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bcl-x expression in normal endometrium, endometrialhyperplasia and adenocarcinoma

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生殖医学杂志 2000年第S1期9卷 41-47页

作者：周从容陈贵安薛爱玲

Objective: To evaluate the relationships between bcl-x expression and apoptosis in normal endometrium (NE), endometrial hyperplasia (EH) and adenocarcinoma (EA). Methods: Immunohistochemical technique was used to examine the localization and expression of bcl-x proteins in 55 cases of NE, 18 cases of EH and 13 cases of EA. The expression form of bcl-x protein in normal or abnormal endometrium was further characterized by Western blot analysis. Results: As assessed by immunohistochemistry, bcl-x proteins were predominantly localized in cytoplasm and nuclear membrane of glandular epithelial cells of the basal layer during the proliferative phase, and the functional layer during the secretory phase. Level of bcl-x protein was lower in proliferative phase and remarkably increased in the late secretory and the menstrual phase. By Western blotting, it was found the form of bcl-x was mainly bcl-xL in proliferative and secretory endometrium. Weak expression of bcl-xs was only found in secretory endometrium. Weak bcl-x expression was also found in cytoplasm of glandular cells of nonatypical hyperplasia, but strong staining presented in atypical hyperplasia, and the only form detected by Western blotting was bcl-xL. While in adenocarcinoma, both bcl-xL. and bcl-xs existed but the amount of the long form was much higher than that of the short one. Conclusion: Our results suggest that the existance of bcl-x, especially bcl-xL plays a role in the regulation of apoptosis in the human endometrium, not only in cycling endometrium but also in endometrial hyperplasia and adenocarcinoma just like the other members of the bcl-2 family.

关键词： Adenocarcinoma Apoptosis bcl-x Endometrium Gene expression Hyperplasia

bcl-x微基因及其突变微基因的构建与鉴定

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第2期14卷 289-293页

作者：黄波王小中王彩纹李静章海斌熊火梅肖芸南昌大学第二附属医院检验科江西省南昌市330006 南昌大学第一附属医院检验科江西省南昌市330006

背景:bcl-xL/bcl-xS比值的增高与肿瘤的发生密切相关,其机制尚未阐明。bcl-x微基因是研究其选择性剪接机制的重要工具。目的:构建人类凋亡相关基因bcl-x的微基因及其突变微基因,为进行bcl-x基因选择性剪接方面的研究打下基础。方法:首... 详细信息

背景:bcl-xL/bcl-xS比值的增高与肿瘤的发生密切相关,其机制尚未阐明。bcl-x微基因是研究其选择性剪接机制的重要工具。目的:构建人类凋亡相关基因bcl-x的微基因及其突变微基因,为进行bcl-x基因选择性剪接方面的研究打下基础。方法:首先采用PCR法从人白血病细胞K562基因组DNA中扩增出bcl-x基因外显子2及内含子2的5’部分序列片段,定向插入真核表达载体pcDNA3.1(-)中,然后扩增出bcl-x基因内含子2的3’端及外显子3部分序列,定向插入上一片段下游,构建成pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因,测序鉴定无误后,用pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因瞬时转染HL-60,通过RT-PCR方法对其在细胞内表达作进一步鉴定。另外,以pcDNA3.1(-)-bcl-x微基因为模板,利用反向PCR法构建突变微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE1(M)。结果与结论:以人白血病细胞K562基因组DNA为模板,P1和P2为引物,经PCR扩增得约686bp的目的片段;以P3和P4为引物扩增出约178bp的目的片段。微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x分别经xbaⅠ和EcoRⅠ双切、xbaⅠ和xhoⅠ双切鉴定均得到预期的片段,突变微基因pcDNA3.1(-)-bcl-x-CRCE1(M)经EcoRⅠ单酶切后,均得到预期片段,测序结果正确,表明成功构建人类凋亡相关基因bcl-x的微基因及其突变微基因。

关键词：微基因突变微基因选择性剪接 bcl-x 顺式作用原件

bcl-x、bax基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系

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细胞与分子免疫学杂志 2001年第4期17卷 356-358页

作者：徐宏勇李开宗付由池窦科峰李景梦第四军医大学西京医院肝胆外科陕西西安710032 解放军451医院

目的研究凋亡相关基因bcl-x及bax在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与HCC临床病理学特征的关系及其意义。方法采用免疫组织化学方法，检测石蜡包埋的HCC标本中凋亡相关基因bcl-x及bax的表达。结果在40例HCC中，bcl-x和... 详细信息

