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超重人群中健康者与非酒精性脂肪性肝病患者的临床特征及血清脂质组学分析

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临床肝胆病杂志 2024年第2期40卷 284-291页

作者：陈小燕袁乙富杜晟楠曹勤蒋元烨上海中医药大学附属普陀医院消化内科上海200062

目的探究超重人群中,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者与健康人的临床指标与脂质代谢差异。方法本研究将体质量指数(BMI)>23 kg/m^(2)定义为超重人群,选取2020年8月—2021年4月上海中医药大学附属普陀医院收治的62例超重NAFLD患者纳入超重... 详细信息

目的探究超重人群中,非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者与健康人的临床指标与脂质代谢差异。方法本研究将体质量指数(BMI)>23 kg/m^(2)定义为超重人群,选取2020年8月—2021年4月上海中医药大学附属普陀医院收治的62例超重NAFLD患者纳入超重NAFLD组,另选取同期超重健康体检者50例作为对照。记录所有受试者的临床信息以及血液生化指标数据。应用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)进行血清脂质组学分析;使用主成分分析法和正交偏最小二乘法判别分析对脂质组学数据进行多元统计分析。计数资料两组间比较采用χ^(2)检验。计量资料两组间比较采用成组t检验或Wilcoxon秩和检验。结果超重NAFLD组BMI显著高于超重对照组(Z=-2.365,P=0.018)。血清学指标中,超重NAFLD组红细胞、血红蛋白、红细胞比容、尿酸、总蛋白、球蛋白、ALP、GGT、ALT、AST、胆碱酯酶、低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白B、血糖水平均显著高于超重对照组(P值均1,P3的甘油三酯含量较超重对照组降低(P<0.001),而不饱和键数≤3的甘油三酯含量较超重对照组增多(P<0.001)。结论超重NAFLD患者的部分生化指标及脂质代谢产物明显异于超重健康人,血液内脂肪酸明显升高,甘油三酯中的含饱和脂肪链的种类显著升高。

关键词：非酒精性脂肪性肝病超重体征和症状脂质组学

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肠胃清对裸小鼠大肠癌皮下移植瘤生长及STAT3、Bcl-2剪接异构体表达的影响

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中医杂志 2024年第8期65卷 849-857页

作者：陈彬邓皖利梁芳袁旭谢曼丽刘慧上海中医药大学附属普陀医院上海市普陀区200062 上海中医药大学

目的探讨肠胃清治疗大肠癌的可能作用机制。方法选用HCT 116肠癌细胞株,制备沉默多聚嘧啶区结合蛋白3(PTBP3)基因、过表达PTBP3基因稳转的肠癌细胞;72只裸小鼠随机分为3组,各组分别通过腋下注射沉默PTBP3的稳转细胞、过表达PTBP3的稳转... 详细信息

