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珠子参总皂苷上调miR-216a抑制人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞损伤

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中国临床解剖学杂志 2022年第6期40卷 689-695页

作者：高山庞婕李占结李晨希尚庆毅连云港第一人民医院药学部江苏连云港222006 江苏省人民医院感染科南京210036 徐州医科大学医学技术学院江苏徐州221004 连云港市赣榆区人民医院检验科江苏连云港222199

目的探讨珠子参总皂苷对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(MRC-5)炎症反应、凋亡的影响及其对miR-216a的调控作用。方法采用HCMV感染MRC-5细胞建立病毒感染模型,不同浓度(100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL)的珠子参总皂苷处理细... 详细信息

目的探讨珠子参总皂苷对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(MRC-5)炎症反应、凋亡的影响及其对miR-216a的调控作用。方法采用HCMV感染MRC-5细胞建立病毒感染模型,不同浓度(100μg/mL、200μg/mL、400μg/mL)的珠子参总皂苷处理细胞,分别将mir-NC、miR-216a mimics转染至HCMV感染的MRC-5细胞,分别将anti-mir-NC、anti-miR-216a转染至HCMV感染的MRC-5细胞后加入珠子参总皂苷处理细胞;采用ELISA法检测TNF-α、IL-6水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,qRT-PCR法检测miR-216a表达量。结果珠子参总皂苷可降低HCMV感染的MRC-5细胞凋亡率及TNF-α、IL-6的水平(PmiR-216a的表达水平升高(PmiR-216a mimics可降低凋亡率及TNF-α、IL-6的水平(PmiR-216a可降低珠子参总皂苷对HCMV感染的MRC-5细胞炎症反应及凋亡的作用。结论珠子参总皂苷可通过上调miR-216a的表达而抑制炎症反应及细胞凋亡从而减轻HCMV感染的MRC-5细胞损伤。

关键词：珠子参总皂苷 miR-216a 人巨细胞病毒人胚肺成纤维细胞凋亡炎症

LncRNA-MEG3竞争性结合miR-216a调控KLF9介导血管通透性减缓重症急性胰腺炎肾脏损伤的机制

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中国老年学杂志 2023年第12期43卷 2997-3001页

作者：颜秀侠李博文吴国柱韩若东安徽医科大学附属亳州医院重症医学科安徽亳州236800

目的研究LncRNA-MEG3竞争性结合miR-216a调控Kruppel样转录因子(KLF)9介导血管通透性减缓重症急性胰腺炎肾脏损伤的机制。方法选取SD大鼠20只,鼠龄8~12 w,体质量225~312 g,随机分为假手术组与模型组,每组10只。肾上皮细胞实验分为肾损伤... 详细信息

目的研究LncRNA-MEG3竞争性结合miR-216a调控Kruppel样转录因子(KLF)9介导血管通透性减缓重症急性胰腺炎肾脏损伤的机制。方法选取SD大鼠20只,鼠龄8~12 w,体质量225~312 g,随机分为假手术组与模型组,每组10只。肾上皮细胞实验分为肾损伤组(未转染MEG3)、对照组(转染不相关序列)、转染组(转染MEG3)。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾组织病理形态;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织及肾上皮细胞中LncRNA-MEG3、miR-216a、KLF9水平;流式细胞仪检测肾上皮细胞凋亡情况;Western印迹法检测肾上皮细胞中核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白水平;双荧光素酶报告检测LncRNA-MEG3与miR-216a相关性。结果假手术组肾小球结构完整,无明显炎症浸润,模型组肾小球有所损伤,有炎性细胞浸润,可见重症急性胰腺炎肾损伤大鼠模型建立成功。与假手术组肾脏血管通透性(151.22±23.14)μg/g相比,模型组肾血管通透性(376.27±43.14)μg/g明显升高(t=14.54,PmiR-216a表达明显降低(PmiR-216a水平无明显统计学差异(P>0.05),在经过转染LncRNA-MEG3后LncRNA-MEG3、KLF9水平较肾损伤组和对照组明显下降,miR-216a水平明显上升(PmiR-216a活性明显增加(PmiR-216a活性无明显变化(P>0.05),表明miR-216a是MEG3的靶基因。结论LncRNA-MEG3通过调控miR-216a的表达,抑制KLF9活性,降低炎症因子的水平及肾上皮细胞的凋亡,对肾保护作用。

