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植物精油对传染性支气管炎病毒人工感染雏鸡的防治效果

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畜牧兽医学报 2024年

作者：林家杰林子学王立佳王国威黄燕萍张愉张桃妮晋英浩磨美兰广西壮族自治区兽用生物制品工程研究中心广西大学动物科学技术学院广西高校动物疫病预防与控制重点实验室广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室

旨在探讨植物精油（商品名：舒柠500）对禽传染性支气管炎病毒（IBV）人工感染雏鸡的防治效果。将260羽1日龄健康非免疫雏鸡分成空白组、模型对照组（A、B、C）、预防组（A、B、C）、治疗组（A、B、C）和阳性药物组（A、B、C）共13组，... 详细信息

旨在探讨植物精油（商品名：舒柠500）对禽传染性支气管炎病毒（IBV）人工感染雏鸡的防治效果。将260羽1日龄健康非免疫雏鸡分成空白组、模型对照组（A、B、C）、预防组（A、B、C）、治疗组（A、B、C）和阳性药物组（A、B、C）共13组，每组20只。除空白组外，其余各A组雏鸡均在8日龄单感染IBV毒株GX-QZ20181028（LX4型），各B组雏鸡均在8日龄单感染IBV毒株GX-NN20200723（Taiwan型），各C组雏鸡均在8日龄共感染IBV毒株GX-QZ20181028（LX4型）和GX-NN20200723（Taiwan型）。预防组在3日龄（感染前5 d）饮水给药（植物精油，1 mL/L水）；治疗组和阳性药物组（双黄连口服液，0.7 mL/L水）均在感染后半数以上的雏鸡表现临床症状时给药治疗，连续给药5 d。在雏鸡8、9、13、14、15、16、17、18、19、20日龄时，评定临床症状计分与疗效；在雏鸡19、22日龄时，观察病理组织学病变、测定免疫器官指数并检测气管和肾脏病毒载量；在雏鸡8、9、15、17、19、22日龄时，对IBV特异性抗体和血清中细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-6进行检测。结果显示，预防组A、B和C的保护率分别为75.00%、85.00%和70.00%；治疗组A、B、C的有效率分别为92.31%、78.57%、77.78%。模型对照组雏鸡可见大量气管黏膜上皮细胞纤毛减少或消失，并发生变性坏死，肾间质淋巴细胞浸润，其余组均无明显病变。预防组、治疗组和阳性药物组气管和肾组织病毒载量均显著低于模型对照组（P＜0.05）。模型对照组胸腺与法氏囊指数显著低于其余各组（P＜0.05）。17日龄（给药后第5天），预防组、治疗组、阳性药物组抗体水平上升，至22日龄（停药后第5天），抗体水平显著高于模型对照组（P＜0.05）。13至22日龄（给药前至停药后第5天），模型对照组的IL-4、IFN-γ含量均显著低于其余各组（P＜0.05），但IL-6含量显著高于其余各组（P＜0.05）。综上，在本试验条件下，植物精油对IBV单感染和共感染雏鸡均有较好的防治作用，其防治作用主要通过抑制病毒复制、促进免疫器官发育和抗体生成、调节细胞因子来实现。本研究为禽传染性支气管炎（IB）防治提供新思路，也为其它动物冠状病毒病有效防治提供了参考。

关键词：传染性支气管炎病毒精油预防治疗

表达传染性支气管炎病毒S1重组腺病毒的构建及免疫原性分析

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中国病原生物学杂志 2024年第7期19卷 751-755页

作者：何杰珩袁子岚程晴梁志鹏张新宇陈高婕池仕红袁生郭锦玥黄淑坚温峰佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528225

目的构建表达传染性支气管炎病毒S1蛋白的重组腺病毒,并进行初步免疫原性分析。方法本研究利用腺病毒表达载体系统,利用同义点突变技术,消除IBV-S1基因中的PacⅠ和PmeⅠ限制性酶切位点;将已突变的S1基因克隆至pShuttle-CMV-N-DsRed穿... 详细信息

