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驽巴贝虫metacaspase基因的克隆、表达、反应原性鉴定和生物信息分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 325-331页

作者：任冀超甘露郑会珍冯秀娟崔泽云李佳欣金依璇张伟郭庆勇巴音查汗·盖力克李永畅新疆农业大学动物医学学院乌鲁木齐830052

目的克隆、表达驽巴贝虫精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(BcMC),鉴定其反应原性并分析其生物学信息。方法根据驽巴贝虫部分基因序列设计并合成Bcmc基因扩增引物,采用PCR扩增Bcmc基因并克隆至原核表达载体pET-28a,提取质粒p... 详细信息

目的克隆、表达驽巴贝虫精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(BcMC),鉴定其反应原性并分析其生物学信息。方法根据驽巴贝虫部分基因序列设计并合成Bcmc基因扩增引物,采用PCR扩增Bcmc基因并克隆至原核表达载体pET-28a,提取质粒pET-28a-Bcmc进行双酶切、PCR和测序鉴定,将重组质粒转入感受态细胞大肠埃希菌BL21 (DE3),优化诱导条件后,选择最适异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导温度和时间诱导,采用12%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析重组蛋白的表达情况。用His标签蛋白纯化试剂盒纯化重组蛋白后,以驽巴贝虫感染阳性马血清为一抗,Western blotting分析重组蛋白的反应原性。采用ProtParam等生物信息学在线软件预测Bcmc基因的理化性质、磷酸化位点、亚细胞定位、抗原表位、二级和三级结构、蛋白互作网络,对比BcMC与疟原虫属MC-1 (PsMC-1)和泰氏锥虫MC (TtMC)的三级结构。Bcmc序列在NCBI上进行BLAST比对,使用Mega 7.0软件,采用邻接法构建基于mc基因序列的系统进化树。结果Bcmc基因PCR扩增产物约为996 bp,与预期片段一致。重组质粒pET-28a-Bcmc经双酶切、PCR和测序鉴定表明插入的目的基因正确。诱导条件优化结果显示,BcMC重组蛋白在IPTG终浓度为0.8 mmol/L、37℃培养5 h时的表达量最高。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白以包涵体的形式表达,相对分子质量(Mr)约为36 000。Western blotting结果表明,纯化后的BcMC可与驽巴贝虫感染阳性马血清发生特异性反应。生物信息学分析结果显示,BcMC的Mr为36 956.72;具有25个磷酸化点位;亚细胞定位预测位于线粒体的比例为10%;B细胞抗原表位分析发现该蛋白含有12个潜在抗原表位;BcMC蛋白的二级结构中,无规则卷曲占50.30%、α-螺旋占23.19%;BcMC的三级结构与PsMC-1和TtMC相似;蛋白互作网络预测结果显示,与BcMC相互作用的蛋白及BcMC参与的生物过程均与细胞凋亡有关。BLAST比对结果和系统进化树分析结果显示,Bcmc与马泰勒虫(CP099439)、马泰勒虫WA株(XM_004830992)的mc基因序列一致性均为99.90%,进化树上聚为一支,亲源关系较近。结论 BcMC原核表达蛋白具有良好的反应原性,生物信息学分析表明BcMC参与驽巴贝虫凋亡的生物过程。

关键词：驽巴贝虫精氨酸/赖氨酸特异性半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶马反应原性生物信息分析

乌鲁木齐县动物产地检疫现状、存在的问题及对策建议

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新疆畜牧业 2013年第11期28卷 4-7页

作者：陈智岳城新疆农业大学新疆乌鲁木齐830052 乌鲁木齐县动物卫生监督所新疆乌鲁木齐县830036

本文通过调查整理乌鲁木齐县产地检疫工作运行情况,进一步分析了乌鲁木齐县动物产地检疫工作在管理体制、人员组成、职能划分、工作运行、资金投入、法律宣传、人员培训、基础设施建设及执法监督等方面存在的一些问题,结合基层实际情况... 详细信息