关键词： LncRNA-MEG3 miR-216a Kruppel样转录因子(KLF)9 重症急性胰腺炎肾脏损伤

miR-216a调控NF-κB信号通路参与脓毒症急性肾损伤的机制

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实用医学杂志 2022年第17期38卷 2133-2137页

作者：邓林林张啸高仪龚园其蓝海兵南昌大学第二附属医院重症医学科南昌330000

目的探讨miR-216a通过NF-κB信号通路对脓毒症大鼠急性肾损伤的作用机制。方法选取SD大鼠40只,采用盲肠结扎穿孔法进行造模,随机分为假手术组、模型组、mir-NC组、miR-216a组,各组10只。观察肾脏病理形态学变化;采用RT-PCR检测各组大鼠... 详细信息

目的探讨miR-216a通过NF-κB信号通路对脓毒症大鼠急性肾损伤的作用机制。方法选取SD大鼠40只,采用盲肠结扎穿孔法进行造模,随机分为假手术组、模型组、mir-NC组、miR-216a组,各组10只。观察肾脏病理形态学变化;采用RT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-216a表达情况;采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中生化指标水平;采用ELISA法检测各组大鼠炎症因子水平;采用Western blot检测鼠NF-κB通路相关蛋白表达。结果假手术组大鼠肾组织结构无异常;模型组和mir-NC组肾组织伴有炎性浸润、肾间质加宽;miR-216a组炎性浸润现象以及肾小球病变情况有所缓解;与假手术组相比,模型组、mir-NC组肾组织miR-216a表达水平较低,与mir-NC组相比,miR-216a组肾组织的miR-216a表达水平较高(Pmir-NC组大鼠血清Scr、BUN、KIM-1水平较高,与mir-NC组相比miR-216a组大鼠血清Scr、BUN、KIM-1水平较低(Pmir-NC组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平较高,与mir-NC组相比miR-216a组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平较低(Pmir-NC组大鼠肾组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65表达较高,与mir-NC组相比miR-216a组大鼠肾组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65表达较低(PmiR-216a过表达可以降低脓毒症大鼠炎症水平,改善肾损伤,可能是通过调控NF-κB信号通路实现的。

关键词： miR-216a NF-κB信号通路脓毒症急性肾损伤

miR-216a通过调控DNMT1减轻慢性阻塞性肺疾病小鼠肺血管内皮细胞凋亡

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MiR-216a通过调控DNMT1减轻慢性阻塞性肺疾病小鼠肺血管内皮细胞...

作者：林铃中南大学

学位级别：硕士

目的:慢性阻塞性肺疾病,简称慢阻肺,是一种常见的慢性呼吸系统疾病。吸烟是慢阻肺常见的关键危险因素,吸烟诱导的肺血管内皮细胞凋亡是导致慢阻肺发生的重要机制之一。本研究对慢阻肺模型小鼠和对照组小鼠肺组织进行微阵列基因芯片分析... 详细信息

