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红曲产品中monacolin k含量检测方法的比较

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食品工业 2024年第8期 255-258页

作者：吴滢滢陈鑫石昕芸王伟平湖北工业大学

monacolin k (Mk)是红曲发酵产物中常见的成分。虽然开发各种定量技术检测红曲产品中的Mk,但大多需要昂贵的设备和专门培训的人员。基于Mk与杂质在固定相上吸附能力的不同以及Mk在波长246 nm与254 nm吸光度差值ΔA,研究吸光度差值与Mk... 详细信息

monacolin k (Mk)是红曲发酵产物中常见的成分。虽然开发各种定量技术检测红曲产品中的Mk,但大多需要昂贵的设备和专门培训的人员。基于Mk与杂质在固定相上吸附能力的不同以及Mk在波长246 nm与254 nm吸光度差值ΔA,研究吸光度差值与Mk浓度的关系。以80%乙醇为红曲发酵液中Mk的提取剂,对比并探讨紫外单波长检测和样品采用层析处理前后紫外双波长检测对红曲样品中Mk测定的准确性,结果发现样品经层析分离处理后使用紫外双波长检测法检测红曲产品中Mk的方法准确性很高,相关系数0.925、回收率107.89%、精密度2.1%,方法最低检出限为29.5 mg/kg。在没有高效液相色谱的条件下可用于红曲样品中Mk的检测分析。

关键词：紫外分光光度法双波长红曲 monacolin k

Enhancement of monacolin k production via intergeneric protoplast fusion between Aspergillus terreus and Monascus anka

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Progress in Natural Science:Materials International 2007年第6期17卷 703-707页

作者： Chen Zhi, Lin Wen, Yu Ping and Song Yuan(Department of Microbiology, College of Biological Sciences, China Agricultural University, Beijing 100094, China) Department of Microbiology College of Biological Sciences China Agricultural University Beijing 100094 China

Intergenric protoplast fusion between Aspergillus terreus CA99 and Monascus anka M-3, the high and low producers of monacolin k respectively,was performed for enhancement of monacolin k production. The 24-hour-old mycelia of A. terreus CA99 and M. anka M-3 were treated with 0.5% lywallzyme, 0.3% snailase and 0.3% cellulase at 34℃ for 5 h and at 30℃ for 3.5 h, and their protoplasts formation reached 1.76×107/mL and 1.68×107/mL respectively. Parental protoplasts were irradiated with a 30 W UV light away from 30 cm for 3 min and then mixed. The mixture was incubated with 30% PEG 6000 for 15 min. The reviving fusants were isolated on the regeneration plates. Of the 363 fusants isolated, over 100 showed enhanced monacolin k production compared with the parental strain M. anka M-3. Ten of them produced monacolin k about 1.6-fold of that *** M-3 does and the monacolin k titer of two fusants (F49 and F104) increased by about 1-fold. The monacolin k yields of F49 and F104 were 460 μg/mL and 457 μg/mL respectively. In optimized fermentation medium, the monacolin k titer of F49 reached 1216 μg/mL.

关键词： monacolin k Monascus anka Aspergillus terreus protoplast fusion fermentation.

精氨酸等物质对紫色红曲菌产monacolin k及红曲色素的影响

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食品科学技术学报 2021年第1期39卷 96-103页

作者：朱倩倩张函王海蛟李颖慧焦梓石嘉辰王成涛张婵北京工商大学北京食品营养与人类健康高精尖创新中心北京100048 北京工商大学北京市食品添加剂工程技术研究中心北京100048

基于前期的非靶向代谢组学研究结果,在红曲菌发酵液原有营养成分的基础上添加精氨酸、L-苹果酸、D-葡萄糖、烟酰胺、α-酮戊二酸、苯丙氨酸、赖氨酸、焦磷酸硫胺素、黄素单核苷酸、L-乳酸等差异代谢物,对发酵第8天和第15天的红曲色素以... 详细信息

