检索结果-南通市图书馆

ARTC1-mediated vapb ADP-ribosylation regulates calcium homeostasis

Journal of Molecular Cell Biology 2023年第7期15卷 1-14页

作者： Xueyao Ma Mengyuan Li Yi Liu Xuefang Zhang Xiaoyun Yang Yun Wang Yipeng Li Jiayue Wang Xiuhua Liu Zhenzhen Yan Xiaochun Yu Chen Wu College of Life Sciences Institute of Life Sciences and Green DevelopmentHebei UniversityBaoding 071002China Department of Public Health Affiliated Hospital of Hebei UniversityBaoding 071000China Westlake Laboratory of Life Sciences and Biomedicine Hangzhou 310024China School of Life Sciences Westlake UniversityHangzhou 310024China Institute of Biology Westlake Institute for Advanced StudyHangzhou 310024China

Mono-ADP-ribosylation(MARylation)is a post-translational modification that regulates a variety of biological processes,including DNA damage repair,cell proliferation,metabolism,and stress and immune *** mammals,MARylation is mainly catalyzed by ADP-ribosyltransferases(ARTs),which consist of two groups:ART cholera toxin-like(ARTCs)and ART diphtheria toxin-like(ARTDs,also known as PARPs).The human ARTC(hARTC)family is composed of four members:two active mono-ADP-ARTs(hARTC1 and hARTC5)and two enzymatically inactive enzymes(hARTC3 and hARTC4).In this study,we systematically examined the homology,expression,and localization pattern of the hARTC family,with a particular focus on *** results showed that hARTC3 interacted with hARTC1 and promoted the enzymatic activity of hARTC1 by stabilizing *** also identified vesicle-associated membrane protein-associated protein B(vapb)as a new target of hARTC1 and pinpointed Arg50 of vapb as the ADP-ribosylation ***,we demonstrated that knockdown of hARTC1 impaired intracellular calcium homeostasis,highlighting the functional importance of hARTC1-mediated vapb Arg50 ADP-ribosylation in regulating calcium *** summary,our study identified a new target of hARTC1 in the endoplasmic reticulum and suggested that ARTC1 plays a role in regulating calcium signaling.

关键词： ATRCs mono-ADP-ribosylation hARTC1 vapb calcium homeostasis

来源：

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

Loss of vapb Regulates Autophagy in a Beclin 1-Dependent Manner

引用

Neuroscience Bulletin 2018年第6期34卷 1037-1046页

作者： Dan Wu Zongbing Hao Haigang Ren Guanghui Wang Laboratory of Molecular Neuropathology Jiangsu Key Laboratory of Neuropsychiatric Diseases and College of Pharmaceutical Sciences Soochow University

Autophagy is an evolutionarily-conserved selfdegradative process that maintains cellular homeostasis by eliminating protein aggregates and damaged ***, vesicle-associated membrane protein-associated protein B(vapb), which is associated with the familial form of amyotrophic lateral sclerosis, has been shown to regulate autophagy. In the present study, we demonstrated that knockdown of vapb induced the up-regulation of beclin 1 expression, which promoted LC3(microtubuleassociated protein light chain 3) conversion and the formation of LC3 puncta, whereas overexpression of vapb inhibited these processes. The regulation of beclin1 by vapb was at the transcriptional level. Moreover,knockdown of vapb increased autophagic flux, which promoted the degradation of the autophagy substrate p62 and neurodegenerative disease proteins. Our study provides evidence that the regulation of autophagy by vapb is associated with the autophagy-initiating factor beclin 1.

