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p75NTR联合sST2预测pHLF价值的临床研究

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p75NTR联合sST2预测PHLF价值的临床研究

作者：努尔扎提江·安维尔新疆医科大学

学位级别：硕士

目的:研究肝切除术后血浆p75神经营养素受体(p75 pan-neurotrophin reXeptor,p75)和可溶性致癌性抑制基因2(Soluble suppression of tumorigeniXity-2,s ST2)在预测肝切除术后肝衰竭(post-hepateXtomy liver failure,pHLF)中的应用价值,为临床上预防和治疗pHLF提供一种诊疗策略。方法:回顾性分析64例于2019年10月至2021年12月期间在新疆医科大学第一附属医院收治并行肝切除术患者的临床资料。其中男32例,女32例;平均年龄48.3±16.35岁;大范围肝切除患者37例和小范围肝切除患者27例。两组各项实验室指标比较采用t检验或Mann-Whitney U秩和检验,率的比较用X检验或Fisher确切概率法。检测患者围手术期血浆p75、s ST2水平,并采用受试者工作特征曲线(ReXeiver operator XharaXteristiX Xurve,ROC)分析预测pHLF价值。结果:64个病人中,25个(39.06%)发生pHLF,39个(60.94%)未发生pHLF。p75与s ST2行相关性分析结果显示两者成正相关(ppSS逻辑回归中单因素分析结果显示手术时间、切除类型、门静脉阻断时间、失血量、术中是否输血、术后第一天指标(AST、p75、s ST2)是pHLF的危险因素,然而,多因素逻辑回归结果显示术后第一天p75、s ST2是pHLF的独立预测因子。多因素逻辑回归构建的模型预测pHLF的ROC曲线下面积为0.830(95%CI:0.725-0.934),敏感度为0.840,特异度为0.744,最佳界值为0.30 ng/L。结论:基于p75与s ST2成正相关且对肝切除术后肝衰竭的发生具有良好的预测能力,血浆p75、s ST2可作为预测pHLF有效的参考指标。

关键词： p75NTR sST2 肝切除术肝功能衰竭

慢病毒介导沉默p75NTR联合NGF过表达转染BMSCs复合DBM支架治疗大鼠骨缺损的实验研究

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慢病毒介导沉默P75NTR联合NGF过表达转染BMSCs复合DBM支架治疗大...

作者：王烨桂林医学院

学位级别：硕士

目的:研究利用慢病毒介导沉默p75神经生长因子受体(p75 nerve growth factor receptor,p75NTR)联合神经生长因子(nerve growth factor,NGF)过表达共转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs),复合脱钙骨基质(demineralized bone matrix,DBM)共培养,构建组织工程骨,探索治疗骨缺损的新途径。方法:通过全骨髓贴壁法分离培养4周龄SD大鼠BMSCs,并利用流式细胞仪检测BMSCs特异性表面标记物。将大鼠BMSCs分4组,A组为未转染组,B组为沉默p75NTR转染组,C组为NGF过表达转染组,D组为沉默p75NTR联合NGF过表达共转染组,转染后第6天荧光显微镜观察双基因转染组目的基因的荧光蛋白表达。Western blot实验检查转染后各组细胞p75NTR及NGF的相对蛋白表达量。CCK-8法检测各组细胞转染后第1～6天增殖活性的变化。扫描电子显微镜观察沉默p75NTR联合NGF过表达转染组细胞复合DBM支架材料共培养后,细胞的黏附情况。分别将上述各组细胞与DBM支架材料共培养,制成组织工程骨。取8周龄SD大鼠,制备大鼠股骨骨缺损模型,将大鼠随机分4组,A组植入未转染BMSCs-DBM,B组植入沉默p75NTR-BMSCs-DBM,C组植入NGF过表达-BMSCs-DBM,D组植入为沉默p75NTR联合NGF过表达-BMSCsDBM。Micro CT扫描术后4周各组骨缺损愈合情况。各组分别于术后4周、8周、12周选取3只大鼠行缺损处HE染色观察新生骨组织。结果:倒置相差显微镜观察培养至第3代BMSCs,细胞贴壁生长,呈长梭形、三角形、纺锤形,排列紧密,部分伸出伪足,根据细胞形态及流式细胞仪鉴定CD34、CD29、CD44可确定所提取培养细胞为BMSCs。转染后第6天,荧光显微镜观察红绿荧光表达,转染效率可达75%左右。Western blot检测结果显示,C组和D组的NGF蛋白表达量明显高于A组、B组,B组与D组的p75NTR蛋白相对表达量明显低于A组、C组,差异有统计学意义(pppparation spacing,Tb Sp)低于A组,差异有统计学意义(pp低于B、C组,差异有统计学意义(pp75NTR联合NGF过表达共转染BMSCs复合DBM支架材料构建组织工程骨,有良好的成骨性能,促进骨再生,对骨缺损有良好的修复效果。

