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大鼠冠状动脉粥样硬化钙化组织与c-kit^(+)和sca-1^(+)细胞的关系研究

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中国临床解剖学杂志 2023年第4期41卷 453-458页

作者：孙攀文郭永龙贾阳阳孙昌业郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院第一附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨大鼠冠状动脉粥样硬化钙化区域sca-1、c-kit的表达变化,为进一步研究冠状动脉粥样硬化机制奠定细胞学基础。方法30只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(n=8)和动脉粥样硬化钙化模型组(n=22)。采用丙基硫氧嘧啶灌胃、高脂高胆... 详细信息

目的探讨大鼠冠状动脉粥样硬化钙化区域sca-1、c-kit的表达变化,为进一步研究冠状动脉粥样硬化机制奠定细胞学基础。方法30只健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组(n=8)和动脉粥样硬化钙化模型组(n=22)。采用丙基硫氧嘧啶灌胃、高脂高胆固醇饲料喂养和维生素D3腹腔注射方法制备模型。模型制备成功后,通过免疫组织化学和免疫荧光技术观察sca-1、c-kit在模型组与正常组的大鼠冠状动脉组织中的表达变化。利用免疫荧光双标技术证明sca-1与α-SMA的共定位表达。利用western blotting技术检测模型组与正常组的冠状动脉组织c-kit、sca-1蛋白的表达差异。结果造模12周,大鼠冠状动脉管壁明显增厚,内膜明显增生,平滑肌纤维排列显著紊乱,坏死物质沉积、脂质沉积和钙结节沉淀。免疫组化和免疫荧光结果显示sca-1+细胞和c-kit^(+)细胞在动脉粥样硬化钙化区域的冠状动脉内膜、中膜、外膜中数量明显高于正常对照。病变区域的部分细胞存在sca-1与α-SMA的共表达。Western blotting结果显示动脉粥样硬化和钙化区域的c-kit、sca-1蛋白的表达量高于正常对照组。结论sca-1+细胞和c-kit^(+)细胞有向冠状动脉粥样硬化钙化区域迁移的倾向,其机制尚需研究。

关键词： sca-1 c-kit 动脉粥样硬化钙化免疫组织化学大鼠心脏

New insights into the effect of molecular crowding environment induced by dimethyl sulfoxide on the conformation and stability of G-quadruplex

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chinese chemical Letters 2023年第3期34卷 326-331页

作者： Yumeng Yang Junfeng Xiang Hongxia Sun Hengwen chen Hong Zhang Yalin Tang Beijing National Laboratory for Molecular Sciences State Key Laboratory for Structural Chemistry of Unstable and Stable SpeciesInstitute of ChemistryChinese Academy of SciencesBeijing 100190China University of chinese Academy of Sciences Beijing 100049China center for Physiochemical Analysis&Measurement Institute of ChemistryChinese Academy of SciencesBeijing 100190China Department of cardiology Guang’anmen HospitalChina Academy of Chinese Medical SciencesBeijing 100053China

Various structures of G-quadruplex in biosystems play an important role in different diseases and are often regulated by a variety of molecular crowding environments induced by internal and even external factors(e.g.,a solvent).Dimethyl sulfoxide(DMSO),a universal solvent,has been widely used in biological studies and for drug therapy,but little is known regarding its effect on G-quadruplex structure and stability.Here,we report the influence of molecular crowding environment induced by DMSO on the conformation and stability of G-quadruplex structure.We show that the G-quadruplex-forming sequences such as human telomeric sequence,which may have diverse conformations in different environments,tend to convert their topologies to parallel structures under the molecular crowding stimulated by DMSO.Moreover,DMSO can increase the stability of the parallel and antiparallel topologies,especially the parallel G-quadruplex sequence c-kit,but not the hybrid topologies.Further analysis of c-kit using the cD and NMR technique,combined with the unique structural characteristics of c-kit,reveals that the crowding,dehydration and interaction of DMSO are conductive to the formation and stability of the parallel G-quadruplex.The present study suggests that,DMSO,a common solvent used in DNA experiments,may have a nonnegligible influence on the structure and stability of G-quadruplex.

