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HIF-1α纳米抗体的制备及其抑制黑素瘤生长的作用

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山西农业科学 2023年第12期51卷 1435-1441页

作者：李佳敏贾琼秦蓉芬迟志端王富明范瑞文山西农业大学动物医学学院山西太谷030801 晋中市庄子乡综合便民服务中心山西晋中030600

缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)参与低氧微环境相关疾病的发生等过程,具有控制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对黑色素瘤的影响,研究利用前期... 详细信息

缺氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)参与低氧微环境相关疾病的发生等过程,具有控制肿瘤生长和发展的功能。黑色素瘤是一种发生于人和动物恶性程度较高的肿瘤。为探明HIF-1α纳米抗体对黑色素瘤的影响,研究利用前期保存的羊驼源黑色素瘤细胞噬菌体文库筛选HIF-1α纳米抗体,经原核表达与纯化后,通过western blot和免疫组织化学验证HIF-1α纳米抗体与抗原的结合性;分别通过CCK-8法、划痕试验以及Western Blot法检测其对B16黑素瘤细胞的增殖和迁移能力及其相关分子表达的影响。结果表明,经表达和纯化获得的HIF-1α纳米抗体分子质量约为16 ku,没有跨膜结构,具有亲水性。通过western blot和免疫组织化学验证了其具有良好的抗原结合性。在增殖试验和划痕试验中,与对照组相比,HIF-1α纳米抗体抑制了B16细胞的增殖和迁移,下调了靶基因VEGF的表达,并使细胞增殖和迁移相关蛋白Ras、ERK、RAC和RAF的表达量下调。预测HIF-1α纳米抗体进入B16细胞内,与抗原结合,通过下游靶基因VEGF下调RAs、ERK、RAC、RAF的表达,从而对细胞增殖和迁移起抑制作用,可作为黑色素瘤治疗的新靶点。

关键词： HIF-1α 纳米抗体 B16细胞 Western Blot法 CCK-8法细胞增殖细胞迁移

白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白表达与定位的影响

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山西农业科学 2023年第9期51卷 1107-1114页

作者：任高雅范小瑞张警文张欣荣贺俊平山西农业大学动物医学学院山西太谷030801

为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染... 详细信息

为了研究白消安对仔猪睾丸曲精小管内增殖分化相关蛋白PCNA、PLZF和GATA4表达与定位的影响,试验选取体外培养仔猪曲精小管为研究对象,分为对照组和试验组,其中试验组各添加5 mg/kg白消安,分别培养1、2、3 d,离心获取曲精小管,采用HE染色检测形态变化,采用免疫组化、qRT-PCR和Western Blot法分别检测PCNA、PLZF和GATA4表达和定位的变化。HE染色结果显示,各试验组曲精小管内均含有支持细胞和生殖细胞;免疫组织化学结果显示,各试验组的PCNA蛋白定位于生殖细胞和支持细胞的细胞核,白消安作用可导致PCNA染色变深,表达量升高。各试验组GATA4蛋白定位于支持细胞的细胞核,且与对照组相比无明显差异;各试验组的PLZF蛋白定位于生殖细胞的细胞核,与对照组相比,白消安作用2 d时PLZF染色无显著差异,白消安作用1、3 d时PLZF染色变深,表达量升高。qRT-PCR和western blot结果显示,与对照组相比,试验组PCNA和GATA4 mRNA及其蛋白表达量均显著升高;白消安作用2 d的PLZF mRNA和蛋白表达量差异不显著,白消安作用1、3 d的PLZF mRN以及蛋白表达量均显著升高。综上所述,PCNA、PLZF和GATA4均表达于体外培养仔猪曲精小管,白消安作用可导致PCNA、PLZF和GATA4在曲精小管内表达水平改变,提示白消安通过影响增殖分化相关蛋白的表达导致猪睾丸精子发生受损。

关键词：白消安仔猪睾丸曲精小管 Western Blot法 PCNA GATA4 PLZF

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丁香油超高压提取工艺的优化及其抗肿瘤研究

华西药学杂志 2020年第3期35卷 303-308页

作者：曾琼瑶张文静张昱李源栋郭强昆明理工大学生命科学与技术学院云南昆明650500 云南省第一人民医院云南昆明650000 云南中烟工业有限责任公司技术中心云南昆明650000

