检索结果-南通市图书馆

广东省猪流行性腹泻病毒s1基因的克隆与序列分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医杂志 2016年第3期52卷 19-21页

作者：罗六龙黄冬妮黄良宗马春全梁梓森华南农业大学兽医学院广东广州510642 佛山科学技术学院广东佛山528231

为研究广东省猪流行性腹泻病毒s1基因的变异情况,于2012-2013年间从广东省不同地区猪场采集56份腹泻病仔猪样本。通过PCR方法扩增到12个样本的PEDV的s1基因序列,并进行序列比对及遗传分析。结果 12个样本PEDV的s1基因序列之间的核苷酸... 详细信息

为研究广东省猪流行性腹泻病毒s1基因的变异情况,于2012-2013年间从广东省不同地区猪场采集56份腹泻病仔猪样本。通过PCR方法扩增到12个样本的PEDV的s1基因序列,并进行序列比对及遗传分析。结果 12个样本PEDV的s1基因序列之间的核苷酸同源性为91.1%-99.6%,氨基酸的同源性为88.5%-99.1%。12个样本PEDV的s1基因序列与国内参考毒株核苷酸的同源性为91.0%-99.9%,氨基酸的同源性为88.5%-99.7%。与国外参考毒株核苷酸的同源性为89.0%-99.7%,氨基酸的同源性为86.5%-99.4%。与经典毒株CV777的核苷酸同源性为91.0%-100.0%,氨基酸的同源性为88.3%-99.9%。其中,仅GD-HY的s1基因与CV777的同源性达100.0%,其他同源性较低。表明近年广东省的PEDV流行毒株以变异株为主,与疫苗株（CV777）的亲缘关系较远。

关键词：猪流行性腹泻病毒 s1基因序列分析

禽传染性支气管炎病毒s1基因毕赤酵母表达载体的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国家禽 2006年第21期28卷 14-16,19页

作者：余祖华王红宁周生黄勇丁轲河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003 四川农业大学大学动物科技学院四川雅安625014

本试验根据已公布的IBV株s1基因序列及pPIC9K表达载体序列,去掉由18个氨基酸构成的信号肽后,设计一对IBV s1基因表达片段的PCR引物,利用RT-PCR扩增得到了IBV四川分离株的s1基因片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质... 详细信息

本试验根据已公布的IBV株s1基因序列及pPIC9K表达载体序列,去掉由18个氨基酸构成的信号肽后,设计一对IBV s1基因表达片段的PCR引物,利用RT-PCR扩增得到了IBV四川分离株的s1基因片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、菌落PCR鉴定,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒,测序分析片段长为1566bp,已经成功切除了由18个氨基酸构成的信号肽序列。将该基因亚克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K的snaBⅠ和NotⅠ酶切位点,并通过菌落PCR、双酶切鉴定了该重组质粒的正确性,IBV s1基因毕赤酵母表达载体的构建为进一步利用毕赤酵母表达IBVs1蛋白提供了基础材料,并对表达产物的免疫原性和禽传染性支气管炎基因亚单位疫苗及特异性诊断抗原的研究打下了基础。

关键词：禽传染性支气管炎 s1基因毕赤酵母表达载体

表达传染性支气管炎病毒s1基因与鸡IL-18基因重组禽痘病毒的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2010年第11期30卷 1435-1439页

作者：管倩陈红英崔保安杨明凡高文明李双亮河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 河南牧翔动物药业有限公司河南郑州450008

将含痘病毒启动子LP2EP2的鸡传染性支气管炎病毒s1糖蛋白基因和鸡IL-18(ChIL-18)基因同时插入到禽痘病毒转移载体psY681中,获得重组禽痘病毒转移载体psYs1/ChIL-18。用脂质体将其转染已感染禽痘病毒s-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在... 详细信息

