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glta基因对粪肠球菌生物膜形成能力影响的初步研究

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牙体牙髓牙周病学杂志 2018年第5期28卷 249-257页

作者：仇珺肖燕相豆豆史晨楠程小刚田宇余擎军事口腔医学国家重点实验室口腔疾病国家临床医学研究中心陕西省口腔疾病重点实验室第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科陕西西安710032 中国人民解放军第十五医院口腔科新疆乌苏833000

目的:探讨粪肠球菌(E.faecalis)谷氨酸合酶基因A(glta)对生物膜形成的影响。方法:采用激光共聚焦扫描电镜(CLSM)观察临床分离的4株E.faecalis的生物膜形成能力、生物膜体积及活菌数;用RT-qPCR检测4株临床菌株的glta基因表达水平的变化;... 详细信息

目的:探讨粪肠球菌(E.faecalis)谷氨酸合酶基因A(glta)对生物膜形成的影响。方法:采用激光共聚焦扫描电镜(CLSM)观察临床分离的4株E.faecalis的生物膜形成能力、生物膜体积及活菌数;用RT-qPCR检测4株临床菌株的glta基因表达水平的变化;构建glta基因高表达E.faecalis菌株,以标准菌V583为对照,分别观察两者生长曲线的变化及24 h内的生物膜形成情况,同时检测其生物膜的体积及活菌数。结果:4株E.faecalis临床菌株均能形成结构致密的生物膜,其生物膜体积及其活菌数均显著高于标准株V583(Pglta基因表达量均随着培养时间的增加而明显降低,在培养6、12 h时,4株临床菌株的glta基因表达显著高于标准株V583(Pglta基因表达量与标准株V583相比无统计学差异(P>0.05)。glta基因高表达株的生长速率与标准株相比无统计学差异(P>0.05);glta基因高表达株生物膜形成较快,结构更加致密且厚度较厚,而标准株V583的生物膜形成较慢,较薄,且glta基因高表达株在12、24 h时生物膜体积及其活菌数均显著高于对照组(Pglta基因能在E.faecalis生物膜形成的早期阶段发挥关键的调控作用,是E.faecalis生物膜形成的重要基因。

关键词：生物膜形成 glta基因 E.faecalis 基因表达

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东北林区鼠类粒细胞埃立克体感染的调查

中华流行病学杂志 2007年第2期28卷 157-159页

作者：詹琳何静萨仁高娃吴晓明王剑波赵秋敏张泮河黄海楠蒋宝贵江佳富张晶波褚宸一高燕杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所、流行病学研究室、病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071 内蒙古大兴安岭林业中心卫生防疫站

目的了解东北林区啮齿动物感染粒细胞埃立克体病原体的情况。方法运用聚合酶链反应方法对吉林、黑龙江、内蒙古林区采集的啮齿动物标本粒细胞埃立克体的16S rRNA和glta基因片段进行检测并测序，将所测序列与OenBank中注册的基因序列进... 详细信息

目的了解东北林区啮齿动物感染粒细胞埃立克体病原体的情况。方法运用聚合酶链反应方法对吉林、黑龙江、内蒙古林区采集的啮齿动物标本粒细胞埃立克体的16S rRNA和glta基因片段进行检测并测序，将所测序列与OenBank中注册的基因序列进行比较分析。结果共检测鼠标本276份，其中吉林长白山林区102份，黑龙江小兴安岭林区61份，内蒙古大兴安岭林区113份，阳性率分别为8．82％、1．64％及0．00％。体表有寄生蜱的鼠感染危险性是体表无寄生蜱鼠的11.30倍（P=0．002）。吉林、黑龙江林区鼠标本及其寄生蜱标本16SrRNA基因序列完全相同，与美国、瑞典、日本等国家检出的粒细胞埃立克体对应序列的同源性为97％～99％。glta基因核苷酸序列与GenBank注册的相应片段比较相似性为87％～97％，推导的氨基酸序列相似性为84％～99％。结论吉林及黑龙江林区存在粒细胞埃立克体宿主动物感染。

