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Asian Journal of Pharmaceutical Sciences 2017年第2期12卷 179-186页

作者： Wenpan Li Shasha Jing Xiu Xin Xirui Zhang Kang Chen Dawei Chen Haiyang Hu Department of Pharmaceutics School of Pharmacy Shenyang Pharmaceutical University

In this study, the CaP/pdna nanoparticles were prepared using Triton X-100/Butanol/Cyclohexane/Water reverse microemulsion system. Optimization of preparation conditions was based on evaluation of particle size by Box–Behnken design method. The particle sizes of the optimized CaP/pdna nanoparticles were found to be 60.23 ± 4.72 nm, polydispersity index was 0.252 and pdna encapsulate efficiency was more than 90%. The optimized CaP/pdna nanoparticles have pH sensitivity and biocompatibility. Further, optimized CaP/pdna nanoparticles showed higher transfection efficiency.

关键词： CaP nanoparticles pdna Reverse microemulsion method Box–Behnken design Transfection and expression

Neuroprotective effect of chitosan nanoparticle gene delivery system grafted with acteoside (ACT) in Parkinson's disease models

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Journal of Materials Science & Technology 2020年第8期36卷 197-207页

作者： Yongyong Xue Na Wang Zhi Zeng Jinpeng Huang Zhiming Xiang Yan-Qing Guan MOE Key Laboratory of Laser Life Science&Institute of Laser Life Science College of BiophotonicsSouth China Normal UniversityGuangzhou510631China School of Life Science South China Normal UniversityGuangzhou510631China South China Normal University-Panyu Central Hospital Joint Laboratory of Translational Medical Research Panyu Central HospitalGuangzhouChina Department of Radiology Guangzhou Panyu Center HospitalGuangzhou511400China

Developing new drugs to treat Parkinson's disease efficiently is challenging. Here we report that chitosan nanoparticles(APPDNs) could serve as novel candidates for the design of anti-PD drugs. In this study, we investigated the effects of chitosan poly ethyleneglycol-poly lactic acid(PEG-PLA) nanoparticles conjugated with nerve growth factor(NGF), acteoside(ACT) and plasmid DNA(p DNA) for PD therapy using in vitro and in vivo models. Using PD cell models, we demonstrated that APPDN had good neuroprotective effects. More significantly, experiments using mouse PD models demonstrated that APPDNs could ameliorate the behavioral disorders of sick mice. Immunohistochemical and western blot(WB) analyses demonstrated that APPDNs could significantly reverse dopaminergic(DA) neuron loss in the substantia nigra and striatum of sick mice. This study opens up a novel avenue to develop anti-PD drugs.

关键词： Parkinson's disease Chitosan nanoparticles Acteoside Gene therapy pdna

壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:粒径对转染效率的影响

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药学学报 2007年第7期42卷 774-779页

作者：杨晓容宗莉袁喜英中国药科大学药学院江苏南京210009

研究粒径对壳聚糖（chitosan，CS）纳米粒介导的转染效率的影响。通过调整CS溶液加入质粒基因（plasmid DNA，pdna）溶液的速度和涡旋时间制备250，580和1300nm粒径pdna/CS纳米粒，研究粒径对CS介导的细胞转染效率的影响。为深入探讨粒... 详细信息

研究粒径对壳聚糖（chitosan，CS）纳米粒介导的转染效率的影响。通过调整CS溶液加入质粒基因（plasmid DNA，pdna）溶液的速度和涡旋时间制备250，580和1300nm粒径pdna/CS纳米粒，研究粒径对CS介导的细胞转染效率的影响。为深入探讨粒径对转染效率的影响，考察了3种粒径pdna/CS纳米粒的药剂学性质，对抗核酸酶作用和细胞对纳米粒的吸附和摄取行为。结果表明：本文制备的3种粒径纳米粒的药剂学性质和凝聚pdna的能力等特性基本无差别，均能有效保护pdna免受核酸酶降解；在HEK293细胞中的转染效率无显著差异；与细胞共孵育4h，流式细胞仪测定的三者细胞摄取率与摄取量相似；荧光显微图像显示3种粒径纳米粒均以小聚集体形式吸附于细胞表面，激光扫描共聚焦显微图像显示直径约为2μm小聚集体较易被细胞内吞入胞。因此粒径在250-1300nm中对壳聚糖纳米粒介导的细胞转染率基本无影响。