目的构建表达传染性支气管炎病毒S1蛋白的重组腺病毒,并进行初步免疫原性分析。方法本研究利用腺病毒表达载体系统,利用同义点突变技术,消除IBV-S1基因中的PacⅠ和PmeⅠ限制性酶切位点;将已突变的S1基因克隆至pShuttle-CMV-N-DsRed穿梭质粒中;使用Pme I线性化处理携带目的基因的穿梭质粒,并与pAdEasy-1质粒同时转化进行同源重组;后将重组质粒转染HEK 293细胞,包装成重组Adv,构建S1-CMV-pAd(293)重组病毒;并进行免疫实验验证抗体。结果 PCR扩增出S1基因,大小约为1 700 bp。S1和pShuttle-CMV-N-DsRed穿梭质粒经酶切及测序结果表明,成功构建S1-CMV表达载体;在BJ5183感受态中进行同源重组,测序结果表明成功构建S1-CMV-Pad重组质粒。利用HEK-293细胞包装成重组腺病毒,能稳定产生红色荧光;经Western blot和IFA验证重组病毒成功表达S1 (RBD)蛋白;以106TCID50/mL滴度肌肉免疫雏鸡,7~21 d后均可检测到S1抗体,且抗体浓度仍呈增长趋势。结论本研究所构建的S1-CMV-pAd重组Adv为之后的免疫保护试验研究及IBV-Adv疫苗构建提供了基础实验支撑。

关键词：传染性支气管炎病毒 S1 腺病毒载体重组病毒

一株GI-19基因型禽传染性支气管炎病毒基因序列分析及致病性研究

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中国家禽 2024年

作者：武奇徐梦成魏邓乐张雪花李丁梅梅江苏省农业科学院动物免疫工程研究所扬州大学兽医学院教育部禽类预防医学重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

为了解传染性支气管炎病毒（IBV）的遗传变异及致病性，试验对江苏某鸡场发病鸡进行病原分离和鉴定，并对分离株S1基因进行同源性、遗传进化树、糖基化位点、S蛋白裂解位点和致病性分析。结果显示：从发病鸡肾脏组织中分离并鉴定到1株IB... 详细信息

为了解传染性支气管炎病毒（IBV）的遗传变异及致病性，试验对江苏某鸡场发病鸡进行病原分离和鉴定，并对分离株S1基因进行同源性、遗传进化树、糖基化位点、S蛋白裂解位点和致病性分析。结果显示：从发病鸡肾脏组织中分离并鉴定到1株IBV，该分离株经SPF鸡胚盲传5代后，可引起典型的侏儒胚特征病变，其S1基因大小为1 620 bp，分离株被命名为CK/CH/WJ215;CK/CH/WJ215与GⅠ-19基因型毒株S1核苷酸序列相似性为94.3%，与流行优势基因型GⅠ-19属于同一分支；RDP4重组分析显示该分离株S1蛋白不存在重组事件；进一步糖基化位点分析表明，与常用疫苗株相比，CK/CH/WJ215 S1蛋白在第51、77、103、138、163、178、247、276、283、530位点出现变异，值得注意的是，与H120疫苗株和QXL87疫苗株相比，CK/CH/WJ215 S1蛋白分别在138和530位出现了新的糖基化位点；7日龄SPF鸡致病性试验显示，该分离株可导致SPF鸡100%(15/15)发病，66.7%(10/15)死亡，并且导致严重的肾脏病变；感染鸡从第2天开始持续排毒，直到第21天气管和泄殖腔排毒率仍为80%(4/5)和100%(5/5)。研究表明，从江苏某鸡场发病鸡群种分离的GⅠ-19基因型IBV对SPF雏鸡具有很强的致病性，结果为该地区传染性支气管炎流行病学及防控提供参考。

关键词：传染性支气管炎病毒 GⅠ-19基因型 S1基因致病性

传染性支气管炎病毒山西分离株的分离鉴定及其S1基因分子特征分析

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中国预防兽医学报 2022年第3期44卷 320-324页

作者：王旭贞程宇谭仕明马海利梁立滨山西省畜牧兽医学校山西太原030024 山西农业大学动物医学学院山西太谷030801

鸡传染性支气管炎(IB)是目前对养禽业造成严重危害的疫病之一,其病原为传染性支气管炎病毒(IBV)。IBV由于其基因组的特点而易于发生变异和重组,从而产生新的变异株。为了解山西地区IBV的流行及变异情况,本研究采集山西省晋中市疑似发生... 详细信息

鸡传染性支气管炎(IB)是目前对养禽业造成严重危害的疫病之一,其病原为传染性支气管炎病毒(IBV)。IBV由于其基因组的特点而易于发生变异和重组,从而产生新的变异株。为了解山西地区IBV的流行及变异情况,本研究采集山西省晋中市疑似发生呼吸道病毒感染的肉鸡组织病料样品,通过PCR鉴定、鸡胚接种及测序,分离鉴定到1株IBV,命名为CK/Shanxi-01/2021。在该分离株S1基因测序的基础上,与NCBI数据库中不同基因型IBV代表株进行序列比对,并构建系统进化树。遗传演化分析结果显示本研究所分离到的IBV为GI-19基因型。将CK/Shanxi-01/2021株的S1基因序列与IBV常用疫苗株H120、M41、H52、4/91及LDT3-A等进行序列比对分析,结果显示分离株与目前常用疫苗株核苷酸序列的同源性为78.1%~85.2%,氨基酸序列同源性为75.2%~78.4%,与以往GI-19基因型病毒株相比其S1蛋白高变区(HVR)出现了V68I、S120A、A271T、N282T、N291S等突变。由此可见,加强IBV流行病学监测,及时掌握目前流行的IBV基因型及其变异特点,对于IB疫情防控具有重要意义。本研究为山西省地区IB疫情防控提供了参考依据。