目的探讨肠胃清治疗大肠癌的可能作用机制。方法选用HCT 116肠癌细胞株,制备沉默多聚嘧啶区结合蛋白3(PTBP3)基因、过表达PTBP3基因稳转的肠癌细胞;72只裸小鼠随机分为3组,各组分别通过腋下注射沉默PTBP3的稳转细胞、过表达PTBP3的稳转细胞、未转染的肠癌细胞,构建沉默模型、过表达模型、对照模型3种大肠癌细胞皮下移植瘤模型,每种模型24只。造模成功后将对照模型裸小鼠随机分为对照模型组、对照肠胃清组、对照奥沙利铂组,沉默模型裸小鼠随机分为沉默模型组、沉默肠胃清组、沉默奥沙利铂组,过表达模型裸小鼠随机分为过表达模型组、过表达肠胃清组、过表达奥沙利铂组,每组均为8只。各肠胃清组肠胃清口服液灌胃剂量为35.9625 g/kg,腹腔注射0.2 ml生理盐水;各模型组以0.5 ml生理盐水灌胃,腹腔注射0.2 ml生理盐水;各奥沙利铂组腹腔注射奥沙利铂5 mg/kg(0.2 ml),以0.5 ml生理盐水灌胃,各组均灌胃每日1次,腹腔注射每周3次。给药31天后检测各组皮下瘤瘤重并计算抑瘤率,免疫组化法检测增殖细胞核抗原Ki67表达水平、细胞凋亡水平;实时荧光定量法、Western Blot检测各组皮下瘤组织PTBP3、信号转导及转录活化因子3(STAT3)剪接异构体α(STAT3α)、STAT3剪接异构体β(STAT3β)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)剪接异构体α(Bcl-2α)、Bcl-2剪接异构体β(Bcl-2β)的mRNA及蛋白表达。结果在对照模型、沉默模型和过表达模型中,各肠胃清组和奥沙利铂组皮下瘤瘤重、皮下瘤组织Ki67表达水平均低于各相应模型组,细胞凋亡水平均高于各相应模型组(P<0.05或P<0.01);沉默肠胃清组和过表达肠胃清组皮下瘤组织PTBP3、STAT3α、Bcl-2α的mRNA和蛋白表达水平均低于相应模型组,STAT3β、Bcl-2β的mRNA和蛋白表达水平均高于相应模型组(P<0.05或P<0.01)。沉默各组皮下瘤瘤重、皮下瘤组织Ki67表达水平及皮下瘤组织中PTBP3、STAT3α、Bcl-2α的mRNA和蛋白表达水平均低于对照相应各组,细胞凋亡水平及皮下瘤组织STAT3β、Bcl-2β的mRNA和蛋白表达水平均高于对照相应各组;过表达各组皮下瘤瘤重、皮下瘤组织Ki67表达水平及皮下瘤组织中PTBP3、STAT3α、Bcl-2αmRNA和蛋白表达水平均高于对照相应各组,细胞凋亡水平及皮下瘤组织STAT3β、Bcl-2β的mRNA和蛋白表达水平均低于对照相应各组(P<0.05或P<0.01)。各奥沙利铂组抑瘤率分别高于各肠胃清组。与对照相应各组比较,沉默相应各组抑瘤率均为正值,过表达相应各组抑瘤率均为负值。结论PTBP3可促进肠癌细胞增殖、抑制细胞凋亡,上调肠癌细胞中STAT3α、Bcl-2α的表达,下调STAT3β、Bcl-2β的表达;肠胃清治疗大肠癌可能与其可抑制PTBP3,进而调控STAT3α、STAT3β、Bcl-2α、Bcl-2β表达作用相关。

关键词：大肠癌选择性剪接肠胃清多聚嘧啶区结合蛋白3 信号转导及转录活化因子3 B细胞淋巴瘤/白血病2

加味防己黄芪汤通过抑制上皮间质转化过程中TGF-β1/Smad/Snail信号通路减轻肾间质纤维化

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中国中药杂志 2024年第11期49卷 3012-3020页

作者：邓雅文金莉陈冬平上海中医药大学附属曙光医院肾内科上海201203 上海中医药大学上海201203 复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科上海200032

研究加味防己黄芪汤在小鼠单侧输尿管结扎(UUO)模型中,以及转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠肾小管导管上皮细胞(NRK-52E)纤维化模型中对上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达的影响,探讨加味防己黄芪汤减轻肾间质纤维化的分子机制。对C57/B... 详细信息

