检索结果-南通市图书馆

p15^(ink4b)和p21^(WAF1)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109的协同抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2009年第30期17卷 3086-3091页

作者：张学彦刘志强景德怀关景明刘伟刘铁夫刘冰熔哈尔滨医科大学附属二院消化科黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属四院消化科黑龙江省哈尔滨市150000

目的:探讨p15ink4b(p15)和p21WAF1(p21)基因联合转染对人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖和凋亡的影响.方法:脂质体介导pcDNA3.1(+)-p15和pcDNA3.1(+)-p21转染EC109细胞,稳定筛选后用RT-pCR检测转染细胞p15与p21基因mRNA表达,Western blot检测转染细胞p15和p21蛋白的表达.用MTT法和透射电镜检测p15和p21基因分别及联合转染对EC109细胞增殖与凋亡的影响,流式细胞仪检测EC109细胞周期分布与凋亡率.结果:p15和p21转染组EC109细胞生长速度低于空载体组与未转染组,联合转染组与二者单独转染组相比,亦明显抑制EC109细胞体外生长速度.p15和p21转染组EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组,S期则显著降低(G1期:60.52%±3.75%,63.12%±2.89%vs42.17%±5.30%,41.38%±6.54%;S期:22.67%±1.25%,17.96%±2.03%vs30.96%±3.33%,36.05%±1.78%,均pp15和p21转染组发生细胞凋亡,联合转染组发生更为明显的G1/S阻滞,G1期比例显著升高、S期比例明显降低(G1期:72.83%±2.31%vs60.52%±3.75%,63.12%±2.89%;S期:13.59%±2.59%vs22.67%±1.25%,17.96%±2.03%,均p4.32±1.74%,10.83%±2.40%,均pp15和p21基因联合转染在体外可以进一步增强对人食管鳞癌EC109细胞的抑制与诱导凋亡作用.

关键词： p15^ink4b p2^1WAF1 基因转染食管鳞癌

鸡p15^(ink4b)基因的克隆表达及纯化

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

吉林农业大学学报 2006年第4期28卷 453-457,461页

作者：艾永兴张玉静胡薇郝军元邹亚学张英波吉林大学畜牧兽医学院长春130062 吉林农业大学生物技术学院长春130118

为研究鸡p15ink4b蛋白的功能及为制备此蛋白的单克隆抗体提供材料,应用引物搭桥法合成p15ink4b基因,应用基因工程的手段构建p15ink4b基因的原核表达载体,在***(DE3)菌进行融合表达,并对表达产物进行亲和层析纯化。结果成功地构建了p15IN... 详细信息

为研究鸡p15ink4b蛋白的功能及为制备此蛋白的单克隆抗体提供材料,应用引物搭桥法合成p15ink4b基因,应用基因工程的手段构建p15ink4b基因的原核表达载体,在***(DE3)菌进行融合表达,并对表达产物进行亲和层析纯化。结果成功地构建了p15ink4b基因原核表达载体,经亲和层析制备了较高纯度的目的表达产物。

关键词： p15^ink4b 细胞周期原核表达亲和层析鸡

亚砷酸诱导人食管癌细胞株EC109细胞p15^(ink4b)基因的表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2006年第19期14卷 1859-1863页

作者：张学彦刘铁夫刘伟崔希威哈尔滨医科大学附属二院消化科黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属四院消化科黑龙江省哈尔滨市150000 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属二院计算机中心黑龙江省哈尔滨市150086

目的：研究亚砷酸(As_2O_3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15^(ink4b)(p15)基因表达的影响．方法：终浓度2μmol/L的As_2O_3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异pCR(MSp)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化... 详细信息