基于前期的非靶向代谢组学研究结果,在红曲菌发酵液原有营养成分的基础上添加精氨酸、L-苹果酸、D-葡萄糖、烟酰胺、α-酮戊二酸、苯丙氨酸、赖氨酸、焦磷酸硫胺素、黄素单核苷酸、L-乳酸等差异代谢物,对发酵第8天和第15天的红曲色素以及monacolin k的产量进行了分析。结果表明:精氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸以及黄素单核苷酸的添加对monacolin k产量的提高效果较好,推测氨基酸类物质的添加对monacolin k产量有促进效果;其中精氨酸添加后效果最为显著,monacolin k产量约为对照组的2.2~3.7倍。不同含量的烟酰胺对monacolin k有不同的影响,低含量具有促进作用;而高含量则表现为抑制作用。赖氨酸、苯丙氨酸以及黄素单核苷酸对红曲色素提升效果较好,其中黄素单核苷酸可使红曲色素产量约提高至对照组的1.5~3.0倍。

关键词：紫色红曲菌 monacolin k 红曲色素液态发酵精氨酸

红曲菌9901利用柚子囊固态发酵产monacolin k

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食品与发酵工业 2021年第15期47卷 142-149页

作者：刘晓宁钱高飞傅曼琼付杰戴海民张薄博江南大学生物工程学院江苏无锡214000 汕头大学理学院广东汕头515063 广东柚通柚美农产品技术研究有限公司广东梅州514000

以monacolin k为主要成分的功能性红曲日益受到健康产业的青睐。为了拓宽功能红曲的生产原料来源,降低生产成本,利用不同食品副产物进行红曲菌9901固态发酵产monacolin k的研究,进一步以合适的食品副产物柚子囊为发酵基质,进行了初始含... 详细信息

以monacolin k为主要成分的功能性红曲日益受到健康产业的青睐。为了拓宽功能红曲的生产原料来源,降低生产成本,利用不同食品副产物进行红曲菌9901固态发酵产monacolin k的研究,进一步以合适的食品副产物柚子囊为发酵基质,进行了初始含水量、接种量、外加碳源种类、乳糖添加量、发酵时间等单因素实验,在此基础上用Design-Expert方法进行响应面分析。适合红色红曲菌9901利用柚子囊固态发酵产monacolin k的条件为:初始含水量46.4%,接种量8.5%,乳糖添加量3.4%(质量分数),在30℃培养2 d后,变温到25℃培养至22 d,monacolin k产量可达6984.9 mg/kg。该研究通过红曲菌固态发酵的方式,充分利用柚子加工副产物生产高值化产品,具有重要的研究意义及实际应用潜力。

关键词：红曲菌 monacolin k 固态发酵柚子囊,高值化利用

乙酸钠、烟酸对红曲菌白色变种产monacolin k的影响

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微生物学通报 2021年第1期48卷 70-81页

作者：赵宽刘宇欣陆信曜诸葛斌宗红江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学生物工程学院工业微生物研究中心江苏无锡214122

【背景】红曲是由红曲菌寄生在大米发酵而成的一种食用米曲,含有胆固醇抑制剂monacolin k,但市售红曲中酸式monacolin k含量低且普遍呈红色,其应用存在局限性。红曲菌白色变种3001-18具有不产色素和桔霉素而高产酸式monacolin k的优点... 详细信息

【背景】红曲是由红曲菌寄生在大米发酵而成的一种食用米曲,含有胆固醇抑制剂monacolin k,但市售红曲中酸式monacolin k含量低且普遍呈红色,其应用存在局限性。红曲菌白色变种3001-18具有不产色素和桔霉素而高产酸式monacolin k的优点。【目的】研究微量营养物对红曲菌固态发酵monacolin k产量及酸式结构占比的作用,并分析其对相关基因表达的影响。【方法】将不同微量营养物添加到固态发酵培养基中以提高红曲菌生物量、monacolin k产量及酸式结构的含量,并对monacolin k合成相关基因进行分析。【结果】添加质量分数为0.1%的乙酸钠后红曲monacolin k总产量提高10.63%,可达17.90 mg/g;添加0.015%的烟酸后可以使红曲产品中monacolink酸式结构的比例由76.08%提升至90.51%;乙酸钠能促进monacolink合成相关基因mokA、mokB和mokC的表达,提高monacolin k产量;烟酸则通过上调mokF、mokH和mokI的表达,使酸式monacolin k迅速合成并外排且产物monacolin k中酸式结构占比提升。【结论】微量营养物能通过增加红曲菌monacolin k合成相关基因的表达量来促进其合成,为高产酸式monacolin k的研究提供了一定的理论依据。

