表达传染性支气管炎病毒S1基因与鸡IL-18基因重组禽痘病毒的构建

作     者：管倩 陈红英 崔保安 杨明凡 高文明 李双亮 GUAN Qian;CHEN Hong-ying;CUI Bao-an;YANG Ming-fan;GAO Wen-ming;LI Shuang-liang

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 河南牧翔动物药业有限公司河南郑州450008 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2010年第30卷第11期

页      面：1435-1439页

核心收录：

学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家"十一五"科技支撑计划资助项目(2006BAD06A08) 

主　　题：传染性支气管炎病毒 S1基因 鸡白细胞介素-18 重组禽痘病毒 

摘      要：将含痘病毒启动子LP2EP2的鸡传染性支气管炎病毒S1糖蛋白基因和鸡IL-18(ChIL-18)基因同时插入到禽痘病毒转移载体pSY681中,获得重组禽痘病毒转移载体pSYS1/ChIL-18。用脂质体将其转染已感染禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组,产生表达S1和鸡IL-18的重组禽痘病毒(rFPV-S1-ChIL-18)。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选,对重组病毒rFPV-S1-ChIL-18进行多次蚀斑克隆。以重组禽痘病毒DNA为模板,利用S1基因和鸡IL-18基因特异引物进行PCR,分别扩增出1条约1.7 kb和1条约0.6 kb的带。经间接免疫荧光法和T细胞转化试验证实感染rFPV-S1-ChIL-18的CEF中存在表达的S1和鸡IL-18。