目的：研究亚砷酸(As_2O_3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15^(ink4b)(p15)基因表达的影响．方法：终浓度2μmol/L的As_2O_3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异pCR(MSp)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化,采用RT-pCR和Western blot方法检测As_2O_3处理前后p15的mRNA和蛋白质水平的表达情况．用Scion Image软件测量条带灰度值,p15蛋白与ACTb条带的灰度比进行半定量分析．结果：EC109细胞p15基因发生高甲基化,p15基因不表达．As_2O_3作用后p15基因甲基化程度明显下降,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(37．11±3．62,50．92±5．47,72．07±7．53 vs 97．23±9．80,p＜0．05)．As_2O_3作用24 h后出现p15 mRNA表达,随As_2O_3作用时间延p15 mRNA表达逐渐增强,各个时间组之间比较,除了未加药组和加药24 h组之间及加药24 h组和加药48 h组之间差异无统计学意义外,其余各个时间组之间差异有统计学意义(0．72±0．07 vs 0．58±0．06 vs 0．48±0．07 vs 0．41±0．08,p＜0．05)．As_2O_3作用24 h后p15蛋白出现表达,2μmol/L作用24-72 h中p15蛋白条带灰度逐渐增强,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(0．51±0．02 vs 0．21±0．01 vs 0．16±0．02 vs 0．06±0．01,p＜0．05),说明其表达随As_2O_3作用时间延长而逐渐增强．结论：As_2O_3可使食管癌EC109细胞p15基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制细胞周期进程．

关键词：亚砷酸 p15^ink4b 甲基化食管癌

p15^(ink4b)和p16^(ink4A)基因在鼻咽癌组织中异常甲基化

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药物与临床 2008年第6期8卷 440-442页

作者：倪海峰莫颖禧周晓莹黄光武张哲广西医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科南宁530021

目的通过检测p15ink4b和p16ink4A基因启动子区甲基化情况,分析其与鼻咽癌发生发展及临床病理特征关系,探讨其可能在鼻咽癌临床早期分子生物学诊断和治疗中的作用。方法运用甲基化特异性聚合酶链反应(pCR)对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻... 详细信息

目的通过检测p15ink4b和p16ink4A基因启动子区甲基化情况,分析其与鼻咽癌发生发展及临床病理特征关系,探讨其可能在鼻咽癌临床早期分子生物学诊断和治疗中的作用。方法运用甲基化特异性聚合酶链反应(pCR)对54例鼻咽癌组织和20例正常鼻咽上皮组织的p15ink4b和p16ink4A基因启动子区甲基化状态进行检测。结果鼻咽癌组织中p15ink4b和p16ink4A基因启动子区甲基化阳性率分别为22%(12/54)和46%(25/54),二者总检出率为48%(26/54),26例甲基化的癌组织同时出现二者甲基化为11例;而在正常鼻咽上皮组织中未检测到p15ink4b和p16ink4A基因启动子区甲基化。结论p15ink4b和p16ink4A基因启动子区甲基化与患者临床病理特征无明显相关关系,为鼻咽癌早期事件,有望成为早期分子生物学诊断的标志物,将来还可能作为去甲基化基因治疗的靶点。二者在鼻咽癌发生发展中可能存在协同作用。

关键词：鼻咽肿瘤 p15^ink4b p16^ink4A甲基化

骨髓增生异常综合征患者p15^(ink4b)基因甲基化状态的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

临床血液学杂志 2009年第6期22卷 571-573页

作者：王亚屏宋强李丽珍赵川莉王鲁群山东大学齐鲁医院血液科济南250012

目的:检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者抑癌基因p15ink4b启动子区异常甲基化情况及其mRNA表达水平,探讨p15ink4b基因异常甲基化在MDS发生、发展中的作用。方法:应用甲基化特异性pCR检测32例MDS患者骨髓p15IN... 详细信息