研究加味防己黄芪汤在小鼠单侧输尿管结扎(UUO)模型中,以及转化生长因子β1(TGF-β1)诱导大鼠肾小管导管上皮细胞(NRK-52E)纤维化模型中对上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达的影响,探讨加味防己黄芪汤减轻肾间质纤维化的分子机制。对C57/BL小鼠予UUO手术,0.5、2倍加味防己黄芪汤以及蒙诺阳性对照药给药7 d后取材,Masson染色观察小鼠肾间质组织胶原沉积情况,Western blot、RT-qPCR检测肾组织中TGF-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad2/3、Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)表达水平。利用SD大鼠制备不同浓度加味防己黄芪汤含药血清,CCK-8检测不同浓度含药血清对NRK-52E增殖活力的影响。TGF-β1诱导NRK-52E纤维化模型,显微镜观察不同浓度含药血清处理后细胞形态。TGF-β1诱导NRK-52E纤维化模型,1倍加味防己黄芪汤含药血清处理,Western blot、RTq PCR检测p-Smad2/3、Smad2/3、Snail、E-cadherin、α-SMA、vimentin表达水平,以及同等模型下sh RNA沉默Snail基因后,1倍加味防己黄芪汤含药血清处理,测量指标同上。结果显示,加味防己黄芪汤能改善UUO模型小鼠纤维化损伤,减轻TGF-β1诱导NRK-52E纤维化模型中的纤维化,使EMT相关指标p-Smad2/3、α-SMA、Snail、vimentin蛋白及m RNA表达降低,E-cadherin蛋白及m RNA表达升高;当sh RNA沉默Snail基因后,加味防己黄芪汤含药血清处理前后EMT相关指标E-cadherin、α-SMA及vimentin蛋白表达及m RNA水平差异没有统计学意义。结果表明,加味防己黄芪汤可能通过抑制TGF-β1/Smad/Snail信号通路减轻肾间质纤维化,参与EMT进程。

关键词：加味防己黄芪汤上皮间质转化肾间质纤维化 TGF-β1/Smad/Snail信号通路

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基于中医“衡-和”思维辨治恶性肿瘤理论探微与体系建构

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 60-64页

作者：温俊凯汪舒云范忠泽邓皖利上海中医药大学附属普陀医院上海200062

中医药的应用贯穿于恶性肿瘤辨治的各个阶段,成效日益突显。为继承并发扬中医独到的原创优势,文章从古代中庸哲学思想与中医思维出发,钩沉“衡-和”思维之渊薮,围绕恶性肿瘤发病时机体内部稳态倾移与偏颇之特点,首倡以调衡致和为纲,求... 详细信息

中医药的应用贯穿于恶性肿瘤辨治的各个阶段,成效日益突显。为继承并发扬中医独到的原创优势,文章从古代中庸哲学思想与中医思维出发,钩沉“衡-和”思维之渊薮,围绕恶性肿瘤发病时机体内部稳态倾移与偏颇之特点,首倡以调衡致和为纲,求衡于动、时、势、气4个层面,致和于阴阳、形神、五脏、天人4个维度。总结凝练“衡-和”六法,由博返约,化简驭繁,为创建肿瘤辨治新体系提供形而上的思度与探索。

关键词：中医 “衡-和”思维恶性肿瘤理论探微体系建构

下瘀血汤对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠模型的治疗作用及机制

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临床肝胆病杂志 2024年第4期40卷 712-719页

作者：侯林圻王知意赵鑫张洁马文婷刘旭凌张玮陶乐刘成吴柳上海中医药大学附属普陀医院实验中心实验室上海200062 上海中医药大学附属普陀医院感染科上海200062

目的探讨下瘀血汤调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)抑制高脂饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法15只雄性C57BL/6小鼠随机分为低脂饮食(LFD)组、HFD组和下瘀血汤-HFD(XYXD)组,每组... 详细信息

