检索结果-南通市图书馆

作者：王丹南京师范大学

学位级别：硕士

暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)是典型的溯河洄游鱼类,其盐度耐受范围广,而在洄游过程中时常遭受水生环境变化,如溶解氧、渗透压及水体污染物等。虽然许多鱼类已在长期进化中形成了一系列适应环境变化的策略,但是剧烈的环境变化仍严重... 详细信息

暗纹东方鲀(Takifugu fasciatus)是典型的溯河洄游鱼类,其盐度耐受范围广,而在洄游过程中时常遭受水生环境变化,如溶解氧、渗透压及水体污染物等。虽然许多鱼类已在长期进化中形成了一系列适应环境变化的策略,但是剧烈的环境变化仍严重威胁其正常的生长、发育和生存。近年来,暗纹东方鲀不仅在我国水产市场占有一定的份额,而且也可作为研究鱼类生理的分子模型。许多学者围绕该鱼遗传结构、营养代谢、渗透调节、免疫应答和抗逆生理等方面进行了大量研究,但是有关环境因素对其先天性免疫能力的影响研究较少。socs是鱼类先天性免疫中一类重要的负调控基因,参与调控细胞因子信号启动、持续和扩增的紊乱,对于机体维持正常的内稳态和细胞功能具有重要作用。因此,本文以暗纹东方鲀为研究对象,研究了暗纹东方鲀socs基因在不同环境下的免疫应答规律,不仅为进一步揭示暗纹东方鲀socs基因在不同盐度下的调控作用提供了重要依据,还为进一步阐明其免疫应答与低氧胁迫的关系提供了有价值的参考资料。具体研究结果如下:1. 暗纹东方鲀socs基因的分子特征及组织表达分析通过RACE技术,克隆获得暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3基因的c DNA全长分别为1420 bp、1354 bp和1547 bp。开放阅读框(ORF)分别为660bp、606 bp和735 bp,分别编码219、201和244个氨基酸。5’UTR分别为69bp、55 bp和52 bp,3’UTR分别为691 bp、694 bp和761 bp。分子质量分别为24.47 k Da、22.40 k Da和27.46 k Da。等电点分别为9.51、8.92和7.67。氨基酸序列分析结果显示,暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3基因均具有保守的socs box和SH2结构域。氨基酸序列比对结果显示,暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3与同属的红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)同源性最高。系统进化树结果显示,暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3均与同属的红鳍东方鲀共聚一支,表明暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3基因在进化过程中高度保守。同时,荧光定量PCR结果显示,暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3基因分别在鳃、脑和心脏三个组织表达较高,而均在肌肉表达较低。2. 盐度和LPS刺激下暗纹东方鲀socs基因的表达分析通过荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹技术,检测暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3基因在不同盐度条件(0、15和30 ppt)注射LPS(Lipopolysaccharide,25μg m L)24 h后的表达模式。结果表明,在0 ppt条件注射LPS 24 h后,暗纹东方鲀鳃和肝组织socs1基因的m RNA及蛋白表达量显著下调,而肾组织socs1表达量上调;在PBS和LPS处理组中,暗纹东方鲀鳃和肾组织socs1基因的m RNA及蛋白表达量随盐度升高呈下降趋势,而肝组织socs1的表达量则出现显著上调。此外,在PBS处理组,鳃组织socs2的m RNA及蛋白表达量随盐度升高呈下调趋势;在LPS处理组,肝组织socs2的m RNA及蛋白表达量随盐度升高出现显著上调。0 ppt条件注射LPS 24 h后,肾组织socs3基因的m RNA及蛋白表达量显著下调,这与暗纹东方鲀socs1和socs2基因的表达模式不同。可见,不同的socs基因在应对LPS刺激时具有不同的调控作用。此外,盐度变化影响暗纹东方鲀鳃、肾和肝组织socs基因的应答水平,且提高盐度可上调肝组织socs基因对LPS的响应。3. 低氧和常氧恢复下暗纹东方鲀socs基因的表达分析通过荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹技术,检测暗纹东方鲀socs1、socs2和socs3基因在低氧胁迫(1.63±0.2 mg/L)和常氧(7.0±0.3 mg/L)恢复下的时序表达模式。结果显示,在低氧胁迫下,脑和肝组织socs1和socs3基因的m RNA及蛋白表达量显著下调。在低氧胁迫前期,肝组织socs1基因的m RNA及蛋白表达量不发生显著变化,而socs3在低氧胁迫2 h时便出现显著下调,表明暗纹东方鲀socs3基因在应对低氧胁迫时比socs1基因更为敏感。与socs1和socs3不同,脑组织socs2基因的m RNA及蛋白表达量在低氧胁迫8 h时上调至最高,同时肝组织socs2基因的m RNA及蛋白表达量分别在低氧胁迫2 h和8h时上调至最高。由此表明,不同的socs基因在应对低氧胁迫时存在不同的时序表达模式。此外,在常氧恢复下,暗纹东方鲀socs基因多数在4 h时发生显著上调或下调,随后在12 h时恢复至正常水平。但是,常氧恢复12 h后脑组织socs1基因的m RNA表达量仍显著上调

