PicoGreen荧光分光光度法测定载pDNA纳米粒中pDNA的包封率
作者单位：中国医学科学院北京协和医学院药物研究所 军事医学科学院毒物药物研究所 军事医学科学院放射医学研究所 中国人民解放军第302医院
会议名称：《2010年中国药学大会暨第十届中国药师周》
会议日期：2010年
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 10[医学]
摘 要：目的:建立微量pDNA的含量测定方法,用于测定载pDNA壳聚糖纳米粒中pDNA的包封率。方法:利用PicoGreen荧光染料与双链DNA特异结合后激发产生荧光,荧光分光光度计检测荧光强度,建立标准曲线,测定纳米粒混悬液中游离的pDNA含量,按照游离的pDNA的含量计算纳米粒中pDNA的包封率。结果:PicoGreen荧光法检测的线性范围10ng·mL-1,低、中、高三种浓度的回收率分别为103.4%,97.6%,98.7%,相应RSD分别为1.0%,0.1%,0.2%(n=3)。PicoGreen荧光法的日内和日间精密度的RSD均小于5%(n=5)。测定纳米粒中pDNA的包封率为(99.67±0.12)%,RSD为0.12%(n=3)。结论:本文建立的PicoGreen荧光法灵敏度高,准确可靠,可以用于载pDNA壳聚糖纳米粒中pDNA的包封率测定。