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c-mos及其在系统发生研究中的应用

动物学杂志 2002年第2期37卷 77-79页

作者：景开颜周开亚孙红英南京师范大学生命科学学院遗传资源研究所南京210097

用于重建系统发生关系的分子标记需满足一些条件 ,常用的有线粒体DNA序列和一些核基因序列。本文介绍了一种核基因c mos,由于其为单拷贝 ,无内元 ,全长约 1kb,便于从基因组中扩增并测序 ,可度量中等分类阶元间的亲缘关系 ,目前主要应用... 详细信息

用于重建系统发生关系的分子标记需满足一些条件 ,常用的有线粒体DNA序列和一些核基因序列。本文介绍了一种核基因c mos,由于其为单拷贝 ,无内元 ,全长约 1kb,便于从基因组中扩增并测序 ,可度量中等分类阶元间的亲缘关系 ,目前主要应用于爬行类和鸟类的系统发生研究中。

关键词：核酸分子标记 c-mos 系统发生应用

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从c-mos和12SrRNA基因序列探讨现生鸟类早期历史和三趾鹑类的系统地位

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动物分类学报 2004年第2期29卷 181-187页

作者：朱立峰常青张保卫金宏周开亚南京师范大学遗传资源研究所南京210097 中国科学院动物研究所北京100080

通常认为古腭型鸟类处在现生鸟类系统进化树的基部 ,最近的分子水平研究则认为今腭型鸟类中雀形目种类构成了现生鸟类中一个最古老的支系。本研究通过对现生鸟类中 2 1目 39种核c mos基因和线粒体 12SrRNA基因部分序列的分析 ,从分子角... 详细信息

通常认为古腭型鸟类处在现生鸟类系统进化树的基部 ,最近的分子水平研究则认为今腭型鸟类中雀形目种类构成了现生鸟类中一个最古老的支系。本研究通过对现生鸟类中 2 1目 39种核c mos基因和线粒体 12SrRNA基因部分序列的分析 ,从分子角度对现生鸟类的早期进化及三趾鹑鸟类的系统发生进行了探讨。研究结果表明 ,鸡雁类是现生鸟类最古老的一个支系 ,现生鸟类的祖先并不是经白垩纪到第三纪大灭绝后残留下来的一些过渡性水鸟(transitionalshorebirds)。在现生鸟类中 ,今腭型鸟类为并系发生 ,古腭型鸟类为单系发生。三趾鹑类在系统发生中晚于鸡雁类和古腭型鸟类 ,早于今腭型鸟类中非鸡雁类鸟类与鹤形目鸟类的亲缘关系较远。建议将现生鸟类分为初鸟下纲和新鸟下纲 2个下纲 ,三趾鹑类属新鸟下纲的三趾鹑目 (Turniciformes)。

关键词：现生鸟类三趾鹑系统发生 c-mos 12SrRNA 基因序列

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氢化非晶硅薄膜对c-mos集成电路的钝化保护作用

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固体电子学研究与进展 1989年第1期9卷 64-69页

作者：何宇亮孙明浩薛自李广根顾青南京大学物理系上海无线电十四厂

本文指出,用α-Si∶H膜钝化cH 4081型中规模电路能明显地降低反向漏电流,使场开启电压提高;配对管开启电压匹配良好,从而使动态工作电压由5.0V下降到3.0V。半绝缘性α-Si∶H膜对外界干扰有屏蔽效果,可使c—mos器件阈值电压的负漂移减小... 详细信息

本文指出,用α-Si∶H膜钝化cH 4081型中规模电路能明显地降低反向漏电流,使场开启电压提高;配对管开启电压匹配良好,从而使动态工作电压由5.0V下降到3.0V。半绝缘性α-Si∶H膜对外界干扰有屏蔽效果,可使c—mos器件阈值电压的负漂移减小。研究了α-Si∶H钝化膜的抗高能粒子的辐照作用,仅2000～3000(?)厚的α-Si∶H膜能使cH4081电路的抗辐照能力由10^(10)e/cm^2提高到大于10^(12)e/cm^2(1.2MeV)。钝化后的c—mos电路自然存放数年后,电路参数基本稳定。