目的探讨下瘀血汤调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)抑制高脂饮食(HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法15只雄性C57BL/6小鼠随机分为低脂饮食(LFD)组、HFD组和下瘀血汤-HFD(XYXD)组,每组各5只。测量肝功能指标ALT和AST、血脂代谢指标TG、TC水平;肝组织经过HE染色、油红O染色,观察小鼠组织形态、脂滴沉积;实时荧光定量PCR检测肝组织中炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6及NLRP6表达水平;Western Blot检测NLRP6、NF-κB和NF-κB p65蛋白水平;免疫组化检测NLRP6和CD68表达。棕榈酸(PA)、脂多糖(LPS)和下瘀血汤含药血清处理鼠Raw264.7细胞,检测炎症情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果与LFD组比较,HFD组血清ALT、AST和TC、TG水平显著升高(P值均<0.05)。肝组织病理学显示,HFD组肝脂肪变性明显,NAS评分显著升高(P<0.05);实时荧光定量PCR结果显示,IL-1β、IL-18等炎症相关因子显著升高,NLRP6表达显著下调(P值均<0.05)。免疫组化显示NLRP6表达与巨噬细胞标志物CD68重合。Western Blot显示,NLRP6表达下调后,磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)显著上调(P<0.05)。与HFD组相比,下瘀血汤可有效改善HFD小鼠的肝脏炎症,上调NLRP6的表达,下调p-NF-κB p65(P<0.05)。PA处理Raw264.7细胞后下调NLRP6,促进炎症进展(P<0.05);下瘀血汤处理可上调NLRP6,抑制炎症和NF-κB(P<0.05)。结论下瘀血汤可显著改善HFD诱导NAFLD小鼠模型的肝脂肪变性和炎症,调控NLRP6/NF-κB减轻巨噬细胞活化可能是其作用机制之一。

关键词：非酒精性脂肪性肝病下瘀血汤巨噬细胞 NLR蛋白质类小鼠,近交C57BL

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Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤转基因小鼠模型构建

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中国比较医学杂志 2024年第7期34卷 60-67,156页

作者：陈苇善汪舒云袁路云王皓月孙可向高嘉敏邓皖利上海中医药大学附属普陀医院上海200062

目的探讨构建Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤小鼠模型最佳他莫昔芬诱导方式,建立小鼠模型。方法以C57BL/6J野生型小鼠为健康的对照组。以不同浓度、剂量、给药时长他莫昔芬腹腔注射于转基因小鼠,即组1以低剂量他莫昔芬(5 mg/kg)给药1 d,组2以低剂... 详细信息

目的探讨构建Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤小鼠模型最佳他莫昔芬诱导方式,建立小鼠模型。方法以C57BL/6J野生型小鼠为健康的对照组。以不同浓度、剂量、给药时长他莫昔芬腹腔注射于转基因小鼠,即组1以低剂量他莫昔芬(5 mg/kg)给药1 d,组2以低剂量他莫昔芬(5 mg/kg)给药3 d,组3以高剂量他莫昔芬(50 mg/kg)给药1 d,组4以高剂量他莫昔芬(50 mg/kg)给药3 d,给药4周后观察各组小鼠生存率、体重变化,药物诱导4周后观察各组小鼠肠道长度变化、肠内腺瘤生长数量以及大小,再通过苏木精伊红染色、显微镜下观察肠道组织、腺瘤的生理情况。结果第一部分实验发现雌鼠生存率低于雄鼠(P0.05),组1与组3差异具有统计学意义(P<0.05)。各组小鼠大肠内都长有腺瘤,多数于结肠远端,组3与组4腺瘤较多也较大。给药组小鼠大肠病理情况与健康对照组相比出现腺瘤生长,腺体组织排列紊乱、上皮细胞排列不齐,肠道黏膜屏障松散,隐窝分歧不规则,组3、组4也有炎症发生,组4部分区域发现细胞坏死。结论他莫昔芬诱导Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤转基因小鼠造模成功,并且由此判断,他莫昔芬浓度10 mg/mL、5 mg/kg的剂量诱导1 d的诱导方式最为合适。

关键词：肠腺瘤 Apc基因 Kras基因动物模型小鼠

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氧化应激及天然食物中的抗氧化剂在干眼中的作用研究进展

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眼科新进展 2024年第3期44卷 235-238页

作者：孔雪晴沙咏怡项敏泓上海中医药大学附属普陀医院眼科上海市200062

干眼是以泪膜不稳定、眼部不适为特征的年龄相关性疾病,其发病与年龄、环境等多种因素密切相关。研究表明,氧化应激在干眼的发病过程中起关键作用。本文主要就氧化应激通过激活自噬、炎症和衰老等诱导干眼发生的机制以及天然食物中抗氧... 详细信息