本文通过调查整理乌鲁木齐县产地检疫工作运行情况,进一步分析了乌鲁木齐县动物产地检疫工作在管理体制、人员组成、职能划分、工作运行、资金投入、法律宣传、人员培训、基础设施建设及执法监督等方面存在的一些问题,结合基层实际情况,提出了个人观点和合理化的对策及建议,对促进基层动物产地检疫工作有力、有序、有效开展具有一定的参考意义。

关键词：动物产地检疫对策建议

2021—2022年赤羽病通过牛羊调运传入山东省的定量风险评估研究

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畜牧与兽医 2024年第2期56卷 98-103页

作者：李超沈朝建魏玉荣张祯涛王玉英张毅何微黄克和薛峰南京农业大学江苏南京210095 中国动物卫生与流行病学中心/农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(南方) 山东青岛266032 新疆畜牧科学院兽医研究所/新疆动物疫病研究重点实验室新疆乌鲁木齐830013 山东省动物卫生技术中心山东济南250109 青岛水族馆山东青岛266031 遵义医科大学贵州遵义563000

为分析评估赤羽病通过牛羊调运传入山东省的风险,收集、整理2021—2022年活牛和活羊调入山东省的途径、调出省份、调入数量和批次等信息,利用“情景树”法建立传入风险随机模型进行仿真分析。结果显示:从外省调入感染赤羽病羊的风险值为... 详细信息

为分析评估赤羽病通过牛羊调运传入山东省的风险,收集、整理2021—2022年活牛和活羊调入山东省的途径、调出省份、调入数量和批次等信息,利用“情景树”法建立传入风险随机模型进行仿真分析。结果显示:从外省调入感染赤羽病羊的风险值为0.0155(95%CI:0.0118~0.0228);从外省调入感染赤羽病牛的风险值为0.0338(95%CI:0.0225~0.0493)。提示:在进行牛羊调运时,做好启运前的产地检疫和到达后的隔离检疫可降低赤羽病传入的风险。本研究为降低赤羽病传入山东省的风险策略制定提供了参考。

关键词：赤羽病定量风险评估调运隔离检疫

过氧化氢体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡的实验观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第5期26卷 332-337页

作者：康金凤胡汉华白山别克陈蓉阿不力孜新疆医科大学乌鲁木齐830054 乌鲁木齐动物卫生监督所乌鲁木齐830054

目的探讨过氧化氢(H2O2)体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡。方法体外培养细粒棘球蚴原头节,实验分为2组,即RPMI1640组及RPMI1640添加谷氨酰胺组。分别用不同浓度的H2O2诱导,使其发生细胞凋亡。用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(... 详细信息

目的探讨过氧化氢(H2O2)体外诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡。方法体外培养细粒棘球蚴原头节,实验分为2组,即RPMI1640组及RPMI1640添加谷氨酰胺组。分别用不同浓度的H2O2诱导,使其发生细胞凋亡。用原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL法)检测凋亡细胞;用过氧化物酶标记链酶卵白素(SP)染色-免疫组化法检测半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)以及FAS基因蛋白(跨膜蛋白Fas)表达情况。表达产物用二氨基联苯胺(DAB)显色,苏木素复染。TUNEL反应以细胞核黄染者为阳性细胞,caspase-1和cas-pase-3以细胞浆被染成棕黄色为阳性细胞,Fas以细胞膜和细胞浆被染成棕黄色为阳性细胞,无黄染者为阴性细胞。根据每个原头节中阳性细胞数所占百分比,对原头节阳性表达程度分为4个级别,即原头节中阳性细胞数50%为"+++"。实验重复2次。各组均设空白对照组。结果RPMI1640组,1mmol/LH2O2诱导12h,查见典型的TUNEL反应阳性细胞;诱导4h,caspase-1表达86.6%为"+～++",cas-pase-3表达77.8%为"+～++";诱导8h,caspase-1表达86.6%为"+～++",caspase-3表达80.0%为"+～++"。均比对照组明显增加(P所增加(P<0.05)。结论H2O2可诱导细粒棘球蚴原头节细胞凋亡。