关键词： Dimethyl sulfoxide G-quadruplex c-kit Molecular crowding

Recalcitrant cutaneous Mastocytosis Treated With Genetically Informed Targeted Therapy:A case Report

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International Journal of Dermatology and Venereology 2023年第2期6卷 107-109页

作者： Laura Gleason Volkan Tekmen Alexa cohen Safiyyah Bhatti Burcu Beksac Jisun cha Pierluigi Porcu Neda Nikbakht Department of Dermatology and cutaneous Biology Thomas Jefferson UniversityPhiladelphiaPA 19107USA Division of Hematologic Malignancies and Hematopoietic Stem cell Transplant Department of Medical OncologySidney Kimmel Cancer CenterThomas Jefferson UniversityPhiladelphiaPA 19107USA Department of Dermatopathology Schweiger Dermatology GroupNew YorkNY 10006USA

Introduction:Mastocytosis,a clonal proliferation of mast cells commonly involving the skin and bone marrow,has a varied clinical presentation ranging from cutaneous lesions to systemic disease.cutaneous mastocytosis is managed symptomatically,but systemic mastocytosis is treated with targeted therapy against the mutated receptor tyrosine kinase c-kit,the pathogenic driver of mastocytosis.However,there are no guidelines for the treatment of cutaneous mastocytosis refractory to symptomatic management.We herein report a method to select genetically informed therapy for symptomatic and recalcitrant cutaneous mastocytosis.case presentation:We performed a mutational analysis of dermal mast cells after enrichment by laser capture in a 23-year-old woman with recalcitrant cutaneous mastocytosis.The analysis revealed a aspartic acid to valine substitution at codon 816(D816V)mutation in the protein c-kit.Based on these results,we initiated treatment with the multi-kinase/kit inhibitor midostaurin,a treatment effective against the D816V c-kit mutation.After 3 months of treatment,the patient exhibited a reduction in the number and size of cutaneous lesions and reported resolution of pruritus and decreased severity of other mast cell-related symptoms.Discussion:The treatment of mastocytosis relies heavily on whether the disease is limited to the skin or systemic.However,there are no guidelines for cutaneous mastocytosis that does not respond to symptomatic management.In the present report describing a patient with recalcitrant cutaneous mastocytosis,we describe a strategy in which skin mutational analysis is used to guide the selection of targeted therapy.conclusion:Performing mast cell mutational analyses in the skin provides a means to select targeted therapy for symptomatic and refractory cutaneous mastocytosis.

关键词： mastocytosis c-kit molecular genetics targeted therapy midostaurin

c-kit在尼古丁依赖肾嫌色细胞癌患者中的作用机制研究

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中国药物依赖性杂志 2023年第5期32卷 414-419,425页

作者：江家豪刘凌琪陈明珠杨兰馨李艳琴武汉大学人民医院泌尿外科武汉430060 武汉大学药学院武汉430072

目的通过分析尼古丁依赖患者肾嫌色细胞癌组织中c-kit的表达情况,并对差异表达的c-kit进行相关生物信息学分析,进一步探讨其在尼古丁依赖肾嫌色细胞癌患者中的潜在作用机制。方法利用癌症基因组图谱(The cancer Genome Atlas,TcGA)数据... 详细信息