将含痘病毒启动子LP2EP2的鸡传染性支气管炎病毒s1糖蛋白基因和鸡IL-18(ChIL-18)基因同时插入到禽痘病毒转移载体psY681中,获得重组禽痘病毒转移载体psYs1/ChIL-18。用脂质体将其转染已感染禽痘病毒s-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达s1和鸡IL-18的重组禽痘病毒(rFPV-s1-ChIL-18)。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选,对重组病毒rFPV-s1-ChIL-18进行多次蚀斑克隆。以重组禽痘病毒DNA为模板,利用s1基因和鸡IL-18基因特异引物进行PCR,分别扩增出1条约1.7 kb和1条约0.6 kb的带。经间接免疫荧光法和T细胞转化试验证实感染rFPV-s1-ChIL-18的CEF中存在表达的s1和鸡IL-18。

关键词：传染性支气管炎病毒 s1基因鸡白细胞介素-18 重组禽痘病毒

我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株s1基因的分离及初步鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华南农业大学学报 2001年第1期22卷 78-80页

作者：游洪王林川华南农业大学动物医学系广东广州510642

根据IBVBeaudette株全基因组序列 ,借助基因分析软件自行设计合成了 3条引物 (you1+、you2 -、youM +) ,引物you1+和you2 -在s1基因两侧 ,跨幅为 16 11bp ,引物you2 -和youM +在s1基因的 3’端 ,跨幅为 5 35bp 用引物you1+和you2 -对 5... 详细信息

根据IBVBeaudette株全基因组序列 ,借助基因分析软件自行设计合成了 3条引物 (you1+、you2 -、youM +) ,引物you1+和you2 -在s1基因两侧 ,跨幅为 16 11bp ,引物you2 -和youM +在s1基因的 3’端 ,跨幅为 5 35bp 用引物you1+和you2 -对 5个IBV地方分离株 (HN2、HN4、JX1、sC2和sC4)进行RT PCR ,均成功地扩增出预期大小的目的片段用另 1对引物 (you2 -和youM +)对各毒株的RT PCR产物再进行PCR扩增 ,均得到一条约 5 30bp的目的片段 ;对RT PCR产物用限制性内切酶PstⅠ进行酶切分析 ,结果酶切产物中得到 2条条带 ,大小分别为 5 6 0和 10 5 0bp ,与GeneBank中 11株已发表的s1基因分析结果一致初步鉴定结果显示 ,已经成功分离得到了IBV s1基因 .

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 RT-PCR s1基因鉴定分离地方毒株

鸽源冠状病毒PsH中国分离株s1基因克隆及分子进化分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2006年第5期37卷 514-517页

作者：钱华冬吴祖立朱建国华修国上海交通大学农业与生物学院动物科学系上海201101

对分离鉴定的鸽源冠状病毒PsH株纤突蛋白s1基因进行RT-PCR法扩增、克隆和序列测定分析.结果表明其s1基因由1 626个核苷酸组成,编码541个氨基酸,s蛋白的切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸（RRFRR）,与常见的鸡传染性... 详细信息

对分离鉴定的鸽源冠状病毒PsH株纤突蛋白s1基因进行RT-PCR法扩增、克隆和序列测定分析.结果表明其s1基因由1 626个核苷酸组成,编码541个氨基酸,s蛋白的切割识别位点为精氨酸-精氨酸-苯丙氨酸-精氨酸-精氨酸（RRFRR）,与常见的鸡传染性支气管炎病毒（IBV）s蛋白切割识别位点相似（RRF/sRR）.该病毒与火鸡蓝冠病病毒（TCV）Gh、G1株s1基因推导的氨基酸同源性仅为24.7%、25%,而与IBV H52、H120、M41、Beau、Conn、Gray、Hotel、sH1、sH2、sH5、sH6基因推导的氨基酸同源性在75.0%～99.6%,其中与sH2、sH5的氨基酸同源性更是达到了99.6%,进一步证明该冠状病毒可能来源于IBV.