关键词：壳聚糖纳米粒 pdna 粒径转染效率

壳聚糖纳米粒作为基因载体的研究:制备,特征和对DNA的保护

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中国药科大学学报 2005年第6期36卷 526-530页

作者：宗莉陈伶俐张淑芸杨晓容朱家壁中国药科大学药物制剂研究所南京210009

目的:制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒药剂学特征以及对DNA的保护作用.方法:复凝聚法制备纳米粒,对纳米粒的形态、粒径及分布、Zeta电位、包封率、载药量和处方影响因素进行了考察,凝胶阻滞法分析壳聚糖和pdna的聚合方式,pdna保护性... 详细信息

目的:制备载基因壳聚糖纳米粒,研究纳米粒药剂学特征以及对DNA的保护作用.方法:复凝聚法制备纳米粒,对纳米粒的形态、粒径及分布、Zeta电位、包封率、载药量和处方影响因素进行了考察,凝胶阻滞法分析壳聚糖和pdna的聚合方式,pdna保护性试验考察壳聚糖纳米粒抵抗核酸酶的能力.结果:制备的pdna/壳聚糖纳米粒为结构较紧密的不规则球形,平均粒径为(240.4±13.2)nm,多分散指数为(0.173±0.05),Zeta电位为(18.4±0.6)mV,包封率为(95.2±1.9)%,载药量为(30.7±0.8)%.凝胶阻滞分析结果表明,纳米粒荷正电,pdna与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合.纳米粒的粒径、Zeta电位受处方中的壳聚糖相对分子质量、N/P(壳聚糖中伯胺基数目/pdna中磷酸基数目)比、pdna浓度、Na2SO4浓度和pH值等因素影响.pdna保护性试验表明,壳聚糖纳米粒对pdna有保护作用.结论:壳聚糖可以有效凝聚pdna,采用复凝聚法可制得200～500 nm范围荷正电的纳米粒,有较高的包封率和载药量,可有效保护pdna免受核酸酶降解.壳聚糖作为黏膜给药的非病毒基因载体具有应用价值.

关键词：壳聚糖纳米粒基因载体 pdna 黏膜

特别重大自然灾害损失统计内容的国际对比——基于《特别重大自然灾害损失统计制度》和pdna系统的分析

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地球科学进展 2017年第10期32卷 1030-1038页

作者：周洪建王曦民政部国家减灾中心北京100124

2014年6月民政部、国家减灾委员会办公室发布实施的《特别重大自然灾害损失统计制度》(简称《统计制度》)在规范统计内容与指标的同时,为多次重特大自然灾害灾后恢复重建规划编制提供了基础,但对恢复重建规划的直接指导作用仍有限。以... 详细信息

2014年6月民政部、国家减灾委员会办公室发布实施的《特别重大自然灾害损失统计制度》(简称《统计制度》)在规范统计内容与指标的同时,为多次重特大自然灾害灾后恢复重建规划编制提供了基础,但对恢复重建规划的直接指导作用仍有限。以国际主流的灾后需求评估(Post Disaster Needs Assessment,pdna)系统为主要研究对象,在详细分析pdna系统内容与特色的基础上,从目标、内容与指标体系、评估方法、评估参数等4个方面与《统计制度》进行了对比分析。未来,应基于《统计制度》拓展增加恢复重建需求评估指标,不断优化完善灾害评估参数库,服务中央—省—地—县等多级用户,编制配套技术标准并优化评估技术规程。研究对于优化完善《统计制度》内容与指标,更好地服务于灾后恢复重现决策,实现与国际接轨有重要的现实意义。

关键词：特别重大自然灾害损失统计指标体系评估参数 pdna

PicoGreen荧光法结合茚三酮比色法测定载pdna壳聚糖纳米粒中pdna的包封率和载药量

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药物分析杂志 2010年第2期30卷 226-229页

作者：黄伟崔光华王玉丽贺俊峰周旭高钟镐中国医学科学院北京协和医学院药物研究所北京100050 军事医学科学院毒物药物研究所北京100850

目的:建立微量DNA和壳聚糖的含量测定方法,用于测定载pdna壳聚糖纳米粒中pdna的包封率和载药量。方法:利用PicoGreen荧光染料与双链DNA特异结合后激发产生荧光,检测荧光强度,建立标准曲线,测定纳米粒混悬液中游离的pdna含量;利用茚三酮... 详细信息