关键词：氢化非晶硅薄膜 c-mos 钝化

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鸻形目27种鸟类c-mos基因序列分析及其系统发育研究

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鸻形目27种鸟类c-mos基因序列分析及其系统发育研究

作者：唐婷河北师范大学

学位级别：硕士

鸻形目鸟类种类繁多、分布广泛,在湿地生态系统中占据重要的地位。由于鸻形目鸟类很多种在形态和生活习性方面具有较大相似性,依据形态学性状对其进行种间和科间分类一直存在争议,本文将使用分子手段研究这一类群之间的亲缘关系。 c-mo... 详细信息

鸻形目鸟类种类繁多、分布广泛,在湿地生态系统中占据重要的地位。由于鸻形目鸟类很多种在形态和生活习性方面具有较大相似性,依据形态学性状对其进行种间和科间分类一直存在争议,本文将使用分子手段研究这一类群之间的亲缘关系。 c-mos是一个单拷贝、无内元基因,内部存在保守区域,很容易从基因组模板中得到扩增并直接测序。基因全长仅1kb左右,以c-mos为“标尺”,可度量中等分类阶元的亲缘关系。本实验利用c-mos基因重建鸻形目27种鸟类系统发生树,得到如下结论: 1.核c-mos部分序列的特点:T、c、A、G的平均含量分别为18.3%,26.1%,21.4%,34.2%。嘧啶含量44.4%低于嘌呤含量55.6%。c-mos基因在密码子第三位点发生的转换与颠换最多,其次是第一位,第二位最少。所有位点的R值为3.9,其中第三位点R值最低,表明其进化速度最快。核苷酸的变异情况显示转换数多于颠换数。序列之间的平均遗传距离是0.047。 2.在科级系统关系上,鸥类与鸻鹬类显示出较近的亲缘关系,支持将鸥类列为鸻形目下科级水平。不支持将瓣蹼鹬列为瓣蹼鹬科,应将其降为鹬科下瓣蹼鹬属。在系统发生分析中,鸻科鸟类位于系统树的最底端,认为是鸻形目鸟类最早出现的一支,起源上早于鹬类和鸥类,在进化树上显示是鹬科加鸥科的姊妹群。 3.在科下系统关系上,支持Sibley等将鹬科分为两个亚科,建议重新形成鹬亚科和滨鹬亚科,其中鹬亚科包括鹬属、沙锥属等大部分鹬科鸟类,滨鹬亚科应包括滨鹬属、阔嘴鹬属、杓鹬属、翘嘴鹬属、瓣蹼鹬属等鸟类。阔嘴鹬属与滨鹬属的鸟类表现出很高的亲缘关系,在阶元上更接近同一属,建议将阔嘴鹬列入滨鹬属。 4.经过相对速率检验,得到各分支存在恒定的分子钟,可用来分析种群分歧时间。设定鸟类单拷贝核DNA(scnDNA)外显子的进化速率大约为0.7%,根据公式大致算出各类群的分歧时间:如鸥科和鹬科鸟类的分歧时间大约在75Myr(百万年),鸻类和鸥类的分歧时间大约在107Myr,滨鹬属与翘嘴鹬属的分歧时间大约在31Myr,瓣蹼鹬与鹬属鸟类的分歧时间大约在21Myr。

关键词：鸻形目 c-mos 系统发育

化学辅助去核方法对牛卵母细胞MAPK活性及母源基因c-mos表达水平的影响

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化学辅助去核方法对牛卵母细胞MAPK活性及母源基因c-mos表达水平...

作者：任久生吉林大学

学位级别：硕士

自从1997年克隆羊多莉成功诞生以来，体细胞核移植技术、转基因技术以及干细胞治疗一直是研究的热点。尽管不断有克隆动物诞生，但克隆成功率仍处于较低水平。克隆是个相对复杂的过程且有多种因素可以影响克隆效率，其中包括不同供体细... 详细信息