关键词：鸽冠状病毒 RT-PCR s1基因分子进化分析

猪传染性胃肠炎病毒s1基因在食品级乳酸菌中的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医学报 2015年第6期35卷 868-872,888页

作者：赵艳丽柏亚铎陈中秋董宏伟董浩高超王开邵洪泽胡桂学吉林农业大学动物科技学院吉林长春130118 北京出入境检验检疫局北京100026 辽宁成大生物股份有限公司辽宁沈阳110179 吉林省农业广播电视学校吉林长春130021 长春科技学院吉林长春130600 吉林省畜牧兽医科学研究院吉林长春130062

猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)纤突蛋白s携带主要的B淋巴细胞抗原表位,是诱导机体产生中和抗体和提供免疫保护作用的主要结构蛋白,本试验通过PCR扩增,获得TGEV s蛋白上约1 218bp的保护性抗原基因s1,将... 详细信息

猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus,TGEV)纤突蛋白s携带主要的B淋巴细胞抗原表位,是诱导机体产生中和抗体和提供免疫保护作用的主要结构蛋白,本试验通过PCR扩增,获得TGEV s蛋白上约1 218bp的保护性抗原基因s1,将其克隆到pMD18-T载体并进行核酸序列测定。通过双酶切连接成功获得重组质粒pNZ8149-s1,电转化至乳酸乳球菌NZ3900中,经乳链菌肽诱导,sDs-PAGE和Western-Blot分析结果显示,TGEV s1基因获得了表达,表达产物具有反应原性。间接免疫荧光试验结果表明,重组乳酸菌表达的蛋白位于菌体表面。

关键词： TGEV s1基因乳酸菌表达

黑龙江省2017年猪流行性腹泻病毒s1基因的遗传演化分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

黑龙江畜牧兽医 2020年第1期 77-83,86页

作者：霍琳琳李曦中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150069

为了监测黑龙江省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的流行及遗传进化情况,试验采用RT-PCR方法对2017年采集到的黑龙江地区猪场腹泻样品进行了PEDV检测,并对PEDV阳性样品进行s1基因测序及遗传演化分析。结果表明:试验成功获得6条PEDV s1基因序列,... 详细信息

为了监测黑龙江省猪流行性腹泻病毒(PEDV)的流行及遗传进化情况,试验采用RT-PCR方法对2017年采集到的黑龙江地区猪场腹泻样品进行了PEDV检测,并对PEDV阳性样品进行s1基因测序及遗传演化分析。结果表明:试验成功获得6条PEDV s1基因序列,6株毒株s1基因之间核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97.8%~100%和96.7%~100%,与国内外近5年分离毒株s1基因核苷酸序列的同源性分别为89.9%~100%和90.7%~100%,与国内外近5年分离毒株s1基因氨基酸序列的同源性分别为88.3%~98.8%和88.0%~97.8%,与传统疫苗株CV777 s1基因核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为90.4%~91.0%和89.3%~90.4%。6株毒株均属于GⅡ型,与近年来广泛流行于我国养猪场并造成严重经济损失的毒株属于同一基因型,与传统疫苗株CV777分属于不同亚群。6株毒株的氨基酸变化主要发生在第一个抗原表位,即499~638位氨基酸上。说明黑龙江地区养猪场猪群中仍然存在PEDV的传播和感染,且与商品化的疫苗毒株相比基因变异明显。

关键词：猪流行性腹泻病毒黑龙江地区 s1基因同源性进化树抗原表位

2019年冬季江苏部分地区鸡传染性支气管炎病毒s1基因遗传进化分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医杂志 2021年第12期57卷 7-11,18页

作者：冷梅唐爽练家敏邵冠明谢青梅蔺文成华南农业大学动物科学学院广东广州510000

为了解2019年冬季江苏省部分地区鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的流行情况,本试验对江苏省内3个地区分离的23株IBV的s 1基因进行了遗传进化分析,首先对采集的病料进行毒株分离并进行病毒核酸测序,然后采用MEGA 5.2、simplot、Megalign、RD... 详细信息