目的:慢性阻塞性肺疾病,简称慢阻肺,是一种常见的慢性呼吸系统疾病。吸烟是慢阻肺常见的关键危险因素,吸烟诱导的肺血管内皮细胞凋亡是导致慢阻肺发生的重要机制之一。本研究对慢阻肺模型小鼠和对照组小鼠肺组织进行微阵列基因芯片分析,发现miR-216a在慢阻肺小鼠肺组织中表达降低。然而miR-216a是否参与慢阻肺的发生发展尚未有报道。因此本研究旨在探讨:(1)验证香烟烟雾暴露联合腹腔注射香烟烟雾提取物(CSE)诱导的慢阻肺模型小鼠肺组织中miR-216a以及DNMT1的表达情况;(2)探索miR-216a能否通过调控DNMT1减轻CSE诱导的小鼠肺血管内皮细胞凋亡。方法:(1)利用香烟烟雾暴露联合腹腔注射CSE的方法构建慢阻肺小鼠模型;通过HE染色检测小鼠肺气肿情况,TUNEL染色检测小鼠肺组织细胞凋亡的情况。采用qRT-PCR检测小鼠肺组织中miR-216a的表达,Western blot检测小鼠肺组织DNMT1与凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及Cleaved caspase-3的表达;(2)提取原代小鼠肺血管内皮细胞(MPVECs)并培养,通过流式细胞术检测不同浓度(0、1%、2%、4%)CSE溶液干预的MPVECs凋亡率,同时检测miR-216a的表达;将miR-216a mimic转染至MPVECs并给予2%CSE干预24h后,检测MPVECs的凋亡率、miR-216a的表达以及DNMT1、Bax、Bcl-2及Cleaved caspase-3的蛋白表达水平。通过双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-216a是否与DNMT13’UTR直接结合。以慢病毒为载体过表达DNMT1的Lenti-DNMT1以及miR-216a mimic同时转染至MPVECs中,随后给予2%CSE干预24h,检测DNMT1、Bax、Bcl-2及Cleaved caspase-3的蛋白表达水平。结果:(1)与对照组小鼠相比,慢阻肺小鼠肺组织出现明显的肺气肿病理改变;同时慢阻肺小鼠肺组织细胞凋亡程度明显增加;慢阻肺小鼠肺组织miR-216a表达降低而DNMT1表达明显增加。(2)MPVECs的细胞凋亡率随着CSE浓度的增加而逐渐增加;miR-216a的表达水平在CSE应激的MPVECs中明显下降,而DNMT1的表达增加;过表达mir-216能够减轻CSE诱导的MPVECs凋亡,并且降低DNMT1、Bax及Cleaved caspase-3的表达,增加Bcl-2的表达。双荧光素酶报告基因检测实验证实了miR-216a能够与DNMT1的3’UTR直接结合;此外,过表达DNMT1能够逆转miR-216a在CSE诱导的MPVECs的抗凋亡作用,增加Bax及Cleaved caspase-3的表达,且降低Bcl-2的表达。结论:miR-216a可能通过调控DNMT1的表达减轻慢阻肺小鼠肺血管内皮细胞凋亡。表3个,图12个,参考文献66篇

关键词：慢性阻塞性肺疾病 miR-216a DNMT1 小鼠肺血管内皮细胞凋亡

miR-216a在胰腺癌组织中的表达及临床意义

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南方医科大学学报 2012年第11期32卷 1628-1631页

作者：侯宝华简志祥崔鹏陈斯聪区应亮李少杰区金锐广东省人民医院//广东省医学科学院普外一科广东广州510080

目的分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-216a的表达差异,探讨miR-216a在胰腺癌中表达的临床意义及潜在应用价值。方法收集14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照。采用Agilent人microRNA寡核苷酸基因芯片(V1... 详细信息

目的分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-216a的表达差异,探讨miR-216a在胰腺癌中表达的临床意义及潜在应用价值。方法收集14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照。采用Agilent人microRNA寡核苷酸基因芯片(V12.0)在基因组范围内检测20例组织标本的miR-216a表达,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果胰腺癌组织中miR-216a的表达显著低于胰腺良性病变组织(P=0.000),miR-216a在胰腺癌组织中的表达与患者年龄、性别、吸烟、临床分期、局部淋巴结转移,远处转移、CA19-9浓度、肿瘤分化程度、神经束膜侵犯、脉管侵犯均无相关性(P>0.05),而与肿瘤T分期具有显著统计学意义(P=0.002)。结论 miR-216a在胰腺癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,检测miR-216a有望成为胰腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。