目的:检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者抑癌基因p15ink4b启动子区异常甲基化情况及其mRNA表达水平,探讨p15ink4b基因异常甲基化在MDS发生、发展中的作用。方法:应用甲基化特异性pCR检测32例MDS患者骨髓p15ink4b基因启动子区甲基化状态,逆转录pCR(RT-pCR)检测p15mRNA表达情况。结果:32例MDS患者骨髓有14例检测到p15ink4b基因启动子甲基化(甲基化阳性率为43.8%),且多为高危型患者。MDS患者骨髓p15mRNA表达水平明显降低。MDS患者p15ink4b基因启动子甲基化与p15mRNA表达缺失具有明显的相关性。结论:MDS中p15ink4b基因启动子高甲基化与基因表达失活密切相关,并在MDS的发生、发展中有重要作用。

关键词：骨髓增生异常综合征基因 p15^ink4b DNA甲基化 CpG岛

p15^(ink4b)高表达对人黑色素瘤细胞G1/S进程的阻滞及与MApK信号相关性之初探

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

细胞生物学杂志 2002年第4期24卷 232-236页

作者：刘军柳惠图谭信高萍北京师范大学生命科学学院细胞增殖与调控生物学教育部重点实验室北京100875 首都医科大学细胞遗传教研室

利用TdR-N_2O同步法分别获得p15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了p15^(IN... 详细信息

利用TdR-N_2O同步法分别获得p15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了p15^(ink4b)对G_1/S相关调控蛋白的影响,在M期细胞释放8h(晚G_1期细胞)后,与对照组MLC2细胞相比,实验组MLIK6细胞中CyclinD1,CyclinE,Cdk4,C-Myc蛋白水平均降低。相反,p27^(KIp1)的表达却上升。同时探讨了MApK信号在p15^(ink4b)阻抑A375细胞G_1/S转换中的作用与相关性,结果显示晚G_1期的MLIK6细胞中ERK1,ERK2水平变化不大,而具有活性的p-ERK1和p-ERK2均表现出下降。上述实验表明,p15^(ink4b)可能通过作用于G_1期相关的周期调节蛋白和抑制ERK1和ERK2活性,阻滞G_1/S转换与抑制DNA合成。

关键词： p15^ink4b 高表达人黑色素瘤细胞 G1/S进程阻滞 MApK信号相关性细胞周期

p15^(ink4b)基因转染对人食管鳞癌细胞EC109增殖的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2005年第16期13卷 1945-1950页

作者：张学彦刘铁夫于旸刘伟崔希威哈尔滨医科大学附属二院消化科黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属一院消化科黑龙江省哈尔滨市150000 哈尔滨医科大学遗传学教研室黑龙江省哈乐滨市150086 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属二院计算机中心黑龙江省哈尔滨市150086

目的:探讨p15ink4b(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组,空载体转染组,未转染组.应用pCR检测外源性p15基因,Westernblot方法检测转染细胞的p15蛋白变化:流... 详细信息

目的:探讨p15ink4b(p15)基因转染对食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖的影响.方法:根据转染质粒的不同和是否进行质粒转染分为3组:p15转染组,空载体转染组,未转染组.应用pCR检测外源性p15基因,Westernblot方法检测转染细胞的p15蛋白变化:流式细胞仪分析细胞周期变化,应用MTT、集落形成实验、流式细胞仪和透射电镜检测转染外源p15基因对EC109细胞增殖和凋亡的影响.结果:p15转染细胞存在外源p15基因,并有p15蛋白高表达;EC109-p15细胞生长速度低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组,集落形成率显著低于对照细胞EC109-空载体组和未转染组(20.8±1.3%vs54.3±3.2%,56.8±2.3%,pp15蛋白高表达使EC109细胞发生G1/S阻滞,G1期细胞比例显著高于空载体组和未转染组(62.4±7.1%vs38.0±5.8%,34.4±1.0%,ppp15转染组发生细胞凋亡.结论:p15基因转染可以抑制人食管鳞癌细胞系EC109细胞增殖并能诱导其发生细胞凋亡.

