miR-141在老年骨质疏松中的表达特点及作用机制

作     者：高方茂 张杰荣 熊时喜 田晓林 林超 

作者机构：三亚市中医院骨一科海南三亚572000 

出 版 物：《中国老年学杂志》 (Chinese Journal of Gerontology)

年 卷 期：2023年第43卷第22期

页      面：5572-5575页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100211[医学-妇产科学] 10[医学] 

基　　金：海南省医药卫生科研项目(21A200340) 

主　　题：骨质疏松 miR-141 人骨髓间充质干细胞 成骨分化 蛋白酪氨酸磷酸酶 

摘      要：目的探讨微小RNA(miR)-141在老年骨质疏松中的表达特点及作用机制。方法采集老年骨质疏松患者80例、骨量正常的老年志愿者45例的血清标本,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-141表达水平。筛选miR-141的下游靶点,使用脂质体2000向人骨髓间充质干细胞中转染miR-141 inhibitor、miR-141 mimics,检测蛋白酪氨酸磷酸酶(PTEN)、蛋白激酶B(AKT)及AKT下游潜在基因表达水平。成骨诱导培养人骨髓间充质干细胞后进行茜素红染色,Western印迹检测Runt相关转录因子(Runx)2、骨钙素(OCN)蛋白表达水平。结果骨质疏松组血清miR-141表达水平明显高于骨量正常组(P0.01)。通过miRNA靶基因预测数据库预测出靶基因15个,对这些靶基因进行KEGG富集分析并结合基因功能注释和查阅相关文献,推测PTEN基因可能是miR-141的潜在靶点。miR-141抑制组PTEN水平明显低于miR-141抑制阴性对照组和对照组,AKT、糖原合酶激酶3β水平明显高于miR-141抑制阴性对照组和对照组(P0.01);miR-141激动组PTEN水平明显高于miR-141激动阴性对照组和对照组,AKT、糖原合酶激酶3β水平明显低于miR-141激动阴性对照组和对照组(P0.01)。茜素红染色结果显示,miR-141抑制组骨髓间充质干细胞中可见大量红染的钙结节,呈密集分布;与对照组相比,红染的钙结节数量明显增多。成骨诱导培养第21天,miR-141抑制组Runx2、OCN蛋白表达水平明显高于对照组(P0.01);miR-141激动组Runx2、OCN蛋白表达水平明显低于对照组(P0.01)。结论老年骨质疏松患者血清miR-141高表达,下调miR-141表达可通过PTEN/AKT/糖原合酶激酶3β信号通路促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。