目的:建立微量DNA和壳聚糖的含量测定方法,用于测定载pdna壳聚糖纳米粒中pdna的包封率和载药量。方法:利用PicoGreen荧光染料与双链DNA特异结合后激发产生荧光,检测荧光强度,建立标准曲线,测定纳米粒混悬液中游离的pdna含量;利用茚三酮和壳聚糖分子上的伯氨基发生显色反应,紫外法测定吸收度,建立标准曲线,测定纳米粒混悬液中游离的壳聚糖含量;按照游离的pdna和壳聚糖含量分别计算纳米粒中pdna的包封率和载药量。结果:PicoGreen荧光法的线性范围1～50ng.mL-1,低、中、高3种浓度的回收率分别为103.4%,97.6%,98.7%,相应RSD分别为1.0%,0.1%,0.2%(n=3)。茚三酮比色法的线性范围0.5～10μg.mL-1,低、中、高3种浓度的回收率分别为104.0%,98.6%,97.9%,相应RSD分别为3.3%,0.6%,1.7%(n=3)。2种分析方法的日内和日间精密度RSD均小于5%(n=5)。测定纳米粒中pdna的包封率为(99.67±0.12)%,RSD为0.12%(n=3);载药量为(50.90±1.71)%,RSD为3.4%(n=3)。结论:本文建立的PicoGreen荧光法和茚三酮比色法灵敏度高,准确可靠,可以用于载pdna壳聚糖纳米粒中pdna的包封率和载药量的测定。

关键词： PicoGreen 茚三酮 pdna 壳聚糖纳米粒包封率载药量

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重特大自然灾害损失统计与评估进展与展望

地球科学进展 2018年第9期33卷 914-921页

作者：王曦周洪建民政部国家减灾中心北京100124

2014年6月《特别重大自然灾害损失统计制度》(以下简称《统计制度》)的出台标志着中国重特大自然灾害损失统计与评估正式进入制度化建设的新阶段。在分析破坏、损失和需求评估(DaLA)、美国国家多灾种评估系统(HAZUS-MH)、澳大利亚应急... 详细信息

2014年6月《特别重大自然灾害损失统计制度》(以下简称《统计制度》)的出台标志着中国重特大自然灾害损失统计与评估正式进入制度化建设的新阶段。在分析破坏、损失和需求评估(DaLA)、美国国家多灾种评估系统(HAZUS-MH)、澳大利亚应急管理署灾害损失评估(EMADLA)、灾害社会经济与环境影响评估(ECLAC)和灾后需求评估(pdna)等5个国际主流灾害损失评估体系的基础上,从统计与评估内容和指标2个方面对比了《统计制度》与国外体系的差异。结合近年来中国重特大灾害损失统计与评估实践和国外体系的特色,从丰富与完善损失统计内容框架、分步改进灾害影响评估方法、完善损失统计的指标与参数等3个方面提出了未来发展展望。研究对改进重特大自然灾害损失统计与评估体系,更好地服务于灾后恢复重建决策具有重要的现实意义。

关键词：重特大灾害损失统计 pdna DaLA HAZUS-MH

基于电荷平衡构建的新型葡聚糖阳离子基因载体及转染的体外研究

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基于电荷平衡构建的新型葡聚糖阳离子基因载体及转染的体外研究

作者：胡文文广西医科大学

学位级别：硕士

目的:本实验基于电荷平衡理论,利用葡聚糖(Dextran,Dex)为基材,构建新型阳离子基因载体,并设计了一系列具有电荷密度梯度变化的载体,从而获得高转染效率的基因载体。方法:本实验分为三部分。第一部分:二甲氨基修饰Dex的合成及其相关表... 详细信息