关键词： vapb Autophagy Beclin 1 ALS Autophagic flux LC3

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

复方地黄颗粒对帕金森病阴虚动风证6-OHDA模型大鼠黑质α-syn、vapb、PTPIP51表达的影响

引用

中国药理学通报 2024年第6期40卷 1179-1186页

作者：孙光洁王行玲吕子微何建成梁建庆甘肃中医药大学基础医学院甘肃兰州730000 上海中医药大学基础医学院上海201203

目的观察复方地黄颗粒对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠黑质α-syn、vapb、PTPIP51表达的影响,并探讨其潜在作用机制。方法构建6-羟基多巴胺(6-OHDA)PD大鼠模型,成模大鼠随机分为Model组、Madopar组、CLD组、CMD组、CHD组,NC组... 详细信息

目的观察复方地黄颗粒对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠黑质α-syn、vapb、PTPIP51表达的影响,并探讨其潜在作用机制。方法构建6-羟基多巴胺(6-OHDA)PD大鼠模型,成模大鼠随机分为Model组、Madopar组、CLD组、CMD组、CHD组,NC组不做任何处理,SO组注射抗坏血酸,每组13只。检测大鼠神经行为学变化;Western blot、RT-PCR、免疫组化检测黑质α-syn、vapb、PTPIP51表达;HE染色观察黑质组织病理形态变化;透射电镜观察黑质细胞线粒体超微结构;ELISA检测各组黑质组织ATP含量变化。结果与NC组和SO组比,Model组大鼠旋转圈数和爬杆时间增加,α-syn表达升高,vapb、PTPIP51表达降低,神经元细胞数量减少、胞体皱缩,线粒体肿胀,线粒体嵴消失,ER-线粒体接触距离变大,ATP含量降低;与Model组相比,Madopar组和CLD组、CMD组、CHD组大鼠旋转圈数和爬杆时间减少,α-syn表达降低,vapb、PTPIP51表达升高,神经元损伤程度减轻,线粒体形态有所改善,ATP含量增加,呈量效差异性,Madopar组和CHD组相对疗效较佳且差异无统计学意义。结论复方地黄颗粒能够减轻PD大鼠行为症状,并可能通过下调α-syn表达,上调PTPIP51、vapb表达,改善线粒体功能,从而发挥治疗PD的作用。

关键词：帕金森病阴虚动风证复方地黄颗粒 α-syn vapb PTPIP51

来源：

维普期刊数据库博看期刊

同方期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

堆型艾美球虫侵入相关蛋白MIC3受体分子vapb的克隆与表达

引用

畜牧与兽医 2019年第8期51卷 73-78页

作者：周舟扬黄剑梅徐立新严若峰宋小凯李祥瑞南京农业大学动物医学院动物健康与食品安全MOE联合国际研究实验室

堆型艾美球虫感染具有寄生部位特异性,其寄生区位于鸡十二指肠,但造成这种特异性的机制尚不清楚。为研究在球虫侵入过程中可能起重要作用的配体-受体分子,对堆型艾美球虫侵入相关蛋白微线蛋白3(MIC3)的受体分子vapb进行克隆及表达。从... 详细信息

堆型艾美球虫感染具有寄生部位特异性,其寄生区位于鸡十二指肠,但造成这种特异性的机制尚不清楚。为研究在球虫侵入过程中可能起重要作用的配体-受体分子,对堆型艾美球虫侵入相关蛋白微线蛋白3(MIC3)的受体分子vapb进行克隆及表达。从鸡十二指肠中分离获得肠道上皮细胞,提取细胞RNA,利用RT-PCR技术扩增vapb基因。分析vapb基因的分子特征,构建重组表达质粒pET-32a-vapb,利用大肠杆菌对其进行表达、纯化,并制备大鼠抗重组vapb蛋白多抗。序列分析揭示了vapb具有一个完整的开放性阅读框,含有732个碱基对,编码244个氨基酸组成的分子量约为26.8 kD的蛋白,其重组蛋白rvapb分子量约为45 kD。序列分析表明其等电点约为7.30,无信号肽,含跨膜区、多个O-糖基化位点和磷酸化位点;进化树分析表明鸡的vapb氨基酸序列与一些动物如Numida meleagris和Coturnix japonica等亲缘关系较近。原核表达、纯化重组蛋白vapb并获得抗rvapb大鼠血清。Western blot分析表明鸡十二指肠上皮细胞中的天然vapb蛋白可被抗rvapb大鼠血清识别。结果表明:成功制备了重组蛋白vapb及抗rvapb大鼠血清,为研究vapb蛋白在堆型艾美球虫侵入过程的作用提供基础。