关键词：粒细胞埃立克体宿主动物 16S rRNA基因 glta基因

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微小牛蜱立克次氏体的检测

黑龙江畜牧兽医（下半月） 2016年第11期 124-126页

作者：唐欢向亮亮程天印湖南农业大学动物医学院长沙410128

为利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术检测微小牛蜱体内携带立克次氏体的种类,无菌条件下提取微小牛蜱总DNA,以设计的引物RPCS.569P/RPCS.1262n和通用引物RPCS.877P/RPCS.1258GCn扩增立克次氏体glta基因,DGGE电泳分离,选取条带进行回收克... 详细信息

为利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术检测微小牛蜱体内携带立克次氏体的种类,无菌条件下提取微小牛蜱总DNA,以设计的引物RPCS.569P/RPCS.1262n和通用引物RPCS.877P/RPCS.1258GCn扩增立克次氏体glta基因,DGGE电泳分离,选取条带进行回收克隆测序。结果表明:微小牛蜱之卵、饱血雌成蜱、半饱血雌成蜱、雄成蜱内均只含2种立克次氏体;测序、分析显示分离菌为立克次氏体属斑点热群。说明微小牛蜱具有潜在斑点热病源传播风险。

关键词：微小牛蜱变性梯度凝胶电泳(DGGE) glta基因立克次氏体斑点热群

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荧光定量PCR检测嗜吞噬细胞无形体

中国人兽共患病学报 2006年第4期22卷 289-293页

作者：张晶波温博海陈梅玲朱丽娜邱玲牛东升军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室

目的采用新型TaqMan—MGB探针建立检测嗜吞噬细胞无形体的实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR）方法。方法依据glta基因序列设计嗜吞噬细胞无形体特异引物和探针，以克隆的嗜吞噬细胞无形体glta基因片段作DNA模板。在荧光定量... 详细信息

目的采用新型TaqMan—MGB探针建立检测嗜吞噬细胞无形体的实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR）方法。方法依据glta基因序列设计嗜吞噬细胞无形体特异引物和探针，以克隆的嗜吞噬细胞无形体glta基因片段作DNA模板。在荧光定量PCR检测仪（ABI 7900HT）上建立实时荧光定量检测方法。结果建立的定量标准曲线的循环闻值（Ct）与模板拷贝数呈良好的线性关系（r=0．996）；与套式PCR相比较，荧光定量PCR检测的灵敏度是其100倍。用荧光定量PCR检测其它相关立克次体和细菌DNA样本，检出结果几乎为0；对荧光定量PCR检测重复性进行分析，变异系数（CV）批内和批间误差在0-2．1％之间，证明该荧光定量PCR具有种特异性和良好的重复性。用荧光定量PCR检测体疑染嗜吞噬细胞无形体的10份蜱和30份小鼠脾脏标本，结果与套式PCR检测结果有密切相关性，但是定量PCR检测敏感性和准确率均高于套式PCR。结论本研究建立的检测嗜吞噬细胞无形体的实时荧光定量PCR具有很高的特异性和敏感性，特别适合检出样本中微量嗜吞噬细胞无形体。

关键词：嗜吞噬细胞无形体实时定量PCR glta基因埃立克体感染

2010-2011无年形我体国的东感北染林情区况蜱调中查嗜吞噬细胞

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中国媒介生物学及控制杂志 2012年第2期23卷 111-113,117页

作者：李颖左双燕唐琨浦冠勤苏州大学金螳螂建筑与城市环境学院江苏苏州215123 军事医学科学院微生物流行病研究所北京100071 中南大学公共卫生学院

目的调查我国东北林区蜱标本中嗜吞噬细胞无形体的感染情况。方法2010-2011年在东北林区采集蜱标本,用聚合酶链反应方法扩增glta基因片段,分析东北林区蜱中无形体的感染情况,代表阳性片段联用长片段16S rRNA进行扩增测序确认;并将所得... 详细信息