目的:本实验基于电荷平衡理论,利用葡聚糖(Dextran,Dex)为基材,构建新型阳离子基因载体,并设计了一系列具有电荷密度梯度变化的载体,从而获得高转染效率的基因载体。方法:本实验分为三部分。第一部分:二甲氨基修饰Dex的合成及其相关表征。首先,使用一定量的二甲基亚砜(Dimethyl sulfoxide,DMSO)使Dex溶解,再加入一定量的羰基二咪唑(1,1’-carbonyldiimidazole,CDI)使其被活化一段时间,然后分别与不同量的3,3-亚氨基双(N,N-二甲基丙胺)(3,3’-Iminobis(N,N-dimethylaminopropyl),B)、3-二甲胺基丙胺(3-dimethylamino-1-propylamine,M)反应,制备不同取代度(degree of substitution,DS)的阳离子Dex。分别通过傅里叶红外光谱(Fourier Transform Infrared Spectrometer,FTIR),核磁共振氢谱(H Nulcear magnetic resonance,H NMR)和核磁共振碳谱(C Nulcear magnetic resonance,C NMR)分析合成的载体是否已被M或B成功修饰,并且通过相应的计算方法,得出修饰后各个组取代比例多少。第二部分:修饰前后Dex分别与质粒DNA(pdna)合成阳离子聚合物的研究。首先需要制备包含EGFP增强型绿色荧光蛋白的pdna。再采用Zeta纳米粒子分析仪对修饰前后Dex及与pdna形成的聚合物的粒径大小和分散稳定性进行测定。利用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)和扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)对一定N/P比值修饰后的Dex与pdna聚合物的尺寸分布、形状稳定性进行了分析。通过琼脂糖凝胶电泳研究修饰前后各组Dex分别与pdna的结合能力,以及加入脱氧核糖核酸酶I后,修饰前后Dex对pdna保护能力。同时利用nanodrop 2000定量分析DNA的浓度来检测载体保护pdna的能力。第三部分:携带pdna的阳离子聚合物用于体外基因转染效率的研究。采用CCK8试验、钙黄绿素/PI活死染色的方法来测试修饰后的各组Dex或者聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI)的细胞毒性。首先通过钙离子荧光探针试剂来观察细胞内钙离子浓度变化,由此证明载体刺激进入细胞。再利用激光共聚焦扫描显微镜对增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的表达进行了定性观察,相对应的使用Image J定量分析绿色荧光的强度。最后,通过流式细胞术进一步检测了EGFP在细胞中的表达情况。结果:第一部分:各组合成的样品通过FTIR检测结果显示Dex和B反应后,在1690 cm处出现新的吸收峰;Dex和M反应后,在1706 cm处出现新的吸收峰。通过H NMR观察发现,B和M的特定质子峰均因Dex分别与B或M接枝后形成酰胺键(δ=1～4 ppm)而发生化学移位。从C NMR的结果检测得出,所有B和M修饰后的阳离子Dex载体在158-160ppm出现新的峰。最后,通过阳离子改性Dex的H NMR谱中峰3(1.87-1.93 ppm,-CH-N(CH))与峰5(5.17 ppm,O-CH(CH)-O)的比值计算得到其二甲氨基的DS。第二部分:按照相应的试剂盒说明书,成功提取了包含EGFP增强型绿色荧光蛋白的pdna。通过Zeta纳米粒子分析仪检测可以看出,修饰前后Dex载体的粒径大小几乎没有太大差别。但修饰前后的Dex的Zeta电位由负变正,并且修饰后的Dex的Zeta电位随着被修饰的二甲氨基数目的增加而增加。各组阳离子载体样品与pdna结合的质量比(即N/P比)一定时,与Dex相比,载体与pdna形成的聚合物的Zeta电位也是向正电位增加。但携带pdna的Dex与Dex比较,反而负电位变更大。为进一步优化载体,并基于电荷平衡理论,分析了较高DS组中的一组载体,在不同N/P比时的Zeta电位和粒径大小变化。结果显示,聚合物的尺寸和Zeta电位大小与N/P呈负相关。通过AFM和SEM对Dex与pdna结合前后以及较高DS的载体与pdna结合前后的粒径进行了分析,结果显示阳离子载体与pdna形成的聚合物呈现稳定的圆球状且分布均匀。琼脂糖凝胶电泳结果得出,同一N/P比例下,较高DS的阳离子Dex载体组并无条带从负极向正极迁移;脱氧核糖核酸酶I存在下,仍有条带迁移。随着N/P比值增高,较高DS组的条带逐渐呈现出反向迁移的现象。nanodrop 2000定量分析结果与琼脂糖凝胶电泳检测结果相一致。第三部分:CCK8试验、钙黄绿素/PI活死染色的结果相互对应,Dex和二甲氨基修饰的Dex都对细胞几乎不产生毒性,而