目的优化丁香油的提取工艺并研究其抗肿瘤活性。方法采用超高压提取丁香干燥花蕾中的精油,通过单因素试验与正交试验优化其取工艺;并通过CCK-8法检测丁香油对正常结肠上皮细胞、HT29和SW480两种结肠癌细胞的增殖抑制情况;采用western B... 详细信息

目的优化丁香油的提取工艺并研究其抗肿瘤活性。方法采用超高压提取丁香干燥花蕾中的精油,通过单因素试验与正交试验优化其取工艺;并通过CCK-8法检测丁香油对正常结肠上皮细胞、HT29和SW480两种结肠癌细胞的增殖抑制情况;采用Western Blot法检测丁香油处理后的两种结直肠癌细胞中凋亡相关蛋白的表达情况。结果通过单因素与正交试验确定的最佳提取条件为:粉碎粒度60目,料液比1:14,保压时间50 min,提取压力400 MPa;得率最高可达19.58%,相比传统水蒸气蒸馏提取法的得率提高了33.92%。CCK-8法结果显示:丁香油对HT29和SW480两种结肠癌细胞增殖的抑制呈现时间-剂量依赖性,差异具统计学意义,且对正常结肠上皮细胞无不良反应。western blot结果显示:与空白对照组比较,中、高浓度丁香油能显著上调细胞内促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达;低、中、高浓度丁香油均能显著下调细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的表达。结论丁香油可抑制结肠癌细胞的生长。

关键词：超高压提取工艺优化丁香干燥花蕾丁香油结肠癌增殖凋亡 CCK-8法 Western Blot法

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PAK6在膀胱癌中表达及其临床意义

PAK6在膀胱癌中表达及其临床意义

作者：乾孝园中国医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨P21活化激酶6(p21-activated kinase 6,PAK6)在膀胱癌中的表达情况及其临床意义。方法:膀胱癌患者89例为膀胱癌组,取其膀胱癌组织;患者(部切/全切)30例为对照组,取其正常膀胱上皮组织。采用免疫组织化学法检测2组组织中PAK6蛋... 详细信息

目的:探讨P21活化激酶6(p21-activated kinase 6,PAK6)在膀胱癌中的表达情况及其临床意义。方法:膀胱癌患者89例为膀胱癌组,取其膀胱癌组织;患者(部切/全切)30例为对照组,取其正常膀胱上皮组织。采用免疫组织化学法检测2组组织中PAK6蛋白阳性表达率。Biu-87、T24膀胱癌细胞、SV-HUC-1正常膀胱细胞分为Biu-87组、T24组和SV-HUC-1组,采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞中PAK6 mRNA的表达情况。采用Western Blot法检测3组细胞中PAK6蛋白的表达水平。结果:膀胱癌组PAK6阳性表达率(46.07%)明显低于对照组(96.67%)(P0.05);Biu-87组和T24组细胞PAK6 mRNA和蛋白表达水平(0.0189±0.0037、0.0530±0.0129,0.0993±0.0121、0.1431±0.0081)明显低于SV-HUC-1组(1.0403±0.3755、0.3381±0.0511)(P<0.05)。结论:PAK6在膀胱癌组织及细胞中呈低表达,且与膀胱癌的复发密切相关;可能在膀胱癌的发生、发展中起抑制作用,可作为新的抑癌指标指导临床。

关键词：膀胱癌 P21活化激酶6 免疫组织化学法实时荧光定量PCR法 Western Blot法复发

MAPK信号通路介导与调控的三种增塑剂单独和联合作用机制探讨及研究展望

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MAPK信号通路介导与调控的三种增塑剂单独和联合作用机制探讨及研...