关键词：慢病毒 p75NTR NGF 脱钙骨基质骨缺损

Effect of tonifying liver and kidney-essence herbs on expression of Nogo-A and p75^(ntr) in cerebral ischemic stroke rats model

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Journal of Traditional Chinese Medicine 2012年第4期32卷 664-668页

作者： Yongmei Yan Tianhao Li Li Liu Haizhe Zhou Li Liu Haizhe Zhou Department of Encephalopathy Shaanxi Uni-versity of Traditional Medicine Hospital Shaanxi 712000China Department of pneumology the Second Hospi-tal Affiliated to Shaanxi University of Traditional MedicineShaanxi 712000 China Chinese Medicine Department of internal Medicine Shaanxi University of Traditional Medicine Shaanxi 712000China Chinese Medicine Department of InternalMedicine Shaanxi University of Traditional Medicine Shaanxi 712000 China

OBJECTIVE:To observe the effect of tonifying liver and kidney-essence herbs on expression of a nerve regeneration inhibitor,Nogo for neuron A(Nogo-A),and its associated signaling molecule,low-affinity neurotrophin receptor p75(p75 ntr),in rats with cerebral ischemic stroke(CIS),with the aim of exploring the possible mechanism of tonifying liver and kidney-essence herbs in recovery following injury to the central nervous system.METHODS:A cerebral ischemic stroke model in SD rats was established with the suture-occlusion method.Successful model rats were divided into placebo and herb groups at random;sham-operated and control groups were set up simultaneously.Each of these groups was divided into six subgroups at random.Expression of Nogo-A and p75 ntr was evaluated with immunofluorescence microscopyatdays3,and weeks1,2,3,4and8 afteradministration.RESULTS:Tonifying liver and kidney-essence herbs suppressed the expression of Nogo-A and p75 ntr(pppectively).CONCLUSION:Suppressing the expression of Nogo-A and p75 ntr is possibly one of the mechanisms underlying the ability of tonifying liver and kidney-essence herbs to promote recovery of the injured central nervous system.

关键词： p75NTR 大鼠模型脑缺血补肾中风中药中枢神经系统肝

proBDNF通过上调p75NTR表达促进口腔鳞状细胞癌SCC-4细胞迁移侵袭

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重庆医科大学学报 2020年第2期45卷 167-172页