关键词： p15^ink4b 基因转染食管鳞癌食管鳞癌细胞 EC109 细胞增殖抑制作用流式细胞仪分析 p15基因 p15蛋白

地西他滨联合三氧化二砷对肝癌SMMC-7721细胞株p15^(ink4b)及甲基化转移酶表达的影响

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

浙江中西医结合杂志 2018年第11期28卷 924-927页

作者：边祥海孙贵富浙江省海盐县人民医院肿瘤内科海盐314300

目的探讨地西他滨(DAC)和三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌SMMC-7721细胞株p15^(ink4b)抑癌基因及甲基化转移酶表达的影响。方法 MTT方法检测地西他滨和三氧化二砷对SMMC-7721细胞株的抑制率。RT-pCR方法检测p15^(ink4b)、DNA甲基转移酶1(DNM... 详细信息

目的探讨地西他滨(DAC)和三氧化二砷(As_2O_3)对肝癌SMMC-7721细胞株p15^(ink4b)抑癌基因及甲基化转移酶表达的影响。方法 MTT方法检测地西他滨和三氧化二砷对SMMC-7721细胞株的抑制率。RT-pCR方法检测p15^(ink4b)、DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3b mRNA的表达。结果 2.0mmol/LDAC和2.0μmol/L As_2O_3联用,肝癌SMMC-7721细胞株细胞增殖抑制率均较4.0mmol/LDAC、4.0μmol/L As_2O_3单药组增强[(72h:(69.9±1.2)%比(33.8±0.7)%、(47.9±2.5)%,pp15^(ink4b)抑癌基因表达增强,联合组同4.0mmol/LDAC、4.0μmol/L As_2O_3单药组比较,差异有统计学意义[(0.74±0.14)比(0.57±0.15)、(0.56±0.11),p4.0mmol/LDAC、4.0μmol/L As_2O_3单药组比较,差异有统计学意义[DNMT3A:(0.28±0.11)比(0.36±0.13)、(0.41±0.13),pb:(0.32±0.13)比(0.39±0.12)、(0.45±0.16),p15)比(0.44±0.19)、(0.44±0.12),pp15^(ink4b)基因表达来抑制肝癌细胞增殖。

关键词：肝癌SMMC-7721细胞株地西他滨三氧化二砷 p15^ink4b 甲基化转移酶

多发性骨髓瘤中p15^(ink4b)和p16^(ink4A)基因高甲基化的检测

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验血液学杂志 2000年第4期8卷 271-274页

作者：范洪涛郭秀枝吴穷周涛谭广销王绿娅张学莉罗更新许敏华霍华德大学暨南大学医学院血液病研究室广州510632 北京安真医院北京100029 暨南大学医学院第一附属医院血液科广州510632

为探索p15 ink4b和p16ink4A基因在多发性骨髓瘤中的甲基化的表达 ,采用敏感的甲基化特异的MSp pCR测定方法 ,检测了 2 4例多发性骨髓瘤 (MM ) p15 ink4b和p16ink4A基因甲基化的情况。结果显示 ,MM中 p15 ink4b和 p16ink4A基因甲基化发... 详细信息

为探索p15 ink4b和p16ink4A基因在多发性骨髓瘤中的甲基化的表达 ,采用敏感的甲基化特异的MSp pCR测定方法 ,检测了 2 4例多发性骨髓瘤 (MM ) p15 ink4b和p16ink4A基因甲基化的情况。结果显示 ,MM中 p15 ink4b和 p16ink4A基因甲基化发生率分别为 70 .8% (17/ 2 4 )和 5 8.3% (14/2 4 ) ,产物分别为 148bp和 15 0bp的片段 ,其中 2例Ⅱ期和 2例Ⅲ期的有浆细胞瘤的MM患者发生 2个基因同时甲基化 ,有 5例 2个基因都没有发生甲基化。这 5例的瘤细胞均为分化较成熟的小浆细胞。结论提示 ,p15 ink4b和 p16ink4A基因甲基化在MM细胞中有一定的发生率。

关键词：多发性骨髓瘤甲基化 p15^ink4b 基因 p16^ink4A