关键词：传染性支气管炎病毒分离鉴定 S1基因进化分析

传染性支气管炎病毒反向遗传系统的构建策略与应用

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畜牧与兽医 2023年第10期55卷 109-115页

作者：赵秀美张华贾惠孙智远徐孝宙余智清姜逸江苏农林职业技术学院江苏镇江212400 江苏省家禽科学研究所江苏扬州225125

传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)是一种具有高度传染性的禽冠状病毒,主要感染鸡的呼吸系统、肾脏和生殖系统等,是导致家禽产业经济损失的主要原因之一。IBV血清型和基因型众多,不同毒株之间交叉保护性差,疾病防... 详细信息

传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)是一种具有高度传染性的禽冠状病毒,主要感染鸡的呼吸系统、肾脏和生殖系统等,是导致家禽产业经济损失的主要原因之一。IBV血清型和基因型众多,不同毒株之间交叉保护性差,疾病防控困难。IBV反向遗传系统的建立与应用为病毒分子水平研究、致病机制研究和新型疫苗研发等提供了新的途径。本文主要介绍了IBV反向遗传技术的构建策略,包括细菌人工染色体(载体)系统、体外连接系统、痘病毒载体系统和基于靶向RNA重组技术等,以及IBV反向遗传系统在病毒基因组结构和功能研究、新型疫苗研发和病毒表达载体研究等方面的应用,以期能为IBV的研究提供参考。

关键词：传染性支气管炎病毒反向遗传系统 S基因疫苗

传染性支气管炎病毒与低致病性禽流感病毒共感染增强鸡支气管堵塞的研究

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中国家禽 2022年第12期44卷 104-110页

作者：张建军陆小龙刘开拓王晓泉胡顺林刘秀梵扬州大学兽医学院动物传染病实验室江苏扬州225009 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 国药集团扬州威克生物工程有限公司江苏扬州225009

为明确鸡支气管堵塞的发病原因,通过建立H9N2亚型、H7N9亚型低致病性禽流感病毒(LPAIV)以及传染性支气管炎病毒(IBV)单独或共感染SPF鸡的动物模型,对其临床症状、死亡率和组织病理变化进行分析。结果显示:H9N2和H7N9亚型LPAIV分别单独... 详细信息

为明确鸡支气管堵塞的发病原因,通过建立H9N2亚型、H7N9亚型低致病性禽流感病毒(LPAIV)以及传染性支气管炎病毒(IBV)单独或共感染SPF鸡的动物模型,对其临床症状、死亡率和组织病理变化进行分析。结果显示:H9N2和H7N9亚型LPAIV分别单独感染组在感染后仅引起轻微的一过性临床症状,未出现呼吸道症状,未观察到试验鸡的死亡;而IBV单独感染组及与LPAIV(H9N2 AIV、H7N9 AIV)共感染组均能引起鸡的呼吸困难、张口喘、支气管堵塞等严重的呼吸道症状,并造成鸡死亡。IBV与LPAIV共感染组鸡的死亡率(IBV+H9N2AIV:40%;IBV+H7N9 AIV:45%)明显高于IBV单独感染组(15%)。临床剖检病死鸡均可观察到组织学病变,其中共感染组发病鸡支气管堵塞更加严重。研究结果揭示了IBV与LPAIV共感染增强鸡支气管堵塞的现象,对鸡呼吸道感染的科学防控具有参考意义。

关键词：鸡支气管堵塞传染性支气管炎病毒低致病性禽流感病毒共感染动物模型

鸡传染性支气管炎病毒nsp4蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究

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南方农业学报 2023年

作者：卢彦澎林丽婷任丽娜晋英浩张桃妮张愉韦兰萍吕迪磨美兰广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室广西高校动物疫病预防与控制重点实验室广西兽用生物制品工程研究中心广西大学动物科学技术学院