自从1997年克隆羊多莉成功诞生以来，体细胞核移植技术、转基因技术以及干细胞治疗一直是研究的热点。尽管不断有克隆动物诞生，但克隆成功率仍处于较低水平。克隆是个相对复杂的过程且有多种因素可以影响克隆效率，其中包括不同供体细胞类型、不同的去核方法、不同的激活方法和不同类型培养基等。其中不同的去核方法对克隆效率有直接影响，化学辅助去核方法与其他去核方法比较有去核准确、吸出胞质量少和细胞毒性小的优点，因此化学辅助去核方法在大动物去核上有广泛应用，但具体分子作用机制研究甚少。为了阐明秋水仙素引起卵母细胞的同源染色质凝集形成细胞膜突起的分子机制。本实验探讨了在基础培养基添加中PVA、L-cysteine和不同浓度FSH对牛卵母细胞成熟率的影响并对cB+离子霉素、6-DMAP+离子霉素、cB+6-DMAP+离子霉素化学激活和电激活的卵裂率和囊胚率进行比较。探讨了秋水仙素不同处理浓度、不同处理时间及和蔗糖共同处理对牛卵母细胞细胞膜突起率的影响。然后，利用Western-blot、实时荧光定量PcR和免疫荧光，重点探讨了秋水仙素处理对牛卵母细胞中促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedprotein kinase，MAPK)活性及其上游调控基因c-mos表达水平的影响，以及在这一过程中纺锤体和细胞核的位置在牛卵母细胞中的变化。研究结果表明，在培养基中添加FSH可以显著提高牛卵母细胞成熟率，添加L-cysteine能够抑制牛卵母细胞的成熟，在TcM199+10%FBS+50μg/mlFSH+2.2μg/mlpyruvate+1μg/ml17β-estradio+1%penicillin streptomycin的培养基中牛卵母细胞成熟率最高达95.92%。通过对牛卵母细胞不同孤雌激活方法进行比较发现，cB+6-DMAP+离子霉素化学激活效果最佳，卵裂率和囊胚率分别为90.59%和21.17%（PcR结果表明秋水仙素能够上调母源基因c-mos的表达水平，经免疫荧光观察发现纺锤体和细胞核位置位于细胞膜突起处。综上所述，本研究优化了牛卵母细胞的体外培养体系和秋水仙素的处理条件。不仅证明了秋水仙素和蔗糖同时处理可以提高牛卵母细胞细胞膜突起率，而且证明了秋水仙素上调母源基因c-mos的表达水平，并能够使MAPK活性升高。而且在这一过程中，纺锤体和细胞核的位置发生了改变。说明秋水仙素引起卵母细胞膜的突起的原因可能是通过调控母源基因c-mos表达水平，继而影响MAPK的活性，从而导致卵母细胞减数分裂过程中纺锤体的形态及组装发生改变。研究结果为阐明化学辅助去核方法的分子机制提供了理论基础。

关键词：牛卵母细胞化学辅助去核方法秋水仙素 MAPK c-mos

核基因c-mos在系统发生研究中的应用与中华绒螯蟹BAc文库的构建

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核基因c-mos在系统发生研究中的应用与中华绒螯蟹BAC文库的构建

作者：景开颜南京师范大学

学位级别：硕士

本论文共分两大部分，分别摘要如下。 1 核基因c-mos在系统发生研究中的应用可用于重建系统发生关系的分子标记需满足一些条件。常用的有线粒体DNA序列和一些核基因序列。c-mos是一种单拷贝、无内元的核基因，全长约1kb，便于从基因组... 详细信息