关键词：细粒棘球绦虫原头节过氧化氢细胞凋亡半胱天冬氨酸蛋白酶 FAS基因基因表达

补喂不同水平半胱胺锌对哈萨克羊生长性能和消化代谢的影响

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动物营养学报 2024年第9期36卷 5837-5847页

作者：张雅楠张俊瑜刘仁平张文杰杨开伦新疆农业大学动物科学学院新疆肉乳用草食动物营养实验室乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院饲料研究所乌鲁木齐830011

本试验旨在研究补喂不同水平半胱胺锌(Zn-CS)对哈萨克羊生长性能和消化代谢的影响。选取3月龄左右、体重(26.98±1.21)kg且健康的哈萨克羊公羊24只,随机分为4组,每组6只,单栏饲养。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮的基础... 详细信息

本试验旨在研究补喂不同水平半胱胺锌(Zn-CS)对哈萨克羊生长性能和消化代谢的影响。选取3月龄左右、体重(26.98±1.21)kg且健康的哈萨克羊公羊24只,随机分为4组,每组6只,单栏饲养。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,试验组饲喂基础饲粮的基础上分别补喂5(5 Zn-CS组)、10(10 Zn-CS组)和15 mg/kg BW Zn-CS(15 Zn-CS组),进行为期52 d(预试期7 d,正试期45 d)的补喂试验。试验期间,每天记录羊只采食量,分别于试验开始前及试验结束时对所有羊只称重;于正试期第30天晨饲前采集羊只颈静脉血液;从第31天开始采用全收粪收尿法进行为期5 d的消化代谢试验。结果显示:1)与CON组相比,10 Zn-CS组和15 Zn-CS组哈萨克羊的体增重和平均日增重显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05)。2)15 Zn-CS组的粗蛋白质、粗脂肪表观消化率显著高于CON组(P<0.05)。3)15 Zn-CS组的氮沉积量、氮沉积率均显著高于CON组(P<0.05);5 Zn-CS组、10 Zn-CS组和15 Zn-CS组相较于CON组尿磷显著降低(P<0.05),摄入锌、粪锌显著提高(P<0.05);15 Zn-CS组较5 Zn-CS组尿锌显著降低(P<0.05)。4)与CON组相比,15 Zn-CS组血浆中生长抑素水平显著降低(P<0.05),10 Zn-CS组血浆中尿素氮含量显著降低(P<0.05)。由此可见,补喂Zn-CS能够提高哈萨克羊的生长性能,降低血浆中生长抑素水平,提高羊只对养分的消化代谢。在本试验条件下,综合各项试验结果,Zn-CS的最佳补喂水平为15 mg/kg BW。

关键词：半胱胺锌哈萨克羊生长性能血浆激素消化代谢

辣椒秸秆及其不同处理的青贮对羔羊饲喂效果评价

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动物营养学报 2024年第1期36卷 387-396页

作者：程志泽艾比布拉·伊马木李凤鸣伊斯拉依·达吾提万江春新疆农业大学草业学院乌鲁木齐830000 新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830000

本试验通过研究辣椒秸秆及不同添加剂处理的青贮辣椒秸秆替代苜蓿干草对羔羊生长性能、消化代谢、瘤胃发酵及血清生化指标的影响,旨在评价其营养价值和饲喂效果。试验选取24只4月龄、体重为(31.13±1.63)kg的萨福克公羔羊,随机分成4组,... 详细信息