目的研究凋亡相关基因bcl-x及bax在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与HCC临床病理学特征的关系及其意义。方法采用免疫组织化学方法，检测石蜡包埋的HCC标本中凋亡相关基因bcl-x及bax的表达。结果在40例HCC中，bcl-x和bax阳性者分别为20 例和19例；14例肝硬变bcl-x和bax 阳性者分别为12例和11例。bcl-x和bax 在HCC细胞中的表达均低于肝硬变(均P∨0.05)；bcl-x和bax在高中分化型HCC细胞中的表达均高于低分化型。AFP≤400μg/L的患者二者的表达均高于AFP∧400μg/L的患者。在临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的HCC细胞中的表达均高于Ⅲ期, 彼此间均有显著性差异；而在男性与女性患者间, 在年龄∧60岁与∨60岁患者间，均无显著性差异(均为P∧0.05)。凋亡相关基因bcl-x及bax在HCC细胞的表达呈正相关(r=0.5602, P∨0.001)。结论凋亡相关基因bcl-x和bax在HCC细胞中的表达，对肝癌细胞的凋亡具有调节作用, 并与HCC的分化程度、临床分期和AFP的水平有关。

关键词：肝细胞癌 bcl-x bax 基因表达病理细胞凋亡

淋巴瘤凋亡调节基因bcl x mRNA及蛋白的表达

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中华病理学杂志 1999年第4期28卷 260-263页

作者：周晓燕许良中何开玲朱雄增朱伟萍张泰明上海医科大学肿瘤医院病理科 200032 上海医科大学肿瘤医院生物化学教研室 200032

目的　探讨凋亡调节基因ｂｃｌｘ在淋巴瘤细胞凋亡调控和肿瘤发生中的作用及在淋巴瘤诊断中的价值。方法　收集３０例新鲜标本和１０９例存档蜡块（均包括淋巴结反应性增生和Ｔ、Ｂ常见类型淋巴瘤），用逆转录－聚合酶链反应（... 详细信息

目的　探讨凋亡调节基因ｂｃｌｘ在淋巴瘤细胞凋亡调控和肿瘤发生中的作用及在淋巴瘤诊断中的价值。方法　收集３０例新鲜标本和１０９例存档蜡块（均包括淋巴结反应性增生和Ｔ、Ｂ常见类型淋巴瘤），用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和免疫组化枸橼酸微波ＡＢＣ法分别观察ｂｃｌｘｍＲＮＡ和其蛋白的表达及分布。结果　ＲＴ－ＰＣＲ显示３０例新鲜标本中均有ｂｃｌｘ的转录，其中２９例可见ｂｃｌｘｌ条带，１３例出现ｂｃｌｘｓ条带，ｂｃｌｘｌ的强度均强于ｂｃｌｘｓ。免疫组化显示１０９例中９７例ｂｃｌｘ阳性，呈胞质内细颗粒状，在淋巴结反应性增生中ｂｃｌｘ呈弱阳性，主要为滤泡中心及滤泡间区细胞阳性，而套细胞为阴性；淋巴瘤细胞常为弥漫强阳性，各类型淋巴瘤染色分数显著高于淋巴结反应性增生（Ｐ＜０．０５），但各类型淋巴瘤间染色分数和阳性率均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论　ｂｃｌｘ在淋巴瘤中呈活跃转录及蛋白高表达，主要以抑制细胞凋亡的ｂｃｌｘｌ形式存在。ｂｃｌｘ的蛋白表达特征可能对淋巴结反应性增生和淋巴瘤的鉴别诊断有一定帮助。

关键词：淋巴瘤细胞凋亡 mRNA 免疫组织化学 bcl-x

地塞米松对脑缺氧缺血新生大鼠bcl-x及bax基因表达的调节

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中华儿科杂志 2000年第8期38卷 480-482页

作者：周伟吴圣楣陈惠金第一军医大学附属珠江医院儿科广州5100282 上海第二医科大学新华医院上海市儿科医学研究所 200092

目的　探讨地塞米松 (DEx)预处理对缺氧缺血 (HI)新生大鼠脑保护作用的可能机制。方法　通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑病 (HIE)动物模型 ,应用快速竞争性RT PCR技术 ,分别对HI、DEx预处理后于HI、缺氧结束后即刻予DEx、DEx加假手术、正... 详细信息