关键词：二甲氨基葡聚糖 pdna 电荷平衡理论基因转染

固定化金属亲和磁性纳米粒子的合成及其在质粒DNA纯化中的应用

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固定化金属亲和磁性纳米粒子的合成及其在质粒DNA纯化中的应用

作者：胡容四川农业大学

学位级别：硕士

RNA残留量是质粒DNA作为基因疫苗主要载体的重要质量评价指标,但因RNA在细胞内的含量极高及在组成、性质上与DNA相似而难以从DNA/RNA混合物中脱除。用传统的色谱分离法和RNA酶降解法虽可去除RNA,达到纯化DNA的目的,但前者操作复杂,后者... 详细信息

RNA残留量是质粒DNA作为基因疫苗主要载体的重要质量评价指标,但因RNA在细胞内的含量极高及在组成、性质上与DNA相似而难以从DNA/RNA混合物中脱除。用传统的色谱分离法和RNA酶降解法虽可去除RNA,达到纯化DNA的目的,但前者操作复杂,后者造价高昂并易带来二次污染。虽然磁分离法具有操作简便、快速、无二次污染等诸多优势而广泛用于DNA的直接纯化,但迄今没有用该法从DNA/RNA混合物中选择性去除RNA,以纯化DNA的报道。本研究合成了Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+磁性纳米粒子,以其为固相载体并基于固定化金属亲和层析原理,成功实现了DNA/RNA混合物中RNA的选择性脱除和pdna的选择性纯化,为医用pdna纯化提供了理论依据和新思路。其主要研究工作及结果如下：1.以FeCl3·6H2O, FeCl2·4H2O和NH3H2O为原料,采用化学共沉淀法合成了Fe304磁性纳米粒子,并对其进行了柠檬酸化修饰;以其为种子,盐酸羟胺为还原剂,还原Au3+包覆在Fe304表面。结果表明：经柠檬酸钠修饰的Fe304磁性纳米粒子稳定性大为提高,在室温条件下放置数月无聚沉现象;VSM测得其饱和磁化强度为52.53emu/g,具有超顺磁性;Fe3O4@Au磁性纳米粒子外观呈红褐色,且经盐酸纯化后的Fe3O4@Au在540nm处有一个较强的Au的特征吸收峰,结合FTIR和XPS等分析,充分证明了Au对Fe304磁性纳米粒子的成功包覆;TEM分析显示Fe3O4@Au粒径约为40nm,VSM表明其饱和磁化强度为19.30emu/g,仍具有超顺磁性、较强的磁响应性和较好的分散性。2.以赖氨酸为原料,通过4步有机合成反应合成了NTA的衍生物Lys-NTA。该有机分子可通过NTA螯合过渡金属离子(如Zn2+),也可通过游离氨基连接其他基团。以硫辛酸(TA)为连接臂,其一端通过S-Au化学键连接于Fe3O4@Au表面,另一端羧基通过缩肽反应(NHS/EDC介导)偶联Lys-NTA-Zn2+,制得Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+磁性纳米粒子。FTIR、1HNMR和MS鉴定表明,通过4步有机合成反应得到了螯合配体Lys-NTA。Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+的FTIR、XPS等分析证明,Lys-NTA-Zn2+成功偶联于Fe3O4@Au表面。UV-Vis检测发现Au的特征吸收峰红移至562nm。产物具有良好的磁响应性和分散性。3.以Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+为固相吸附剂,考察了吸附时间、磷酸根浓度、pH,NaCl浓度等因素对质粒DNA纯化的影响。结果表明：在0～2mol/L范围内,NaCl浓度越高,越有利于Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+磁性纳米粒子对RNA的吸附;酸性环境(如pH5.8)有利于吸附,碱性条件(pH>7.5)抑制吸附;在高浓度磷酸根(如100mmol/L)中,Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+磁性纳米粒子几乎不吸附核酸;而当磷酸根浓度较低(如0.25mmol/L)时,Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+磁性纳米粒子既吸附RNA也吸附pdna。当磷酸缓冲液浓度为0.5mmol/L, pH5.8, NaCl浓度为1.5mol/L,裂解液稀释60倍时,Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+磁性纳米粒子能大量地选择性吸附RNA,不吸附pdna,达到了实验目的,使得pdna得以纯化。