小反刍兽疫病毒N75-1株在山羊子宫内膜上皮细胞中的增殖规律研究

中国食品科学技术学会第二十届年会

作者：武宗高刘晓宇华中农业大学环境食品学教育部重点实验室

已有研究发现外源雌激素物质能够影响ERα蛋白的表达,环境雌激素产生雌激素效应除经典的核受体介导的基因型调节效应,还有膜受体介导的快速非基因型效应。环境雌激素诱导细胞增殖可以经MAPK信号转导通路进行调控。而增塑剂具有类雌激素... 详细信息

已有研究发现外源雌激素物质能够影响ERα蛋白的表达,环境雌激素产生雌激素效应除经典的核受体介导的基因型调节效应,还有膜受体介导的快速非基因型效应。环境雌激素诱导细胞增殖可以经MAPK信号转导通路进行调控。而增塑剂具有类雌激素效应。本文采用Western Blot法检测三种增塑剂邻苯二甲酸酯(DBP)、双酚A(BPA)和壬基酚(NP)单独及混合处理的MCF-7细胞中ERα蛋白的表达量变化,并对ERK,JNK和p38信号通路的关键受体蛋白的表达进行研究,初步探索DBP、BPA和NP促进MCF-7细胞增殖作用的单独及联合作用机制。结果显示JNK和p38信号通路均有调控3种增塑剂雌激素效应的效果,增塑剂混合暴露后上调效应更明显。同时JNK和P38通路蛋白质磷酸化也显示出参与和介导效应。研究展望:本文仅探究了MAPK信号通路的介导与调控作用。后续研究会集中探究P65和P53信号通路是否存在对三种增塑剂单独和混合暴露的调控效应。形成P38(JNK)-P65-P53的联合和交叉信号通路的效应探讨。旨在较为全面深入地阐释研究较少的非基因组层面的增塑剂的作用机制。

关键词：增塑剂作用机制 MAPK信号通路 Western Blot法受体蛋白

来源： cnki会议评论

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小反刍兽疫病毒N75-1株在山羊子宫内膜上皮细胞中的增殖规律研究

作者：王建松西北农林科技大学

学位级别：硕士

小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一种感染山羊、绵羊的急性高度传染性疾病。PPR是世界动物卫生组织(OIE)法定报告动物疾病,我国将此病列为一类动物疾病。近年来,PPR疫情在包括我国在内的世界多个国家已发生或正在发生,... 详细信息

小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的一种感染山羊、绵羊的急性高度传染性疾病。PPR是世界动物卫生组织(OIE)法定报告动物疾病,我国将此病列为一类动物疾病。近年来,PPR疫情在包括我国在内的世界多个国家已发生或正在发生,对疫情国公共卫生及养羊行业造成了重大威胁。加强对PPRV的检测分析及其增殖规律研究对于PPR防控具有重要意义。本研究根据GenBank上已发表的PPRV-N基因序列,设计合成了一对扩增N基因的特异性引物,通过基因扩增,载体构建及标准阳性质粒的梯度稀释,建立了用于检测PPRV实时荧光定量PCR方法。利用建立的荧光定量PCR方法以及Western Blot法对PPRV N75-1疫苗株在山羊子宫内膜上皮细胞(EEC)内的增殖规律进行了检测分析,获得的结果如下:1.成功建立了用于检测PPRV的实时荧光定量PCR方法,结果表明建立的标准曲线相关系数R2=0.973,扩增效率为126.0%。该法特异性强、敏感度高、重复性好,可用于对PPRV的定量检测。2.PPRV能够引起EEC细胞发生细胞病变,接种PPRV 48h后EEC细胞开始出现早期轻微细胞病变效应(CPE),至72h后细胞CPE较为明显,96h细胞开始出现裂解现象。接种MOI=10的PPRV N75-1株,分别在0h、1h、3h、6h、9h、12h、24h、48h、72h收取细胞,通过建立的qPCR方法检测病毒增殖水平,发现接种后3h时N基因转录水平有一定的升高,6h时有明显的升高,在接种后9h达到了最高的水平,从接种后12h开始下降,然后形成了一个稳定的状态。用western blot方法检测N蛋白的表达情况,1h即可以检测到N蛋白的表达,且N蛋白在细胞内的表达量6h有明显上升,12h后有明显的下降。通过本研究,成功建立了基于N基因检测PPRV的实时荧光定量PCR法,并对PPRV N75-1在EEC内的增殖规律进行了检测分析,为深入研究PPRV对山羊生殖系统的损伤机制奠定了实验基础,对小反刍兽疫防控具有重要的理论意义和潜在的应用价值。