目的　探讨地塞米松 (DEx)预处理对缺氧缺血 (HI)新生大鼠脑保护作用的可能机制。方法　通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑病 (HIE)动物模型 ,应用快速竞争性RT PCR技术 ,分别对HI、DEx预处理后于HI、缺氧结束后即刻予DEx、DEx加假手术、正常对照 5组 (每组 40只鼠 )动物的实验侧大脑组织中bcl x (bcl xl和bcl xs)、baxmRNA的表达进行半定量分析。结果　脑HI后bcl xs、baxmRNA的表达明显增强 ,并在HI后 2 4h左右达高峰 (bcl xs 1.5 2± 0 .17,bax 1.43± 0 .17) ,在脑HI后 2～ 72h ,DEx预处理组bcl xs、baxmRNA的表达水平 (bcl xs 0 .0 3± 0 .0 5～ 0 .19± 0 .2 3,bax 0 .0 2± 0 .0 3～ 0 .13± 0 .2 1)显著低于HI组 (bcl xs 0 .14± 0 .0 6～ 1.5 2± 0 .17,bax 0 .0 9± 0 .0 3～ 1.43± 0 .17) (P x组其bcl xs、baxmRNA的表达量 (bcl xs 0 .13± 0 .0 7～ 1.5 3± 0 .18;bax 0 .0 7±0 .0 5～ 1.47± 0 .10 )与HI组之间的差异无显著性 (P >0 .0 5 )。DEx及HI对bcl xlmRNA的表达无明显影响。结论　脑HI可诱导bcl xs、baxmRNA过表达 ,这种过表达在脑HI后细胞凋亡的调控过程中可能起着重要作用。DEx预处理可通过抑制bcl xs、baxmRNA的过表达起到抗细胞凋亡的作用。

关键词：地塞米松 bcl-x bax 新生大鼠缺氧缺血性脑瘤

反义寡核苷酸vMO调控bcl-x剪接对人乳腺癌细胞侵袭转移的影响

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中国病原生物学杂志 2020年第5期15卷 527-532页

作者：李清祥廖志华张静刘勇白羽蒋沁炆朱春龙邬艳王小中刘静南昌市第三医院检验科江西南昌330009 江西省妇幼保健院检验科南昌大学第二附属医院检验科江西省检验医学重点实验室南昌市东湖区疾病预防控制中心

目的探讨靶向纠正bcl-x基因异常剪接对人乳腺癌细胞侵袭转移等生物学行为的影响。方法人乳腺癌MDA-MB-231细胞和正常NIH3T3细胞均设转染组和空白对照组。实验组采用靶向bcl-x基因的特异性Vivo-Morpholino Antisense Oligomer(vMO)进行转... 详细信息

目的探讨靶向纠正bcl-x基因异常剪接对人乳腺癌细胞侵袭转移等生物学行为的影响。方法人乳腺癌MDA-MB-231细胞和正常NIH3T3细胞均设转染组和空白对照组。实验组采用靶向bcl-x基因的特异性Vivo-Morpholino Antisense Oligomer(vMO)进行转染,空白对照组常规培养。采用qRT-PCR和Western Blot分别检测各组bcl-x剪接体bcl-xL和bcl-xS mRNA和蛋白表达水平,通过流式细胞仪(FCM)、平板克隆形成试验、Transwell侵袭试验及划痕试验检测vMO对MDA-MB-231和NIH3T3细胞增殖、凋亡、侵袭及转移的影响。结果VMO能稳定高效转染细胞,荧光阳性率达99.17%,并能持续稳定存在7天以上;VMO能在胞内有效调节bcl-x的剪接模式,MDA-MB-231细胞中bcl-xL mRNA和蛋白较对照组显著降低,而bcl-xS mRNA和蛋白较对照组显著升高(Pbcl-x pre-mRNA促使bcl-xL向bcl-xS转化,在抑制乳腺癌细胞侵袭及转移方面具有重要作用。

关键词：乳腺癌细胞 bcl-x 反义寡核苷酸侵袭转移

宫颈癌组织中survivin与bcl-x表达及其相关性

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基础医学与临床 2006年第10期26卷 1122-1124页

作者：王华丽赵敬杰孟静徐晖山东大学第二医院山东济南250033

目的研究宫颈癌组织中survivin、bcl-x的表达及其相关性。方法用免疫组化SP法检测survivin、bcl-x在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达。结果Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳... 详细信息

