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COX-2通过AA对HSC-T6细胞增殖及acsl家族基因表达的调控

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COX-2通过AA对HSC-T6细胞增殖及Acsl家族基因表达的调控

作者：章烁南华大学

学位级别：硕士

目的本实验拟从COX-2代谢底物花生四烯酸这一视角，阐明COX-2调控HSC细胞增殖及acsl家族基因表达的机制。实验一方法1、利用MTT比色法检测大鼠HSC-T6细胞在花生四烯酸20μM、40μM、60μM24h、48h的增殖情况。2、利用RT-PCR检测AA20μM... 详细信息

目的本实验拟从COX-2代谢底物花生四烯酸这一视角，阐明COX-2调控HSC细胞增殖及acsl家族基因表达的机制。实验一方法1、利用MTT比色法检测大鼠HSC-T6细胞在花生四烯酸20μM、40μM、60μM24h、48h的增殖情况。2、利用RT-PCR检测AA20μM、AA40μM、AA60μM组时HSC的COX-2、acsl家族基因的表达情况。结果1、花生四烯酸20μM、40μM、60μM时HSC细胞生存率增加（pacsl1基因在AA60μM表达相对增高(pacsl3、acsl6基因在AA40μM、AA60μM表达增高(pacsl4、acsl5基因在各组表达无显著变化(p>0.05）。实验二方法1、向HSC-T6转染构建的pYr-1.1-hU6-EGFP-COX-2shRNA1，荧光显微镜下评估其转染效率。分组为①HSC组;②AA40μM组;③pYr-1.1HK+AA组;④COX-2shRNA1+AA组。AA组浓度为MTT筛选的最佳反应浓度40μM。2、利用MTT比色法检测转染后各组HSC细胞增殖情况。3、利用WB技术检测转染48h后各组COX-2、acsl家族基因的表达情况。结果1、AA40μM组较HSC组OD值增加（pacsl1、 acsl6基因表达较HSC组增加(pacsl1、acsl6蛋白表达降低(pacsl1、acsl6表达无显著差异(p>0.05）。结论1、COX-2可以通过代谢底物花生四烯酸促进肝星状细胞的增殖作用。2、COX-2可以通过代谢底物花生四烯酸调控HSC细胞acsl1、acsl6基因表达。

关键词： COX-2 AA shRNA HSC acsl

COX-2对棕榈酸或油酸诱导重新脂化HSC-T6 acsl家族基因表达的影响

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COX-2对棕榈酸或油酸诱导重新脂化HSC-T6 Acsl家族基因表达的影响

作者：綦湘毅南华大学

学位级别：硕士

目的：本章主要探讨棕榈酸或油酸对重新脂化HSC-T6的影响及COX-2在棕榈酸或油酸诱导的HSC-T6重新脂化过程中对各种acsl表达影响。方法:1、使用含有200mmol/L棕榈酸或20μg/ml油酸的DMEM培养基处理HSC-T6;油红O染色检测棕榈酸和油酸干预4... 详细信息

目的：本章主要探讨棕榈酸或油酸对重新脂化HSC-T6的影响及COX-2在棕榈酸或油酸诱导的HSC-T6重新脂化过程中对各种acsl表达影响。方法:1、使用含有200mmol/L棕榈酸或20μg/ml油酸的DMEM培养基处理HSC-T6;油红O染色检测棕榈酸和油酸干预48小时后HSC-T6细胞内脂滴的变化，观察棕榈酸和油酸对HSC-T6细胞重新脂化的影响。2、利用本实验构建的pYr-1.1-COX-2shRNA，将其转染至HSC-T6中，然后在荧光显微镜下观察并评估其转染效率。3、Western Blot：COX-2shRNA干扰COX-2的表达后再分别给予棕榈酸或油酸处理细胞，Western blot检测各组HSC-T6细胞内COX-2，acsl1，acsl3，acsl4，acsl5，acsl6的表达。结果：1、200mmol/L棕榈酸或20μg/ml油酸干预48小时后均能够促进HSC-T6内脂滴的增多;棕榈酸干预组脂质沉积明显高于空白对照组，两者比较具有显著性差异（P acsl1，acsl5, acsl6的表达，具有显著性差异（P acsl3、acsl4的表达无作用，统计无意义（P>0.05）;与棕榈酸处理组和油酸处理组比较，COX-2shRNA+棕榈酸组和COX-2shRNA+油酸组进一步上调acsl5、acsl6的表达，具有显著性差异（P acsl1、acsl3、acsl4的表达无作用，统计无意义（P>0.05）。结论：1、棕榈酸或油酸均能够诱导HSC-T6重新脂化。2、棕榈酸或油酸均能够上调HSC-T6中acsl1、acsl5、acsl6的表达。3、COX-2对棕榈酸或油酸上调acsl5、acsl6的表达具有拮抗作用。

