亚砷酸诱导人食管癌细胞株EC109细胞p15^(INK4B)基因的表达
Expression of p15^(INK4B) gene induced by arsenic trioxide in esophageal cancer cell line EC109作者机构：哈尔滨医科大学附属二院消化科黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属四院消化科黑龙江省哈尔滨市150000 哈尔滨医科大学附属二院分子实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学附属二院计算机中心黑龙江省哈尔滨市150086
出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)
年 卷 期：2006年第14卷第19期
页 面：1859-1863页
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金：黑龙江省科技计划攻关重点项目基金资助 No.GB05C401-09 黑龙江省卫生厅科研基金资助项目 No.2004-117
摘 要：目的：研究亚砷酸(As_2O_3)对人食管癌EC109细胞株细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p15^(INK4B)(p15)基因表达的影响．方法：终浓度2μmol/L的As_2O_3加入食管癌EC109细胞系,采用甲基化特异PCR(MSP)检测食管癌EC109细胞系中p15基因甲基化,采用RT-PCR和Western blot方法检测As_2O_3处理前后p15的mRNA和蛋白质水平的表达情况．用Scion Image软件测量条带灰度值,P15蛋白与ACTB条带的灰度比进行半定量分析．结果：EC109细胞p15基因发生高甲基化,p15基因不表达．As_2O_3作用后p15基因甲基化程度明显下降,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(37．11±3．62,50．92±5．47,72．07±7．53 vs 97．23±9．80,P0．05)．As_2O_3作用24 h后出现p15 mRNA表达,随As_2O_3作用时间延p15 mRNA表达逐渐增强,各个时间组之间比较,除了未加药组和加药24 h组之间及加药24 h组和加药48 h组之间差异无统计学意义外,其余各个时间组之间差异有统计学意义(0．72±0．07 vs 0．58±0．06 vs 0．48±0．07 vs 0．41±0．08,P0．05)．As_2O_3作用24 h后P15蛋白出现表达,2μmol/L作用24-72 h中P15蛋白条带灰度逐渐增强,As_2O_3作用72,48,24 h组和未加药组之间差异均有统计学意义(0．51±0．02 vs 0．21±0．01 vs 0．16±0．02 vs 0．06±0．01,P0．05),说明其表达随As_2O_3作用时间延长而逐渐增强．结论：As_2O_3可使食管癌EC109细胞p15基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制细胞周期进程．
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