作者：李鹏程张旭凤云蔓何龙海南医学院第一附属医院口腔科海口570000

目的 :探索前体形式--脑源性神经营养因子前体(precursor brain derived neurotrophic factor,proBDNF)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)SCC-4细胞迁移与侵袭能力的影响及其潜在机制。方法:对SCC-4细胞给予20 ng/mL proBDNF刺激后,通过Transwell迁移实验和划痕实验检测SCC-4细胞迁移,通过Transwell侵袭实验检测SCC-4细胞侵袭,通过qRT-pCR和Western blot实验检测SCC-4细胞p75神经营养素受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)mRNA与蛋白表达。进一步采用免疫荧光法观察proBDNF与p75NTR在SCC-4细胞的亚细胞定位。敲除p75NTR后,分别通过Transwell迁移实验、划痕实验、Transwell侵袭实验和qRT-pCR检测proBDNF对SCC-4细胞迁移、侵袭及促迁移侵袭相关基因表达的影响。结果:20 ng/mL proBDNF可明显促进SCC-4细胞迁移和侵袭(均p=0.000),且proBDNF与p75NTR在SCC-4细胞存在亚细胞共定位。proBDNF可促进SCC-4细胞p75NTR mRNA和蛋白表达(均p=0.000)。敲除p75NTR能逆转proBDNF引起的SCC-4细胞迁移、侵袭反应,以及降低结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、波形蛋白(vimentin,VIM)、酪氨酸蛋白激酶受体UFO(anexelekto,AXL)、高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)、解整合素金属蛋白酶19(a disintegrin and metalloproteinase 19,ADAM19)、纤连蛋白富含亮氨酸跨膜蛋白2(fibronectin leucine-rich transmembrane protein 2,FLRT2)和磷酸二酯酶1C(phosphodiesterase 1C,pDE1C) mRNA表达水平(均pproBDNF依赖上调p75NTR表达来促进SCC-4细胞迁移和侵袭,其机制可能为proBDNF结合p75NTR通过上调下游促迁移侵袭相关基因CTGF、VIM、AXL、HMGA2、ADAM19、FLRT2和pDE1C表达有关。

关键词： proBDNF p75NTR 口腔鳞状细胞癌迁移侵袭

蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑损伤大鼠脑组织NgR、p75NTR表达的影响

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中成药 2021年第6期43卷 1602-1608页

作者：张晰马丙祥张建奎王怡珍陈恬恬李华伟党伟利周荣易河南中医药大学第一附属医院河南郑州450000

目的观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑室旁白质软化大鼠脑组织NgR、 p75NTR表达的影响。方法制备宫内感染致脑损伤模型。30只孕鼠于妊娠第16、17天连续2 d给予腹腔注射LpS(350μg/kg),1次/d,设为LpS组;6只注射同等剂量的生理盐水... 详细信息

目的观察蒲金口服液对宫内感染/炎症致早产脑室旁白质软化大鼠脑组织NgR、 p75NTR表达的影响。方法制备宫内感染致脑损伤模型。30只孕鼠于妊娠第16、17天连续2 d给予腹腔注射LpS(350μg/kg),1次/d,设为LpS组;6只注射同等剂量的生理盐水设为对照组。造模成功后选取LpS组孕鼠所产脑损伤仔鼠80只随机分为蒲金口服液高、低剂量组(24、12 g/kg)、银杏叶提取物组、模型组,每组20只,4组各随机分为早期、晚期干预组各10只,早期组于生后第1天给药,晚期组于第8天给药,连续7 d,每日1次。IHC、Western blot检测21日龄4组早、晚期干预仔鼠脑组织NgR、p75NTR的表达。结果与0日龄对照组仔鼠相比,LpS可致仔鼠脑组织中NgR、p75NTR的表达升高(pp75NTR表达(pp75NTR的表达作用优于蒲金口服液低剂量和银杏叶提取物(ppVL仔鼠受损神经有保护作用,其机制可能是通过下调NgR、p75NTR的表达,从而抑制髓鞘相关抑制因子与其受体结合形成受体复合体,降低NgR、p75NTR介导的信号通路活性,抑制生长锥的塌陷,促进损伤神经修复。

关键词：蒲金口服液宫内感染/炎症脑损伤 NgR p75NTR

前列腺癌神经生长因子受体TrkA/p75NTR比值与临床分期、分级的关系

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中华男科学杂志 2015年第11期21卷 982-987页

作者：杨杰张嘉宜王亚民邵鹏飞宋宁宏华立新张炜南京医科大学第一附属医院泌尿外科江苏南京210029

目的：探讨神经生长因子（NGF）的两种受体（TrkA和p75NTR）在前列腺癌（pCa）发生、发展中的表达规律及作用机制。方法：采用免疫组化法研究62例pCa和35例良性前列腺增生（BpH）组织中TrkA及p75NTR蛋白的表达，并结合临床资料进行统计... 详细信息