目的调查我国东北林区蜱标本中嗜吞噬细胞无形体的感染情况。方法2010-2011年在东北林区采集蜱标本,用聚合酶链反应方法扩增glta基因片段,分析东北林区蜱中无形体的感染情况,代表阳性片段联用长片段16S rRNA进行扩增测序确认;并将所得序列与GenBank中已注册的序列进行比对分析。结果共检测蜱2293只,其中2010年1161只,阳性率4.91%,2011年1132只,阳性率4.24%,2年的感染率差异无统计学意义(χ2=0.373,P=0.830;χ2=1.789,P=0.409)。全沟硬蜱阳性率4.86%(91/1872),长角血蜱为3.41%(14/411),森林革蜱为0(0/10),3个蜱种的感染率差异无统计学意义(P>0.05)。测得的glta序列中,NE-glta-1与Hc346株(GenBank:GU935788)最相似,仅差2 bp,相似性99%;NE-glta-2与MDJ-Ip92株(HQ396224)序列一致,相似性100%。与2个序列相似性最远的是ZJ-HGA-72株(DQ458811),相差53 bp,相似性84%。测得的16S rRNA序列与我国从东北鼠源分离株China-C-T(tGQ412339)最接近,相似性为99%,与Florida株(AF309867)相似性最远,相似性97%。结论我国东北林区蜱中普遍存在嗜吞噬细胞无形体的感染,全沟硬蜱和长角血蜱可能为无形体的媒介宿主。

关键词：嗜吞噬细胞无形体蜱 16SrRNA基因 glta基因

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吉林省林区蜱粒细胞无形体感染的调查

中国人兽共患病学报 2007年第5期23卷 438-440页

作者：詹琳何静吴晓明张泮河黄海楠蒋宝贵褚宸一张晶波高燕杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所流行病学研究室病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的调查吉林省蜱粒细胞无形体感染。方法运用聚合酶链反应方法对吉林延边地区采集的蜱标本粒细胞无形体16S rRNA和glta基因片段进行扩增及序列分析,将扩增序列与GenBank注册的基因序列进行比较,构建粒细胞无形体glta基因进化树。结果... 详细信息

目的调查吉林省蜱粒细胞无形体感染。方法运用聚合酶链反应方法对吉林延边地区采集的蜱标本粒细胞无形体16S rRNA和glta基因片段进行扩增及序列分析,将扩增序列与GenBank注册的基因序列进行比较,构建粒细胞无形体glta基因进化树。结果共检测游离蜱427只,其中全沟硬蜱100只,森林革蜱327只,粒细胞无形体感染阳性率分别为4.00%和0.00%。寄生蜱感染阳性率2.9%。寄生蜱与游离蜱感染率差别无显著性。16S rRNA序列与我国已在GenBank注册的AF205140序列一致,与国外粒细胞无形体16S rRNA序列存在不同程度的差异,相似性为97%～99%;glta基因与GenBank的粒细胞无形体glta基因片段比较,相似性为87%～97%,推导的氨基酸序列相似性为84%～99%。结论我国吉林省林区存在蜱粒细胞无形体感染。

关键词：蜱粒细胞无形体 16S rRNA基因 glta基因

黑龙江省口岸地区蜱类感染嗜吞噬细胞无形体Anaplasma phagocytophila的初步调查

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寄生虫与医学昆虫学报 2010年第3期17卷 152-156页

作者：付维明丁大伟李明崔忠起赵伟崔永民黑龙江出入境检验检疫局哈尔滨150001 虎林出入境检验检疫局黑龙江虎林158400 密山出入境检验检疫局黑龙江密山158300 东宁出入境检验检疫局黑龙江东宁157200

为调查黑龙江省口岸蜱类携带嗜吞噬细胞无形体Anaplasma phagocytophila感染情况,运用聚合酶链式反应方法扩增嗜吞噬细胞无形体柠檬酸合成酶（glta）基因片段,对黑龙江省各口岸地区采集的蜱标本进行检测,并对阳性结果进行序列分析.共检... 详细信息