为了解2019年冬季江苏省部分地区鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的流行情况,本试验对江苏省内3个地区分离的23株IBV的s 1基因进行了遗传进化分析,首先对采集的病料进行毒株分离并进行病毒核酸测序,然后采用MEGA 5.2、simplot、Megalign、RDP 4等分析软件对IBV的s 1基因序列进行分析。结果显示:23株分离毒株中有7株为HN08型(占30.4%),另外16株为QX型(占69.6%),其中分离毒株CKCHJsCZ1912-5的s 1基因发生了重组,其假定亲本分别为QX型QXL87毒株与HN08型sAIBK毒株,说明连云港地区减毒活疫苗的使用是IBV发生重组的关键因素,但因重组片段不大,所以该毒株没有单独形成进化分支。通过Megalign软件分析分离毒株之间的一致性,得出23株IBV分离毒株间核苷酸序列和氨基酸序列一致性分别为82.9%~99.9%和79.2%~99.8%。通过对江苏省IBV分离毒株与参考株进行遗传进化分析,发现23株分离毒株s 1基因发生较大程度变异,分离毒株与参考株间的一致性差异大,推测s 1基因的多样性可能是目前导致免疫失败的一个重要原因。毒株变异为鸡传染性支气管炎的防控工作带来了难题,也为研制新型疫苗提供指导。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒 s1基因遗传进化分析重组

2株鸡传染性支气管炎病毒株的分离鉴定及其s1基因遗传进化分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

福建农业学报 2022年第11期37卷 1388-1393页

作者：林裕胜刘维巍张龙江锦秀张靖鹏刘庆华胡奇林福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013 福建农林大学动物科学学院福建福州350002

【目的】了解福建地区鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的流行及其s1基因变异情况。【方法】对2021年在福建地区鸡群中分离的2株病毒,通过鸡胚致病性试验、电子显微镜观察及RT-PCR方法进行鉴定。对2株分离株的s1... 详细信息

【目的】了解福建地区鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的流行及其s1基因变异情况。【方法】对2021年在福建地区鸡群中分离的2株病毒,通过鸡胚致病性试验、电子显微镜观察及RT-PCR方法进行鉴定。对2株分离株的s1基因进行克隆、测序并利用生物学软件进行分析。【结果】分离到的2株病毒均为IBV,分别命名为FJ-NP01和FJ-FZ01;FJ-NP01株和FJ-FZ01株的s1基因全长分别为1 629 nt和1 620 nt,编码543aa和540 aa。FJ-FZ01株的s1基因裂解位点为HRRRR,与基因型I分支所有参考毒株裂解位点一致;分离株FJNP01的s1基因裂解位点为HRRKR,与已报道的基因型ⅣIBV分离毒株的裂解位点不同,与基因型Ⅵ参考毒株TC07-2的裂解位点一致。FJ-NP01株和FJ-FZ01株之间的核苷酸和氨基酸同源性较低,分别为83.2%和79.6%;与中国使用的Mass型常规疫苗H120和H52核苷酸和氨基酸序列同源性仅为75.7%~76.3%和77.1%~83.5%。FJ-NP01株是由基因型Ⅳ毒株CK CH GD LZ12-4与基因型I毒株L-1 148在s1基因处发生重组而产生的新毒株,其核苷酸序列1 438~1 506 nt与推测的亲本毒株CK CH GD LZ12-4同源性达97%,其他s1基因核苷酸序列与推测的亲本毒株L-1148同源性达95.9%。【结论】以上结果表明福建地区IBV流行较为复杂,现有Mass型疫苗在福建省可能起不到良好的免疫保护作用。

关键词：鸡传染性支气管炎病毒分离鉴定 s1基因序列分析