关键词：磁性纳米粒子 pdna RNA 固定化金属亲和吸附

Fe3O4@Au纳米复合材料的合成及对质粒DNA的纯化研究

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Fe3O4@Au纳米复合材料的合成及对质粒DNA的纯化研究

作者：田鹤枫四川农业大学

学位级别：硕士

质粒DNA(pdna)是生物化学和生物医学研究最常用的载体分子。目前磁分离法纯化pdna的一般策略是先用RNase(主要来源为牛胰)降解RNA,得到“无RNA”的细胞裂解液,再从中回收pdna,因而成本高昂并易引入新的免疫源。基于DNA和RNA的结构差异,... 详细信息

质粒DNA(pdna)是生物化学和生物医学研究最常用的载体分子。目前磁分离法纯化pdna的一般策略是先用RNase(主要来源为牛胰)降解RNA,得到“无RNA”的细胞裂解液,再从中回收pdna,因而成本高昂并易引入新的免疫源。基于DNA和RNA的结构差异,建立利用磁性载体选择性纯化DNA方案,可为pdna的纯化提供新思路。本研究以固定化金属螯合亲和层析(immobilized metal affinity chromatography,IMAC)原理为基础,成功合成了 Fe304@Au-TA-NTA-Zn2+MNPs,建立和优化了从DNA/RNA混合溶液中选择性脱除RNA的方案,为医用pdna纯化提供了新的思路和技术支撑。主要研究工作及结果如下:1.用Fe3+、Fe2+和氨水共沉淀合成了 Fe3O4磁性纳米粒子(magnetic nanoparticles,MNPs),以2,3-二疏基丁二酸(DMSA)为巯基化试剂对其进行了表面修饰,以其为磁核通过羟胺还原法合成了 Fe3O4@Au MNPs,并对相应的反应条件进行了优化。结果显示:(1)Fe304MNPs具有超顺磁性,稳定性良好,室温条件下10日不聚沉,饱和磁化强度为53 emu/g;(2)二巯基丁二酸是非常有效的表面巯基化试剂,可使氯金酸有效还原沉积,得到金壳包覆均匀的Fe304@Au MNPs。该复合粒子呈红褐色,在555 nm处有Au的特征吸收峰,平均粒径约为35 nm,饱和磁化强度为17emu/g,用磁分离架10min即可达到完全回收;(3)利用碱老化法在Fe3O4@AuMNPs表面连接硫辛酸(TA)。同时通过有机合成制备Lys-NTA-Zn2+,并以 NHS/EDC 为缩肽试剂,制得 Fe304@Au-TA-NTA-Zn2+MNPs。FTIR 充分证明了二者的有效偶联。VSM和磁分离试验表明Fe304@Au-TA-NTA-Zn2+MNPs具有良好的超顺磁性和磁响应性。2.利用Fe3O4@Au-TA-NTA-Zn2+ MNPs对大肠杆菌裂解液中的RNA进行选择性分离研究。通过改变吸附和洗脱的环境因素(如缓冲液浓度、盐离子浓度、磁性载体用量、时间、pH以及竞争性吸附剂等手段)优化了选择性吸附和洗脱RNA的条件。结果显示:磷酸根对DNA和RNA的吸附均有抑制作用,对DNA的吸附抑制更明显;在一定范围内(0～2.0mol/L),NaCl浓度的升高对RNA的吸附有促进作用;pH对RNA的吸附影响较小,但当pHpdna;使用30 mM的EDTA溶液(含0.5 mol/LNaCl),洗脱15 min后,可洗脱下99%的RNA。酶切鉴定表明,分离纯化后的pdna仍然保持生物活性。本研究从“pdna/RNA混合液中选择性脱除RNA杂质”,以达到净化pdna的目的。该方法特别适合医疗用pdna纯化后期的精制去杂和基因疫苗的精制,也为pdna自动化提取提供了有益探索。

关键词： pdna RNA 选择性吸附 DMSA Fe3O4@Au磁性纳米粒子固定化金属亲和吸附