关键词： COX-2 HSC-T6 棕榈酸油酸 acsl

COX-2对HSC-T6细胞中acsl家族相关基因表达的影响

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COX-2对HSC-T6细胞中Acsl家族相关基因表达的影响

作者：靖新艳南华大学

学位级别：硕士

目的研究COX-2对HSC-T6细胞中acsl家族相关基因表达的影响，明确COX-2调节HSC-T6细胞脂类代谢的作用环节。方法1、实验分组：HSC-T6细胞组（空白组），pYr-1.1-COX-2shRNA组（COX-2shRNA组）;pYr-1.1-NC组（空载体组）。2、将构建好的pY... 详细信息

目的研究COX-2对HSC-T6细胞中acsl家族相关基因表达的影响，明确COX-2调节HSC-T6细胞脂类代谢的作用环节。方法1、实验分组：HSC-T6细胞组（空白组），pYr-1.1-COX-2shRNA组（COX-2shRNA组）;pYr-1.1-NC组（空载体组）。2、将构建好的pYr-1.1-COX-2shRNA及pYr-1.1-NC分别转染至HSC-T6细胞中，并于转染后48小时用荧光倒置显微镜观察转染效率。3、利用Real-time PCR技术检测转染后各组细胞内COX-2、acsl1、acsl3、acsl4、acsl5、acsl6基因表达情况。4、根据Real-time PCR技术检测结果，选取acsl家族中有意义的基因，再利用Western Blot技术检测HSC-T6细胞中acsl家族相关基因的蛋白表达。结果1、转染HSC-T6细胞48小时后，在荧光倒置显微镜下可见细胞质中分布着绿色荧光，且转染效率达75%以上。2、HSC-T6细胞不同组别中COX-2mRNA表达情况：COX-2mRNA在COX-2shRNA组中表达低于空白组和空载体组，统计学处理有显著意义(p＜0.05)。3、HSC-T6细胞不同组别中acsl家族相关基因mRNA表达情况：COX-2shRNA组中acsl6mRNA表达较空白组及空载体组明显增加，统计学处理有显著意义(p＜0.05)，但acsl1、acsl3、acsl4、acsl5mRNA表达变化不大，没有统计学意义（p＞0.05）。4、HSC-T6细胞不同组别中acsl6蛋白质表达情况：COX-2shRNA组中acsl6蛋白质表达较空白组及空载体组明显增加，统计学处理有显著意义(p＜0.05)。结论1、靶向COX-2的shRNA可以明显沉默HSC-T6细胞中COX-2的表达。2、在大鼠HSC-T6细胞中，acsl1、acsl3、acsl4、acsl5、acsl6五种亚型均有表达;但沉默HSC-T6细胞COX-2表达后，仅acsl6mRNA表达明显增强，acsl1、acsl3、acsl4、acsl5mRNA的表达无显著作用。3、沉默HSC-T6细胞COX-2表达后，acsl6蛋白质表达增加。4、COX-2可能通过下调acsl6的表达来调控HSC-T6细胞的脂类代谢。