目的：探讨神经生长因子（NGF）的两种受体（TrkA和p75NTR）在前列腺癌（pCa）发生、发展中的表达规律及作用机制。方法：采用免疫组化法研究62例pCa和35例良性前列腺增生（BpH）组织中TrkA及p75NTR蛋白的表达，并结合临床资料进行统计分析。结果：通过成组t检验，发现自BpH组织至低分化pCa组织（Gleason 8～10分），随着组织分化逐渐降低或临床分期逐渐增高，TrkA受体表达显著增强，p75NTR受体表达显著减低，TrkA／p75NTR比例显著增大。在BpH组织中两者比例为0．32，在Gleason评分6分的pCa组织中为0．52，在7分的组织中为1．65，而在8～10分的组织中为5．75；在pT2期组织中两者比例为0．89，在pT3a期为1．5，在pT3b期为3．75，在有淋巴结转移（pTxN1）的组织中为7．00。结论：TrkA／p75NTR比例的失调性增高，可能是前列腺细胞恶变后的基本特征之一。TrkA／p75NTR比值越高，组织分化程度越低，临床分级、分期越高，患者预后可能越差。

关键词：前列腺癌 TrkA p75NTR 临床分期 Gleason评分

“百会”透“曲鬓”对急性期脑出血大鼠脑组织中p75NTR表达影响的研究

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“百会”透“曲鬓”对急性期脑出血大鼠脑组织中P75NTR表达影响的...

作者：董珊珊黑龙江中医药大学

学位级别：硕士

目的:研究针刺“百会”透“曲鬓”对急性期脑出血大鼠脑组织中p75NTR表达的影响,探讨该针刺疗法治疗急性期脑出血的作用机制。方法:选取体质量(300±20)g,健康成年雄性Wistar大鼠72只,将大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组根据6... 详细信息

目的:研究针刺“百会”透“曲鬓”对急性期脑出血大鼠脑组织中p75NTR表达的影响,探讨该针刺疗法治疗急性期脑出血的作用机制。方法:选取体质量(300±20)g,健康成年雄性Wistar大鼠72只,将大鼠随机分为假手术组、模型组和针刺组,每组根据6h、24h、3d、7d不同时间点再分为四个亚组,每个亚组6只大鼠。依据改良自体血注射法制备脑出血大鼠模型,针刺组大鼠给予针刺“百会”透“曲鬓”进行干预。参照Rosenberg评分法来综合评价各组大鼠的神经功能缺损情况,采用TUNEL法检测各组大鼠脑出血半暗带区细胞凋亡情况,采用免疫组化法检测p75NTR在脑出血半暗带区的表达水平,并对两者进行相关性分析。结果:1.神经功能缺损评分结果:(1)假手术组大鼠未见任何神经功能缺损体征;(2)与相同时间点假手术组比较,模型组大鼠出现明显的神经功能受损体征,差异有显著统计学意义(ppppp75NTR阳性细胞;(2)与相同时间点假手术组比较,模型组与针刺组大鼠半暗带区脑组织p75NTR表达明显增多,差异具有统计学意义(pp75NTR蛋白表达,在术后6h即出现,3d时达到高峰,7d时表达开始下降;(4)与相同时间点模型组比较,针刺组大鼠在各时间点p75NTR蛋白表达显著减少,差异具有统计学意义(pp75NTR的表达与细胞凋亡数目呈正相关,相关系数为0.811。结论:1.针刺“百会”透“曲鬓”可以减轻脑出血大鼠神经功能缺损体征;2.针刺“百会”透“曲鬟”能够减少脑出血后脑组织神经细胞的调亡;3.针刺“百会”透“曲鬟”能够抑制与细胞凋亡密切相关的p75NTR的表达,对脑出血半暗带区脑组织有保护作用。

关键词： “百会”透“曲鬓” 头针疗法脑出血 p75NTR 细胞凋亡

过表达p75NTR负向调控BMSCs增殖及成骨分化的实验研究

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过表达P75NTR负向调控BMSCs增殖及成骨分化的实验研究

作者：朱伦井桂林医学院

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目的:通过研究p75NTR过表达对体外培养的兔骨髓间充质干细胞的影响,阐明过表达p75NTR可以负向调控BMSCs的增殖及成骨分化,为提高骨组织工程修复骨缺损不愈合的疗效提供相关的干预靶点。方法:选取幼年新西兰大白兔双侧股骨,用全骨髓分离... 详细信息