关键词：小反刍兽疫病毒山羊子宫内膜上皮细胞荧光定量PCR 增殖规律 Western Blot法

屋尘螨与鸡蛋白交叉过敏的流行病学分析及实验研究

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屋尘螨与鸡蛋白交叉过敏的流行病学分析及实验研究

作者：刘桂丽河北医科大学

学位级别：硕士

目的:过敏反应主要由血清中免疫球蛋白E（Ig E）介导,通过效应细胞释放生物活性介质而产生各种临床表现,如荨麻疹、血管神经性水肿等。有时,即使是微量蛋白质也可引起敏感个体出现致命的反应。随着对过敏性疾病的不断研究,交叉过敏反应... 详细信息

目的:过敏反应主要由血清中免疫球蛋白E（Ig E）介导,通过效应细胞释放生物活性介质而产生各种临床表现,如荨麻疹、血管神经性水肿等。有时,即使是微量蛋白质也可引起敏感个体出现致命的反应。随着对过敏性疾病的不断研究,交叉过敏反应也逐渐引起人们的重视。所谓交叉过敏就是当两种蛋白质在序列或结构上高度同源时,出现相同的抗原决定簇的几率增高,易出现交叉反应。检测屋尘螨与鸡蛋白之间是否存在交叉过敏、交叉过敏发生的概率以及发生交叉反应的蛋白种类;屋尘螨及鸡蛋白市售蛋白分子组分;比较免疫印迹法与狭缝免疫印迹法（Slot-blot）符合概率。基于目前屋尘螨与鸡蛋白过敏的发病率高,诊断及防治难的特点,本研究成果为屋尘螨与鸡蛋白过敏提供了可行且可靠的个体化治疗方法,并且使临床医师能更好的指导过敏患者正确饮食及生活习惯。方法:1流行病学调查及分析:对2015.01-2016.10就诊于河北医科大学第四医院皮肤科进行血清特异性过敏原检测的患者进行流行病学调查,并结合sIgE检测结果进行回顾性分析。2选取尘螨特异性sIgE（specific Ig E,sIgE）与总Ig E（total Ig E,t Ig E）同时阳性血清进行狭缝免疫印迹实验（Slot-blot）,对比Slot-blot检测结果与艾康生物技术有限公司销售的免疫印迹法结果的一致性。3采用Slot-blot法进行交叉实验,采用鸡蛋白sIgE与t Ig E同时阳性血清与屋尘螨抗原进行反应,检测尘螨与鸡蛋白是否存在交叉反应及交叉概率。4采用Slot-blot进行抑制实验,先将鸡蛋白与屋尘螨sIgE阳性血清进行反应,然后再与包被的屋尘螨抗原反应,检测屋尘螨与鸡蛋白交叉抑制率和有效抑制浓度。5将屋尘螨及鸡蛋白粗提取液进行聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）,检测各蛋白组分的完整性、分子量大小及所占比例。6对屋尘螨和鸡蛋白粗提取液进行免疫印迹实验（western bolt,WB）,选取屋尘螨sIgE与t Ig E同时阳性血清和鸡蛋白血sIgE与t Ig E同时阳性血清各10例为探针,检测各组分的抗原性。