关键词：胰腺癌 miR-216a 临床病理特征

miR-216a、mir-301a调控BMPR2促进缺氧环境下肺动脉平滑肌细胞的增殖

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江苏大学学报（医学版） 2022年第3期32卷 194-199,218页

作者：林潇郑炜平李鸿茹陈愉生周梦福建省立医院老年科福建福州350001 福建省立医院呼吸与危重症医学科福建福州350001 福建省立医院风湿免疫科福建福州350001

目的:探讨miR-216a、mir-301a对缺氧环境下人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary arterial smooth muscle cells,HPASMC)增殖的影响并研究其发生机制。方法:采用CCK8法检测常氧和不同缺氧时间培养下HPASMC的增殖活力,qRT-PCR检测各组mir-... 详细信息

目的:探讨miR-216a、mir-301a对缺氧环境下人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary arterial smooth muscle cells,HPASMC)增殖的影响并研究其发生机制。方法:采用CCK8法检测常氧和不同缺氧时间培养下HPASMC的增殖活力,qRT-PCR检测各组miR-216a、mir-301a和骨形成蛋白2型受体(bone morphogenetic protein receptor type 2,BMPR2)mRNA表达。CCK8和蛋白免疫印迹法分别检测转染了miR-216a或mir-301a抑制物后HPASMC的增殖能力及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达水平。双荧光素酶报告分别检测BMPR2与miR-216a、BMPR2与mir-301a之间的关系。CCK8和蛋白免疫印迹法分别检测同时转染miR-216a或mir-301a联合BMPR2过表达质粒后HPASMC的增殖能力及BMPR2、PCNA的表达水平。结果:随着缺氧时间的延长,HPASMC的增殖活力和miR-216a表达增加,BMPR2 mRNA表达逐渐下降,mir-301a在缺氧24 h表达水平最高。下调miR-216a和mir-301a均显著抑制HPASMC的增殖活力及PCNA表达。双荧光素酶报告测定证实BMPR2分别是miR-216a和mir-301a的靶点。同时转染miR-216a或mir-301a联合BMPR2过表达质粒,BMPR2表达下降,细胞增殖活力及PCNA表达增加。结论:缺氧环境下,miR-216a、mir-301a通过抑制BMPR2促进HPASMC增殖,引发肺动脉高压的形成。

关键词： miR-216a mir-301a 肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞骨形成蛋白2型受体

miR-216a对重症急性胰腺炎腺泡损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1 通路的影响

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肝胆外科杂志 2023年第1期31卷 57-61页

作者：薛冰赵春艳郭中霞王志兵河南省商丘市第一人民医院急诊重症科商丘476000

目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-mir-NC组、anti-miR-216a组、Sch+mir-NC组、Sch+miR-216a组.Con组不做任何处理,其余各组采用雨蛙肽(10 nmol/L)联合脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)(10 mg/L)处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建SAP细胞模型,anti-mir-NC组、anti-miR-216a组、Sch+mir-NC组、Sch+miR-216a组分别转染anti-mir-NC、anti-miR-216a、mir-NC、miR-216a mimics.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中miR-216a及P2X7、NLRP3、caspase-1 mRNA相对表达量;Western blot法检测各组细胞中P2X7、NLRP3、Caspase-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cellymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific protease-3,Cleaved caspase-3)蛋白表达情况.结果各组细胞中IL-6、TNF-α含量比较,Con组miR-216a组mir-NC组/Sch+mir-NC组miR-216a组,差异有统计学意义(PmiR-216a组mir-NC组/Sch+mir-NC组miR-216a组,差异有统计学意义(PmiR-216a组mir-NC组/Sch+mir-NC组miR-216a组miR-216a和P2X7、NLRP3、Caspase-1 mRNA及其蛋白相对表达量比较,Con组miR-216a组mir-NC组/Sch+mir-NC组miR-216a组,差异有统计学意义(PmiR-216a可通过抑制P2X7-NLRP3/caspase-1信号通路减轻SAP腺泡细胞炎症,并诱导细胞凋亡,从而减轻SAP腺泡损伤.

