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胎盘氧化应激及营养调控研究进展

饲料工业 2016年第20期37卷 1-7页

作者：徐建雄罗振上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

胎盘作为联系母体和胎儿的桥梁,是保障胎儿正常生长的前提条件。据报道胎盘氧化应激与妊娠疾病和胎儿的生长发育密切相关。文章综述了胎盘氧化应激与血管发生、凋亡、内质网应激、自噬和转运载体及营养调控方面的研究进展,为抗氧化剂在... 详细信息

胎盘作为联系母体和胎儿的桥梁,是保障胎儿正常生长的前提条件。据报道胎盘氧化应激与妊娠疾病和胎儿的生长发育密切相关。文章综述了胎盘氧化应激与血管发生、凋亡、内质网应激、自噬和转运载体及营养调控方面的研究进展,为抗氧化剂在实际动物生产中的应用提供指导。

关键词：胎盘氧化应激营养调控

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断奶仔猪肠道屏障功能的研究进展

饲料工业 2013年第24期34卷 1-6页

作者：徐建雄盛永帅上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室，上海 200240

仔猪的断奶过程伴随着心理、环境、营养三大应激,小肠的屏障功能极易受到应激影响而遭受损伤,使得小肠黏膜通透性增加,有害物质进入机体,引发各种疾病,给养猪业带来极大的危害。文章介绍了评估肠道屏障功能的主要方法,综述了断奶日龄、... 详细信息

仔猪的断奶过程伴随着心理、环境、营养三大应激,小肠的屏障功能极易受到应激影响而遭受损伤,使得小肠黏膜通透性增加,有害物质进入机体,引发各种疾病,给养猪业带来极大的危害。文章介绍了评估肠道屏障功能的主要方法,综述了断奶日龄、断奶应激、采食量和日粮组成等对仔猪旁细胞屏障及跨细胞屏障的影响,以及缓解小肠屏障功能损伤的方法。

关键词：仔猪断奶肠道屏障评估

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核酸适配体筛选的改良与优化策略

生物技术通报 2017年第11期33卷 67-75页

作者：李世雨傅强严亚贤上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

核酸适配体以其类似抗体的功能及诸多优于抗体的特点引起人们的广泛关注,如何利用指数富集的配基系统进化技术(SELEX技术)来高效地筛选核酸适配体是其应用的关键。结合近些年核酸适配体的研究进展,为提高筛选效率及核酸适配体性能,针对... 详细信息

核酸适配体以其类似抗体的功能及诸多优于抗体的特点引起人们的广泛关注,如何利用指数富集的配基系统进化技术(SELEX技术)来高效地筛选核酸适配体是其应用的关键。结合近些年核酸适配体的研究进展,为提高筛选效率及核酸适配体性能,针对适配体筛选三大不同环节所做的尝试及改良进行相关的阐述,包括初始随机寡核苷酸文库的设计与修饰、筛选过程所用方法及次级文库的制备、筛选过程后(Post-SELEX)核酸适配体性能的优化等;特别比较了筛选方法包括毛细管电泳SELEX、细胞SELEX、磁珠SELEX、加尾SELEX、微流控SELEX、微阵列SELEX和高通量SELEX,以及次级文库的制备方法诸如不对称PCR法、λ核酸外切酶法、磁珠法、不等长PCR法、综合性方法等;对核酸适配体发展面临的问题及发展前景进行探讨,以期为相关科研人员的研究提供参考。

关键词：核酸适配体 SELEX 筛选效率优化策略

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猪链球菌2型生物被膜的生物学特性研究

畜牧与兽医 2011年第9期43卷 1-7页

作者：孟祥朋孙建和上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

通过细胞培养板法研究了猪链球菌2型生物被膜的生物学特性。结果显示:大部分猪链球菌均具有不同程度形成生物被膜的能力,其中3株(3/15)形成能力较强;猪链球菌生物被膜的成熟约需60 h,培养基中葡萄糖浓度是影响生物被膜形成的重要因素;... 详细信息

通过细胞培养板法研究了猪链球菌2型生物被膜的生物学特性。结果显示:大部分猪链球菌均具有不同程度形成生物被膜的能力,其中3株(3/15)形成能力较强;猪链球菌生物被膜的成熟约需60 h,培养基中葡萄糖浓度是影响生物被膜形成的重要因素;生物被膜中的多糖含量显著高于浮游菌;氨苄青霉素钠和阿莫西林对这3株猪链球菌生物被膜的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)均高于游离菌约2 500倍;扫描电镜观察发现,生物被膜内猪链球菌彼此黏连,形成致密的三维立体结构。对猪链球菌生物被膜生物学特性的研究为进一步揭示生物被膜的形成机制、耐药机理,以及清除生物被膜等提供理论依据。