关键词：暗纹东方鲀 socs基因不同环境胁迫免疫应答

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细胞因子信号转导抑制因子socs基因甲基化与肿瘤

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医学综述 2007年第7期13卷 514-516页

作者：姜雨刚何松美谢毅林木生广东医学院肝胆外科研究所广东湛江524001

细胞因子信号转导抑制因子(socs)基因的异常甲基化与多种人类肿瘤的发生、发展有明显的相关性。socs基因的甲基化沉默导致JAK/STAT途径的结构激活,从而造成了致癌基因和增殖相关基因的激活并最终导致了肿瘤的形成。

关键词： socs基因甲基化肿瘤

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团头鲂socs家族基因的分子特征及其对嗜水气单胞菌胁迫的响应

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华中农业大学学报 2022年第6期41卷 222-229页

作者：翟文娅李博王济秀王焕岭刘红华中农业大学水产学院/农业农村部淡水生物繁育重点实验室/长江经济带大宗水生生物产业绿色发展教育部工程研究中心武汉430070

为探究团头鲂细胞因子信号转导抑制因子(suppressor of cytokine signaling,socs)家族基因的序列特征和功能,从NCBI数据库获取socs1、socs2、socs3a、socs3b、socs4、socs5a、socs5b、socs6、socs7、socs9共10个socs基因的cDNA序列,利用ExPASy、SMART等在线网站对其进行生物信息学分析,预测团头鲂10个socs的理论分子质量、理论等电点与结构域等分子特性。系统进化(MEGA 6软件)分析结果显示,10个socs可分为2个亚族:Ⅰ型亚族包括socs4、socs5a、socs5b、socs6、socs7与socs9,Ⅱ型亚族包括socs1、socs2、socs3a与socs3b。半定量PCR结果显示,健康团头鲂10个socs基因在被检测组织中具有明显的组织特异性,socs1、socs2、socs3在多个组织中表达量较高。在嗜水气单胞菌感染后,采用实时定量PCR检测团头鲂socs基因在脾脏、体肾、头肾中的表达量,其中socs1、socs2、socs3a、socs3b表达量均显著上调。结果表明,团头鲂socs家族基因的表达模式各不相同,预示其功能的多样性,其中socs1、socs2、socs3在免疫应答中发挥重要作用。

关键词：团头鲂嗜水气单胞菌 socs基因细菌性败血症抗细菌感染免疫应答

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3种黄颡鱼socss基因分子特性及致病菌胁迫下的表达模式

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水产学报 2022年第9期46卷 1537-1552页

作者：孙亦如张红燕毕宜慧马思思张凯暨杰王涛贾永义尹绍武南京师范大学海洋科学与工程学院江苏省特色水产育种与绿色高效养殖技术工程研究中心浙江省淡水水产研究所

细胞因子信号传导抑制因子(socs)是JAK/STAT信号通路中细胞因子信号受体的重要抑制因子。为探究socs在鱼类免疫应答过程中的作用，本研究以杂交黄颡鱼“黄优1号”及其母本黄颡鱼和父本瓦氏黄颡鱼为对象，克隆了杂交黄颡鱼“黄优1号” 3... 详细信息

细胞因子信号传导抑制因子(socs)是JAK/STAT信号通路中细胞因子信号受体的重要抑制因子。为探究socs在鱼类免疫应答过程中的作用，本研究以杂交黄颡鱼“黄优1号”及其母本黄颡鱼和父本瓦氏黄颡鱼为对象，克隆了杂交黄颡鱼“黄优1号” 3个免疫相关基因(socs1、socs2和socs3)，并对其生物信息学进行了比较分析；采用qRT-PCR技术研究了socs1、socs2和socs3基因分别在3种黄颡鱼感染嗜水气单胞菌和鮰爱德华氏菌后的表达模式。结果显示，杂交黄颡鱼“黄优1号” socs1、socs2和socs3基因的全长分别为561、735和672 bp，分别编码186、244和223个氨基酸，其预测的蛋白结构均含有保守的SH2结构域和socs盒。黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼和杂交黄颡鱼“黄优1号”socs1、socs2和socs3基因的表达在被检的8个不同组织中呈现组织特异性。在两种致病菌感染后，杂交黄颡鱼“黄优1号”及其双亲的socs1、socs2和socs3基因在肝脏、鳃和头肾组织中的表达量均在前24 h显著升高，随后逐渐恢复至正常水平。此外，鮰爱德华氏菌感染后，杂交黄颡鱼“黄优1号” socs1、socs2和socs3基因的表达量显著高于双亲，表现出较双亲更强的免疫调节能力且具有病原特异性。该结果为进一步解析黄颡鱼socs家族免疫防御调控机制提供了参考依据。