关键词：重症急性胰腺炎(SAP) 腺泡细胞损伤 miR-216a P2X7-NLRP3/caspase-1通路

miR-216a调控气道炎症参与慢性阻塞性肺疾病进展的机制研究

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宁夏医学杂志 2022年第4期44卷 308-311页

作者：贺霞王铎陈瑶宁夏吴忠市人民医院老年病科宁夏吴忠751100

目的探讨microRNA-216a(miR-216a)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用及潜在机制。方法收集具有吸烟史的COPD患者、非吸烟者及非COPD的吸烟者作为研究对象,收集所有患者手术切除期间肺组织,检测miR-216a在各组患者肺中的表达,生... 详细信息

目的探讨microRNA-216a(miR-216a)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)气道炎症中的作用及潜在机制。方法收集具有吸烟史的COPD患者、非吸烟者及非COPD的吸烟者作为研究对象,收集所有患者手术切除期间肺组织,检测miR-216a在各组患者肺中的表达,生物信息学分析miR-216a与溴结构域蛋白4(BRD4)的靶向关系,并在人支气管上皮(HBE)细胞系HBE4-E6/E7中进行验证。检测BRD4、白细胞介素-8(IL-8)和IL-6在肺中的表达。使用CSE诱导模型系统研究miR-216a在气道上皮细胞炎性细胞因子表达中的作用。结果COPD患者肺中miR-216a表达水平较其他2组均显著降低(qRT-PCR 0.41±0.13;荧光原位杂交0.91±0.37),miR-216a表达水平与肺功能(r=0.4882,PmiR-216a和IL-8表达相关。CSE诱导可显著降低miR-216a的表达,并增加BRD4表达;转染miR-216a模拟物抑制CSE诱导的BRD4上调,同时CSE诱导的BRD4表达被miR-216a模拟物和(或)BRD4 siRNA的转染抑制。CSE处理后IL-8表达增加,并且BRD4表达的降低或miR-216a的过表达而抑制CSE诱导的IL-8表达,而IL-6无上述现象。结论miR-216a通过靶向BRD4调节表达而参与COPD气道炎症。

关键词： miR-216a 气道炎症慢性阻塞性肺疾病澳结构域蛋白4

LncRNA DANCR通过负调控miR-216a表达参与牙周膜干细胞成骨分化和迁移

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临床口腔医学杂志 2024年第1期40卷 3-7页

作者：任燕张雪白静李月辉唐山市丰润区人民医院河北唐山064000 唐山市中心医院河北唐山063000 开滦(集团)有限责任公司唐家庄医院河北唐山063100

目的:探究长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码RNA(lncRNA DANCR)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化和迁移的影响及其潜在机制。方法:采用Western blot方法检测成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phos... 详细信息

目的:探究长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码RNA(lncRNA DANCR)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化和迁移的影响及其潜在机制。方法:采用Western blot方法检测成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)的蛋白表达。qRT-PCR检测miR-216a-5p和DANCR的相对表达水平。miR-216a-5p和DANCR之间的关系通过荧光素酶报告基因、RNA免疫沉淀进行评估。Transwell实验检测细胞迁移能力。结果:hPDLSCs被成骨分化诱导培养基刺激后,DANCR表达降低而miR-216a-5p表达升高。DANCR过表达或者miR-216a-5p敲低均降低了hPDLSCs中ALP、OCN和RUNX2的蛋白表达,并且抑制了ALP活性和细胞迁移能力。DANCR与miR-216a-5p存在靶向关系。结论:DANCR可通过调控miR-216a表达参与hPDLSCs成骨分化和迁移。

关键词：牙周炎 LncRNA DANCR miR-216a 牙周膜细胞