关键词： COX-2 shRNA HSC-T6 细胞 acsl 家族相关基因脂类代谢

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水牛acsl基因家族全基因组及表达分析

安徽农业科学 2023年第14期51卷 79-85,135页

作者：梁莎莎于农淇鄢胜飞卢瑛李厅厅黄健谭正准李辉黄荣春潘伟军覃广胜中国农业科学院广西水牛研究所/广西水牛遗传繁育重点实验室广西南宁530001

为鉴定水牛长链脂酞辅酶A合成酶(long-chain fatty Acyl-CoA synthetases,acsls)的家族成员并探究该基因家族在泌乳方面的功能,通过生物信息学技术对水牛acsl基因家族进行了motif、基因结构分析、共线性分析、不同物种系统进化分析,运用... 详细信息

为鉴定水牛长链脂酞辅酶A合成酶(long-chain fatty Acyl-CoA synthetases,acsls)的家族成员并探究该基因家族在泌乳方面的功能,通过生物信息学技术对水牛acsl基因家族进行了motif、基因结构分析、共线性分析、不同物种系统进化分析,运用qPCR技术检测acsls在不同组织的mRNA表达量。结果表明:水牛acsl基因家族共有5个家族成员并分别命名为***1、***3、***4、***5和***6。染色体分布情况结果显示:***1位于1号染色体,***3位于2号染色体,***4位于25号染色体,***5位于23号染色体,***6位于9号染色体。这5个acsl氨基酸数在699~722 aa,所有蛋白的等电点除acsl6外均大于7.00。Motif分析发现,除acsl3和acsl4缺少motif8外,其余均含有预测出的Motif 1~10,且排序相同。物种内共线性分析结果显示,水牛和普通牛中均不存在串联重复和片段重复,种间共线性分析结果显示,水牛acsl与普通牛acsl存在4对片段重复基因。不同物种acsl系统发育分析显示,acsl基因家族具有较高的保守性,其中水牛与普通牛和牦牛的聚类更为相近。不同组织表达量分析发现acsl1、acsl3在乳腺组织的mRNA表达量高于其他组织,acsl6在大脑的mRNA表达量高于其他组织,acsl4在肺部的mRNA表达量高于其他组织,acsl5在肝的mRNA表达量高于其他组织。根据RNA-seq测序结果分析不同泌乳时期表达量结果显示,acsl1在整个泌乳期均有高表达量,尤其是在泌乳第50、140和280天。acsl3和acsl5在泌乳第7天和第50天高表达,但随着泌乳天数增加,表达量降低。acsl4和acsl6在泌乳第7天表达量最高,但在整个泌乳期的表达量均远低于该家族的其他3个成员。

关键词：水牛 acsl 基因结构共线性系统发育乳腺组织表达量

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连续系统仿真语言acsl及其应用

计算机仿真 1997年第2期14卷 42-46页

作者：展锦程谢乔军何祖威电力工业部苏州热工研究所中国核工业总公司核动力运行研究所重庆大学仿真工程研究所

介绍了连续系统仿真语言ＡＣＳＬ的特点、程序结构、举例说明了其应用。

关键词：系统仿真仿真语言 acsl 图形建模

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基于acsl的密码软件形式化验证方法

信息安全与通信保密 2011年第7期9卷 76-78,81页

作者：罗婷郭渊博郝耀辉中国人民解放军信息工程大学电子技术学院

在分析通用软件形式化验证方法的基础上,这里设计提出了一种专门针对密码软件安全性的形式化验证方法。该方法采用acsl(ANSI/ISO C Specification Language)语言对密码软件的安全性进行形式化描述,并采用自动证明与辅助证明相结合的方法... 详细信息

在分析通用软件形式化验证方法的基础上,这里设计提出了一种专门针对密码软件安全性的形式化验证方法。该方法采用acsl(ANSI/ISO C Specification Language)语言对密码软件的安全性进行形式化描述,并采用自动证明与辅助证明相结合的方法,能够对软件的实现是否满足了对安全性至关重要的一些密码学特性进行有效验证。还以一个开源openssl实现中RC4算法的软件实现部分为例,给出了对其保险性进行验证的过程与步骤,结果表明了该方法的有效性。

关键词： acsl 码软件安全性定理证明形式化验证

Dynamic Measurement of Task Scheduling Algorithm in Multi-Processor System

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Journal of Shanghai Jiaotong university(Science) 2019年第3期24卷 372-380页

