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An elevated serum mir-141 level in patients with bone-metastatic prostate cancer is correlated with more bone lesions

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Asian Journal of Andrology 2013年第2期15卷 231-235,I0007页

作者： Hai-Liang Zhang Xiao-Jian Qin Da-Long Cao Yao Zhu Xu-Dong Yao Shi-Lin Zhang Bo Dai Ding-Wei Ye Department of Urology Fudan University Shanghai Cancer Center Shanghai 200032 China

The skeleton is the most common metastatic organ in patients with prostate cancer （PCa）. Non-invasive biomarkers that can facilitate the detection and monitoring of bone metastases are highly desirable. We designed this study to assess the expression patterns of serum mir-141 in patients with bone-metastatic PCa. Serum samples were collected to measure the mir-141 level in 56 patients, including six with benign prostatic hyperplasia （BPH）, 20 with localized PCa and 30 with bone-metastatic PCa （10 with hormone-naive PCa, 10 with hormone-sensitive PCa and 10 with hormone-refractory PCa）. A bone scan was performed for each patient with PCa to assess the number of bone lesions. The quantification of serum mir-141 levels was assayed by specific TaqMan qRT-PCR. The results showed that serum mir-141 levels were elevated in patients with bone metastasis （P〈O.O01）. There was no statistically significant difference in the serum mir-141 levels between patients with BPH and patients with localized PCa. Using Kendall＇s bivariate correlation test, both the Gleason score and the number of bone-metastatic lesions were found to correlate with serum mir-141 levels （P=0.012 and P〈O.O01, respectively）. The serum mir-141 level was found to be positively correlated with alkaline phosphatase （ALP） level in patients with skeletal metastasis, using Pearson＇s bivariate correlation test. No relationship was found between the serum mir-141 level and the serum prostate-specific antigen （PSA） level. We concluded that serum mir-141 levels are elevated in patients with bone-metastatic PCa and that patients with higher levels of serum mir-141 developed more bone lesions. Furthermore, serum mir-141 levels are correlated with serum ALP levels but not serum PSA levels.

关键词： alkaline phosphatase (ALP) biological markers bones metastasis microRNAs mir-141 prostate-specific antigen(PSA) prostatic neoplasms serum

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mir-141的过表达抑制MHCC-97H肝癌细胞的增殖和侵袭迁移

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第8期32卷 1083-1087,1093页

作者：姚博文薛雨墨刘志奎徐蒙涂康生王军西安交通大学第一附属医院肝胆外科陕西西安710061 西安交通大学第一附属医院急诊科陕西西安710061

目的观察肝细胞癌组织中mir-141的表达水平,通过上调MHCC-97H肝癌细胞中mir-141的水平观察对MHCC-97H细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法实时定量PCR检测mir-141在肝癌及癌旁组织中的表达水平,并分析mir-141表达水平与临床病理指标的关... 详细信息

目的观察肝细胞癌组织中mir-141的表达水平,通过上调MHCC-97H肝癌细胞中mir-141的水平观察对MHCC-97H细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法实时定量PCR检测mir-141在肝癌及癌旁组织中的表达水平,并分析mir-141表达水平与临床病理指标的关系及生存率。利用人工合成的mir-141模拟物,瞬时转染MHCC-97H细胞。MTT法检测MHCC-97H细胞的增殖,TranswellTM实验检测MHCC-97H细胞的侵袭及迁移,Westernblot法及免疫组织化学检测mir-141下游潜在靶点肝细胞产生的促红素受体A2(EphA2)的表达。结果mir-141在肝癌组织中表达水平显著低于相应癌旁组织;肝癌组织中mir-141低表达与TNM分期、门静脉侵犯及Edmondson分级显著相关;低表达mir-141患者3年生存率明显低于高表达组;mir-141模拟物转染可上调MHCC-97H细胞mir-141水平,上调mir-141可显著抑制MHCC-97H细胞的增殖、侵袭及迁移,并下调EphA2的蛋白水平;mir-141低表达组EphA2蛋白水平明显高于mir-141高表达组,相关性分析显示肝癌组织中mir-141与EphA2蛋白表达呈显著负相关。结论mir-141在肝癌组织中表达下调且与EphA2表达呈显著负相关,其低表达与肝癌恶性临床病理特征有关,上调mir-141表达可抑制EphA2的表达抑制肝癌细胞增殖、侵袭及迁移能力。

关键词： mir-141 肝细胞癌增殖侵袭迁移肝细胞产生的促红素受体A2(EphA2)

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mir-141与2型糖尿病大鼠血糖水平的关系及其作用机制研究