目的通过分析尼古丁依赖患者肾嫌色细胞癌组织中c-kit的表达情况,并对差异表达的c-kit进行相关生物信息学分析,进一步探讨其在尼古丁依赖肾嫌色细胞癌患者中的潜在作用机制。方法利用癌症基因组图谱(The cancer Genome Atlas,TcGA)数据库,分析肿瘤组织与癌旁组织中c-kit表达差异,meta分析验证上述结果。基于UALcAN数据库,分析影响基因表达的临床病理特征。通过Linkedomics进行c-kit共表达基因的基因富集通路及PPI网络图的获取。Timer分析c-kit表达与肿瘤免疫浸润的关系。免疫组化分析尼古丁依赖肾嫌色细胞癌患者肾组织中c-kit蛋白的表达情况。结果c-kit在肾嫌色细胞癌组织中异常高表达,且表达与患者肿瘤分期相关。kit在肾嫌色细胞癌的免疫浸润中发挥着重要的作用。吸烟能诱导肾嫌色细胞癌患者肿瘤组织中c-kit蛋白表达。结论尼古丁作为肾癌的重要诱发因素,可能通过激活肿瘤组织中c-kit活性在肾嫌色细胞癌的发生发展过程中发挥重要作用。

关键词： c-kit 肾嫌色细胞癌生物信息学尼古丁

ASXL2基因突变与伴AML1-ETO融合基因的AML患者的临床特征、预后及c-kit基因突变的关系

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中国实验血液学杂志 2020年第1期28卷 125-129页

作者：崔鹏徐冬邢恬任国华马尚民淄博市第一医院血液风湿免疫科山东淄博255200

目的:分析ASXL2基因突变与伴AML1-ETO融合基因的急性髓系白血病(AML)患者的临床特征、预后及c-kit基因突变的关系。方法:收集并回顾性分析本院63例伴有AML1-ETO融合基因的初发AML患者的临床资料,根据PcR直接测序技术对患者ASXL2基因突... 详细信息

目的:分析ASXL2基因突变与伴AML1-ETO融合基因的急性髓系白血病(AML)患者的临床特征、预后及c-kit基因突变的关系。方法:收集并回顾性分析本院63例伴有AML1-ETO融合基因的初发AML患者的临床资料,根据PcR直接测序技术对患者ASXL2基因突变情况进行检测。比较ASXL2基因突变(A组)患者与无突变患者(B组)的临床特征、c-kit基因突变率及预后状况。结果:63例患者中,发生ASXL2基因突变8例(12.70%)。A组患者初诊时外周血血红蛋白水平较B组患者明显下降(P0.05),且2组患者均无中枢神经系统、肝、脾浸润病例的出现。A组cD33表达较B组明显降低(P0.05)。2组患者治疗缓解率和中位生存期无显著性差异(P>0.05)。A组c-kit基因突变检出率与B组无显著性差异(P>0.05)。结论:在伴AML1-ETO融合基因的AML患者中,ASXL2基因突变占有一定比例,且该病患者外周血血红蛋白浓度和cD33表达往往较低,同时ASXL2基因突变与c-kit基因突变可能并无密切关系。

关键词：急性髓系白血病 ASXL2 AML1-ETO c-kit 基因突变

白术七物颗粒对慢传输型便秘小鼠肠道运动、cajal间质细胞、c-kit表达及肠道菌群的影响

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中国中医药信息杂志 2023年第5期30卷 83-90页

作者：肖金银林仁敬罗雯鹏谷丽瑶肖玉娇王梨力陆文洪李帅军罗敏湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第二附属医院湖南中医药大学中医学国内一流建设学科湖南长沙410005

目的观察白术七物颗粒对慢传输型便秘(STc)小鼠肠道运动、cajal间质细胞(Icc)、酪氨酸激酶受体c-kit及肠道菌群的影响,探讨其治疗STc的作用机制。方法42只IcR小鼠随机分为对照组、模型组、普芦卡必利组和白术七物颗粒低、中、高剂量组,... 详细信息