结果:1流行病学调查1.1本研究对2015.01-2016.10就诊于河北医科大学第四医院皮肤科的诊断为过敏反应相关性疾病的患者血清sIgE检测结果进行了回顾性分析。病例总数为5186例,男3100例,女2086例,年龄31.72±1.12岁,病程1周-数年,病种以荨麻疹、湿疹及皮炎为主。其中t Ig E阳性为3828例,尘螨sIgE阳性患者1223例,鸡蛋白sIgE阳性患者822例,其中尘螨与鸡蛋白sIgE同时阳性病例达419例,尘螨与鸡蛋白sIgE同时阳性病例占尘螨sIgE阳性的病例的34%。1.2过敏原sIgE阳性病例的分布情况:尘螨1223（31.9%）,鸡蛋白822（21.5%）,牛奶430（11.2%）,牛羊肉344（9%）,小麦223（5.8%）,猫狗毛300（7.8%）,霉菌172（4.5%）,矮豚草166（4.3%）,树组合114（3%）,蟑螂109（2.8%）,葎草96（2.5%）,腰果花生159（4.2%）,鱼虾蟹152（4%）,芒果150（3.9%）。2免疫印迹法（艾康生物有限公司）与Slot-blot法实验结果对比分析60例尘螨sIgE阳性（免疫印迹法）的血清中,56例在Slot-blot实验中显示阳性,一致性概率达95%。3屋尘螨抗原与鸡蛋白阳性血清交叉过敏反应概率（Slot-blot法）将包埋于PVDF膜上的屋尘螨抗原与鸡蛋白sIgE阳性血清反应,随机检测60例,30例出现阳性反应,其出现交叉反应概率为50%。4鸡蛋白对屋尘螨抗原抗体反应的交叉抑制率的检测鸡蛋白对屋尘螨抗原抗体反应有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性,当鸡蛋白干预抗原浓度为100μg/ml时,达到最大抑制率,为93%。5屋尘螨提取液与鸡蛋白提取液中各蛋白组分分析5.1屋尘螨列可见3条主要条带,分别是57kd,50kd,16kd,各组分所占比例依次是55.5%,43.4%,1.3%,其中57kd的蛋白所占比例最大。5.2鸡蛋白列可见4条主要条带,分别是75kd,44.5kd,28kd,14.3kd,各组分所占比例依次是19.6%,66%,7.7%,6.6%,其中所占比例最大的是44.5kd的条带。6屋尘螨与鸡蛋白免疫抗原性分析（WB检测）6.1 10例尘螨sIgE阳性患者的血清池为探针,50kd、57kd处可见明显阳性反应条带,考虑是Derp10（原肌凝蛋白）和Derp4（α-淀粉酶）。6.2 10例鸡蛋白sIgE阳性的患者血清池为探针。主要阳性反应条带有3条,分别是14.3kd、44.5kd、75kd,考虑分别为溶菌酶（Lys）、卵白蛋白（OVA）和卵转铁蛋白（OVT）。结论:1就诊于我院的过敏反应相关疾病的患者,主要过敏原是尘螨组合和鸡蛋白。2屋尘螨主要过敏原为Derp10（原肌凝蛋白）和Derp4（