为调查黑龙江省口岸蜱类携带嗜吞噬细胞无形体Anaplasma phagocytophila感染情况,运用聚合酶链式反应方法扩增嗜吞噬细胞无形体柠檬酸合成酶（glta）基因片段,对黑龙江省各口岸地区采集的蜱标本进行检测,并对阳性结果进行序列分析.共检测蜱1 609只,29只阳性,阳性率为1.80%,结果表明,黑龙江省口岸蜱类除日本血蜱外均有自然感染嗜吞噬细胞无形体的现象.所感染的嗜吞噬细胞无形体glta 基因与GenBank 中登录的嗜吞噬无形体glta基因片段,相似性为82%～98%.因此,我国黑龙江省口岸地区存在蜱粒细胞无形体感染.

关键词：蜱粒细胞无形体 glta基因黑龙江中国

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云南巴尔通体的系统发育多样性分析

中国热带医学 2008年第12期8卷 2075-2077页

作者：杨发莲白鹤鸣杨慧云南省地方病防治所云南大理671000

目的基于glta基因序列的系统发育分析对云南巴尔通体的多样性进行分析。方法用云南省1999年至今分离到的并已在GenBank中公布的32个巴尔通体变异体(glta基因)为目标株,利用网上核酸序列比对程序BLAST进行核酸序列同源性搜索,调出相似性... 详细信息

目的基于glta基因序列的系统发育分析对云南巴尔通体的多样性进行分析。方法用云南省1999年至今分离到的并已在GenBank中公布的32个巴尔通体变异体(glta基因)为目标株,利用网上核酸序列比对程序BLAST进行核酸序列同源性搜索,调出相似性最高且有效发表种典型菌株为对比株,进行比对和系统发育分析。结果32个巴尔通体变异体可归为B.elizabethae、B.tribocorum、B.grahamii、B.washoensis、B.taylrii、B.phoceensis和B.yunnannensis7个分枝。同一枝中所有分离的变异体与其发育关系最密切且有效发表种典型的菌株间的glta基因序列均有不同程度的差异。部分变异体与有效发表种典型的菌株间存在较大的遗传差异。结论云南巴尔通体菌不仅具系统发育多样性,而且还具有其特异性和可能有潜在的新种。一些不明原因的疾病有可能与巴尔通体的感染有关不容忽视。

关键词：云南巴尔通体 glta基因系统发育分析

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中国巴尔通体属系统发育多样性分析

热带医学杂志 2020年第4期20卷 455-459页

作者：龙露陆家海中山大学公共卫生学院广东广州510080

目的通过对中国范围内分布的巴尔通体进行系统发育多样性分析,了解我国巴尔通体分布种类情况,可为临床诊断提供参考。方法下载GenBank中2000-2019年公布的中国范围内的巴尔通体glta基因序列,采用CLUSTAL X 2.0进行多序列比对确定变异体... 详细信息

目的通过对中国范围内分布的巴尔通体进行系统发育多样性分析,了解我国巴尔通体分布种类情况,可为临床诊断提供参考。方法下载GenBank中2000-2019年公布的中国范围内的巴尔通体glta基因序列,采用CLUSTAL X 2.0进行多序列比对确定变异体,再在NCBI中在线采用Blastn策略同源性搜索与各变异体相似性最高且是有效发表种的glta基因序列,作为参考序列,然后利用MEGA 7.0进行系统发育分析,构建系统发育树。结果中国的巴尔通体大致可归为25个种类,其中有11个种类可对人类致病,分别为B.henselae、B.quintana、B.elizabethae、B.clarridgeiae、B.grahamii、B.melophagi、B.rattimassiliensis、B.rochalimae、B.tribocorum、B.vinsonii、B.washoensis;还有27个变异体可能是潜在的新种。云南、黑龙江、新疆巴尔通体种类最丰富。结论中国巴尔通体种类丰富,可致人类患病的种类也较多,还有一些潜在新种,尤以云南、黑龙江、新疆等地的多样性最高,可为一些不明原因疾病的诊断提供参考。

关键词：巴尔通体属系统发育多样性 glta基因中国