目的:通过研究p75NTR过表达对体外培养的兔骨髓间充质干细胞的影响,阐明过表达p75NTR可以负向调控BMSCs的增殖及成骨分化,为提高骨组织工程修复骨缺损不愈合的疗效提供相关的干预靶点。方法:选取幼年新西兰大白兔双侧股骨,用全骨髓分离贴壁法提取兔骨髓间充质干细胞体外培养;构建表达EGFp的p75NTR过表达慢病毒载体并感染体外培养的原代兔骨髓间充质干细胞;感染后培养至7 d用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达丰度,并用Western blot检测p75NTR蛋白的过表达情况;用CCK8检测感染后细胞的生长活性情况;同时经成骨诱导分化培养,检测碱性磷酸酶活力及矿化结节形成情况来评估感染后细胞的成骨分化能力。结果:体外分离培养的兔骨髓间充质干细胞符合实验设计需要;p75NTR过表达慢病毒构建成功后感染兔骨髓间充质干细胞能表达出绿色荧光蛋白（感染效率约90%）,且p75NTR蛋白表达量明显增多,与阴性病毒对照组及正常细胞组比较,差异有显著性意义（p＜0.05）,过表达p75NTR的细胞模型构建成功;过表达p75NTR的兔骨髓间充质干细胞的生长明显受抑制（p＜0.05）;过表达p75NTR的兔骨髓间充质干细胞在体外经诱导成骨分化培养后,其碱性磷酸酶活力明显降低,矿化结节形成明显减少（差异比较有统计学意义,p＜0.05）。结论:过表达p75NTR可以负向调控BMSCs的增殖及成骨分化。

关键词： p75NTR 骨髓间充质干细胞过表达成骨分化增殖

运动训练对衰老小鼠认知功能及海马p75NTR表达的作用

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运动训练对衰老小鼠认知功能及海马P75NTR表达的作用

作者：王韩成都体育学院

学位级别：硕士

目的:通过制备12月龄自然衰老小鼠模型并施以8周运动训练干预,研究运动对衰老小鼠学习记忆、海马p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)、Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)以及p53基因表达的作用,证明有氧... 详细信息

目的:通过制备12月龄自然衰老小鼠模型并施以8周运动训练干预,研究运动对衰老小鼠学习记忆、海马p75神经营养因子受体(p75 neurotrophin receptor,p75NTR)、Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)以及p53基因表达的作用,证明有氧运动能够通过抑制衰老小鼠海马内p75NTR信号通路的活化,改善老年认知的退化,为在衰老早期及进程中实施运动干预,促进脑康复提供实验基础。方法:24只雄性C57小鼠,构建不同月龄组别,分为3月龄青年组(Y组)及12月龄老年组,其中老年组又分为自然增龄组(SC组)及老年跑台组(SE组)。SE组采取45min/d,5d/w的运动训练,其中0-5min速度为5m/s,5-10min速度为8m/s,10-40min速度为12m/s,40-45min速度为5m/s,运动训练共8周。末次训练结束24h后,采用Morris水迷宫测试观察实验小鼠空间学习记忆能力;行为学实验结束后处死小鼠,在冰袋上快速剥离双侧海马,投入液氮速冻,采用实时荧光定量pCR(Quantitative Real-time pCR;RT-q pCR)检测海马组织中的p75NTR及其下游底物总JNK、p53基因的表达。结果:1.Morris水迷宫结果显示:在定位航行训练期间,组内比较:SE组小鼠第1与2天的平均潜伏期差异显著(ppppppp>0.05)。2.RT-q pCR检测显示:与SC组比较,SE组小鼠海马组织中p75NTR、总JNK以及p53 mRNA的表达水平明显降低(pp75NTR、总JNK及p53 mRNA的表达水平显著升高(pp75NTR及其下游关键蛋白的基因表达水平,从而抑制p75NTR信号通路的激活,减少海马神经细胞的凋亡,发挥改善学习记忆,延缓认知功能衰退的作用。

关键词：运动训练认知功能海马 p75NTR JNK p53