关键词：微量营养物红曲菌固态发酵 monacolin k 相对转录水平

高产monacolin k的青稞功能红曲发酵工艺优化研究

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中国酿造 2021年第2期40卷 66-71页

作者：郝静涂兆鑫纪凤娣刘煜吴晶张成萍张建玲魏巍青海华实科技投资管理有限公司青海西宁810000 青海华实青稞生物科技开发有限公司青海西宁810000 青海省青稞资源综合利用工程技术研究中心青海西宁810000 北京市营养源研究所北京100069

选用青稞为原料,在固态发酵条件下,研究青稞接种从毛红曲霉(Monascus pilosus)后发酵过程中不同因素对monacolin k产量的影响。对不同培养基配方及发酵条件等进行单因素试验优化,并以发酵温度、接种量和初始pH值为影响因素,确定产Monaco... 详细信息

选用青稞为原料,在固态发酵条件下,研究青稞接种从毛红曲霉(Monascus pilosus)后发酵过程中不同因素对monacolin k产量的影响。对不同培养基配方及发酵条件等进行单因素试验优化,并以发酵温度、接种量和初始pH值为影响因素,确定产monacolin k的青稞功能红曲的最优发酵工艺条件。结果表明,以pH 4.0的水浸泡至无白心后蒸煮20 min的青稞米为基础培养基,添加0.6%蛋白胨、0.3%酵母提取物和0.3%磷酸二氢钾,装料量160 g/500 mL,接种10%从毛红曲菌液体菌种,变温发酵,32℃发酵2 d后降温至25℃发酵21 d。此优化条件下monacolin k产量可达1.52%。

关键词：从毛红曲菌青稞功能红曲 monacolin k 发酵工艺

不同基因型的稻米原料和红曲菌株制备高monacolin k红曲的研究

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不同基因型的稻米原料和红曲菌株制备高Monacolin K红曲的研究

作者：朱逸涵福建农林大学

学位级别：硕士

人体血液中胆固醇含量长期处于过高状态,易导致动脉粥样硬化(AS)等心脑血管疾病。1979年,日本学者远藤章教授发现红曲霉的次生代谢产物monacolin k具有显著的降胆固醇功效,可用于改善人类当前所面临的心脑血管疾病的困境,因此如何提高... 详细信息

人体血液中胆固醇含量长期处于过高状态,易导致动脉粥样硬化(AS)等心脑血管疾病。1979年,日本学者远藤章教授发现红曲霉的次生代谢产物monacolin k具有显著的降胆固醇功效,可用于改善人类当前所面临的心脑血管疾病的困境,因此如何提高红曲发酵产物中monacolink含量成为国内外众多专家、学者研究的热点。本文主要从三方面入手研究,以期提高红曲中monacolink含量,即筛选高产菌株、筛选优质稻米原料、优化发酵工艺;通过小鼠动物试验对本研究制备的红曲的降胆固醇功效进行研究。主要研究结果如下:1、高产monacolink红曲菌株的筛选:以40株红曲菌株为研究对象,采用固态发酵方式,以发酵产物中monacolin k含量作为指标,筛选出一株高产monacolin k的红曲菌株FG-2,其monacolin k含量为2.46mg/g,是模式菌株APS 002的2.29倍。将其ITS序列与GenBank数据库进行blastn比对分析,基本确定该菌株为紫红曲霉(MOnascus purpureus)。2、优质稻米原料的筛选:以紫红曲霉FG-2对26份稻米原料进行筛选,发现当以水稻“1a825”的精米为底物进行发酵时,产生的monacolink含量最高,可达3.61mg/g,为以市售大米为底物的2.70倍。同时,对FG-2以不同类型稻米为原料产monacolink的能力进行了比较,结果表明,以精米为原料(monacolin k平均产量1.00mg/g)优于糙米(0.42mg/g),以粘稻(0.98mg/g)为原料优于糯稻(0.39mg/g)。3、红曲菌株产monacolink最佳发酵工艺的确定:采用紫红曲霉FG-2为生产菌种,通过单因素优化和正交试验法确定出最佳发酵条件为:发酵前期温度为30℃,pH为5.0,装米量为40g,发酵时间为17d,最佳发酵条件下测得的monacolink含量为4.64mg/g,较优化前提高了28.5%,约为市售古田红曲米的8.30 倍。4、monacolink降胆固醇功效研究:以等量的不同种类的红曲喂食高脂血症小鼠,3周后取血,测定血清中总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)。结果表明,与高脂血症模型对照组(B)相比,古田红曲粉试验组(C)、自制红曲粉试验组(D)、血脂康药品试验组(E)的TC含量分别降低了29.5%、34.1%、37.0%。B组相对于其余各组存在着极显著差异(p0.05)。因此,在降胆固醇功效方面:“血脂康”药品>本研究制备的红曲>市售古田红曲米。