关键词：杂交黄颡鱼 socs基因致病菌表达模式

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GH调控鸡原代肝细胞中GH/IGF-Ⅰ信号通路相关基因mRNA表达的研究

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扬州大学学报（农业与生命科学版） 2013年第3期34卷 23-28页

作者：王慧娟杨磊邵芳王星果郁建锋顾志良苏州大学基础医学与生物科学学院江苏苏州215123 常熟理工学院生物与食品工程学院江苏常熟215500

为研究离体条件下鸡肝脏中表达的GH/IGF-Ⅰ信号通路相关基因受生长激素(GH)调控的mRNA表达情况,以4～5周龄雌性商品代AA肉鸡为试验材料,采用改良的半原位两步灌流法并结合消化法分离肝细胞,进行原代培养;采用SYBR green荧光定量PCR方法... 详细信息

为研究离体条件下鸡肝脏中表达的GH/IGF-Ⅰ信号通路相关基因受生长激素(GH)调控的mRNA表达情况,以4～5周龄雌性商品代AA肉鸡为试验材料,采用改良的半原位两步灌流法并结合消化法分离肝细胞,进行原代培养;采用SYBR green荧光定量PCR方法,检测GH处理后鸡肝细胞中GH/IGF-Ⅰ信号通路中相关基因IGF-Ⅰ、HNF-1α、HNF-1β、HNF-3β、CIS、socs-1、socs-2和socs-3的表达情况。结果表明:胶原酶消化法获得的肝细胞分离良好,形态完整,铺板4h后完全贴壁,继续培养24h即可用于GH处理试验;GH能引起鸡肝细胞中IGF-Ⅰ、socs-2、socs-3和CIS基因mRNA表达上调,而对HNF-1α、HNF-1β、HNF-3β、socs-1基因mRNA的表达无影响。

关键词：鸡原代肝细胞生长激素 IGF-Ⅰ基因 CIS基因 socs基因

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寿胎丸对小鼠母胎界面socs1，socs2，socs3 mRNA表达的影响

寿胎丸对小鼠母胎界面SOCS1，SOCS2，SOCS3 mRNA表达的影响

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作者：尹胜湖南中医药大学

学位级别：硕士

目的：观察寿胎丸能否纠正CBA／J×DBA／2免疫流产模型小鼠子宫蜕膜Th1/Th2失衡,进而对寿胎丸保胎的作用机理进行初步阐述。方法：CBA／J×BALB／c小鼠作为正常妊娠模型组,CBA／J×DBA／2小鼠自然流产模型按妊娠顺序随机分为模型空白组... 详细信息

目的：观察寿胎丸能否纠正CBA／J×DBA／2免疫流产模型小鼠子宫蜕膜Th1/Th2失衡,进而对寿胎丸保胎的作用机理进行初步阐述。方法：CBA／J×BALB／c小鼠作为正常妊娠模型组,CBA／J×DBA／2小鼠自然流产模型按妊娠顺序随机分为模型空白组、寿胎丸高剂量组和寿胎丸低剂量组,一共4组,每组各10例,通过RT-PCR实验,检测各组中绒毛组织和蜕膜组织socs1,socs2和socs3基因的mRNA表达变化情况。比较正常妊娠模型组和自然流产空白组之间,以及模型空白组、寿胎丸高剂量组和寿胎丸低剂量组之间socs基因mRNA的表达变化情况。结果：自然流产模型较正常妊娠模型,socs1、socs2和socs3在组织中的mRNA表达水平都下降,而且socs1和socs3在统计学意义上变化显著;在自然流产模型的模型空白组、寿胎丸高剂量组和寿胎丸低剂量组中,socs3的mRNA表达在高剂量组中明显高于在空白组中,且差异有显著性统计学意义,而socs1和socs2的mRNA在自然流产模型空白组和寿胎丸低剂量组中较高表达,而在寿胎丸高剂量组中低表达。结论：寿胎丸能抑制socs1和socs2基因的表达,促进socs3基因的表达,从而促进向Th2的分化,起到保胎的作用。