本论文共分两大部分，分别摘要如下。 1 核基因c-mos在系统发生研究中的应用可用于重建系统发生关系的分子标记需满足一些条件。常用的有线粒体DNA序列和一些核基因序列。c-mos是一种单拷贝、无内元的核基因，全长约1kb，便于从基因组中扩增并测序，可度量中等分类阶元的亲缘关系，目前主要应用于爬行类和鸟类的系统发生研究中。本论文首先探讨了c-mos分别在蜥蜴亚目、新蛇下目及羊膜动物高级阶元系统发生研究中的应用。在所得蜥蜴亚目的聚类结果中，美洲鬣蜥科、夜蜥科、石龙子科、蜥蜴科、壁虎科、睑虎科、鳞脚虎科均为单系。鬣蜥科是避役科的姐妹群，盾蜥科与环尾蜥科紧密关联，鳄蜥与巨蜥相聚。支持蚓蜥类应归于石龙子型类，不支持鳄蜥类的科级分类地位，提示鳄蜥类可能是亚科级分类阶元。新蛇下目聚类结果提示蝰科、眼镜蛇科和蟒科都是单系群。游蛇科与眼镜蛇科亲缘关系较近;蝰科是游蛇科和眼镜蛇科的姐妹群。对水蛇亚科的分类地位提出疑问，支持水蛇类的科级分类地位。在用c-mos重建的羊膜动物高级阶元系统发生树中，哺乳类、龟类、鸟类、有鳞类均为单系群，哺乳类与其它羊膜类是姐妹群，有鳞类处于爬行动物系统发生的基部。建议在进行系统发生分析时，应采用不同方法构树并分析比较。此外，本文还运用生物信息学手段，检索美丽线虫基因纽全序列，推导出了对应于人类mos蛋白的同源氨基酸序列，并对其结构和进化进行了初步分析。 2 中华绒螯蟹BAc文库的构建基因组文库可依据载体不同而产生大小相异的插入片段，小到质粒几个Kb，大到YAc几个Mb。随着人类基因组计划的完成，大片段基因组文库的重要性日益突出，其所用载体包括YAc、BAc和PAc。其中，BAc／PAc以其克隆效率高、操作简易、插入DNA片段大、保存稳定等特性，成为目前构建大片段基因组文库的首选。中华绒螯蟹是我国重要的经济蟹类之一，但目前对其的研究大多数仍以形态学性状为基础。为了配合本实验室对中华绒螯蟹在分子水平的研究，作者尝试了中华绒螯蟹的BAc文库的构建。由于该实验涉及仪器、试剂众多，需要建立有关的实验技术，直至论文完成之际，文库尚未全部完成。

关键词：核基因 c-mos 晰蜴亚目新蛇下目羊膜动物系统发生美丽线虫 BAc文库中华绒螯蟹

瓶鼻海豚mtDNA控制区序列变异及c-mos基因在鲸类系统发生研究中的应用

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瓶鼻海豚mtDNA控制区序列变异及c-mos基因在鲸类系统发生研究中的...

作者：季国庆南京师范大学

学位级别：硕士

本论文共包括四个部分： 1．综述了近年来鲸类分子系统学的研究进展。 2．改进了从鲸类陈旧骨骼标本中进行基因组DNA提取和PcR扩增的方法。通过模板DNA的纯化和使用降落式PcR和二次巢式PcR的循环条件，成功地从鲸类陈旧骨骼标本中特异... 详细信息

本论文共包括四个部分： 1．综述了近年来鲸类分子系统学的研究进展。 2．改进了从鲸类陈旧骨骼标本中进行基因组DNA提取和PcR扩增的方法。通过模板DNA的纯化和使用降落式PcR和二次巢式PcR的循环条件，成功地从鲸类陈旧骨骼标本中特异地扩增出目的片段，用于克隆和测序。 3．测定了30头中国水域瓶鼻海豚(Tursiops spp.)mtDNA控制区5’端424bp的序列，结合已发表的中国水域其它瓶鼻海豚的mtDNA控制区序列，共发现54个变异位点，定义了37种单元型。中国水域瓶鼻海豚的两个形态型之间没有共享单元型，且具有8个鉴别位点。基于最大似然法(maximum likelihood,ML)和邻接法(neighbor joining,NJ)的系统发生分析均把单元型聚类为分别代表两个形态型的支系。形态型之间的核苷酸歧异度为5.58％，超过了其它海豚类种间的序列歧异水平，支持把这两个形态型划分为两个独立的种，即***和了***。中国水域北部(黄渤海和东海北部)的瓶鼻海豚全为了***，南部水域(东海南部、台湾海峡、南海和北部湾)的瓶鼻海豚主要为了***，与以前的形态学研究结果相吻合。虽然两种瓶鼻海豚的分布区在台湾海峡一带出现重叠，但相互之间缺乏基因交流，提示两者可能已出现了显著的生殖隔离。 4．通过猪等的c-mos基因保守区设计了用于扩增鲸类c-mos基因的引物。应用此引物扩增并测定了齿鲸类5个科12个种共24个个体的c-mos基因编码区546bp的序列。结果表明鲸类的c-mos基因遗传变异水平较低。在系统发生重建中，同科的物种聚为一单系，但不能很好地解决科下亚科间的关系，提示c-mos基因适用于鲸类科及科以上阶元的系统发生分析。

关键词：鲸类瓶鼻海豚(genus: ursiops) mtDNA控制区 c-mos 系统发生

AY 9944-A-7对猪卵母细胞体外成熟及c-mos、MEK、ERK1/2表达量的影响

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AY 9944-A-7对猪卵母细胞体外成熟及c-mos、MEK、ERK1/2表达量的...