目的研究宫颈癌组织中survivin、bcl-x的表达及其相关性。方法用免疫组化SP法检测survivin、bcl-x在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达。结果Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳性率与宫颈癌病理分级与临床分期呈正相关。Survivin表达阳性率与宫颈癌组织中bcl-x表达正相关。结论Survivin异常表达引起的凋亡抑制在宫颈癌发生、发展中起一定作用,其过表达提示宫颈癌预后不良。宫颈癌组织中survivin的表达与bcl-x的表达呈正相关。

关键词：凋亡基因 survivin bcl-x 宫颈肿瘤免疫组化

银屑病患者表皮及真皮中bcl-x、bcl-2、Bax表达的免疫组化研究

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中华皮肤科杂志 1999年第6期32卷 383-385页

作者：茅晓红程浩孙国均张家敬周凯浙江医科大学附属第二医院皮肤科杭州310009

目的探讨银屑病患者细胞增殖与凋亡的调节。方法用免疫组化SP法检测银屑病皮损及非皮损中bcl－x、bcl-2、Bax的表达情况。结果银屑病皮损中，bcl-x在表皮各层、真皮炎症细胞及血管内皮的表达均较正常明显增高；Bax在颗粒层与棘层的表达... 详细信息

目的探讨银屑病患者细胞增殖与凋亡的调节。方法用免疫组化SP法检测银屑病皮损及非皮损中bcl－x、bcl-2、Bax的表达情况。结果银屑病皮损中，bcl-x在表皮各层、真皮炎症细胞及血管内皮的表达均较正常明显增高；Bax在颗粒层与棘层的表达轻度增高。上述异常在非皮损中已经部分存在，且治疗后未完全恢复正常。而bcl-2表达与正常相似，局限于基底层黑素细胞，角质形成细胞未见阳性。结论银屑病中角质形成细胞过度增殖，炎症细胞浸润及血管增生可能与bcl－x／Bax比率的上调有关。bcl-2对银屑病的发病可能意义不大。

关键词：银屑病细胞死亡 bcl-x bcl-2 Bax

蒙药德都红花-7味散对CCl_(4)所致肝纤维化大鼠bcl-2、bcl-x蛋白表达的影响

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中国老年学杂志 2021年第24期41卷 5614-5617页

作者：薛兰牧仁徐艳华陈红梅娜日苏巴图德力根韩志强内蒙古民族大学附属医院内蒙古通辽028007 内蒙古民族大学

目的观察蒙药德都红花-7味散对CCl_(4)所致肝纤维化大鼠bcl-2、bcl-x蛋白表达的影响。方法将40只SD雄性大鼠按体重分层随机分为对照组、模型组、水飞蓟素组、德都红花-7味散组,每组10只。采用腹腔注射CCl_(4)方法建立肝纤维化模型,空白... 详细信息

目的观察蒙药德都红花-7味散对CCl_(4)所致肝纤维化大鼠bcl-2、bcl-x蛋白表达的影响。方法将40只SD雄性大鼠按体重分层随机分为对照组、模型组、水飞蓟素组、德都红花-7味散组,每组10只。采用腹腔注射CCl_(4)方法建立肝纤维化模型,空白对照组和模型组灌胃蒸馏水,德都红花-7味散低剂量组按0.3 g/kg,水飞蓟宾组21 mg/kg灌胃给药,每天给药一次,给药7 w后动物禁食12 h,取肝组织4%多聚甲醛固定。HE染色观察肝组织病理改变,免疫组织化学方法检测大鼠肝组织中bcl-2、bcl-x蛋白表达影响。结果HE染色模型组中央静脉、汇管区周围及肝实质内均可见大量的肝细胞脂肪变性,肝细胞内可见体积较小、数量不等的圆形空泡;中等量的汇管区周围可见少量的炎性细胞浸润;小叶结构紊乱,多见纤维间隔形成;未见明显的细胞坏死。水飞蓟宾组、德都红花-7味散组中央静脉、汇管区周围及肝实质内肝细胞颗粒变性明显轻于模型组;小叶结构紊乱,多见纤维间隔形成与模型组比较较轻。免疫组织化学染色与空白组比较模型组bcl-2、bcl-x蛋白表达升高,差异有统计学意义(Pbcl-x蛋白表达下降,德都红花-7味散组bcl-2蛋白表达下降,差异有统计学意义(Pbcl-2、bcl-x蛋白表达相关。

关键词：蒙药德都红花-7味散肝纤维化 bcl-2 bcl-x