牛轮状病毒多克隆抗体制备及特性分析
Preparation and characterization of polyclonal antibody against bovine rotavirus作者机构:西藏农牧学院动物科学学院西藏林芝860000 江苏省农业科学院兽医研究所/农业农村部兽用生物制品工程技术重点实验室江苏南京210014
出 版 物:《畜牧与兽医》 (Animal Husbandry & Veterinary Medicine)
年 卷 期:2024年第56卷第7期
页 面:72-77页
学科分类:090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
基 金:江苏省农业科技自主创新资金项目[CX(23)1029] 财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系(CARS-37)
主 题:牛轮状病毒 NCDV毒株 MARC-145细胞 多克隆抗体
摘 要:旨在优化G6P[1]型牛轮状病毒(bovine rotavirus, BRV)在MARC-145细胞中的培养条件,制备其兔源多克隆抗体,并对制备的多抗进行效价检测及鉴定。对G6P[1]型BRV毒株NCDV进行不同病毒接种量及收毒时间优化,确定病毒在MARC-145细胞中的最佳培养条件;以1×10^(7) TCID_(50) NCDV活毒作为免疫原免疫成年兔,制备兔源多克隆抗体;通过间接ELISA检测多抗效价,并通过间接免疫荧光试验(IFA)及中和试验鉴定其特异性。结果:NCDV毒株以感染比0.1、感染时间24 h为最佳培养条件,病毒滴度可至4.9×10^(6) TCID_(50)/mL;间接ELISA结果显示,多克隆抗体的效价为1∶51 200,表明NCDV具有良好的免疫原性;IFA及中和试验结果表明,NCDV多克隆抗体与G6P[1]型、G9P[1]型和G10P[11]型BRV毒株均能发生特异性反应,存在良好的交叉中和效应,表明制备的多抗具有良好的反应性。综上,本试验成功优化了NCDV毒株在MARC-145细胞中的增殖条件,并制备了高效价的兔源多克隆抗体,为后续BRV感染的血清学诊断及疫苗研发奠定了理论基础。