目的观察白术七物颗粒对慢传输型便秘(STc)小鼠肠道运动、cajal间质细胞(Icc)、酪氨酸激酶受体c-kit及肠道菌群的影响,探讨其治疗STc的作用机制。方法42只IcR小鼠随机分为对照组、模型组、普芦卡必利组和白术七物颗粒低、中、高剂量组,采用盐酸洛哌丁胺灌胃建立STc小鼠模型,各给药组分别予相应药物灌胃14 d。观察小鼠一般体征变化,测定粪便干湿重及肠道推进率,HE染色观察结肠组织形态,免疫组化染色检测结肠组织c-kit表达,TUNEL染色检测结肠组织Icc凋亡情况,16S rRNA测序检测肠道菌群变化。结果与对照组比较,模型组小鼠精神不振,皮毛粗糙、光泽度差,大便干结、呈团块状,粪便干湿重显著减少,肠道推进率显著降低(Pc-kit表达显著降低(Pcc凋亡有所增加;与模型组比较,白术七物颗粒中、高剂量组和普芦卡必利组小鼠一般体征显著改善,粪便干湿重显著增加,肠道推进率显著升高(Pc-kit表达显著升高(Pcc凋亡减少。16S rRNA测序结果显示,白术七物颗粒可调节模型小鼠粪便绒毛杆菌属、乳杆菌属、拟杆菌属、副拟杆菌属和阿克曼菌属等菌群丰度,尤以白术七物颗粒高剂量组效果最明显。结论白术七物颗粒可改善STc小鼠症状和结肠损伤,促进肠道运动,其机制可能与上调结肠组织c-kit表达、抑制Icc凋亡、改善肠道菌群失调有关。

关键词：白术七物颗粒慢传输型便秘 cajal间质细胞 c-kit 肠道菌群小鼠

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益生菌组合物对慢传输型便秘的改善作用

食品与发酵工业 2022年第11期48卷 95-100页

作者：陈家伦张万祥甘聃仙乐健康科技股份有限公司广东汕头515041

探究益生菌组合物(鼠李糖乳杆菌LR-168、嗜酸乳杆菌LA-99和动物双歧杆菌BB-115)对慢传输型便秘的作用及机制。将50只6周龄雄性BABL/c小鼠随机分为空白组(生理盐水)、模型组(洛哌丁胺)、阳性对照组(洛哌丁胺+动物双歧杆菌BB-12:5×10^(8)... 详细信息

探究益生菌组合物(鼠李糖乳杆菌LR-168、嗜酸乳杆菌LA-99和动物双歧杆菌BB-115)对慢传输型便秘的作用及机制。将50只6周龄雄性BABL/c小鼠随机分为空白组(生理盐水)、模型组(洛哌丁胺)、阳性对照组(洛哌丁胺+动物双歧杆菌BB-12:5×10^(8) cFU)、低剂量组(洛哌丁胺+益生菌组合物:5×10^(8) cFU)和高剂量组(洛哌丁胺+益生菌组合物:5×10^(9) cFU),灌胃21 d后处死,对小鼠生理生化指标进行测定。与模型组相比,益生菌组合物低、高剂量组显著提高小肠推进率、黑便粒数和黑便质量,显著降低首粒黑便时间;此外,灌菌处理后,血清和结肠组织的兴奋性神经递质(P物质、胃动素和胃泌素)分泌上升,抑制性神经递质(血管活性肽、生长抑素和内皮素-1)分泌下降;各组间的血清细胞因子水平无统计学差异;结肠组织的AQP3和c-kit基因转录量在益生菌干预后显著提高。益生菌组合物具有缓解慢传输型便秘的作用,这可能是通过影响胃肠调节肽分泌,以及AQP3和c-kit基因转录的水平来实现的。

关键词：慢传输型便秘益生菌洛哌丁胺胃肠调节肽 AQP3 c-kit

c-kit信号在宫腔粘连发生发展过程中的作用机制研究

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C-kit信号在宫腔粘连发生发展过程中的作用机制研究

作者：范露南昌大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在阐释c-kit在宫腔粘连发生发展中的分子作用机制,以期为预防宫腔粘连的发生以及治疗策略提供理论依据。方法:收集2021年6月～2022年2月于江西省妇幼保健院因妊娠相关宫腔操作史行宫腔镜检查,诊断为宫腔粘连（intrauterine... 详细信息