作者： XIE Ying WU Jinzhao CHEN Jianying CUI Mengtian School of Computer Science and Technology Southwest Minzu UniversityChengdu 610041China Guangxi Key Laboratory of Hybrid Computational and IC Design Analysis Guangxi University for NationalitiesNanning 530006China Chengdu Institute of Computer Application Chinese Academy of SciencesChengdu 610041China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China

It is important to evaluate function behaviors and performance features of task scheduling algorithm in the multi-processor system.A novel dynamic measurement method(DMM)was proposed to measure the task scheduling algorithm’s correctness and *** a multi-processor system,task scheduling problem is represented by a combinatorial evaluation model,interactive Markov chain(IMC),and solution space of the algorithm with time and probability metrics is described by action-based continuous stochastic logic(acsl).DMM derives a path by logging runtime scheduling actions and corresponding *** judging whether the derived path can be received by task scheduling IMC model,DMM analyses the correctness of *** judging whether the actual values satisfy label function of the initial state,DMM analyses the dependability of *** simulation shows that DMM can effectively characterize the function behaviors and performance features of task scheduling algorithm.

关键词： multi-processor task scheduling algorithm IMC acsl dynamic measurement

抑制长链酰基辅酶A合成酶活性对COX-2调控HSC-T6增殖的影响

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抑制长链酰基辅酶A合成酶活性对COX-2调控HSC-T6增殖的影响

作者：刘洁南华大学

学位级别：硕士

目的:研究抑制长链酰基辅酶A合成酶活性对COX-2调控HSC-T6增殖的影响。方法:1.体外培养HSCs-T6细胞,将构建好的p Yr-1.1COXshRNA转染至活化的HSCs-T6细胞中,在荧光显微镜下观察其转染效率。分组为a)空载体组(NC组):活化的HSCs-T6细胞+p ... 详细信息

目的:研究抑制长链酰基辅酶A合成酶活性对COX-2调控HSC-T6增殖的影响。方法:1.体外培养HSCs-T6细胞,将构建好的p Yr-1.1COXshRNA转染至活化的HSCs-T6细胞中,在荧光显微镜下观察其转染效率。分组为a)空载体组(NC组):活化的HSCs-T6细胞+p Yr-1.1-HK;b)COX-2sh RNA组(KD组):活化的HSCs-T6细胞+p Yr-1.1-COX2sh RNA;c)NC+acsl抑制剂组:活化的HSCs-T6细胞+p Yr-1.1-HK+acsl抑制剂Triacsin C;d)KD+acsl抑制剂组:活化的HSCs-T6细胞+p Yr-1.1-COX-2sh RNA+acsl抑制剂Triacsin C。2.利用MTT法检测沉默COX-2对HSCs-T6的增殖情况。3.利用RT-PCR技术检测转染48h后各组HSCs-T6细胞内a-SMA、COX-2、acsl1、acsl3、acsl4、acsl5、acsl6基因表达情况。结果:1.转染的HSCs-T6细胞内可见绿色荧光质粒,且转染率大于75%,说明质粒转染成功;2.与空载体组相比较,转染COX-2sh RNA质粒,48h后HSCs-T6细胞增殖率降低,且有统计学意义(Pacsl家族的Q-PCR法检测结果:与空载体组相比,COX-2sh RNA组a-SMA、COX-2表达降低,acsl6 m RNA表达明显增强,acsl其它亚型表达无统计学意义;与COX-2sh RNA组相比,COX-2sh RNA+acsl抑制剂组a-SMA、COX-2表达增强,acsl6 m RNA表达降低。***检测各组细胞活力结果:NC+acsl抑制剂组与NC组、KD组相比较,促进HSCs-T6细胞的增殖;KD+acsl抑制剂组与KD组比较,促进HSCs-T6细胞的增殖;KD+acsl抑制剂组与NC+acsl抑制剂组比较,HSCs-T6细胞的增殖抑制。结论:1.沉默COX-2可有效抑制HSC-T6增殖。2.抑制acsl活性能逆转沉默COX-2对HSC-T6增殖的抑制作用,提示COX-2可能通过acsl通路调控HSC-T6增殖。

关键词： COX-2shRNA 肝星状细胞增殖 acsl