关键词：猪链球菌生物被膜胞外多糖耐药性

小肽微量元素螯合物对断奶仔猪生长性能、氧化应激状况和粪便金属元素含量的影响

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饲料工业 2018年第14期39卷 8-13页

作者：徐雪李少华钟丘实张京徐维娜徐建雄上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

试验旨在研究小肽微量元素螯合物对断奶仔猪生长性能、氧化应激状况和粪便金属元素含量的影响,选用204头健康状况良好、体重相近的21日龄断奶仔公猪(长白×大白二元杂交),随机分成A、B、C和D四组,每组3重复,每重复17头。A、B组分别添加... 详细信息

试验旨在研究小肽微量元素螯合物对断奶仔猪生长性能、氧化应激状况和粪便金属元素含量的影响,选用204头健康状况良好、体重相近的21日龄断奶仔公猪(长白×大白二元杂交),随机分成A、B、C和D四组,每组3重复,每重复17头。A、B组分别添加低水平和高水平的无机Cu、Fe、Zn、Mn元素;C、D组分别添加低水平和高水平小肽螯合Cu、Fe、Zn、Mn。采集血液和粪便样进行相关指标的测定。结果表明:(1)平均日采食量(ADFI)和腹泻率均无显著差异(P>0.05)。与A、B组相比,D组平均日增重(ADG)升高,料肉比(F/G)显著降低(P0.05),C组粪便中Cu含量显著低于A、B组(P<0.05),D组粪便中Cu含量比A组升高35.1%,比B组降低56.1%。结果表明,低水平小肽微量元素螯合物对断奶仔猪生产性能和健康状况无不良影响,但能显著降低粪便中铜的排放量,而高水平小肽微量元素螯合物提高了断奶仔猪的生长性能和健康状况,但对粪便中铜的减排效果不如低水平小肽微量元素螯合物。

关键词：小肽微量元素螯合物断奶仔猪氧化应激指标生长性能铜排放量

猪流行性腹泻病毒Nsp8与宿主细胞互作蛋白的筛选及鉴定

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中国动物传染病学报 2021年第1期29卷 1-8页

作者：周书亭丁思嘉凌悦廖卓韵王子泓邹霭萱罗渝宵黄梓鑫陈宇翔袁聪俐朱建国崔立杨志彪上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

猪流行性腹泻病毒Nsp8是RNA依赖的RNA聚合酶辅助因子,在病毒基因组复制中具有重要作用。为了从宿主细胞蛋白角度了解PEDV Nsp8蛋白的作用,本研究以PEDV感染的宿主细胞LLC-PK1为研究对象,提取LLC-PK1细胞总RNA,利用SMART技术经过反转录... 详细信息

猪流行性腹泻病毒Nsp8是RNA依赖的RNA聚合酶辅助因子,在病毒基因组复制中具有重要作用。为了从宿主细胞蛋白角度了解PEDV Nsp8蛋白的作用,本研究以PEDV感染的宿主细胞LLC-PK1为研究对象,提取LLC-PK1细胞总RNA,利用SMART技术经过反转录、扩增和纯化获得双链cDNAs,将其与pGADT7-Rec和carrier DNA共同转化至酵母Y187菌株,构建LLC-PK1 cDNA酵母文库,对该文库容量及质量进行鉴定。结果显示:本研究构建的LLC-PK1 cDNA文库库容量为2.1×10^7 CFU/mL,插入cDNA片段长度为500~2500 bp;将构建的诱饵质粒pGBKT7-Nsp8与LLC-PK1 cDNA酵母表达文库进行杂交,筛选阳性克隆菌株并测序分析,共获得了8个潜在互作蛋白;将8个蛋白分别与诱饵质粒pGBKT7-Nsp8进行酵母回复杂交验证,有4种宿主蛋白与Nsp8蛋白共转化后能在含X-α-Gal的DDO/X/A和QDO/X/A选择培养基中形成蓝色菌落;选择其中出现频率最高的LDHB蛋白与Nsp8,分别构建含有Flag标签和HA标签的真核表达载体,利用不同的标签抗体进行Co-IP鉴定,发现Nsp8与LDHB蛋白可以发生免疫共沉淀;通过激光共聚焦显微镜观察发现,Nsp8和LDHB蛋白在细胞质中存在明显共定位。本研究结果表明,Nsp8与宿主蛋白LDHB存在相互作用,推测LDHB蛋白可能通过与PEDV Nsp8蛋白在细胞质中的相互作用参与病毒复制的生物学过程。

关键词：猪流行性腹泻病毒 Nsp8 cDNA文库蛋白相互作用

酵母CUP1基因的结构及其蛋白质鳌合金属离子功能的研究进展

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中国畜牧兽医 2013年第3期40卷 62-67页

作者：颉孝贤王起山陈振亮马育芳潘玉春上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240

酵母CUP1编码的蛋白质属于金属硫蛋白,该蛋白质富含半胱氨酸,大小为61个氨基酸,分子质量约为6165u。CUP1蛋白能够鳌合金属铜离子,使得酵母对铜离子产生耐受力。在铜等金属离子的诱导下,酵母CUP1基因的启动子与转录因子ACE1等结合力增强... 详细信息