干眼是以泪膜不稳定、眼部不适为特征的年龄相关性疾病,其发病与年龄、环境等多种因素密切相关。研究表明,氧化应激在干眼的发病过程中起关键作用。本文主要就氧化应激通过激活自噬、炎症和衰老等诱导干眼发生的机制以及天然食物中抗氧化剂对于改善眼表氧化应激状态、治疗干眼方面的应用进展进行综述。

关键词：氧化应激干眼抗氧化剂天然食物

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基于NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路探讨如金解毒散对巨噬细胞焦亡模型的影响

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中国免疫学杂志 2024年

作者：马宇慧李祎楠孟佳磊齐璐瑶雷鸣孙芳园上海中医药大学附属普陀医院全科医学科上海中医药大学附属第七人民医院

目的：观察如金解毒散对RAW264.7细胞焦亡模型的治疗作用，并探讨其抗炎机制。方法：RAW264.7细胞经LPS刺激4 h，ATP刺激30min构建细胞焦亡模型。分组包括对照组（Control）、模型组（LPS+ATP）、如金解毒散低剂量组（RJJDS50μg/ml）... 详细信息

目的：观察如金解毒散对RAW264.7细胞焦亡模型的治疗作用，并探讨其抗炎机制。方法：RAW264.7细胞经LPS刺激4 h，ATP刺激30min构建细胞焦亡模型。分组包括对照组（Control）、模型组（LPS+ATP）、如金解毒散低剂量组（RJJDS50μg/ml）、如金解毒散中剂量组（RJJDS100μg/ml）、如金解毒散高剂量组（RJJDS200μg/ml）、地塞米松组（DEX组）。随后收集各组细胞及上清液，检测上清液中LDH释放量，正倒置荧光显微镜观察细胞ROS水平，ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）的含量，蛋白免疫印迹法（Westernblotting）检测细胞中NLRP3、Caspase-1p45、Caspase-1p20、GSDMD-FL和GSDMD-N的蛋白水平，正倒置荧光显微镜观察PI阳性细胞数量。结果：与对照组相比，模型组细胞上清液中LDH、TNF-α、和IL-1β的含量显著升高（P <0.05）；模型组细胞ROS水平显著升高（P<0.05）；NLRP3、Caspase-1p20和GSDMD-N 的蛋白水平上调（P < 0.05）；PI 阳性细胞数增多（P < 0.05）。与模型组相比，如金解毒散各治疗组和阳性药DEX组显著降低了RAW264.7细胞焦亡模型上清液中LDH、TNF-α和IL-1β的含量（P < 0.05）；下调了NLRP3、Caspase-1 p20和GSDMD-N蛋白的表达（P < 0.05）；PI阳性细胞数显著减少（P < 0.05）。结论：如金解毒散抑制巨噬细胞焦亡，发挥抗炎作用涉及NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号。

关键词：如金解毒散急性肺损伤巨噬细胞细胞焦亡炎症小体

中药单体干预核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体治疗呼吸系统疾病的研究现状

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中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1839-1843页

作者：潘华阳罗旭明马福祺倪振华王雄彪林玉华上海中医药大学附属普陀医院呼吸科上海200062 上海中医药大学附属普陀医院中心实验室上海200062

适宜的炎症可以有效地消除有害物质和预防疾病,是一种自我保护措施,以防止对机体带来更大的损伤,然而异常激活的炎症则对机体不利。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体参与炎症反应,与机体许多生理病理过程密切相关,在... 详细信息

适宜的炎症可以有效地消除有害物质和预防疾病,是一种自我保护措施,以防止对机体带来更大的损伤,然而异常激活的炎症则对机体不利。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体参与炎症反应,与机体许多生理病理过程密切相关,在肺部疾病的发生和发展中发挥了重要作用。本文主要对NLRP3炎性小体的激活机制、活化假说以及中药单体通过干预NLRP3炎性小体治疗呼吸系统疾病的研究进行综述。

关键词：中药单体呼吸系统疾病核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体中药治疗炎症