关键词：交叉过敏尘螨鸡蛋白狭缝免疫印迹法 Western Blot法

GHR和IGF-IR在济宁青山羊子宫内分布和表达的发育性变化

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GHR和IGF-IR在济宁青山羊子宫内分布和表达的发育性变化

作者：同海妮山东农业大学

学位级别：硕士

济宁青山羊作为我国著名的羔皮用山羊品种之一，具有性成熟早（初情期始于60日龄，90-120日龄即性成熟），繁殖率高，遗传性稳定，适应性强，耐粗饲，性温顺易管理等特性，现已被列入《中国羊品种志》的优良地方山羊品种。有关济宁... 详细信息

济宁青山羊作为我国著名的羔皮用山羊品种之一，具有性成熟早（初情期始于60日龄，90-120日龄即性成熟），繁殖率高，遗传性稳定，适应性强，耐粗饲，性温顺易管理等特性，现已被列入《中国羊品种志》的优良地方山羊品种。有关济宁青山羊性成熟早、繁殖率高、多胎性等生物学性能的原因机制为国内外学者所关注，子宫中GHR和IGF-IR的表达、分布及其功能以及二者之间存在的内在联系，目前尚不完全清楚。而且有关GHR和IGF-IR在济宁青山羊出生后整个生长发育过程中在子宫中的研究尚未见报道。为了探讨济宁青山羊生后发育过程中不同年龄段GHR和IGF-IR在子宫中的分布及mRNA的表达性差异是否在子宫的生长发育过程中起到促进作用，本试验应用免疫组化SABC法研究GHR、IGF-IR免疫阳性细胞在子宫的分布规律，HE染色观察子宫的组织结构;应用实时荧光定量RT-PCR技术，检测其在不同年龄段济宁青山羊子宫中的表达差异性;Western Blot法鉴定GHR、IGF-IR蛋白片段的大小。试验结果：Western Blot法测出在36kDa、70kDa、55kDa处分别有GAPDH、GHR和IGF-IR蛋白特异性片段的存在。GHR和IGF-IR免疫阳性染色主要见于子宫腺上皮细胞、基质细胞、血管内皮细胞和子宫平滑肌细胞的胞质中，偶见胞核着色，且GHR免疫阳性细胞数多于IGF-IR免疫阳性细胞数。GHR mRNA和IGF-IR mRNA表达趋势与其免疫阳性细胞数变化趋势基本一致，但IGF-IR mRNA的表达量低于GHR mRNA的表达量。GHR和IGF-IR在出生后呈逐渐上升的趋势，60d达到高峰（P＜0.01），而90d显著下降（P＜0.01），120d呈上升趋势，随后下降并维持在一个相对的稳定水平。综上所述，GHR和IGF-IR能够通过自分泌和旁分泌的调节方式影响子宫的生长发育，在子宫的生长发育过程中起着重要作用，且初情期（60d）和性成熟期（120d）是子宫发育最快的时期，子宫生理功能趋于完善，为胚胎着床和发育提供营养做好准备。

关键词：济宁青山羊 GHR IGF-IR 免疫组化法 Western Blot法 q RT-PCR

Twist2和E-cadherin在宫颈鳞癌中的表达及意义

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Twist2和E-cadherin在宫颈鳞癌中的表达及意义

作者：葛艳兰州大学

学位级别：硕士

目的：研究转录因子Twist2与上皮细胞钙粘蛋白E-cadherin在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌中的表达情况,探讨它们在宫颈癌变过程中的作用及意义。方法：采用免疫组织化学法（PV-9000二步法）检钡（?）Twist2、 E-cad... 详细信息

目的：研究转录因子Twist2与上皮细胞钙粘蛋白E-cadherin在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞状细胞癌中的表达情况,探讨它们在宫颈癌变过程中的作用及意义。方法：采用免疫组织化学法（PV-9000二步法）检钡（?）Twist2、 E-cadherin在正常宫颈组（30例）、宫颈低度病变组（CINⅠ）（35例）、宫颈高度病变组（CINⅡ-Ⅲ）（44例）、宫颈鳞状细胞癌组（53例）4组中的表达情况及Twist2、 E-cadherin在宫颈鳞癌中的表达与临床病理学特征的关系。另取60例新鲜的宫颈组织（其中20例宫颈鳞状细胞癌、20例宫颈上皮内瘤变（CIN）、20例正常宫颈组织）,应用Western Blot法检测（?）Twist2、 E-cadherin在三组中的表达情况。结果：①免疫组织化学法显示：Twist2与E-cadherin在正常宫颈组织、CIN（Ⅰ）、CIN（Ⅱ-Ⅲ）、宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为：6.7%、25.7%、47.7%、79.2%和93.3%、74.3%、52.3%、24.5%。各组之间比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）。Twist2、 E-cadherin的阳性表达率在宫颈鳞癌的分化程度、临床分期、有无淋巴结转移的各组间差异有统计学意义（P＜0.05）,在不同年龄间差异无统计学意义（P＞0.05）。②estern blot法显示：对照组、CIN组、宫颈鳞癌组间Twist2逐渐升高,E-cadherin逐渐降低,三组间的相对表达量差异有统计学意义（P＜0.05）。③Twist2与E-cadherin在宫颈鳞癌组织中的表达呈负相关（r=-0.401,P=0.003）。结论:Twist2、 E-cadherin可能共同参与了宫颈鳞状细胞癌的恶性转化过程,联合检测（?）Twist2与E-cadherin有助于判断宫颈癌的恶性程度。

关键词：宫颈鳞状细胞癌 Twist2 E-cadherin Western Blot法免疫组织化学法（PV-9000二步法）