关键词：堆型艾美球虫微线蛋白3 受体 vapb

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

vapb缺失诱导自噬的机制研究

VAPB缺失诱导自噬的机制研究

引用

作者：吴丹苏州大学

学位级别：硕士

目的:自噬在神经退行性疾病中扮演着重要的角色。本研究考察囊泡相关膜蛋白相关蛋白B(vapb)是否参与自噬调控及其机制研究。方法:我们分别在HEK293T、HeLa和SH-SY5Y三种细胞系中,转染了两种vapb干扰小RNA来沉默vapb的表达,利用蛋白免疫... 详细信息

目的:自噬在神经退行性疾病中扮演着重要的角色。本研究考察囊泡相关膜蛋白相关蛋白B(vapb)是否参与自噬调控及其机制研究。方法:我们分别在HEK293T、HeLa和SH-SY5Y三种细胞系中,转染了两种vapb干扰小RNA来沉默vapb的表达,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中LC3和Beclin 1的蛋白水平。在HEK293T细胞中过表达FLAG-vapb,检测细胞中的LC3和Beclin 1的蛋白水平。在HEK293中敲减vapb,同时过表达GFP-LC3和FLAG-P62,通过免疫荧光的方法,检测GFP-LC3和FLAG-P62的共定位情况。在HEK293T细胞中沉默vapb的表达,通过实时定量PCR(Real-time q PCR)检测Beclin1 m RNA水平的变化。在HEK293T细胞中同时沉默vapb和Beclin 1的表达,检测细胞中的LC3蛋白水平。在m Cherry-LC3稳定转染的HEK293细胞中,同时沉默vapb和Beclin 1的表达,检测细胞中m Cherry-LC3点状聚集的数量。在HeLa细胞中,敲减vapb后过表达m Cherry-EGFP-LC3B,另一组加入自噬抑制剂Bafilomycin A1(Baf A1),最后在荧光显微镜下检测Cherry和GFP的点状聚集。在HEK293细胞中过表达GFP-HTT60、m Cherry-LC3和FLAG-P62,或者RFP-SOD1-G93A、GFP-LC3和FLAG-P62,通过免疫荧光的方法,检测三种蛋白的共定位情况。在HEK293细胞中敲减vapb,然后过表达GFP-HTT60或RFP-SOD1-G93A,并加入蛋白酶体抑制剂MG132或自噬抑制剂Baf A1,在荧光显微镜下检测这些的点状聚集数量。结果:在HEK293T、HeLa和SH-SY5Y三种细胞系中,敲减vapb显著地上调了LC3Ⅱ和Beclin 1的蛋白水平,而在HEK293T中过表达FLAG-vapb则导致了LC3Ⅱ和Beclin 1的蛋白水平的下降。在HEK293中敲减vapb后,GFP-LC3和FLAG-P62的共定位增多。敲减vapb后,Beclin 1的m RNA水平增加。在敲减Beclin 1后,敲减vapb则LC3Ⅱ水平和m Cherry-LC3的点状聚集不再增加。在HeLa细胞中敲减vapb后转染m Cherry-EGFP-LC3B,我们发现红色荧光比黄色荧光的比值有所增加,这说明自噬流增强;敲减vapb后,加入100 n M Baf A1处理4小时后,黄色荧光点的数量增多,这再次表明敲减vapb起始自噬。在HEK293细胞中过表达GFP-HTT60、m Cherry-LC3和FLAG-P62,或者RFP-SOD1-G93A、GFP-LC3和FLAG-P62,这三个蛋白有共定位,说明GFP-HTT60或RFP-SOD1-G93A均与自噬体共定位。在HEK293细胞中敲减vapb后,GFP-HTT60和RFP-SOD1-G93A的聚集在转染细胞中的比例下降,这说明RFP-SOD1-G93A或者GFP-HTT60的降解增加。在用MG132处理细胞后,这种蛋白聚集下降的现象仍然可见,而在用Baf A1处理细胞后,该现象消失,这说明GFP-HTT60和RFP-SOD1-G93A聚集体的降解与vapb敲减所诱导的自噬有关。结论:敲减vapb可以上调Beclin 1的转录表达,进而诱导自噬。vapb缺失所诱导的自噬是依赖于Beclin 1的。vapb敲减增强自噬流,并促进易聚集蛋白GFP-HTT60和RFP-SOD1-G93A的降解。

关键词： vapb 自噬 Beclin 1 ALS 自噬流 LC3

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

与肌萎缩侧索硬化症相关的VAPB点突变可通过IGF1-AKT信号通路影响...