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中国糖尿病杂志 2020年第2期28卷 133-139页

作者：陈文文白春英谢小超赵慧青岛市中医医院内分泌科 266000

目的探讨mir-141与T2DM大鼠血糖水平关系及其对蛋白激酶B(Akt)/AMP依赖的蛋白激酶α(AMPKα)通路和炎症因子释放的影响.方法将SD大鼠随机分为对照组(Con)、糖尿病组(DM)、糖尿病+mir-141抑制剂组[mir-141(-)]及糖尿病+mir-141模拟物组[m... 详细信息

目的探讨mir-141与T2DM大鼠血糖水平关系及其对蛋白激酶B(Akt)/AMP依赖的蛋白激酶α(AMPKα)通路和炎症因子释放的影响.方法将SD大鼠随机分为对照组(Con)、糖尿病组(DM)、糖尿病+mir-141抑制剂组[mir-141(-)]及糖尿病+mir-141模拟物组[mir-141(+)].RT-PCR检测IRS2、mir-141、核因子κB p65(NF-κBp65)表达,Western blot检测Akt/AMPKα蛋白表达.结果与DM组比较,mir-141(-)组各时间点血糖水平、FPG、TNF-α、IL-1β及高级氧化蛋白产物(AOPPs)降低,mir-141(+)组上述指标升高(Pmir-141(-)组胰岛细胞凋亡降低,mir-141(+)组升高(Pmir-141(-)组mir-141、NF-κBp65 mRNA、NF-κBp65蛋白表达降低(Pmir-141(+)组NF-κBp65蛋白表达升高(Pmir-141高表达导致T2DM大鼠血糖水平升高、IRS2降低,其作用机制可能与Akt/AMPKα通路蛋白磷酸化被抑制进而导致的炎症反应有关.

关键词：糖尿病,2型 mir-141 蛋白激酶B/AMP依赖的蛋白激酶a IRS2 血糖

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基于Keap1-Nrf2/HO-1信号通路探讨mir-141对大鼠脑缺血再灌注后的炎症反应及保护神经元功能的研究

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免疫学杂志 2023年第8期39卷 681-688页

作者：罗贤亮郭昌贵姚发元陈禹彤陈万琼付雨桐昭通市中医医院神经内科 657000 云南省区域中医(脑病)诊疗中心昭通657000 昆明医科大学第二附属医院康复医学科 650101 昭通市第一人民医院 657000

目的探究mir-141靶向KELCH样ECH关联蛋白-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Keap1-Nrf2/HO-1)信号通路调控脑缺血再灌注(IR)后的炎症反应及保护神经元功能的作用机制。方法60只大鼠随机分为sham组、IR组、agomirNC组、mir-141组;agomir... 详细信息

目的探究mir-141靶向KELCH样ECH关联蛋白-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1(Keap1-Nrf2/HO-1)信号通路调控脑缺血再灌注(IR)后的炎症反应及保护神经元功能的作用机制。方法60只大鼠随机分为sham组、IR组、agomirNC组、mir-141组;agomir-NC组、mir-141组大鼠侧脑室注射agomir NC、mir-141 agomir,sham组、IR组注射等体积生理盐水。用大脑中动脉栓塞(MCAO)构建IR模型,sham组只插线不结扎。72 h后行神经功能学评分;TTC染色、TUNEL染色检测脑梗死体积和细胞凋亡;ELISA法、qRT-PCR、Western blot检测IL-1β、IL-6、TNF-α、mir-141、Keap1、Nrf2、HO-1、NLRP3水平。同时将体外培养并转染的小胶质细胞BV-2分为control组、OGD组、agomir-NC组、mir-141组、mir-141+pcDNA3.1-NC组、mir-141+Keap1组;糖氧剥夺(OGD)法建立IR细胞模型。TargetScanHuman预测及双荧光素酶报告验证mir-141对Keap1的靶向调控关系;MTT法、AnnexinV-FITC/PI双染法测定BV-2细胞增殖、凋亡能力;再次应用ELISA法、qRT-PCR、Western blot检测白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、TNF-α、mir-141、Keap1、Nrf2、HO-1、NLRP3水平。结果过表达mir-141可促进IR大鼠神经功能恢复,减少脑梗死体积和细胞凋亡,降低IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3水平,升高Nrf2、HO-1水平。BV-2细胞中mir-141能够负向调控Keap1表达,过表达mir-141抑制Keap1-Nrf2/HO-1信号通路,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,并下调IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3的表达。结论mir-141能够靶向调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路,减轻IR的炎症反应,限制小胶质细胞激活,保护神经元。