酵母CUP1编码的蛋白质属于金属硫蛋白,该蛋白质富含半胱氨酸,大小为61个氨基酸,分子质量约为6165u。CUP1蛋白能够鳌合金属铜离子,使得酵母对铜离子产生耐受力。在铜等金属离子的诱导下,酵母CUP1基因的启动子与转录因子ACE1等结合力增强,从而在转录水平上的表达量大大提高。作者对酵母CUP1基因的研究进行了综述,主要包括CUP1基因的结构、其蛋白质鳌合金属离子的作用、启动子相关的分析及CUP1基因特别是其启动子在转基因中的应用,为深入研究CUP1基因的生理机制奠定基础,同时也为其在转基因中的应用,特别是在转CUP1基因动、植物生产中的应用提供理论依据。

关键词：酵母 CUP1基因鳌合启动子转基因

TaqMan荧光定量PCR检测滑液囊支原体方法的建立及其感染鸡血液内载量测定

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微生物学通报 2024年第9期51卷 3648-3657页

作者：朱悦祁晶晶武梦思张广冻丁思羽陈玥彤高崧于圣青扬州大学兽医学院江苏扬州225009 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 扬州优佳创生物科技有限公司江苏扬州225261 锦州医科大学畜牧兽医学院辽宁锦州121000

【背景】滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是禽类的常见病原,严重危害家禽养殖业的发展。MS易与其他病原混合感染,给临床诊断造成困难,因此亟须建立一种快速、准确、灵敏的检测方法对疑似患病禽进行快速诊断,以降低经济损失。【目... 详细信息

【背景】滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)是禽类的常见病原,严重危害家禽养殖业的发展。MS易与其他病原混合感染,给临床诊断造成困难,因此亟须建立一种快速、准确、灵敏的检测方法对疑似患病禽进行快速诊断,以降低经济损失。【目的】建立一种检测MS的TaqMan荧光定量PCR方法,测定MS在感染鸡血液内的载量变化,为临床检测MS感染提供技术支持。【方法】参考GenBank中登录的MS基因保守区域序列设计特异性引物和探针,以温度梯度qPCR法确定最适退火温度,用矩阵法优化其引物和探针加入量,通过提取MS 0801基因组作为模板构建标准曲线,并进行特异性、灵敏度、重复性试验,建立一种检测MS的TaqMan荧光定量PCR方法。使用建立的方法检测滴鼻攻毒和足垫攻毒后MS在感染鸡血液内的载量变化。【结果】建立的TaqMan荧光定量PCR方法最佳退火温度为55℃,引物和探针(10 mol/L)加入量分别为0.8 mL和0.4 mL;扩增曲线具有良好的线性关系,R^(2)>0.99;特异性强,仅对MS有特异性反应,对其他病原均无扩增反应;敏感性高,最低检测限为25 copies/μL;重复性好,批间试验和批内试验变异系数均小于2%。通过TaqMan荧光定量PCR检测MS在感染鸡血液内的动态变化,发现两个攻毒组MS含量的峰值和总体波动无明显差异,但足垫攻毒的MS在血液中的增殖要快于滴鼻攻毒。【结论】本实验建立了一种能够快速检测MS的TaqMan荧光定量PCR方法,并用于检测MS在感染鸡血液内的动态变化,为临床上检测MS感染提供了技术支撑,为疫苗免疫评价方法提供了新的思路。

关键词：滑液囊支原体 TaqMan荧光定量PCR 攻毒模型增殖变化

微生物源性抗氧化剂对大鼠抗氧化及损伤修复的作用

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中国饲料 2010年第22期 11-15页

作者：陈小连孙婷婷徐建雄上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室

本试验以脂多糖(LPS)致氧化损伤大鼠为模型,研究微生物源性抗氧化剂对大鼠生长性能、脏器系数、抗氧化及损伤修复的作用。将64只70日龄SD大鼠随机分成4组,每组16只,雌雄对半。对照组和损伤模型组饲喂基础日粮,抗氧化剂组和损伤修复组饲... 详细信息

本试验以脂多糖(LPS)致氧化损伤大鼠为模型,研究微生物源性抗氧化剂对大鼠生长性能、脏器系数、抗氧化及损伤修复的作用。将64只70日龄SD大鼠随机分成4组,每组16只,雌雄对半。对照组和损伤模型组饲喂基础日粮,抗氧化剂组和损伤修复组饲喂基础日粮并添加0.8 mL/d.只微生物源性抗氧化剂。损伤模型组和损伤修复组腹腔注射LPS 1 mg/kg,对照组和抗氧化剂组注射等量的生理盐水,试验期22 d。结果显示,与对照组相比,抗氧化剂显著增加大鼠日增重,提高血清超氧化物岐化酶(SOD)活力,降低丙二醛(MDA)含量和一氧化氮(NO)水平(P生物源性抗氧化剂具有提高大鼠抗氧化性能、修复机体氧化损伤的作用。

关键词：微生物源性抗氧化剂氧化损伤自由基代谢大鼠