作者：娄松萧山西农业大学

学位级别：硕士

卵泡液促减数分裂甾醇(FF-MAS)是胆固醇生物合成途径的中间产物,因其诱导卵母细胞减数分裂作用而得名,在胆固醇生物合成途径中,FF-MAS在△14-还原酶的作用下转化为睾丸促减数分裂甾醇(T-MAS)。AY 9944-A-7能够通过抑制△14-还原酶表达,... 详细信息

卵泡液促减数分裂甾醇(FF-MAS)是胆固醇生物合成途径的中间产物,因其诱导卵母细胞减数分裂作用而得名,在胆固醇生物合成途径中,FF-MAS在△14-还原酶的作用下转化为睾丸促减数分裂甾醇(T-MAS)。AY 9944-A-7能够通过抑制△14-还原酶表达,阻断FF-MAS向T-MAS的转化,使FF-MAS在性腺中累积,从而发挥其诱导卵母细胞减数分裂的作用。本试验以排出第一极体(PBI)作为衡量猪cEOs体外成熟的标志,研究AY9944-A-7在猪卵丘包裹的卵母细胞(cEOs)体外自发成熟中的作用;检测不同浓度AY9944-A-7诱导的猪cEOs体外成熟过程中mos/MEK/ERK1/2通路中关键基因的表达量,探究AY 9944-A-7作用的信号通路。试验结果如下：分别在猪cEOs体外成熟培养体系添加0,20,30,40μmol/L AY 9944-A-7,研究AY9944-A-7对猪cEOs体外成熟的作用。并对成熟卵母细胞进行荧光定量分析,研究不同浓度AY 9944-A-7对mos/MEK/ERK1/2通路中关键基因表达量的影响。结果表明：在猪cEOs体外成熟培养体系添加30μmol/L AY 9944-A-7,卵母细胞成熟率最高,且显著高于其它组(Pc-mos基因在20μmol/L AY 9944-A-7培养下的猪cEOs中表达量最高,MEK、 ERK1、ERK2均在30μmol/L AY 9944-A-7培养下的猪cEOs中表达量最高。在猪cEOs体外成熟培养体系中添加30μmol/L AY 9944-A-7,分别在体外培养12h、 24h、36h、44h,对培养后的卵母细胞进行荧光定量分析,研究不同的培养时间,AY9944-A-7对mos/MEK/ERK1/2通路中关键基因表达量的影响。结果表明：c-mos基因在30μmol/L AY 9944-A-7培养12h时表达量最高;MEK基因在30μmol/L AY 9944-A-7培养12h和44 h时表达量最高,两者之间差异不显著(P>0.05);ERK1与ERK2基因均在30μmol/LAY 9944-A-7培养44 h时表达量最高。综上,AY 9944-A-7诱导体外猪cEOs恢复减数分裂成熟的最佳浓度为30μmol/L。在培养基中添加AY 9944-A-7的多少以及培养时间的长短,都会对mos/MEK/ERK1/2通路中关键基因的表达量产生影响。

关键词： AY 9944-A-7 猪cEOs c-mos MEK ERK1 ERK2

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c-mos运算放大器cA3130

微电子学与计算机 1976年第5期 35-37页

作者：高存贞

最近RcA公司发表了一种新型运算放大器cA3130,为8腿TO-5型(见图1),与通用运算放大器μA741Ic相同,并能和741系列相容。cA3130的输入级使用了mos FET,中间级是高β双极晶体管,输出级是c-mos结构。并把稳压二极管、偏压二极管、恒流源等P-... 详细信息

最近RcA公司发表了一种新型运算放大器cA3130,为8腿TO-5型(见图1),与通用运算放大器μA741Ic相同,并能和741系列相容。cA3130的输入级使用了mos FET,中间级是高β双极晶体管,输出级是c-mos结构。并把稳压二极管、偏压二极管、恒流源等P-mos都做在同一片子上,实现了单块化。

关键词：运算放大器双极晶体管中间级输出级 c-mos cA3130