关键词： mir-141 脑缺血再灌注 KELCH样ECH关联蛋白1-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1 炎症反应神经元保护

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mir-141增强人血管内皮细胞增殖及迁移能力

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基础医学与临床 2010年第8期30卷 801-806页

作者：刘大全李东华刘洪斌天津市南开医院中西医结合急腹症研究所天津300100

目的研究microRNA对血管内皮细胞增殖及迁移能力的影响,以阐明microRNA在血管新生过程中发挥作用的分子机制。方法用microRNA的反义寡核苷酸序列封闭microRNA的功能后,用四甲基氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)进行筛查,分析血管内皮细胞增... 详细信息

目的研究microRNA对血管内皮细胞增殖及迁移能力的影响,以阐明microRNA在血管新生过程中发挥作用的分子机制。方法用microRNA的反义寡核苷酸序列封闭microRNA的功能后,用四甲基氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)进行筛查,分析血管内皮细胞增殖活性。随后封闭或过表达这些microRNA,用MTT、集落形成和迁移实验检测细胞的增殖和迁移能力。结果有7种microRNAs对血管内皮细胞的生长有促进作用。其中封闭mir-141的功能后,细胞生长受抑制最明显,且集落形成能力和细胞迁移能力也明显下降。相反,过表达mir-141后,细胞增殖和迁移能力明显增强。结论 mir-141能够增强血管内皮细胞的增殖和迁移能力,起到促进血管新生的作用。

关键词： microRNA mir-141 血管内皮细胞血管新生

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mir-141过表达增强人食管癌细胞的放射敏感性

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中华放射医学与防护杂志 2016年第12期36卷 893-897页

作者：张斌刘冬梅马艳会郜娜贺春雨赵秀莉张景伟郑州大学附属肿瘤医院药学部 450003 郑州大学附属肿瘤医院放疗科 450003

目的研究mir-141对食管癌细胞放射敏感性的影响及可能的作用机制。方法将mir-141 mimic或mir-对照转染到食管癌KYSE-150细胞中，分别使用qRT-PCR和Western blot技术检测mir-141和增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。CC... 详细信息

目的研究mir-141对食管癌细胞放射敏感性的影响及可能的作用机制。方法将mir-141 mimic或mir-对照转染到食管癌KYSE-150细胞中，分别使用qRT-PCR和Western blot技术检测mir-141和增殖相关蛋白Ki67、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达。CCK-8，流式细胞术及克隆形成实验检测放射处理后细胞的放射敏感性变化。结果随放射剂量的增加，食管癌细胞中mir-141表达逐渐降低（t=2.57~8.96，P〈0.05）。mir-141过表达抑制了细胞的增殖和克隆形成能力，促进了KYSE-150细胞凋亡，使得放射敏感性增高（t=3.24，P〈0.05）。此外，与对照组相比，mir-141过表达显著抑制KYSE-150细胞中的Ki67和Bcl-2蛋白表达（t=6.56、8.24，P〈0.01），并促进Bax蛋白表达（t=3.24，P〈0.01），进一步证实了mir-141增强食管癌细胞的放射敏感性。结论 mir-141通过调控细胞增殖和凋亡相关蛋白表达增强食管癌细胞的放射敏感性。

关键词： mir-141 食管癌 KYSE-150细胞放射敏感性

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mir-141在老年骨质疏松中的表达特点及作用机制

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中国老年学杂志 2023年第22期43卷 5572-5575页

作者：高方茂张杰荣熊时喜田晓林林超三亚市中医院骨一科海南三亚572000

目的探讨微小RNA(mir)-141在老年骨质疏松中的表达特点及作用机制。方法采集老年骨质疏松患者80例、骨量正常的老年志愿者45例的血清标本,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测mir-141表达水平。筛选mir-141的下游靶点,使用脂质体200... 详细信息