本试验通过研究辣椒秸秆及不同添加剂处理的青贮辣椒秸秆替代苜蓿干草对羔羊生长性能、消化代谢、瘤胃发酵及血清生化指标的影响,旨在评价其营养价值和饲喂效果。试验选取24只4月龄、体重为(31.13±1.63)kg的萨福克公羔羊,随机分成4组,每组6只。对照组(CK组)饲喂含15%苜蓿干草的饲粮,试验组则分别以风干辣椒秸秆(PS组)、植物乳杆菌+枯草芽孢杆菌青贮辣椒秸秆(LP+BS组)和植物乳杆菌+糖蜜青贮辣椒秸秆(LP+M组)替代饲粮中全部的苜蓿干草。预试期10 d,正试期50 d。结果显示:1)PS组的平均干物质日采食量显著低于CK、LP+BS和LP+M组(P0.05)。2)PS组干物质(DM)、中性洗涤纤维(NDF)和粗脂肪(EE)表观消化率显著低于CK、LP+BS和LP+M组(P0.05)。3)PS组瘤胃液pH显著高于LP+BS和LP+M组(P0.05)。4)除LP+BS组血清尿素氮含量显著低于CK、PS和LP+M组(P0.05)。综上可知,添加植物乳杆菌+枯草芽孢杆菌或植物乳杆菌+糖蜜制备的青贮辣椒秸秆可替代饲粮中全部苜蓿干草饲喂羔羊,且以植物乳杆菌+枯草芽孢杆菌青贮辣椒秸秆的饲喂效果更好。

关键词：辣椒秸秆青贮辣椒秸秆羔羊瘤胃发酵参数血清生化指标饲喂效果

不同微生态制剂对羔羊生长性能及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响

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动物营养学报 2024年第2期36卷 1107-1116页

作者：马文彬王彦陈翔宇阿不夏合满·穆巴拉克袁岑秦荣艳刘艳丰张志军刘力萌王乐乐王文奇新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 新疆畜牧科学院饲料研究所乌鲁木齐830000 巴楚安欣牧业有限责任公司巴楚843800

本试验旨在研究不同微生态制剂对羔羊生长性能及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响,为提高羔羊的生长性能并改善其健康状况提供数据参考。试验选用日龄一致、体重[(3.00±0.20)kg]相近、健康状况良好的初生湖羊羔羊48只,随机分为3组,每... 详细信息

本试验旨在研究不同微生态制剂对羔羊生长性能及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响,为提高羔羊的生长性能并改善其健康状况提供数据参考。试验选用日龄一致、体重[(3.00±0.20)kg]相近、健康状况良好的初生湖羊羔羊48只,随机分为3组,每组4个重复,每个重复4只羊。对照组饲喂开食料,试验1组在开食料中添加2.2%的微生态制剂Ⅰ(丁酸梭菌∶枯草芽孢杆菌=4∶5),试验2组在开食料中添加2.2%的微生态制剂Ⅱ(丁酸梭菌∶枯草芽孢杆菌∶低聚果糖=4∶5∶5)。试验期40 d。结果表明:1)各组之间15~34日龄、35~54日龄和15~54日龄羔羊平均日羊奶摄入量、平均日开食料采食量和平均日增重无显著差异(P>0.05)。2)试验1组血清乳酸脱氢酶(LDH)活性和β-羟丁酸(β-HB)含量显著高于对照组(P<0.05),试验2组血清谷丙转氨酶(ALT)活性显著高于对照组(P<0.05)。3)试验1组、试验2组血清免疫球蛋白G(IgG)含量显著高于对照组(P<0.05),试验2组血清免疫球蛋白M(IgM)和白细胞介素-4(IL-4)含量显著高于对照组(P<0.05),试验1组、试验2组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)含量显著低于对照组(P<0.05)。4)试验1组、试验2组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著高于对照组(P<0.05),试验1组、试验2组血清丙二醛(MDA)含量显著低于对照组(P<0.05),试验2组血清一氧化氮(NO)含量显著高于对照组(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加不同微生态制剂可增强羔羊机体免疫力,提高抗氧化能力,开食料中添加2.2%的微生态制剂Ⅱ(丁酸梭菌∶枯草芽孢杆菌∶低聚果糖=4∶5∶5)的效果更好。

