV毒株在MARC-145细胞中的增殖条件,并制备了高效价的兔源多克隆抗体,为后续BRV感染的血清学诊断及疫苗研发奠定了理论基础。