目的探讨微小RNA(mir)-141在老年骨质疏松中的表达特点及作用机制。方法采集老年骨质疏松患者80例、骨量正常的老年志愿者45例的血清标本,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测mir-141表达水平。筛选mir-141的下游靶点,使用脂质体2000向人骨髓间充质干细胞中转染mir-141 inhibitor、mir-141 mimics,检测蛋白酪氨酸磷酸酶(PTEN)、蛋白激酶B(AKT)及AKT下游潜在基因表达水平。成骨诱导培养人骨髓间充质干细胞后进行茜素红染色,Western印迹检测Runt相关转录因子(Runx)2、骨钙素(OCN)蛋白表达水平。结果骨质疏松组血清mir-141表达水平明显高于骨量正常组(PmirNA靶基因预测数据库预测出靶基因15个,对这些靶基因进行KEGG富集分析并结合基因功能注释和查阅相关文献,推测PTEN基因可能是mir-141的潜在靶点。mir-141抑制组PTEN水平明显低于mir-141抑制阴性对照组和对照组,AKT、糖原合酶激酶3β水平明显高于mir-141抑制阴性对照组和对照组(Pmir-141激动组PTEN水平明显高于mir-141激动阴性对照组和对照组,AKT、糖原合酶激酶3β水平明显低于mir-141激动阴性对照组和对照组(Pmir-141抑制组骨髓间充质干细胞中可见大量红染的钙结节,呈密集分布;与对照组相比,红染的钙结节数量明显增多。成骨诱导培养第21天,mir-141抑制组Runx2、OCN蛋白表达水平明显高于对照组(Pmir-141激动组Runx2、OCN蛋白表达水平明显低于对照组(Pmir-141高表达,下调mir-141表达可通过PTEN/AKT/糖原合酶激酶3β信号通路促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。

关键词：骨质疏松 mir-141 人骨髓间充质干细胞成骨分化蛋白酪氨酸磷酸酶

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mir-141对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制

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中国老年学杂志 2021年第19期41卷 4358-4361页

作者：晓映吴优张华张跃平李文光南通大学附属医院泌尿外科江苏南通226001

目的探讨mir-141对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法收集108例膀胱癌患者作为研究对象,采用荧光定量PCR分析膀胱癌及癌旁组织的mir-141表达水平。采用慢病毒在BIU-8膀胱癌细胞系建立mir-141沉默稳定细胞系(mir-141 KD组)... 详细信息

目的探讨mir-141对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法收集108例膀胱癌患者作为研究对象,采用荧光定量PCR分析膀胱癌及癌旁组织的mir-141表达水平。采用慢病毒在BIU-8膀胱癌细胞系建立mir-141沉默稳定细胞系(mir-141 KD组)和对照细胞系(mir-Control组),采用EdU染色和CCK8试剂盒分析两组增殖能力;采用Annexin V-FITC/PI分析两组凋亡水平;采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析mir-141的靶基因。结果与癌旁组织比较,膀胱癌组织中mir-141表达上调(Pmir-Control组比,mir-141 KD组EdU阳性率显著下调(Pmir-Control组比,mir-141 KD组的增殖能力明显下调(Pmir-Control组比,mir-141 KD组凋亡水平明显增加(Pmir-141的靶基因。结论mir-141在膀胱癌中呈高表达,通过下调转录因子RUNX3的水平,进而调节膀胱癌细胞的增殖和凋亡。

关键词： mir-141 膀胱癌增殖凋亡

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mir-141通过靶向致癌基因Bmi-1抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移

MiR-141通过靶向致癌基因Bmi-1抑制胰腺癌细胞的增殖和迁移

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作者：吴康健南京医科大学

学位级别：硕士

【背景】胰腺癌（Pancreatic Cancer,PC）是预后最差的恶性肿瘤之一。传统的治疗方法对胰腺癌的诊疗没有起到预期的作用,目前迫切需要去开发新的治疗方向和治疗靶点。微小RNA（mi RNA）由于与肿瘤的发生发展息息相关而引起越来越多的关... 详细信息