关键词：微生态制剂羔羊生长性能血清生化指标免疫抗氧化

地塞米松与ATP联用在体外诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2009年第4期27卷 332-335页

作者：康金凤胡汉华袁武梅武贵臻陈蓉白山别克.吴汗艾赛提.卡力新疆医科大学乌鲁木齐830054 乌鲁木齐动物卫生监督所乌鲁木齐830000

目的探讨地塞米松与三磷酸腺苷(ATP)联用在体外诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡的作用。方法体外培养细粒棘球绦虫原头节,分别设地塞米松(5mmol/L)组、ATP(1.6mmol/L)组、地塞米松(5mmol/L)+ATP(1.6mmol/L)组和空白对照组,显微镜下观察... 详细信息

目的探讨地塞米松与三磷酸腺苷(ATP)联用在体外诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡的作用。方法体外培养细粒棘球绦虫原头节,分别设地塞米松(5mmol/L)组、ATP(1.6mmol/L)组、地塞米松(5mmol/L)+ATP(1.6mmol/L)组和空白对照组,显微镜下观察原头节变化。药物诱导8h后,选取原头节形态改变最明显的一组和空白对照组,透射电镜观察这两组原头节的超微结构,原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶标记技术(TUNEL法)检测原头节中的凋亡细胞,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性检测试剂盒检测该酶活性,琼脂糖凝胶电泳检测两组原头节的DNA片段。结果药物诱导8h后观察,与对照组相比,地塞米松组和地塞米松+ATP组的原头节均出现团缩、顶突内凹和体积缩小,钙颗粒明显减少且模糊不清,未见原头节活动,其中地塞米松+ATP组原头节的形态改变更明显,故选择该组作为实验组,与空白对照组进行后续试验。透射电镜观察见实验组原头节中实质细胞体积缩小、细胞膜皱缩、细胞基质浓缩、核异染色质凝集呈团块状或新月形边集于核膜下,表现出凋亡细胞的特征。TUNEL法在实验组的原头节中检测到散在的凋亡细胞,对照组则未见凋亡细胞。实验组caspase-3活性约为对照组的12倍。电泳结果显示,实验组DNA中有约150bp的核小体DNA片段。结论地塞米松与ATP联用可在体外诱导细粒棘球绦虫原头节细胞凋亡。

关键词：细粒棘球绦虫原头节地塞米松三磷酸腺苷细胞凋亡

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獭兔胃肠道乳酸菌的分离与鉴定

西北农业学报 2024年第7期33卷 1208-1214页

作者：张菲菲薛海涛吴婕任战军乌鲁木齐海关乌鲁木齐830000 西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100

为探索獭兔胃肠道中固有的乳酸菌群,丰富乳酸菌应用,选择中性或偏酸性MRS培养基分离并培养健康獭兔胃肠道中的乳酸菌、16S rDNA测序对所获菌株进行种属鉴定、基因组DNA荧光定量PCR检测其在40、80日龄的獭兔胃肠道中的相对含量。结果从... 详细信息

为探索獭兔胃肠道中固有的乳酸菌群,丰富乳酸菌应用,选择中性或偏酸性MRS培养基分离并培养健康獭兔胃肠道中的乳酸菌、16S rDNA测序对所获菌株进行种属鉴定、基因组DNA荧光定量PCR检测其在40、80日龄的獭兔胃肠道中的相对含量。结果从獭兔胃、空肠、盲肠、结肠、直肠中均分离出1株粪肠球菌;胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠中均分离出1株短乳杆菌;胃、十二指肠、回肠、盲肠、结肠、直肠中均分离出1株植物乳杆菌;十二指肠、空肠、盲肠、结肠中均分离出1株空肠肠球菌。所获菌株在獭兔胃肠道中普遍分布,并且其相对水平随獭兔日龄的增长而升高,这些菌类有待成为獭兔内源乳酸菌饲料添加剂的备用选择。

关键词：乳酸菌獭兔 16S rDNA

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