引用

作者：郭月梅浙江大学

学位级别：硕士

骨骼肌是人体中重要的组成部分,发挥着重要的代谢调控功能,当肌肉发生病变会严重影响人们的正常生活。肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种神经退行性肌肉疾病,目前没有特别好的治疗方法。vapb是存在于内质网上... 详细信息

骨骼肌是人体中重要的组成部分,发挥着重要的代谢调控功能,当肌肉发生病变会严重影响人们的正常生活。肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种神经退行性肌肉疾病,目前没有特别好的治疗方法。vapb是存在于内质网上的一种Ⅱ型整合膜蛋白,在脂质转移和磷脂代谢、膜运输、微管重组、未折叠蛋白质应答以及端粒沉默等细胞功能当中发挥着重要的功能。近几年在一些家族性ALS病人当中鉴定出几种vapb的点突变体,但是对这些突变体在肌肉分化当中的机制研究还没有报道。本论文基于本实验室前期对vapb的研究基础,对这些与ALS相关的vapb点突变体在成肌细胞分化中的机制进行了初步研究。Rab5是一种小GTP酶,定位于早期内体,胰岛素受体底物蛋白IRS1在IGF1-AKT信号通路中起着重要作用。实验室前期研究发现vapb既可以和Rab5相互作用,又可以和IRS1相互作用,vapb与Rab5的相互作用增加了IRS1的稳定性,通过影响IGF1-AKT信号通路影响成肌细胞分化(本实验室未发表数据)。本论文研究发现与ALS相关的vapb点突变体在C2C12成肌细胞中存在聚集,这种聚集的形成改变了内质网的正常结构,这些突变体不能与Rab5结合,与IRS1的共定位消失,不能增加IRS1的稳定性。在C2C12细胞中过表达野生型vapb可以促进成肌细胞分化,而与ALS相关的vapb点突变体则不能促进。本研究首次将目前报道的与ALS相关的vapb点突变体综合到一起,发现它们跟野生型vapb在促进成肌细胞分化当中的差别,有助于更好地理解vapb突变在ALS中的致病机理。

关键词：骨骼肌 ALS vapb Rab5 IRS1 成肌细胞分化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

肌萎缩侧索硬化症相关基因vapb对皮质神经元存活及突触蛋白表达的影响

引用

脑与神经疾病杂志 2018年第1期26卷 1-5页

作者：杨璇宋彬彬刘佳文翁绳凤郭威李宁王秀明于佳北京中医药大学附属北京老年医院老年病临床与康复研究所北京100095 北京中医药大学附属北京老年医院检验科北京100095

目的探讨肌萎缩侧索硬化症(ALS)致病基因vapb P56S突变对原代培养皮质神经元的细胞活性及突触蛋白表达的影响。方法以非转基因(nTg)和vapb P56S转基因(P56S Tg)新生小鼠为细胞来源,体外培养皮质神经元10d和20d后,分别利用MTT法和Western... 详细信息

目的探讨肌萎缩侧索硬化症(ALS)致病基因vapb P56S突变对原代培养皮质神经元的细胞活性及突触蛋白表达的影响。方法以非转基因(nTg)和vapb P56S转基因(P56S Tg)新生小鼠为细胞来源,体外培养皮质神经元10d和20d后,分别利用MTT法和Western blot法检测皮质神经元存活率以及突触蛋白表达水平。结果与nTg小鼠的皮质神经元比较,vapb P56S转基因小鼠的皮质神经元在体外培养20d时细胞活力显著降低(Pvapb P56S降低原代皮质神经元活性,并在神经元变性死亡前即损害突触结构和功能相关蛋白的表达。

关键词：肌萎缩侧索硬化症 vapb 神经变性突触蛋白

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：