【背景】胰腺癌（Pancreatic Cancer,PC）是预后最差的恶性肿瘤之一。传统的治疗方法对胰腺癌的诊疗没有起到预期的作用,目前迫切需要去开发新的治疗方向和治疗靶点。微小RNA（mi RNA）由于与肿瘤的发生发展息息相关而引起越来越多的关注。在肿瘤中异常表达的mi RNA中,至少有50%可以作为转录后调节因子并发挥重要作用。微小RNA主要通过直接结合其靶基因的信使RNA展现致癌或肿瘤抑制活性。Bmi-1基因是转录抑制因子多梳基因家族（polycomb group genes,Pc G）的成员,目前已经被证实参与多种肿瘤的发生发展。【目的】本实验目的在于探究mi R-141在胰腺癌中通过下调Bmi-1的表达发挥抑癌作用的机制。【方法】1.使用GEO数据库中下载的胰腺癌mi RNA表达谱芯片进行数据分析,探究mi R-141在胰腺癌组织及相应的正常组织中的表达水平。2.采用GEO数据库中下载的胰腺癌m RNA表达谱芯片分析Bmi-1在癌组织和正常样本中的表达量;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Bmi-1在胰腺癌细胞和正常细胞的表达量。通过表达谱芯片分析mi R-141与Bmi-1表达水平之间是否存在联系性。***-8法检测过表达mi R-141后胰腺癌细胞的增殖能力;平板克隆形成实验检测mi R-141的上调表达对细胞克隆形成能力的影响。通过Transwell迁移实验检测mi R-141的表达上调后细胞的迁移能力是否产生变化。***-8法检测敲减Bmi-1后胰腺癌细胞的增殖能力;平板克隆形成实验检测Bmi-1的下调表达对细胞克隆形成能力的影响。通过Transwell迁移实验检测Bmi-1的表达降低后细胞的迁移能力是否产生变化。5.通过生物信息学数据库检索mi R-141与Bmi-1之间可能存在的结合位点;荧光素酶报告基因实验论证mi R-141与Bmi-1之间是否存在靶向结合位点。上调mi R-141在胰腺癌细胞中的表达蛋白水平检测Bmi-1的变化。6.上调靶基因Bmi-1的表达,与mi R-141 mimic共转染,观察胰腺癌细胞增殖迁移能力的变化。【结果】1.根据对两组胰腺癌相关mi RNA表达谱芯片的分析结果显示,mi R-141在胰腺癌中表达下调;实时荧光定量PCR检测mi R-141在胰腺癌细胞和正常胰腺细胞中表达水平。***-1在胰腺癌组织和细胞中呈现高表达。Pearson’s相关性分析显示,mi R-141与Bmi-1在胰腺癌中的表达呈负相关。3.上调mi R-141的表达后,胰腺癌细胞的增殖,克隆形成能力以及迁移能力减弱。4.干扰胰腺癌细胞中Bmi-1的表达后,与过表达mi R-141的结果类似,胰腺癌细胞的增殖和迁移能力受到抑制。5.双荧光素酶报告基因实验证明了mi R-141与Bmi-1存在靶向结合位点。蛋白免疫印迹法（Western blot）实验结果显示高表达mi R-141抑制Bmi-1的蛋白表达水平,进一步证明了mi R-141与Bmi-1之间的靶向结合关系。***-1的过表达可以逆转mi R-141对胰腺癌增殖迁移的抑制作用。【结论】mi R-141在胰腺癌中呈现低表达并在胰腺癌中起到抑癌作用。Bmi-1在胰腺癌中的表达呈现异常增高的趋势,mi R-141与Bmi-1之间存在负相关性。通过研究,我们发现mi R-141可以通过靶向作用于Bmi-1来抑制胰腺癌细胞的生长过程。这表明mi R-141/Bmi-1可能成为胰腺癌基因治疗方向研究的新靶点,为胰腺癌的诊疗开辟新的道路。

关键词： mir-141 Bmi-1 胰腺癌

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mir-141通过靶向下调EphA2表达而抑制人口腔鳞状细胞癌细胞系的增殖

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基础医学与临床 2015年第2期35卷 213-217页

作者：韩哲李磊周晓清天津医科大学第二医院口腔科天津300210 济宁市第一人民医院口腔科山东济宁272000

目的探讨mir-141对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞增殖活性的影响及其与Eph A2的靶向关系。方法构建pre-mir-141、Eph A2野生型(Eph A2-WT)和突变型(Eph A2-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRTPCR)检测pre-mir-141的转染效率。用MTT... 详细信息

目的探讨mir-141对口腔鳞状细胞癌(OSCC)CAL27细胞增殖活性的影响及其与Eph A2的靶向关系。方法构建pre-mir-141、Eph A2野生型(Eph A2-WT)和突变型(Eph A2-MT)真核表达载体,采用实时定量PCR(qRTPCR)检测pre-mir-141的转染效率。用MTT检测细胞增殖活性,用双荧光素酶报告基因检测、qRT-PCR和Western blot验证mir-141与Eph A2的靶向关系。结果 pc DNATM6.2-GW-pre-mir-141、pmir GLO-Eph A2-WT和pmir GLO-Eph A2-MT表达载体构建成功,转染pre-mir-141的CAL27细胞mir-141的表达显著升高(Pmir-141过表达能够明显抑制CAL27细胞的增殖(Pmir-141和Eph A2-WT的CAL 27细胞其荧光活性显著下降(Pmir-141的CAL27细胞其Eph A2的表达要显著低于转染空质粒组(Pmir-141的过表达能够显著抑制Eph A2的蛋白表达水平。结论 mir-141的过表达可能通过靶向下调Eph A2的表达从而抑制OSCC的增殖。

关键词：口腔鳞状细胞癌 mir-141 Eph A2 增殖

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