关键词：红曲霉稻米原料 monacolin k 降胆固醇发酵条件

红曲菌固态发酵高产monacolin k的研究

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红曲菌固态发酵高产Monacolin K的研究

作者：姜冰洁江南大学

学位级别：硕士

monacolin k是红曲菌主要的次级代谢产物之一,是降血脂和胆固醇的红曲产品(药物及保健品)中的关键活性物质。现行各种降脂红曲产品标准中,大米是唯一可允许使用的生产原料,但其发酵水平较低,一般只稳定在千分之几的水平。此外,生产企业... 详细信息

monacolin k是红曲菌主要的次级代谢产物之一,是降血脂和胆固醇的红曲产品(药物及保健品)中的关键活性物质。现行各种降脂红曲产品标准中,大米是唯一可允许使用的生产原料,但其发酵水平较低,一般只稳定在千分之几的水平。此外,生产企业普遍反应,在降脂红曲产品的贮存过程中,关键活性物质monacolin k含量会随着时间的延长大幅度下降。因此,为提高降脂红曲中monacolin k的发酵水平,并掌握该物质在贮存过程中的含量变化规律,本课题开展了发酵原料多样性的研究、产品贮存过程中含量变化规律的研究及由此所产生的产品标准问题的研究。以五种常用谷物原料和四种非谷物原料为固态发酵基质,对其产monacolin k的能力进行比较,筛选出颗粒度小、粘性较小的小米为最优发酵基质,其产量达到7.25 mg/g,约是传统发酵基质大米的1.5倍。其他几种谷物原料也都得到较高产量的monacolin k,而非谷物原料的monacolin k产量普遍较低。以小米为固态发酵基质,通过单因素实验确定了最佳的发酵时间、装料量、发酵初始含水量、接种量等发酵参数。以小米为原料生产的降脂红曲,其monacolin k的含量普遍稳定在1.1%以上,比以大米原料的产量提高了50%以上。在发酵基质中添加营养物质以提高monacolin k含量的研究:发现在固态发酵基础上添加20%甘油和3.5%大豆粉,可使产量提高到19.24 mg/g,比单纯小米为原料的monacolin k产量提高了近1.5倍。此外,对发酵产品进行检测,未检出桔霉素的存在,说明该发酵工艺是安全的。在小米固态发酵的优化结果的基础上,以农业副产物茶梗为原料进行发酵产monacolin k的研究,在装料量为30 g,甘油添加量为35%,大豆粉添加量4.5%的条件下,产量为7 mg/g左右,比优化前提高了近10倍。说明即使在非谷物的固态发酵基质上,添加营养物质对monacolin k的生物合成的作用十分明显。研究不同辐照强度及贮存时间对降脂红曲产品中monacolin k的含量及两种结构比例的影响。结果表明Co-60γ射线辐照强度在12 kGy范围内,辐照强度对monacolin k的含量和两种结构的比例均影响不大;随着贮存时间的延长,红曲产品中monacolin k的含量呈明显减少趋势,其中酸式结构比例减少,内酯式结构比例增加。并建立了线性回归拟合的方法,能够较为简单的计算出红曲产品中monacolin k的半衰期,为降脂红曲产品的贮存时间的确定提供实验依据。针对当前降脂红曲生产的一些特点及降脂红曲产品标准繁多且不统一的问题,本课题还对我国几种降脂红曲产品标准中的有关内容及指标进行了探讨。这些内容包括生产用红曲菌种的选择、发酵原料、产品中monacolin k的含量规定及检测方法的探讨、桔霉素的限定指标等。