【目的】筛选出鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)非结构蛋白4(non-structural protein 4，nsp4)抗原性较好的氨基酸区域并制备多克隆抗体，为进一步研究nsp4在IBV复制过程中的功能提供物质基础，也为IBV新型诊... 详细信息

【目的】筛选出鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus，IBV)非结构蛋白4(non-structural protein 4，nsp4)抗原性较好的氨基酸区域并制备多克隆抗体，为进一步研究nsp4在IBV复制过程中的功能提供物质基础，也为IBV新型诊断试剂盒与疫苗开发打下基础。【方法】对IBV Beaudette株nsp4蛋白进行原核表达，以重组nsp4蛋白作为免疫原免疫日本大耳白兔和健康阴性鸡制备相应的兔和鸡多克隆抗体，并对制备的多克隆抗体进行生物学功能研究。【结果】Western blotting鉴定结果表明，表达的重组nsp4蛋白为13.6 kD，与预计结果相符；且其能与IBV GX-YL5株和M41株全病毒阳性血清反应。间接ELISA结果表明，制备的nsp4蛋白兔和鸡多克隆抗体血清效价分别达1:128000和1:6400。Western blotting验证表明2种多克隆抗体均能与重组nsp4蛋白和IBV全病毒反应；间接免疫荧光试验(IFA)验证表明2种多克隆抗体均与IBV GX-YL5株、Beaudette株和M41株感染鸡胚肾细胞(CEK)表达的nsp4蛋白反应；且能与转染状态以感染Beaudette株的非洲绿猴肾细胞(Vero)表达的nsp4蛋白反应；过表达nsp4 蛋白可促进IBV的复制。【结论】成功制备了具有良好反应性和特异性的IBV nsp4蛋白兔和鸡多克隆抗体，并表明nsp4蛋白可促进IBV复制，为IBV检测和深入研究IBV nsp4的生物学功能奠定了基础。

关键词：传染性支气管炎病毒 nsp4 多克隆抗体反应性特异性

不同毒力传染性支气管炎病毒诱导SPF鸡炎症反应的免疫机制

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东北农业大学学报 2023年第1期54卷 60-69页

作者：马得莹范佳慧任梦婷谢晶晶王芳芳焦亚茹韩宗玺东北农业大学动物科学技术学院哈尔滨150030 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室哈尔滨150001

以specific pathogen-free(SPF)鸡为研究对象,通过滴鼻点眼方式感染传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)强毒株(CK/CH/LDL/140520)和IBV弱毒株(γCoV/ck/China/I0718/17)。分别在感染后12、36 h和3、7、14 d,采集法氏囊、脾脏、肾脏和气管,运用实时荧光定量PCR法,检测感染不同毒力IBV后,SPF鸡各脏器组织中免疫相关因子表达差异,初步探讨SPF鸡对不同毒力IBV免疫反应机制。结果表明,IBV弱毒株感染早期主要上调Toll样受体15(Toll-like receptors 15,TLR15)基因表达水平,提高白细胞介素(Interleukin,IL-1β)、IL-8基因表达量。法氏囊是介导启动获得性免疫反应的主要器官;脾脏是介导调控获得性免疫反应的主要器官,IBV强毒株在感染后期持续诱导提高TLR7、TLR15、TLR21基因和IL-6基因表达水平。可知,不同毒力IBV诱导SPF鸡炎症反应的免疫活化机制及介导调控获得性免疫反应的器官存在一定差异,为进一步揭示IBV强弱毒株致病性差异及诱导宿主不同免疫反应激活机理提供新的参考依据。

关键词：传染性支气管炎病毒 SPF鸡 Toll样受体细胞因子

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中国传染性支气管炎病毒的流行和疫苗

中国科学：生命科学 2023年第12期53卷 1733-1744页

作者：李慧昕韩宗玺刘胜旺中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室哈尔滨150069

鸡传染性支气管炎病毒在中国流行了近半个世纪,引起的传染性支气管炎是危害养禽业的重要疫病之一,造成了严重的经济损失.本文简单介绍了传染性支气管炎病毒的历史、特点和危害,着重对传染性支气管炎病毒在中国的流行现状、病毒基因型及... 详细信息

鸡传染性支气管炎病毒在中国流行了近半个世纪,引起的传染性支气管炎是危害养禽业的重要疫病之一,造成了严重的经济损失.本文简单介绍了传染性支气管炎病毒的历史、特点和危害,着重对传染性支气管炎病毒在中国的流行现状、病毒基因型及其特点以及中国传染性支气管炎疫苗进行了回顾和总结,为更好地防控鸡传染性支气管炎提供参考.

关键词：鸡传染性支气管炎传染性支气管炎病毒流行特点基因型防控