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calycosin improves cognitive function in a transgenic mouse model of Alzheimer's disease by activating the protein kinase c pathway

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Neural Regeneration Research 2017年第11期12卷 1870-1876页

作者： Lei Song Xiaoping Li Xiao-xue Bai Jian Gao chun-yan Wang Department of Respiratory Medicine First Hospital of Jilin UniversityChangchunJilin ProvinceChina Department of Pediatrics First Hospital of Jilin UniversityChangchunJilin ProvinceChina cadre's Ward First Hospital of Jilin UniversityChangchunJilin provinceChina Department of Neurosurgery China-Japan Union Hospital of Jilin UniversityChangchunJilin ProvinceChina

The major pathological changes in Alzheimer＇s disease are beta amyloid deposits and cognitive impairment. calycosin is a typical phy- toestrogen derived from radix astragali that binds to estrogen receptors to produce estrogen-like effects. Radix astragali calycosin has been shown to relieve cognitive impairment induced by diabetes mellitus, suggesting calycosin may improve the cognitive function of Alzhei- mer＇s disease patients. The protein kinase c pathway is upstream of the mitogen-activated protein kinase pathway and exerts a neuropro- tective effect by regulating Alzheimer＇s disease-related beta amyloid degradation. We hypothesized that calycosin improves the cognitive function of a transgenic mouse model of Alzheimer＇s disease by activating the protein kinase c pathway. Various doses of calycosin （10, 20 and 40 mg/kg） were intraperitoneally injected into APP/PS1 transgenic mice that model Alzheimer＇s disease. calycosin diminished hippocampal beta amyloid, Tau protein, interleukin-lbeta, tumor necrosis factor-alpha, acetylcholinesterase and malondialdehyde levels in a dose-dependent manner, and increased acetylcholine and glutathione activities. The administration of a protein kinase c inhibitor, cal- phostin c, abolished the neuroprotective effects of calycosin including improving cognitive ability, and anti-oxidative and anti-inflammato- ry effects. Our data demonstrated that calycosin mitigated oxidative stress and inflammatory responses in the hippocampus of Alzheimer＇s disease model mice by activating the protein kinase c pathway, and thereby improving cognitive function.

关键词： nerve regeneration neurodegeneration Alzheimer's disease calycosin hippocampus oxidative stress inflammation mice protein kinase c calphostin c glutathione malondialdehyde neural regeneration

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蛋白激酶cζ对小鼠受精卵发育早期基因组转录活化的影响

蛋白激酶Cζ对小鼠受精卵发育早期基因组转录活化的影响

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第七届全国酶学学术讨论会

作者：付伟赵咏梅武迪迪冯晨宗志宏王亚杰刘莹刘奕于爱鸣陈菲于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室

为研究蛋白激酶cζ(protein kinase cζ,PKcζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法,观察PKcζ的抑制剂对小鼠受精卵1-细胞期G1和G2不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响。小鼠1-细胞... 详细信息

为研究蛋白激酶cζ(protein kinase cζ,PKcζ)在小鼠受精卵细胞早期发育过程中对胚胎基因组活化影响,采用免疫印迹和细胞免疫荧光的方法,观察PKcζ的抑制剂对小鼠受精卵1-细胞期G1和G2不同时期小鼠受精卵基因组活化的影响。小鼠1-细胞期受精卵蛋白激酶c(PKc)的活性不断增加,并在G2达到最高。PKc的抑制剂calphostin c可以明显抑制PKc的活性达47%。同时calphostin c对受精卵1-细胞期基因组的早期活化具有显著的抑制作用(Pcζ的含量明显多于G1期和卵母细胞MⅡ期,分别比它们高27%和110%。PKcζ的特异性抑制剂可以抑制受精卵1-细胞期基因的转录和活化(Pcζ参与了小鼠受精卵基因组早期转录的调控。

关键词：受精卵蛋白激酶cζ calphostin c

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蛋白激酶抑制剂对UGT1A及UGT1A3的影响

蛋白激酶抑制剂对UGT1A及UGT1A3的影响

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作者：肖永胜浙江大学

学位级别：硕士

目的探究蛋白激酶抑制剂姜黄素和钙感光蛋白c （calphostinc）对UGT1A及UGT1A3的影响。方法蛋白激酶抑制剂分别处理LS174T细胞和重组表达UGT1A3的Sf9细胞,通过Real-time PcR和Western blot分别检测处理前后的LS174T细胞内UGT1A和Sf... 详细信息

目的探究蛋白激酶抑制剂姜黄素和钙感光蛋白c （calphostinc）对UGT1A及UGT1A3的影响。方法蛋白激酶抑制剂分别处理LS174T细胞和重组表达UGT1A3的Sf9细胞,通过Real-time PcR和Western blot分别检测处理前后的LS174T细胞内UGT1A和Sf9细胞中UGT1A3表达量的变化;以木犀草素为底物进行体外孵育,检测处理前后LS74T细胞内UGT1A活性的变化和重组UGT1A3的活性变化;通过免疫沉淀和免疫印迹的方法观察蛋白激酶抑制剂处理前后重组UGT1A3磷酸化水平的变化。对UGT1A3预测的磷酸化位点进行定点突变并重组表达,比较野生型蛋白和突变型蛋白的代谢差异。结果在不引起细胞毒性和细胞形态变化的条件下,蛋白激酶抑制剂对LS174T细胞中UGT1A和Sf9细胞中重组UGT1A3的表达均无影响,但均可浓度依赖性抑制UGT1A和UG1A3的活性。体外孵育体系中添加姜黄素对木犀草素体外孵育具有抑制作用。进一步研究发现,经蛋白激酶抑制剂处理后,Sf9细胞内重组UGT1A3的磷酸化水平下降。突变体S43G催化三种黄酮类化合物的活性仅为野生型的58%-69%。结论姜黄素对UGT1A和UGT1A3具有直接抑制作用和间接抑制作用,而calphostin c只具有间接抑制作用。姜黄素对UGH A和UGT1A3的直接抑制作用很可能是其作为底物木犀草素的竞争性抑制剂引起的。姜黄素和calphostin c对UGT1A的间接抑制作用,很可能是通过抑制UGT1A的磷酸化修饰而介导的。UGT1A3在蛋白激酶c催化下可发生磷酸化修饰,且磷酸化修饰对UGT1A3活性具有调控作用。预测的UGT1A3磷酸化位点中,43位的丝氨酸很可能是其磷酸化位点。

关键词：姜黄素 calphostin c UGT1A UGT1A3 抑制磷酸化

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