目的:本研究旨在阐释c-kit在宫腔粘连发生发展中的分子作用机制,以期为预防宫腔粘连的发生以及治疗策略提供理论依据。方法:收集2021年6月～2022年2月于江西省妇幼保健院因妊娠相关宫腔操作史行宫腔镜检查,诊断为宫腔粘连（intrauterine adhesion,IUA）的患者子宫内膜标本（N=18）。以及收集同期行宫腔镜检查排除宫腔粘连,诊断为正常宫腔形态的育龄期子宫内膜标本（N=14）。通过组织免疫化学以及免疫印迹实验（western blot）对c-kit进行初步定位定量检测。同时,利用western blot分别检测E-cadherin、整合素αVβ3以及相关蛋白rab11a蛋白表达水平。此外,本研究还结合c-kit抑制剂处理人子宫内膜上皮细胞系（h EEc细胞和Ishikawa细胞）,并检测其相关潜在作用蛋白表达水平。结果:组织免疫化学显示c-kit在子宫内膜组织上皮细胞以及子宫内膜间质细胞表面均有表达。Western blot检测发现,与正常子宫内膜组织相比,宫腔粘连患者c-kit蛋白表达显著下降（P＜0.05）,同时E-cadherin蛋白表达亦明显减弱（P＜0.05）。另外,与正常子宫内膜组织相比,宫腔粘连患者的整合素αV、整合素β3以及rab11a蛋白表达无统计学差异（P＞0.05）。体外细胞实验显示,随着Imatinib浓度的增加,细胞AKT磷酸化程度明显减少,E-cadherin的表达随之下调。结论:在子宫内膜修复过程中,由于c-kit受体表达减少,使得其下游AKT信号活化减弱,进而下调E-cadherin表达水平,最终促进宫腔粘连的发生。

关键词： c-kit 宫腔粘连 E-cadherin

电针天枢、大肠俞对慢传输型便秘大鼠结肠组织chAT、ScF和c-kit表达的影响

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中国中医药信息杂志 2022年第9期29卷 90-94页

作者：钟峰匡泓俊文钱曹洋袁楠杨腊媛袁杨阳章薇湖南中医药大学湖南长沙410208 湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的观察电针“天枢”“大肠俞”对慢传输型便秘(STc)大鼠结肠组织乙酰胆碱转移酶(chAT)、干细胞因子(ScF)和酪氨酸激酶受体c-kit表达的影响,探讨电针治疗STc的作用机制。方法将40只SPF级SD大鼠随机分为空白组、盐水组、模型组和电针组... 详细信息

目的观察电针“天枢”“大肠俞”对慢传输型便秘(STc)大鼠结肠组织乙酰胆碱转移酶(chAT)、干细胞因子(ScF)和酪氨酸激酶受体c-kit表达的影响,探讨电针治疗STc的作用机制。方法将40只SPF级SD大鼠随机分为空白组、盐水组、模型组和电针组,每组10只。模型组和电针组连续21 d灌胃复方地芬诺酯混悬液建立STc模型。造模成功后,电针组电针双侧“天枢”“大肠俞”,每日1次,连续14 d,其余各组固定相同时间,不干预。测定大鼠胃排空率和小肠推进率,免疫荧光检测大鼠结肠组织chAT和c-kit表达,Western blot检测结肠组织ScF、c-kit蛋白表达,RT-PcR检测结肠组织ScF、c-kit mRNA表达。结果与空白组比较,盐水组大鼠胃排空率、小肠推进率及结肠组织chAT、ScF、c-kit表达差异无统计学意义(P>0.05);与空白组比较,模型组大鼠胃排空率、小肠推进率显著降低(PchAT和c-kit表达显著降低,ScF、c-kit蛋白及mRNA表达显著降低(PchAT、c-kit表达显著升高,ScF、c-kit蛋白及mRNA表达显著升高(Pc大鼠胃肠道传输功能,其机制可能与促进chAT表达/激活ScF/c-kit通路有关。

关键词：慢传输型便秘电针天枢大肠俞乙酰胆碱转移酶干细胞因子 c-kit 大鼠