关键词：寿胎丸 socs基因反复自然流产

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杂交黄颡鱼“黄优1号”杂种优势的分子机制研究

杂交黄颡鱼“黄优1号”杂种优势的分子机制研究

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作者：张红燕南京师范大学

学位级别：硕士

杂种优势(Heterosis)是一种复杂的生物学现象,杂交子代常常表现出优于亲本的表型特征。杂种优势的利用已成为我国提高鱼产量和改进鱼品质的重要途径之一,然而关于鱼类杂种优势的分子调控机制研究尚处于初级阶段。为了全面解析鱼类杂种... 详细信息

杂种优势(Heterosis)是一种复杂的生物学现象,杂交子代常常表现出优于亲本的表型特征。杂种优势的利用已成为我国提高鱼产量和改进鱼品质的重要途径之一,然而关于鱼类杂种优势的分子调控机制研究尚处于初级阶段。为了全面解析鱼类杂种优势的分子机制,本文以相同环境培育下的杂交黄颡鱼“黄优1号”(Hybrid yellow catfish“Huangyou-1”,H)及其母本黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco,F)和父本瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli,M)为研究对象,运用第二代测序技术(mRNA组和micro RNA组)和基于TMT蛋白定量分析技术从转录、转录后调控及蛋白水平对杂交黄颡鱼“黄优1号”杂种优势的分子遗传机制进行研究;然后研究了嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、鮰爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)感染下杂交黄颡鱼“黄优1号”及其亲本的免疫相关基因socs(Suppressors of cytokine signaling)的应答情况,从而综合解析杂交黄颡鱼“黄优1号”杂种优势的分子机制。该研究结果不但对鱼类杂种优势的有效利用和鲿科鱼类杂交育种研究具有重要的理论意义和实用价值,而且为今后解析其他鱼类的杂种优势遗传机制研究提供了理论基础。具体研究结果如下:1.多组学联合分析杂交黄颡鱼“黄优1号”的杂种优势(1)mRNA组(mRNA-seq)、miRNA组(miRNA-seq)和TMT蛋白组学测序(TMT proteomics):共鉴定出57,710个基因、818个miRNA和4,528个蛋白,其中大比例的差异基因(DEG)、差异miRNA(DEM)和差异蛋白(DEP)表现出加性(Additive)遗传模式,非加性(Nonadditive)差异基因/蛋白的KEGG通路多数显著富集于免疫防御、抗氧化能力、物质代谢以及消化和吸收等方面(P67%),对ELD和transgressive调控基因/蛋白质进行KEGG通路富集性分析,发现与非加性差异表达基因/蛋白质富集了类似的通路(P基因/蛋白质的高亲本表达(生长、营养、摄食和疾病抵抗力)与miRNA的低亲本表达均遗传自母本或父本,暗示着子代可能遗传了父本或母本的优势,使H能够在生长、抗病力、营养成分等方面表现出杂种优势。2.两种致病菌感染下杂交黄颡鱼“黄优1号”及其亲本的socs基因的表达研究(1)黄颡鱼、瓦氏黄颡鱼和杂交黄颡鱼“黄优1号”的socs1、socs2和socs3基因在鳃、心、肌肉、脑、头肾、肝、肠、脾8种组织均有分布,但存在一定的组织特异性。(2)在嗜水气单胞菌或鮰爱德华氏菌感染后,杂交黄颡鱼“黄优1号”及其双亲的socs1、socs2和socs3基因在肝、鳃和头肾组织的表达量均在早期显著升高(Psocs1、socs2和socs3基因在肝、鳃和头肾组织的表达量均高于双亲(Psocs1、socs2和socs3基因在肝和头肾组织到达峰值的时间早于母本或父本,说明杂交群体的肝和头肾组织对病原菌的感染更为敏感,即菌感染后socs基因表达的敏感性具有组织特异性,且杂交黄颡鱼“黄优1号”非特异免疫系统的效率相对较高。由此说明,杂交黄颡鱼“黄优1号”及其双亲的socs1、socs2和socs3基因在非特异性免疫过程中发挥重要作用,且杂交黄颡鱼“黄优1号”的抗菌能力优于双亲。

关键词：杂交黄颡鱼“黄优1号” 杂种优势 mRNA组、miRNA组和TMT蛋白组学联合分析 socs基因

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