关键词：红曲菌固态发酵 monacolin k 降脂红曲

含monacolin k功能性红曲的制备及应用研究

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含Monacolin K功能性红曲的制备及应用研究

作者：王龙湖北工业大学

学位级别：硕士

以收集自不同地域的11种红曲米为研究对象，挑选出monacolin k含量高，糖化、酯化能力强，含水量、酸度适中的红曲米。并从中分离筛选得到1株各项能力突出菌CG-3B，以其为出发菌进行紫外氯化锂复合诱变，得到高产Mk红曲菌株MB-3。进行... 详细信息

以收集自不同地域的11种红曲米为研究对象，挑选出monacolin k含量高，糖化、酯化能力强，含水量、酸度适中的红曲米。并从中分离筛选得到1株各项能力突出菌CG-3B，以其为出发菌进行紫外氯化锂复合诱变，得到高产Mk红曲菌株MB-3。进行固、液态纯种红曲制曲及功能性红曲酒酿造工艺研究，并对其功能性及稳定性进行分析，结果如下： 1）菌种的分离筛选：收集不同地域红曲米并测定其理化指标（含水量、色价、糖化力、酯化力），采用高效液相色谱法（HPLC）测定红曲米中monacolin k的含量。以Mk的含量为首要筛选指标，辅以糖化力、色价等因素，筛选出一株红曲菌CG-3B，其各项指标分别为：含水量11.32%，色价为1280.20u/g，糖化力为644.15mg/g h，酯化力为246.57mg/100mL，Mk含量为1.237mg/g。 2）紫外氯化锂复合诱变：以CG-3B为出发菌，进行紫外线敏感性研究，结果表明20cm、15W，紫外照射90s时其致死率达92.3%，故选取90s为最佳照射时间。将经紫外处理后的红曲孢子均匀涂布于含氯化锂的平板上，当氯化锂浓度为0.8‰时，其致死率达86.7%。经多次复合诱变筛选，得到一株高产Mk菌株MB-3，其Mk产量比出发菌提高了49.23%，达1.846mg/g。 3）制曲工艺研究与优化：以MB-3为菌种制备固态及液态红曲，分别发酵酿造红曲酒，其中固态曲发酵酒Mk含量为37.86mg/L，液态曲发酵酒Mk含量为18.72mg/L，故选择固态红曲为最佳酿造用曲。以MB-3为菌种，大米终含水量、制曲温度、初始pH值及制曲时间为变量设计实验，结果以高产Mk为首要筛选指标，得到最佳固态纯种制曲工艺：大米终含水量40%、30℃5d转23℃9d、pH4.0、发酵14d，Mk产量为：2.174mg/g。 4）酿造工艺研究与优化：优化传统黄酒酿造操作，并以糖化条件、黄酒酵母添加量、添加的红曲制曲方式及添加时间为变量设计实验优化其酿造工艺，结果以酒体色泽、口感、Mk含量为筛选指标，得到最佳酿造工艺：按1:1的料水比，添加0.07mL耐高温α-淀粉酶和0.05mL糖化酶糖化180min，以2‰的比例添加黄酒酵母和15g固态红曲，调节料水比发酵产酒17d后压榨过滤，红曲酒Mk含量为56.68mg/L。

关键词：红曲霉 monacolin k 纯种制曲红曲酒